Produzione e analisi ottimizzate di vescicole ricombinanti piene di proteine da E. coli

Stiamo cercando di capire le interazioni dinamiche tra le molecole all'interno delle cellule viventi. Per l'analisi biochimica, può essere necessario utilizzare grandi quantità di proteine ricombinanti. Questi possono essere estremamente difficili da esprimere in una forma correttamente piegata e funzionale.

Se una proteina risultasse mal ripiegata o insolubile quando espressa nei batteri, i ricercatori dovrebbero ricorrere a cellule di mammifero, che è costoso e relativamente lento, o utilizzare polipeptidi sintetici. Il nostro protocollo consente un'elevata espressione di resa e l'esportazione di proteine impegnative da E.coli. L'aggiunta di una breve sequenza peptidica scissabile al terminale amminico della proteina non solo migliora la produzione e la resa di ogni proteina che abbiamo testato fino ad oggi, ma esporta anche la proteina dalla cellula nei media.

Oltre a semplificare l'espressione proteica, semplifica anche la purificazione delle proteine a valle.