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Imaging del calcio nel collicolo superiore del topo

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10:43 min

April 21st, 2023

April 21st, 2023


Trascrizione

La mia ricerca si concentra sulla codifica neurale e sui meccanismi per l'elaborazione visiva. Stiamo cercando di rispondere a come le varie informazioni sono codificate nel cervello, in particolare nel collicolo superiore sotto i meccanismi neurologici sottostanti. Per comprendere l'elaborazione visiva, gli scienziati combinano vari approcci, tra cui la morfologia neuronale, il tracciamento anterogrado e retrogrado, il sequenziamento IL, la modellazione neurologica, l'apprendimento automatico.

La sfida è quella di rimuovere il cranio sopra la SSA, tagliando e lasciando nell'osso in un unico pezzo più grande, è probabile che fallisca perché l'osso è attaccato alla dura. Combinando due foto su un'immagine di calcio ad ampio campo, il nostro recente lavoro ha rivelato l'architettura funzionale della direzione del movimento nel topo SC sia a risoluzione singola che su scala globale. Abbiamo scoperto che i neuroni con preferenza simile formano chiazze fino a 500 micrometri sotto il globale verso l'alto sul movimento nasale.

Con il nostro protocollo, stiamo colmando due lacune nella ricerca. In primo luogo, i ricercatori possono eseguire l'imaging a lungo termine in SC di topo con una risoluzione di una singola cellula senza rompere la corteccia. In secondo luogo, i ricercatori possono registrare la neuroattività attraverso l'intero SC utilizzando il microscopio a campo largo.

Il nostro protocollo fornisce una misura per visualizzare lo SC mediale posteriore alla risoluzione di una singola cellula con una corteccia intatta nei topi. Inoltre, utilizziamo un tappo biocompatibile per esporre l'SC, che riduce l'infezione per l'imaging cronico. I nostri risultati forniscono un modo per studiare la codifica neurale delle informazioni visive in un ampio campo visivo.

In combinazione con l'optogenetica, si possono studiare i mezzi input provenienti da diverse regioni cerebrali che modulano la neuroattività in SC.

Questo protocollo descrive in dettaglio la procedura per l'imaging delle risposte del calcio nel collicolo superiore (SC) dei topi svegli, compreso l'imaging dell'attività di un singolo neurone con microscopia a due fotoni, lasciando intatta la corteccia nei topi wild-type, e l'imaging dell'intero SC con microscopia ad ampio campo nei topi mutanti a corteccia parziale.

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Capitoli in questo video

0:00

Introduction

2:41

Preparation of a Suction Cup and Plugs for Calcium Imaging in Mouse

4:30

Viral Construct (AAV) Injection in Mouse Superior Colliculus for Calcium Imaging

5:48

Implantation of the Headplate in Mouse for Calcium Imaging

6:40

Implanting the Plug in the Mouse for Calcium Imaging

8:06

Two‐Photon Calcium Imaging of Mouse Superior Colliculus Neurons

9:37

Wide‐Field Calcium Imaging of Mouse Superior Colliculus Neurons

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