Il sovraccarico di pressione del ratto ha indotto un rimodellamento moderato e il modello di disfunzione sistolica precoce è una versione più lieve del sovraccarico di pressione del ratto precedentemente creato indotto per il modello di insufficienza cardiaca sistolica. Lo studio che amo, lo studio delle vie coinvolte nell'iniziazione e nella propagazione del rimodellamento cardiaco, soprattutto per quanto riguarda il rimodellamento metabolico, la disfunzione del miocardio e il ciclo del calcio. Prima di iniziare la procedura, regolare uno strumento di legatura emoclip vascolare tramite un pezzo di plastica pretaglio da sette pollici per modificare la clip nell'area interna appropriata, a seconda del modello di insufficienza cardiaca desiderato.
Successivamente, confermare una mancanza di risposta al riflesso fetale nel ratto anestetizzato e radere i capelli sotto l'ascella destra nella zona toracica laterale destra. Rastremi gli arti dell'animale su una tavola di dissezione di plastica e intuba l'animale con un'angiocath calibro 16. Avviare la ventilazione meccanica con volumi di marea di due millilitri a 50 cicli al minuto e una frazione di ossigeno ispirato del 21%.
Un aumento simmetrico della parete toracica dovrebbe essere osservato ad ogni respiro. Posizionare con cura l'animale sul lato laterale sinistro e piegare la coda in modo a forma di U. Quindi rastrettare delicatamente la coda sulla tavola di plastica e disinfettare la pelle esposta con iodio povidone.
Usando un bisturi, fare incisioni cutanee orizzontali da uno a due centimetri nella zona dell'ascella destra un centimetro sotto l'ascella destra e sezionare lo strato muscolare toracico fino a raggiungere la gabbia toracica della costola. Fare una toracotomia di un centimetro tra la seconda e la terza costola e posizionare un retrattore toracico nell'incisione prima di sezionare delicatamente i due lobi della ghiandola del timo. Spingere i lobi di lato e utilizzare una forcep grigia curva per smussare con cura sezionare l'aorta ascendente dalla vena cava superiore.
Una volta isolata l'aorta ascendente, utilizzare le forcep per sollevare attentamente il vaso e posizionare la clip vascolare intorno all'aorta ascendente. Quindi utilizzare la sutura monofilamento 2-0 per chiudere il torace prima di suturare lo strato muscolare del torace tramite sutura di cono vicrilico A-3-0 e chiudere la pelle con una sutura monofilamento 3-0 in nylon. Per l'imaging ecocardiografico, dopo la sedazione, rimuovere i capelli dal petto anteriore del ratto e stabilizzare l'animale in posizione supina su una tavola di dissezione di plastica.
Acquisire clip di vista parasternale a lungo asse 2D e una clip di vista parasternale a corto asse 2D a livello del muscolo papillare. Ottenere immagini in modalità M dalla vista dell'asse parasternale corto a livello del muscolo papillare per misurare lo spessore sinistro del setto ventricolare e della parete posteriore in diastole e i diametri sinistro ventricolare end-diastolico ed end-sistolico. Acquisire immagini di visualizzazione dell'asse parasternale corto in modalità M 2D a livello del muscolo medio-papillare per fungere da riferimento per ottenere misurazioni seriali e successive del ventricolo sinistro affidabili.
Quindi ottenere immagini in modalità M della vista dell'asse parasternale lungo a livello della valvola aortica per valutare il diametro dell'atrio aortico relativo a due sinistra e la sistole finale. La caratterizzazione dei fenotipi di insufficienza cardiaca che si sviluppano da otto a 12 settimane dopo la bande aortica crescente può essere facilmente eseguita tramite ecocardiografia. L'asse parasternale lungo 2D e i video clip ecocardiografici dell'asse parasternale corto 2D possono essere utilizzati per misurare la lunghezza e l'area del ventricolo sinistro a fine diastole e sistole finale negli animali da insufficienza cardiaca sham e MOD.
In questa vista dell'asse parasternale corto 2D, l'aumento dell'ipertrofia ventricolare sinistra e del fenotipo MOD può essere osservato rispetto all'aspetto del ventricolo sinistro nell'immagine ecocardiografica fittizia. Il ventricolo sinistro e il volume diastolico nel fenotipo dell'insufficienza cardiaca MOD di solito varia da 600 a 700 microlitri con pochi animali che presentano un volume end-diastolico superiore a 700 microlitri. Il volume ventricolo sinistro e sistolico nel fenotipo MOD varia da 120 a 160 microlitri.
In questi tracciamenti rappresentativi del ciclo del volume di pressione della settimana fittizia tre bande aortiche post-discendenti, MOD e animali insufficienza cardiaca sistolica overt, la pressione massima del ventricolo sinistro alla settimana otto è aumentata drasticamente negli animali MOD e insufficienza cardiaca sistolica sovrastolica rispetto alla settimana tre animali da banding aortico post-discendenti. a causa della mancata corrispondenza tra la crescita dell'animale e dell'aorta e la stenosi creata fissa nell'aorta ascendente. Inoltre, la terza settimana dopo gli animali AAB viene completamente compensata a tre settimane con una diminuzione del ventricolo sinistro e volumi diastolici e asintolici rispetto agli animali fittizi.
Da notare che il modello di insufficienza cardiaca indotta dal sovraccarico di pressione del ratto è associato ad alti tassi di mortalità e insufficienza con solo circa il 20% dei ratti che subiscono una transizione a banda aortica crescente per sviluppare il fenotipo di insufficienza cardiaca MOD. La cosa più importante da ricordare è caratterizzare correttamente il fenotipo degli animali mediante ecocardiografia in modo da restringere le variazioni biologiche osservate tra gli animali all'interno dello stesso gruppo. In una valutazione più dinamica utilizzando il catetere a loop del volume di pressione può essere utilizzato per valutare il rilassamento, la disfunzione contrattuale e la rigidità miocraziale.
