JoVE Journal

Neuroscience

Author Produced

Hai accesso completo a questo contenuto tramite

Nanyang Technological University

Un protocollo migliorato per purificare e direttamente mono-biotinyare recombinante BDNF in un tubo per gli studi sul traffico cellulare nei neuroni

Trascrizione

Il BDNF ricombinante contenente una sequenza Avi (BDNFAvi) viene prodotto nelle cellule HEK293 in modo conveniente ed è purificato dalla cromatografia di affinità. BDNFavi viene quindi direttamente mono-biotinylated con l'enzima BirA in un tubo. BDNFavi e BDNFavi monobionlate mantengono la loro attività biologica rispetto al BDNF disponibile in commercio.

Capitoli in questo video

0:00

Introdcution

0:48

Transfection of HEK293 cells

1:49

Media Collection and Storage

3:02

Media Concentration and Purification

4:58

In vitro Mono-biotinylation Reaction

6:01

Biotinylation Analysis

6:56

Visualization of Retrograde Axonal Transport of BDNF-QD in Live Neurons

7:58

Represetative Results

13:17

Conclusion

Video correlati

Utilizziamo i cookies per migliorare la tua esperienza sul nostro sito web.

Continuando a utilizzare il nostro sito web o cliccando “Continua”, accetti l'utilizzo dei cookies.