Modello murino di sindrome da distress respiratorio acuto indotto da acido oleico

Questo modello induce nei topi diverse caratteristiche chiave della sindrome respiratoria acuta, come l'edema, la permeabilità alveolare e la filtrazione leucocitaria, aiutando così i ricercatori a comprendere meglio la fisiopatologia dell'ARDS L'uso dell'oleico per indurre RDS imita meglio queste condizioni, evitando al contempo il rischio di alterare il pH del sangue e causare emboli quando si utilizza acido oleico puro. Una sedazione ben fatta è molto importante. Assicurati che l'animale sia profondamente sedato durante tutta la procedura.

In questo modo, nessuna improvvisa espansione può ostacolare la procedura di questa procedura passo dopo passo, consente a tutti gli associati di eseguire correttamente questa procedura. Inoltre, questa tecnica può essere applicata per studiare diverse malattie cambiando la sostanza dell'iniettore. Inizi a preparare la soluzione dell'oleato di sodio aggiungendo le compresse o la soluzione dell'idrossido di sodio nell'acqua ultrapura per elevare il pH a 12-13.

Quindi, aggiungere l'acido oleico goccia a goccia sotto costante agitazione in un bagno ad ultrasuoni a 37 gradi Celsius. Successivamente, per eseguire la somministrazione intratracheale di acido oleico, adagiare il topo anestetizzato in posizione di decubito dorsale su un termoforo a 37 gradi Celsius ed eseguire un'incisione da 0,5 a 1 centimetro a forma di V a livello tiroideo. Rimuovere la tiroide per esporre la trachea e iniettare 50 microlitri della soluzione oleata.

Dopo l'iniezione, chiudere l'incisione con una sutura sintetica monofilamento non assorbibile. Quindi, riportare il topo nella gabbia di casa e monitorarlo fino al completo recupero dall'intervento chirurgico. Per la somministrazione endovenosa, utilizzare un ago ultra sottile per iniettare acido oleico nel plesso orbitale del topo anestetizzato.

Per raccogliere il liquido di lavaggio broncoalveolare, adagiare il topo eutanasiato in posizione di decubito dorsale e praticare un'incisione di 1 centimetro nella regione anteriore con forbici chirurgiche. Esporlo alla trachea e fai un piccolo taglio per introdurre un catetere endovenoso calibro 20. Collegare il catetere a una siringa sterile da 1 millilitro per iniettare lentamente 500 microlitri di soluzione fisiologica sterile nei polmoni.

Quindi, aspirare il liquido di lavaggio broncoalveolare con la stessa siringa. Dopo aver ripetuto la raccolta del fluido da 3 a 5 volte, trasferire il fluido in una microprovetta sterile e posizionare la provetta sul ghiaccio. Nell'analisi rappresentativa, l'iniezione di acido oleico ha aumentato i leucociti totali nelle vie intratracheali ed endovenose rispetto al controllo.

La somministrazione intratracheale di acido oleico induce la produzione di mediatori dell'infiammazione, come il fattore di necrosi tumorale alfa, l'interleuchina 6 e l'interleuchina 1 beta, rispetto al controllo. La somministrazione intratracheale ed endovenosa di acido oleico ha anche aumentato la concentrazione di proteine totali nel liquido di lavaggio broncoalveolare. L'iniezione intratracheale ed endovenosa ha migliorato la concentrazione di prostaglandina E2 e la formazione di corpi lipidici rispetto al controllo.

Inoltre, colorazione con ematossilina ed eosina. Ha illustrato la rottura dei tessuti, l'emorragia e l'infiltrazione leucocitaria dopo somministrazione endovenosa e intratracheale di acido oleico. Dopo che la ricerca ha eseguito la tecnica, i campioni raccolti potrebbero essere analizzati per valutare le proteine Queste procedure possono aiutare la ricerca e capire come può imitare l'ARDS e scegliere e sviluppare nuovi trattamenti che