Ringraziamo il Bloomington Drosophila Stock Center per gli stock fly; C. Gahr, JT Alkema e S. van Hasselt per il loro primo tentativo di sviluppare il dosaggio dell&#39;aria sotto pressione; Jasper Bosman per il consiglio sulla coltivazione del lievito; E Rezza Azanchi e Joel Levine per sviluppare in origine il monitoraggio del comportamento di accoppiamento Drosophila . JA Gorter è stato sostenuto da una borsa di studio della Neuroscience Research School di BCN / NWO. Questo lavoro è stato sostenuto in parte dall&#39;organizzazione olandese per la ricerca scientifica (NWO) (riferimento: 821.02.020) a JC Billeter.

<ol>
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Sci. 276 (1662), 1705-1711 (2009).</li><li>Dukas, R., Jongsma, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Costs+to+females+and+benefits+to+males+from+forced+copulations+in+fruit+flies.">Costs to females and benefits to males from forced copulations in fruit flies.</a> Anim. Behav. 84 (5), 1177-1182 (2012).</li><li>Yorozu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+sensory+representations+of+wind+and+near-field+sound+in+the+Drosophila+brain.">Distinct sensory representations of wind and near-field sound in the Drosophila brain.</a> Nature. 457 (7235), 201-205 (2009).</li></ol>

Gli autori non hanno interessi concorrenti per rivelare.

Questo protocollo descrive un test per verificare il comportamento di accoppiamento per 24 ore mentre controlla continuamente i segnali ambientali che una coppia di accoppiamenti è ipotizzata per utilizzare per determinare la frequenza di accoppiamento. È possibile aumentare la frequenza di accoppiamento in risposta all&#39;aria del lievito erogata attraverso un sistema di aria compressa quando il mezzo contiene anche il lievito ( Figura 2B ). Inoltre, una risposta simile in frequenza di accoppiamento può essere osservata con un mezzo di alimentazione semplificato contenente solo agar, peptone e odore di acido acetico direttamente nel mezzo ( Figura 3B ) Con gli esperimenti qui dimostrati, si possono trarre conclusioni solo sul comportamento di accoppiamento generale della coppia, in quanto entrambi i sessi sono esposti alle stesse condizioni ambientali. Tuttavia, da ricerche precedenti, sappiamo che il 47% della variazione della frequenza di accoppiamento è determinato dalla femmina, mentre il contributo maschile rappresenta solo l&#39;11% della variazione20 . Pertanto, la maggior parte delle modifiche nella frequenza di accoppiamento osservate sono probabilmente il risultato della ricezione sessuale femminile. L&#39;aumento dei corteggiamenti dei maschi lascia ancora la femmina ad accettare o rifiutare l&#39;accoppiamento, dato che le femmine di D. melanogaster adulte possono abbattere con successo i tentativi di accoppiamento 29 . Per le conclusioni ferme e per attribuire in modo specifico le differenze nella frequenza di accoppiamento alla ricettività sessuale femminile, è necessario testare ulteriori coppie di accoppiamenti dove il genotipo della femmina è varia, ma quello del maschio è mantenuto costante. Questo protocollo ha dimostrato due modi per fornire composti odorosi a una coppia di accoppiamenti, sia con un sistema di aria compressa che direttamente nel mezzo alimentare. Il sistema dell&#39;aria sotto pressione ha il vantaggio che qualsiasi effetto può essere attribuito ai composti che vengono trasportati attraverso l&#39;aria, mentre ciò non può essere concluso quando i composti vengono messi direttamente nel supporto alimentare. D&#39;altra parte, wNon è possibile individuare alcun effetto con il sistema dell&#39;aria sotto pressione, ma non significa automaticamente che la cue non influenza il comportamento. Potrebbe anche significare che il composto non viene erogato in modo efficiente attraverso il sistema di aria compressa. La composizione dell&#39;aria all&#39;uscita del sistema di erogazione dell&#39;aria può essere analizzata posizionando un filtro idrocarburico e analizzando il contenuto dell&#39;aria bloccata con la gascromatografia accoppiata con spettrometria di massa. Il sistema dell&#39;aria pressurizzata è un buon test per testare composti che possono essere facilmente resi in aria per un intervallo più lungo. Miti composti volatili potrebbero essere messi direttamente nel supporto alimentare. Un altro svantaggio del sistema dell&#39;aria pressurizzata è la velocità dell&#39;aria che può avere sul comportamento del volo. Le mosche si fermano in movimento quando la velocità dell&#39;aria è troppo alta (sopra 0,7-1,6 m / s) 30 . Inoltre, il sistema ad aria compressa può rendere intollerabile un ambiente semplice e di bassa qualità asciugando il mezzo alimentare. In entrambi i casi, le mosche potrebbero non essere perfUgualmente bene, e nessuna conclusione può quindi essere attribuita ai composti specifici testati. Molti passaggi sono essenziali durante la preparazione per il funzionamento ottimale di questi dosaggi. Il primo passo che richiede attenzione è la preparazione del mezzo. È importante che il mezzo, compresi composti volatili odorosi come l&#39;acido acetico, sia preparato al giorno dell&#39;esperimento e non prima per evitare l&#39;evaporazione. Inoltre, il mezzo ha bisogno di indurire su una superficie senza flusso di aria supplementare (evitare di utilizzare delle cappe di fumi) perché il flusso d&#39;aria può stimolare l&#39;evaporazione dell&#39;odore. Il secondo passo che richiede una cura particolare è la creazione del sistema di aria compressa. Il flusso d&#39;aria deve essere abbastanza alto per bolle la bolla del lievito senza trasferire alcun fluido all&#39;arena. Questo protocollo dimostra un comportamento composto da odori di lievito in combinazione con comportamenti di accoppiamento. Tuttavia, questo sistema può essere applicato a qualsiasiTipo di odore, così come altri tipi di comportamenti. Per utilizzare questo sistema per altri odori, è necessario regolare il flusso d&#39;aria e l&#39;odore medio per ottimizzare il trasferimento dei composti ai piatti. Tuttavia, in generale, qualsiasi composto che può essere trasferito dall&#39;aria può essere testato con questo sistema. Inoltre, è possibile testare qualsiasi tipo di comportamento, sia in maschi che in femmine, utilizzando lo stesso tipo di piatti o regolando il tubo per raggiungere e connettersi a aree di prova più grandi o minori. Inoltre, quando vengono testati comportamenti più dettagliati, è necessario riconsiderare le velocità e le risoluzioni delle telecamere utilizzate. In ogni caso, se entrambi gli esperimenti con e senza l&#39;odore di prova vengono eseguiti contemporaneamente e con la stessa fonte d&#39;aria, è possibile rilevare qualsiasi risposta alla cue ambientale, indipendentemente dalle variazioni di pressione o di concentrazione da un esperimento all&#39;altro. Infine, il dosaggio qui dimostrato può essere esteso per almeno un altro ciclo LD (fino a 48 ore), fintanto che i fL&#39;alimentazione di ood non si asciuga.

I comportamenti riproduttivi hanno generalmente elevati costi energetici, soprattutto per le femmine, che producono gameti più grandi rispetto ai maschi e devono scegliere con cura le condizioni per aumentare la loro prole in via di sviluppo. A causa del costo energetico, non sorprende che la riproduzione sia connessa alle condizioni nutrizionali. Questo è vero nella maggior parte, se non in tutti, animali compresi i mammiferi, la cui pubertà può essere ritardata dalla malnutrizione e il cui comportamento sessuale può essere influenzato negativamente dalla restrizione alimentare 1 . La riproduzione dell&#39;organismo del modello genetico Drosophila melanogaster è anche influenzata da condizioni nutrizionali. La corte dei maschi a livello più elevato in presenza di volatili alimentari 2 e le femmine sono più ricettive sessualmente in presenza di lieviti, un importante nutrimento per la produzione di uova e la sopravvivenza dei figli 3 , 4 , 5 . QuestoLa risposta riproduttiva evoluzionistica riposta all&#39;alimentazione offre l&#39;opportunità di studiare meccanismi che connettono la disponibilità di cibo ambientale alla riproduzione sessuale in un organismo geneticamente tractable e time-efficient. Infatti, il lavoro in D. melanogaster ha implicato il percorso dell&#39;insulina come un importante regolatore della connessione tra il comportamento alimentare e l&#39;accoppiamento 6 . Ha anche dimostrato che l&#39;atto di accoppiamento modifica la preferenza alimentare delle femmine nonché i neuroni chemiosensori associati 7 , 8 , 9 . È chiaro che le indicazioni alimentari influenzano i comportamenti riproduttivi in D. melanogaster . Questi effetti sembrano interessare principalmente le femmine, in particolare quelle che hanno già maturato 5 . Tuttavia, per testare questi effetti acuti delle condizioni ambientali, il dosaggio classico utilizzato per il comportamento femminile di accoppiamento potrebbeNon essere molto adatto a causa delle lunghe interruzioni tra gli episodi di accoppiamento. Nel classico test di rimozione, una femmina vergine prima si collega con un maschio e viene immediatamente isolata e presentata con un nuovo maschio 24-48 h più tardi. Questo saggio classico è stato usato con grande successo per identificare componenti dell&#39;eiaculato maschile che modificano il comportamento femminile e la risposta femminile 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17 , 18 . Il test di accoppiamento continuo dimostrato qui è quindi un&#39;aggiunta a saggi classici di accoppiamento che possono essere utilizzati per studiare l&#39;effetto acuto delle condizioni ambientali sui comportamenti riproduttivi. Utilizzando il dosaggio continuo per il comportamento di accoppiamento che viene spiegato qui, abbiamo precedentemente mostrato che una coppia di mosche esposte al lievito rimateràSempre in un periodo di osservazione di 24 ore 5 , 19 , 20 , 21 , mentre mosche non esposte al cibo rimarrà solo una volta 5 . Questa scoperta può essere sconcertante alla luce di una grande parte della letteratura D. melanogaster che indica che le femmine non si ritraggono per diversi giorni dopo un accoppiamento iniziale (riveduto nei riferimenti 10 , 11 ). Tuttavia, questa discrepanza può essere facilmente spiegata da condizioni di analisi, in cui una femmina è isolata per uno a diversi giorni prima di fornire una nuova opportunità di accoppiamento. Se la coppia non si accoppia in questo periodo di osservazione, la donna è caratterizzata come non ricettivo. Inoltre, la frequenza di accoppiamento elevato non dovrebbe sorprendere, dato che i dati provenienti da mosche selvatiche mostrano che le femmine contengono spermatozoi da 4 a 6 maschi nei loro organi di stoccaggio; Così inDicating che le femmine naturalmente rimane diverse volte 22 , 23 . Qui dimostriamo l&#39;uso di questo saggio di accoppiamento continuo per scoprire come le mosche raccolgono e combinano informazioni sulle condizioni ambientali per modulare la frequenza di accoppiamento. Questo test consente di testare un numero relativamente elevato di coppie di maternità per studi genetici e di verificare l&#39;influenza dei segnali ambientali volatili e non volatili. Il dosaggio viene tipicamente eseguito per 24 h, ma può essere esteso a 48 h, consentendo la sperimentazione di segnali ambientali di ciclo come il ciclo scuro (LD). Ci dimostriamo questo test verificando l&#39;influenza dei segnali volatili da una coltura di lieviti all&#39;interno di un sistema di aria pressurata in combinazione con la disponibilità di nutrienti di lievito non volatili nel substrato alimentare. L&#39;impianto a pressione pressurizzata pompava continuamente segnali volatili in un&#39;arena di accoppiamento che contengonoSubstrato alimentare e una coppia di test (il cui comportamento di accoppiamento è monitorato). Per determinare ulteriormente le specificità attraverso le quali il lievito influenza l&#39;accoppiamento, si prova un importante composto volatile di lievito, cioè acido acetico 24 , in combinazione con un contenuto di amminoacidi che corrisponde a quello del lievito nel substrato alimentare, sotto forma di peptone (amino Acidi derivati ​​dalla digestione enzimatica delle proteine ​​animali). Insieme questi esperimenti dimostrano come l&#39;effetto dei segnali ambientali sul comportamento di accoppiamento di D. melanogaster possa essere testato con questo saggio.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cabinet</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel kitchen cabinet</td>
			<td>Horecaworld</td>
			<td>7412.0105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White LEDs</td>
			<td>Lucky Light</td>
			<td>ll-583wc2c-001</td>
			<td>Cold white, 20 mAmp and 2 V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red LEDs</td>
			<td>Lucky Ligt</td>
			<td>ll-583vc2c-v1-4da</td>
			<td>Wavelength between 625 nm, 20 mAmp and 6 V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Resistor</td>
			<td>Royal Ohm</td>
			<td>CFR0W4J0561A50</td>
			<td>560 ohm, 0.25 W, 250 V and 5 % tolerance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smartphone light meter app</td>
			<td>Patrick Giudicelli</td>
			<td></td>
			<td>Light/Lux Meter FREE, version 1.1.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power timer</td>
			<td>Alecto</td>
			<td>TS-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal brackets</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sharp angle 5 by 5 mm,&#160; 2 x 5450 and 1 x 1100 mm long</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Frosted glass plate</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1190 x 545 x 5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper sheets</td>
			<td>LEE filters</td>
			<td>220</td>
			<td>White frost</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fan</td>
			<td>Nanoxia Deep silence</td>
			<td>4260285292828</td>
			<td>80 mm Ultra-Quiet PC Fan, 1200 RPM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big fan</td>
			<td>Nanoxia Deep silence</td>
			<td>4260285292910</td>
			<td>120 mm Ultra-Quiet PC Fan, 650-1500 RPM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Webcam camera</td>
			<td>Logitech</td>
			<td>950270</td>
			<td>B910 HD WEBCAM OEM, Angle: 78-degree, resolution: 5-million-pixel&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera software</td>
			<td>DeskShare</td>
			<td></td>
			<td>Security monitor pro</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly rearing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly rearing bottles</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>32-130</td>
			<td>6oz Drosophila stock bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flypad</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>59-114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wild-type flies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Canton-S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly rearing vials</td>
			<td>Dominique Dutscher</td>
			<td>789008</td>
			<td>Drosophila tubes narrow 25x95 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td>MIR-154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic hot plate</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td>505-20000-00</td>
			<td>MR Hei-Standard</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Caldic Ingredients B.V.</td>
			<td>010001.26.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Gezond&#38;wel</td>
			<td>1019155</td>
			<td>Dextrose/Druivensuiker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Van Gilse</td>
			<td></td>
			<td>Granulated sugar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>62-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wheat germ</td>
			<td>Gezond&#38;wel</td>
			<td>1017683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soy flour</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>62-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Molasses</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>62-117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Active dry yeast</td>
			<td>Red Star</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tegosept</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>20-258</td>
			<td>100%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone (bacto)</td>
			<td>BD</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Acid</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1000631000</td>
			<td>Glacial, 100%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small petridish</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>627102</td>
			<td>35 x 10 mm with vents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin film</td>
			<td>Bemis NA</td>
			<td></td>
			<td>Parafilm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast and pressurised air set-up</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big petridish</td>
			<td>Gosselin</td>
			<td>BP140-01</td>
			<td>140 x 20.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>Millipore corporation</td>
			<td></td>
			<td>MiliQ</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast extract</td>
			<td>BD</td>
			<td>212750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar (pure)</td>
			<td>BD</td>
			<td>214530</td>
			<td>bacto</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose (0(+)-glucose monohydrate)&#160;</td>
			<td>Merck</td>
			<td>18270000004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open caps</td>
			<td>Schott</td>
			<td>29 240 28&#160;</td>
			<td>GL45</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone septum</td>
			<td>VWR</td>
			<td>548-0662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barbed bulkhead fittings</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>6149-0002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large PVC tubing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>diameter: outer 1.2 cm and inner 0.9 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small PVC tubing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>diameters: outer 0.8 cm and inner 0.5 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aquarium pump</td>
			<td>Sera precision</td>
			<td></td>
			<td>Sera air 110 plus, AC 220-240 V, 50/60 Hz, 3 W and pressure &#62;100 mbar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Activated charcoal</td>
			<td>Superfish</td>
			<td>A8040400</td>
			<td>Norit activated carbon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposible filter unit</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>10462100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipettes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>612-1600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>300013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot glue</td>
			<td>Pattex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filter</td>
			<td>Whatman</td>
			<td></td>
			<td>FP 30/pore size 0.45 mm CA-S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analysis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistics software</td>
			<td>R</td>
			<td></td>
			<td>lme4 package</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method to test the effect of environmental cues on mating behavior in drosophila melanogaster

L&#39;azionamento sessuale di un individuo è influenzato dal genotipo, dall&#39;esperienza e dalle condizioni ambientali. Come questi fattori interagiscono per modulare i comportamenti sessuali rimane poco compreso. In Drosophila melanogaster , i segnali ambientali, come la disponibilità di cibo, influenzano l&#39;attività di accoppiamento che offre un sistema tracciato per indagare i meccanismi che modulano il comportamento sessuale. In D. melanogaster , i segnali ambientali vengono spesso rilevati attraverso i sistemi gassosi e olfattivi chemosensoriali. Qui espostiamo un metodo per testare l&#39;effetto dei segnali chimici ambientali sul comportamento dell&#39;accoppiamento. Il dosaggio è costituito da una piccola arena di accoppiamento contenente un mezzo alimentare e una coppia di accoppiamenti. La frequenza di accoppiamento per ogni coppia viene monitorata continuamente per 24 ore. Qui esprimiamo l&#39;applicabilità di questo test per testare i composti ambientali da una sorgente esterna attraverso un sistema di aria compressa e la manipolazione dei componenti ambientali direttamente nell&#39;arena di accoppiamento. L&#39;uSe di un sistema di aria compressa è particolarmente utile per testare l&#39;effetto di composti molto volatili, mentre manipolazione di componenti direttamente nell&#39;arena di accoppiamento può essere utile per accertare la presenza di un composto. Questo saggio può essere adattato per rispondere a domande sull&#39;influenza delle indicazioni genetiche e ambientali sul comportamento e sulla fecondità di accoppiamento e su altri comportamenti riproduttivi maschi e femmine.

Utilizzando questo test continuo, il comportamento di accoppiamento e la frequenza di accoppiamento in specifiche possono essere determinati in condizioni ambientali sperimentali. Per controllare le condizioni ambientali, abbiamo trasformato un armadio in acciaio inox in una zona di prova, con una propria sorgente luminosa e diffusione che assicura un&#39;elevata abbondanza di luce e una minima quantità di riflessi dalla parte superiore delle arene di accoppiamento ( figura 1A ) . L&#39;area di prova interna è completamente incassata in acciaio inossidabile e vetro, che consente la pulizia con solventi organici, come ad esano o etanolo. Inoltre, l&#39;armadietto è dotato di fori che fungono da bocchettoni per il tubo, portando volute dal sistema di aria compressa (vedi figure 1A e 1B ). Il sistema dell&#39;aria pressurizzata, regolato per gli odori di lievito, è costituito da un flusso d&#39;aria guidato attraverso una coltura di lievito liquido prima di entrare nelle arene di prova attraverso 4 distributori di pipette con10 prese ciascuna ( figura 1C ). L&#39;intero sistema è ermetico e dotato di diversi filtri di particelle, sia prima che dopo la penetrazione nella coltura del lievito, per ridurre al minimo la contaminazione con odori confusi ( Figura 1B ). Per dimostrare l&#39;uso di questo saggio, abbiamo testato se i segnali volatili di una coltura di lieviti possono influenzare il comportamento di accoppiamento. L&#39;aria fu bubbled attraverso una coltura di lievito liquido per 24 h, e le prese d&#39;aria sono state collocate all&#39;ingresso di ogni arena di accoppiamento (vedi figura 2A ). La metà delle arene di accoppiamento conteneva alimenti a vola con lievito (Food + lievito) e l&#39;altra metà conteneva alimenti mossi senza aggiunta di lievito (Alimento - lievito). Un maschio e una femmina selvatici sono stati esposti agli odori provenienti dalla cultura del lievito esterno e la loro frequenza di accoppiamento è stata registrata. Per determinare quali variabili sono necessarie per spiegare i risultati grafici, abbiamo eseguito modelli di effetti misti, inclusi o esclusiLe variabili indipendenti del mezzo alimentare, l&#39;aria del lievito e un&#39;interazione dei due. I dati della Figura 2B sono meglio rappresentati da un modello che comprende le variabili indipendenti del cibo medio (p = 0.001) e l&#39;aria del lievito (p = 0.061), ma non esiste alcun effetto di interazione spiegante. Anche se la variabile d&#39;aria del lievito non è significativa in questo insieme di dati completo, è necessario spiegare i risultati. L&#39;analisi dell&#39;aria di lievito separata per il mezzo alimentare mostra che una coppia di accoppiamenti non risponde agli odori di lievito quando non esiste un lievito nel mezzo alimentare (aria: p = 0,992), ma aumenta la loro frequenza di accoppiamento nell&#39;aria di lievito quando il lievito è Aggiunto anche al supporto alimentare (aria: p = 0.018). Insieme, questi risultati dimostrano l&#39;applicabilità del sistema dell&#39;aria pressurizzata per testare l&#39;influenza degli odori ambientali in combinazione con le condizioni medie del cibo. Illustriamo anche come il sistema dell&#39;aria pressurizzata può essere bypAssediando l&#39;aggiunta di indizi chimici ambientali direttamente all&#39;arena di prova. Per dimostrare quali composti di lievito specifici influenzano la frequenza di accoppiamento, abbiamo provato l&#39;ipotesi che il contenuto di amminoacidi del lievito sia necessario per il suo effetto sull&#39;accoppiamento mettendo una dose di peptone (proteine ​​idrolizzate) corrispondenti agli aminoacidi fornite dal lievito nell&#39;agar Substrato che fodera l&#39;arena di accoppiamento. Abbiamo anche testato la necessità di acido acetico, uno dei principali prodotti fermentativi volatili del lievito, per aumentare la frequenza di accoppiamento. Questo è stato fatto aggiungendo acido acetico direttamente al cibo. Un maschio e una femmina selvatici sono stati testati in arene contenenti agar o agar con peptone, con o senza acido acetico direttamente nel mezzo alimentare ( Figura 3B ). Questo rende per un mezzo alimentare molto semplice e un ambiente povero; Quindi, anche la frequenza di accoppiamento medio diminuisce rispetto alla Figura 2B. I dati nella Figura 3B sono meglio rappresentati da un modello compreso ilVariabili indipendenti di sostanze alimentari (p = 0,002), aria dell&#39;acido acetico (p = 0,001) e interazione dei due (p = 0,022). La ricettività femminile aumenta sulla presenza di acido acetico, ma solo nella condizione in cui il peptone è presente nel mezzo. Ciò dimostra che le mosche devono simultaneamente sentire gli aminoacidi e l&#39;acido acetico per aumentare la loro frequenza di accoppiamento ( Figura 3B ). Ciò dimostra che l&#39;aggiunta di composti odorosi direttamente all&#39;area di prova può influenzare il comportamento dell&#39;accoppiamento e che tali influenze possono essere rilevate in condizioni ambientali molto semplici. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/55690/55690fig1.jpg" /> Figura 1: Diagramma della scatola sperimentale e sistema di aria compressa con lievito. ( A ) Schema illustrativo della scatola di accoppiamento controllata sotto il profilo ecologico descritta nella sezione 1. Descrizione dei numeri e delle frecce annotate: 1. scheda di illuminazione con<html> Ternando le luci bianche e rosse; 2. ventilatore piccolo; 3. 3 strati di carta filtrante, ciascuno strato composto da due fogli di carta filtro; 4. piastra di diffusione in vetro appoggiata su staffe fissate su 3 lati della scatola; 5. ventilatore grande; 6. fori per tubi e cavi; 7. area sperimentale; Grande freccia, 50 cm alla lastra di vetro; Freccia centrale, 35 cm di altezza per i fori del cavo; E piccola freccia, 7 cm di altezza per i fori dei tubi. ( B ) Schema illustrativo della coltura del lievito liquido con flusso d&#39;aria, come descritto nelle sezioni 5, 6.4 e 6.5. Descrizione dei numeri annotati: 1. unità filtrante usa e getta; Cappello con setto in silicone e fuoriuscite; 3. liquido liquido; E 4. tubo di vetro con fibra di vetro. ( C ) Schema illustrato delle prese d&#39;aria come descritto nel punto 6.7. Descrizione dei numeri annotati: 1. pipetta serologica; 2. tubo tagliato da una siringa da 1 ml e 3. 1000 μL punta pipetta.Target = &quot;_ blank&quot;&gt; Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura. <img alt="figura 2" src="/files/ftp_upload/55690/55690fig2.jpg" /> Figura 2: Odore di lievito aumenta la ricettività femminile in presenza di lieviti nel substrato alimentare. ( A ) Illustrazione schematica di un&#39;arena di accoppiamento con un maschio e una femmina e una punta pipetta dalla presa d&#39;aria di figura 1C che penetra attraverso il foro di entrata. ( B ) Presentazione grafica della risposta in frequenza di accoppiamento di una coppia di accoppiamento Canton-S con l&#39;odore di lievito con e senza lievito nel mezzo alimentare di alimento (Alimento - lievito: aria media n = 12, aria lievito n = 13 e cibo + lievito : Aria media n = 24, aria lievitata n = 23). Grafico a linee con barre di errore SEM e produzione statistica di modelli di effetti misti con aria come variabile indipendente e data come variabile casuale per ogni mezzo alimentare in modo indipendente. La statistica principaleIl modello include il cibo (p = 0.001) e l&#39;aria del lievito (p = 0.061). Adattato dal riferimento 5 . <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55690/55690fig2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/55690/55690fig3.jpg" /> Figura 3: L&#39;acido acetico nel substrato alimentare a mosca aumenta la ricettività femminile in presenza di peptone. ( A ) Illustrazione schematica di un&#39;arena di accoppiamento, con alimento di alimento moscata contenente acido acetico e una spina in plastica di paraffina che chiude il foro di entrata. ( B ) Una presentazione grafica della frequenza di accoppiamento di una coppia di accoppiamenti Canton-S in risposta all&#39;acido acetico sia sul mezzo agarico che sul peptone (agar: - acido acetico n = 52, + acido acetico n = 40 e peptone: - acido acetico N = 28, + acido acetico n = 25). Grafico a linee con barre di errore SEM e statistiche(P = 0,002), l&#39;aria dell&#39;acido acetico (p = 0,001) e l&#39;alimento * aria (p = 0,022) come variabili indipendenti e la data come variabile casuale. Adattato dal riferimento 5 . <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55690/55690fig3large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

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A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

Noi dimostriamo un dosaggio per analizzare i suggerimenti ambientali e genetici che influenzano il comportamento di accoppiamento nella mosca di frutta Drosophila melanogaster .

Un metodo per testare l &#39;effetto dei segnali ambientali sul comportamento di accoppiamento in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

a-method-to-test-effect-environmental-cues-on-mating-behavior

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

9.0K Views.  University of Groningen.  Noi dimostriamo un dosaggio per analizzare i suggerimenti ambientali e genetici che influenzano il comportamento di accoppiamento nella mosca di frutta Drosophila melanogaster . 

Video: A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during abstinence. Moreover, various environmental challenges can exacerbate this effect, as well as increase ongoing drug intake.
The procedure we describe here highlights the impact of a common environmental challenge, food restriction, on drug craving that is expressed as an augmentation of drug seeking in abstinent rats.
Rats are implanted with chronic intravenous i.v. catheters, and then trained to press a lever for i.v. heroin over a period of 10-12 days. Following the heroin self-administration phase the rats are removed from the operant conditioning chambers and housed in the animal care facility for a period of at least 14 days. While one group is maintained under unrestricted access to food (sated group), a second group (FDR group) is exposed to a mild food restriction regimen that results in their body weights maintained at 90% of their nonrestricted body weight. On day 14 of food restriction the rats are transferred back to the drug-training environment, and a drug-seeking test is run under extinction conditions (i.e.&#160;lever presses do not result in heroin delivery).
The procedure presented here results in a highly robust augmentation of heroin seeking on test day in the food restricted rats. In addition, compared to the acute food deprivation manipulations we have used before, the current procedure is a more clinically relevant model for the impact of caloric restriction on drug seeking. Moreover, it might be closer to the human condition as the rats are not required to go through an extinction-training phase before the drug-seeking test, which is an integral component of the popular reinstatement procedure.

A procedure that allows a demonstration of robust augmentation of drug seeking in food-restricted rats is described. Following heroin self-administration training, rats go through an abstinence period, in a drug-free environment, during which they are mildly food restricted. Drug seeking is then tested in the drug-associated environment.

Una procedura per studiare l&#39;effetto della prolungata restrizione alimentare sulla Cerco eroina nei ratti in astinenza

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

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Measuring Sensitivity to Viewpoint Change with and without Stereoscopic Cues

The speed and accuracy of object recognition is compromised by a change in viewpoint; demonstrating that human observers are sensitive to this transformation. Here we discuss a novel method for simulating the appearance of an object that has undergone a rotation-in-depth, and include an exposition of the differences between perspective and orthographic projections. Next we describe a method by which human sensitivity to rotation-in-depth can be measured. Finally we discuss an apparatus for creating a vivid percept of a 3-dimensional rotation-in-depth; the Wheatstone Eight Mirror Stereoscope. By doing so, we reveal a means by which to evaluate the role of stereoscopic cues in the discrimination of viewpoint rotated shapes and objects.

We discuss a novel method forviewpoint-rotation of visual stimuli, and demonstrate using a mirror stereoscopethe three-dimensional percept of rotation-in-depth. The technique can be used to investigate the role of stereoscopic cues in encoding viewpoint-rotated figures.

Misurazione Sensibilità alla Viewpoint Cambia con e senza stereoscopico Cues

The speed and accuracy of object recognition is compromised by a change in viewpoint; demonstrating that human observers are sensitive to this ...

The Use of the Puzzle Box as a Means of Assessing the Efficacy of Environmental Enrichment

Environmental enrichment can dramatically influence the development and function of neural circuits. Further, enrichment has been shown to successfully delay the onset of symptoms in models of Huntington&#8217;s disease 1-4, suggesting environmental factors can evoke a neuroprotective effect against the progressive, cellular level damage observed in neurodegenerative disorders. The ways in which an animal can be environmentally enriched, however, can vary considerably. Further, there is no straightforward manner in which the effects of environmental enrichment can be assessed: most methods require either fairly complicated behavioral paradigms and/or postmortem anatomical/physiological analyses. This protocol describes the use of a simple and inexpensive behavioral assay, the Puzzle Box 5-7 as a robust means of determining the efficacy of increased social, sensory and motor stimulation on mice compared to cohorts raised in standard laboratory conditions. This simple problem solving task takes advantage of a rodent&#8217;s innate desire to avoid open enclosures by seeking shelter. Cognitive ability is assessed by adding increasingly complex impediments to the shelter&#8217;s entrance. The time a given subject takes to successfully remove the obstructions and enter the shelter serves as the primary metric for task performance. This method could provide a reliable means of rapidly assessing the efficacy of different enrichment protocols on cognitive function, thus paving the way for systematically determining the role specific environmental factors play in delaying the onset of neurodevelopmental and neurodegenerative disease.

Environmental enrichment provides a potential protective effect against neurodegenerative disorders. Currently, however, there is no easy way of determining the efficacy of enrichment procedures. This protocol describes a simple &#8220;Puzzle Box&#8221; method for assessing an animal&#8217;s cognitive function, in order to reveal the effectiveness of environmental enrichment.

L&#39;uso del Puzzle Box come un mezzo per valutare l&#39;efficacia di arricchimento ambientale

Environmental enrichment can dramatically influence the development and function of neural circuits.  Further, enrichment has been shown to successfully ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations supportive behavior of other people as well as positive social relationships can act as powerful resources to cope with stress. In order to study the interplay between these variables, this protocol describes two effective experimental manipulations of social relationships and supportive behavior in the laboratory. In the present article, these two manipulations are implemented in the Trier Social Stress Test (TSST)&#8212;a standard stress induction paradigm in which participants are subjected to a simulated job interview. More precisely, we propose (a) a manipulation of the relationship between different protagonists in the TSST by making a shared social identity salient and (b) a manipulation of the behavior of the TSST-selection committee, which acts either supportively or unsupportively. These two experimental manipulations are designed in a modular fashion and can be applied independently of each other but can also be combined. Moreover, these two manipulations can also be integrated into other stress protocols and into other standardized social interactions such as trust games, negotiation tasks, or other group tasks.

Previous research on the social dimension of stress has focused on two important variables: social identity and social support. This protocol introduces an effective experimental manipulation of these two social variables and describes their implementation in a standard stress induction paradigm (Trier Social Stress Test).

La dimensione sociale dello stress: manipolazioni sperimentali di sostegno sociale e identità sociale nella Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

Un metodo per valutare le proprietà di rinforzo di etanolo in ratti senza acqua privazione, Saccarina dissolvenza o di formazione accesso esteso

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

Il roditore psicomotorio vigilanza Test (rPVT): un metodo per la valutazione delle prestazioni neurocomportamentali in ratti e topi

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

Sperimentazione animale ansia in ratti: effetti di sporgenze braccio aperto e chiuso braccio parete trasparenza in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae

Oxygen deprivation in animals can result from exposure to low atmospheric oxygen levels or from internal tissue damage that interferes with oxygen distribution. It is also possible that aberrant behavior of oxygen-sensing neurons could induce hypoxia-like behavior in the presence of normal oxygen levels. In D. melanogaster, development at low oxygen levels results in inhibition of growth and sluggish behavior during the larval phases. However, these established manifestations of oxygen deficit overlap considerably with the phenotypes of many mutations that regulate growth, stress responses or locomotion. As result, there is currently no assay available to identify i) cellular hypoxia induced by a mutation or ii) hypoxia-like behavior when induced by abnormal neuronal behavior.
We have recently identified two distinctive behaviors in D. melanogaster larvae that occur at normal oxygen levels in response to internal detection of hypoxia. First, at all stages, such larvae avoid burrowing into food, often straying far away from a food source. Second, tunneling into a soft substratum, which normally occurs during the wandering third instar stage is completely abolished if larvae are hypoxic. The assay described here is designed to detect and quantitate these behaviors and thus to provide a way to detect hypoxia induced by internal damage rather than low external oxygen. Assay plates with an agar substratum and a central plug of yeast paste are used to support animals through larval life. The positions and state of the larvae are tracked daily as they proceed from first to third instar. The extent of tunneling into the agar substratum during wandering phase is quantitated after pupation using NIH ImageJ. The assay will be of value in determining when hypoxia is a component of a mutant phenotype and thus provide insight into possible sites of action of the gene in question.

A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae

The protocol describes a simple assay to identify Drosophila melanogaster larvae that are experiencing hypoxia under normal atmospheric oxygen levels. This protocol allows hypoxic larvae to be distinguished from other mutants that show overlapping phenotypes such as sluggishness or slow growth.

Un saggio di Burrowing/Tunneling per rilevazione di ipossia nelle larve di Drosophila melanogaster

Oxygen deprivation in animals can result from exposure to low atmospheric oxygen levels or from internal tissue damage that interferes with oxygen ...

An Automated Method to Determine the Performance of Drosophila in Response to Temperature Changes in Space and Time

Temperature is a ubiquitous environmental factor that affects how species distribute and behave. Different species of Drosophila fruit flies have specific responses to changing temperatures according to their physiological tolerance and adaptability. Drosophila flies also possess a temperature sensing system that has become fundamental to understanding the neural basis of temperature processing in ectotherms. We present here a temperature-controlled arena that permits fast and precise temperature changes with temporal and spatial control to explore the response of individual flies to changing temperatures. Individual flies are placed in the arena and exposed to pre-programmed temperature challenges, such as uniform gradual increases in temperature to determine reaction norms or spatially distributed temperatures at the same time to determine preferences. Individuals are automatically tracked, allowing the quantification of speed or location preference. This method can be used to rapidly quantify the response over a large range of temperatures to determine temperature performance curves in Drosophila or other insects of similar size. In addition, it can be used for genetic studies to quantify temperature preferences and reactions of mutants or wild-type flies. This method can help uncover the basis of thermal speciation and adaptation, as well as the neural mechanisms behind temperature processing.

An Automated Method to Determine the Performance of Drosophila in Response to Temperature Changes in Space and Time

Here we present a protocol to automatically determine the locomotor performance of Drosophila at changing temperatures using a programmable temperature-controlled arena that produces fast and accurate temperature changes in time and space.

Un metodo automatizzato per determinare le prestazioni della drosofila in risposta a variazioni di temperatura nello spazio e nel tempo

Temperature is a ubiquitous environmental factor that affects how species distribute and behave. Different species of Drosophila fruit flies have specific ...

Elevated Plus Maze Test Combined with Video Tracking Software to Investigate the Anxiolytic Effect of Exogenous Ketogenic Supplements

The overall goal of this study is to describe the methodology of the elevated plus maze (EPM) test in combination with a video tracking software. The purpose of the method is to document the effect of various potential anxiolytic treatments on laboratory rodent models. The EPM test is based on the rodents&#39; proclivity toward protected, enclosed dark spaces and unconditioned fear of open spaces and heights, and their innate intense motivation to explore novel environments. The EPM test is a widely used behavioral test for investigating the anxiolytic or anxiogenic responses of rodents given drugs that are known to affect behavior. Observation demonstrating a decreased proportion of time spent on closed arms, an increased proportion of time spent on open arms, a reduced number of entries to closed arms, and an elevated number of entries to open arms measured by the EPM test may reflect reduced anxiety levels. Using this method, the effect of exogenous ketone supplements on anxiety-related behavior is tested in Sprague Dawley (SPD) rats. Exogenous ketone supplements are chronically fed to the rats for 83 days or subchronically and acutely orally gavaged, daily for 7 days, before conducting the EPM test. Behavioral data collection is performed using the SMART video tracking system by a blinded observer at the end of the treatments. The main findings indicate that the EPM test is an effective method to detect the ketone supplement-induced anxiolytic effect and can be considered a sensitive measure to assess changes in anxiety behavior associated with drug- or metabolic-based therapies.

Here, we present a protocol to investigate changes in the anxiety level of rodent animal models. The elevated plus maze (EPM) test, used together with a video tracking software, provides a reliable method to document the effect of various potential anxiolytic treatments in preclinical laboratory scenarios.

Elevato oltre a Test combinato con Video Software di monitoraggio per studiare l'effetto ansiolitico dei supplementi chetogenica esogeni del labirinto

The overall goal of this study is to describe the methodology of the elevated plus maze (EPM) test in combination with a video tracking software. The ...