Gli autori desiderano ringraziare il signor Akihiro Hirano per la sua assistenza nella produzione dell'apparato su misura. Gli autori vorrei ringraziare il signor Kosuke Takahashi e il signor Shingo Nakajima per la loro assistenza tecnica. Questo lavoro è stato supportato dalla ricerca sul rischio delle sostanze chimiche, salute e assegni di ricerca di laboratorio Scienze, Ministero della salute, del lavoro e Welfare, Giappone (H25-KAGAKU-IPPANN-003) e A Research Project Grant dall'Istituto di scienza e tecnologia Meiji Università, Giappone.

Tutte le procedure sperimentali descritte qui sono state approvate dalla istituzionale Animal Care e uso Comitato di Meiji University (IACUC 14-0002(1)). Animali utilizzati nei risultati rappresentativi sono stati preparati come segue: ratti maschi Sprague-Dawley sono stati acquistati da una società di animali di laboratorio e stabulati in gruppo di 4 animali per gabbia standard del ratto (W200 × D410 × H250 mm) per almeno una settimana prima dell'inizio della esperimento del comportamento. La camera di stabulazione degli animali era mantenuto in condizioni ambientali standard per luce (12:12 orario di chiaro/scuro con luci alle 10:00 h), temperatura (25,0 ± 0,5 ° C), umidità (55 ± 10%) e ventilazione (10 volte / h), e gli animali hanno avuti ad libitum accesso a cibo ( Oriental lievito Co. Ltd., Tokyo, Giappone) e acqua. Gli animali erano tenuti in una gabbia di standard del ratto (W410 x D250 x H200 mm, Toyoriko Co., Ltd., Aichi, Giappone) con carta biancheria da letto (alfa-dri, LSG Corporatin, Tokyo, Giappone).
1. elevato più l'analisi del labirinto
<ol><li>Impostare più elevati labirinto apparato in un contenitore su misura (W1, 500 × D1, 500 × H2, 000mm) (Figura 1A) con un quadro di metallo a forma di più 500 mm sopra il pavimento per supportare l'esecuzione braccia di modo (Figura 1B), illuminazione a soffitto, contenitore per illuminare la superficie del labirinto per l'intensità della luce necessaria (Figura 1) e una videocamera digitale nel soffitto centro per abilitare il monitoraggio dei video dal vivo dei test comportamentali (Figura 1).</li>
	<li>Fissare i bracci (x W100 L500 mm) sul quadro a forma di più e quindi fissare la piattaforma centrale quadrata (W100 x D100 mm) al centro dei quattro bracci (Figura 1 -F). Nota: Nel nostro laboratorio, abbiamo due tipi di braccia aperte (x W100 L500 mm) e due tipi di bracciolo chiuso (L500 x W100 x H450 mm) (Figura 1). Il bracciolo chiuso hanno pareti trasparente o opache (Figura 1), e le braccia aperte sono progettate con o senza una breve cengia (H5 mm, Figura 1E). La piattaforma centrale quadrata (W100 × D100 mm) è posto al centro dei quattro bracci (Figura 1 -F). Così, le seguenti quattro combinazioni di armi possono essere allestite secondo scopo sperimentale: open arms con sporgenze + bracciolo chiuso con pareti trasparenti (sporgenze/trasparente), braccia aperte con sporgenze + bracciolo chiuso con pareti opache (sporgenze/opaco), a braccia aperte senza sporgenze + bracciolo chiuso con pareti trasparenti (No-sporgenze/trasparente) e le braccia aperte senza sporgenze + bracciolo chiuso con opaco pareti (No-sporgenze/opaco). La superficie della pista braccio è nera, per consentire il migliore animale traccia dal software di analisi di comportamento automatizzato, come descritto nella sezione 2, analisi comportamentale.</li>
	<li>Regolare l'intensità di illuminazione sulla superficie della parte distale di ogni braccio e la piattaforma centrale per circa 100 Lux.</li>
	<li>Prima di ogni prova, pulire l'intero apparato con soluzione di etanolo 70% e pulire con acqua distillata.</li>
	<li>Fare clic sul pulsante"record" sul registratore su disco rigido per avviare la videocamera digitale che registra comportamento del ratto per la video analisi descritta in sezione 2, analisi comportamentale di imaging.</li>
	<li>Posizionare un animale sulla piattaforma centrale rivolto verso un braccio aperto e consentire la libera esplorazione sull'apparecchio per 5 min.</li>
	<li>Fare clic sul pulsante"stop" sul registratore su disco rigido per completare la registrazione.</li>
	<li>Contare il numero di feci e le minzioni sono dopo il ritorno l'animale sottoposto a test per la camera di stabulazione degli animali.</li>
	<li>Ripetere dal passo 1.4 fino alla fine dell'esperimento. Nota: Esecuzione di un test a secco viene sempre effettuata prima di iniziare ogni esperimento per verificare che tutte le impostazioni sperimentali sono impostate correttamente prima di eventuali animali da esperimento sono esposti a condizioni sperimentali. In caso contrario, alcuni animali, soprattutto il primo animale potrebbe verificarsi diverse condizioni ambientali (ad es., rumori possibilmente indotti dallo sperimentatore durante la manipolazione e/o animale spunti eventualmente lasciati dall'animale precedentemente testato). Nota: Quando un animale è in fase di test, gli sperimentatori sono vicino al contenitore. Così, anche se gli sperimentatori non sono visibili il ratto può ancora essere in grado di percepire loro via odore e/o suono.</li>
</ol>2. behavioral Analysis
Nota: Analisi comportamentale viene eseguita tramite l'osservazione manuale e software di analisi automatico.
<ol><li>
Osservazione manuale
	<ol>
<li>Dopo che l'animale è posto sul davanzale, osservare le seguenti indicazioni: numero delle voci (una voce su un braccio è definita come qualsiasi istanza quando tutti i 4 zampe sono sul braccio), il tempo trascorso su ciascun braccio, e numero di frequentanti allungato posture un braccio aperto di fronte , mentre tirando indietro la piattaforma centrale verso un braccio chiuso.</li>
		<li>Misurare la durata e la frequenza dei comportamenti sopra definito da cronometro e conteggio per 5 min, a partire da quando sono chiuse le porte del contenitore.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Analisi automatizzata
	<ol>
<li>Utilizzando il programma di software disponibile, registrare i seguenti: distanza percorsa, il tempi trascorso in diverse posizioni su braccia aperte (segmenti prossimali, medio e distale dalla piattaforma centrale), e un minuto per minuto analisi del tempo trascorso su aperto e chiuso braccia.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante"start" del software di analisi automatizzati allo stesso tempo come l'osservazione manuale inizia (la registrazione si ferma automaticamente se è impostata la durata della registrazione). Nota: Il software di analisi comportamentale utilizzato in questo studio tracce dell'animale tramite il contrasto con il campo di sfondo; l'animale, che viene assegnata una dimensione fissa, viene identificato come l'oggetto più luminoso e quindi utilizzabile per la tracciabilità degli animali la locomozione del suo punto centrale.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+Brain's+Reward+Circuitry+in+Depression:+Transcriptional+Mechanisms.">Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms.</a> Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).</li><li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+mouse+behavior:+interactions+with+laboratory+environment.">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).</li><li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+'fear'-motivated+behaviour.">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).</li><li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+open:closed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat.">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li><li>Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+illumination,+closed+wall+transparency+and/or+extramaze+space+influence+both+baseline+anxiety+and+response+to+diazepam+in+the+rat+elevated+plus-maze.">Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze.</a> Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).</li><li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety.">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).</li><li>Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+vision+and+proprioception+in+the+aversion+of+rats+to+the+open+arms+of+an+elevated+plus-maze.">The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze.</a> Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).</li><li>Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethopharmacological+analysis+of+behaviour+of+rats+using+variations+of+the+elevated+plus-maze.">Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze.</a> Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).</li><li>Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+pharmacological+validation+of+the+elevated+plus+maze+constructed+with+transparent+walls.">Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls.</a> Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).</li><li>Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+elevated+plus-maze+test+with+opaque+or+transparent+walls+in+the+detection+of+mouse+strain+differences+and+the+anxiolytic+effects+of+diazepam.">Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam.</a> Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).</li><li>Fernandes, C., File, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+open+arm+ledges+and+maze+experience+in+the+elevated+plus-maze.">The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).</li><li>Horii, Y., Kawaguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Higher+detection+sensitivity+of+anxiolytic+effects+of+diazepam+by+ledge-free+open+arm+with+opaque+walled+closed+arm+elevated+plus+maze+in+male+rats.">Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats.</a> Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).</li><li>Santos, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+effect+of+acute+sibutramine+in+female+rats+in+the+elevated+T-maze+and+elevated+plus-maze+tests.">Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).</li><li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood.">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).</li><li>Horii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male+Hatano+high-avoidance+rats+show+high+avoidance+and+high+anxiety-like+behaviors+as+compared+with+male+low-avoidance+rats.">Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats.</a> Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).</li><li>Walf, A. A., Frye, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents.">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).</li><li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+pharmacological+investigation+of+anxiety+and+maternal+responsiveness+of+postpartum+female+rats+in+a+pup+elevated+plus+maze.">Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze.</a> Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).</li><li>Albani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavior+in+the+elevated+plus+maze+is+differentially+affected+by+testing+conditions+in+rats+under+and+over+three+weeks+of+age.">Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age.</a> Front Behav Neurosci. 9, 31 (2015).</li></ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Aumenta il numero di pazienti affetti da disturbi psichiatrici, tra cui il disturbo d'ansia, è importante sviluppare studi all'avanguardia per migliorare la comprensione del meccanismo di base di ansia. Per raggiungere questo obiettivo, è anche importante ottimizzare le procedure sperimentali. Di conseguenza, per migliorare l'applicazione di elevato più la prova del labirinto, abbiamo dimostrato l'effetto delle caratteristiche di braccio sui risultati sperimentali utilizzando ratti.
L'elevato plus labirinto nasce originariamente per testare animale ansia in roditori4, ma anche se le strutture di base sono solitamente coerenti (ad es., elevato 500 mm sopra il pavimento con una forma plus), vari disegni di braccio sono spesso utilizzati. Originariamente, l'apparato consisteva di braccia aperte senza sporgenze e chiuso le braccia con pareti in legno opachi. Tuttavia, braccia aperte più di recente sono state sviluppate con sporgenze per evitare che gli animali cadere l'apparecchio e braccia chiuse sono state sviluppate anche con pareti trasparenti per facilitare l'osservazione del comportamento sulle braccia chiuse. Tuttavia, non ci sono stati rapporti che affrontate gli effetti combinati di questi braccio caratteristiche sui risultati sperimentali in elevato più la prova del labirinto. Come dimostrano i nostri risultati, la presenza di sporgenze braccio aperto e la trasparenza delle pareti braccio chiuso in diminuzione scanso di esplorazione di braccio aperto in ratti (Figura 2), che può diminuire la sensibilità di rilevazione dell'effetto ansiolitico di diazepam ( Figura 3). L'apparato di sporgenze trasparente è apparso per incoraggiare una maggiore esplorazione sulle braccia aperte da veicolo trattato i ratti (Figura 3). Questo ridotto comportamentale discriminazione nell'esplorazione di braccio aperto attività tra veicolo e diazepam trattato i ratti, rendendo così più difficile individuare le differenze nei livelli di ansia. Di conseguenza, la minore sensibilità dell'apparato di sporgenze trasparente può significare che gli animali più avrebbero bisogno di essere testati per dimostrare il trattamento significativo effetti rispetto all'utilizzo di apparecchi No-sporgenze/opaco.
Nel nostro protocollo, la durata e il numero di voci su ogni braccio è stato misurato manualmente da sperimentatori ben addestrati. Questa procedura consente la misurazione accurata delle voci di braccio, definito come tutti i 4 zampe posizionate su un braccio. Anche se è vero che i sistemi di rilevamento automatizzato degli animali sono disponibili per alcuni parametri comportamentali, quali la distanza, nella nostra esperienza che non può sempre accuratamente distinguere tra voci e non-voci su braccia, soprattutto quando gli animali eseguire posture frequentanti allungato vicino al confine tra la piattaforma centrale e un braccio. Pertanto, si consiglia di utilizzare una combinazione di entrambi i sistemi manuali e automatizzati di osservazione, basata sulla loro rispettivi punti di forza per ogni parametro del comportamento.
Ci sono alcune altre differenze di protocollo tra laboratori. Ad esempio, alcuni ricercatori inserire animali sulla piattaforma centrale rivolto verso un braccio chiuso13,14, mentre altri lo posto i ratti affrontando un braccio aperto15,16. Inoltre, alcuni ricercatori prova comportamento immediatamente dopo l'assunzione di ratti dalla loro casa-gabbia, mentre altri permettono i ratti qualche tempo per acclimatarsi al comportamento sala prove prima di iniziare il test. Rispetto al primo caso, nei test preliminari che abbiamo sperimentato come i risultati differiscono a seconda che braccio ratto inizialmente affrontato; C'era un'incidenza aumentata di entrare che il topo è stato collocato di fronte al braccio. Inoltre, quando i ratti sono stati collocati un braccio chiuso di fronte, alcuni animali non ha fatto spostare fuori quel braccio chiuso dopo la prima voce. In tal caso, è difficile distinguere se i ratti verificano conflitti tra le braccia aperte e chiuse, o che preferiscono semplicemente essere in un luogo chiuso senza mai riconoscere la presenza di braccia aperte. Sebbene nel nostro studio abbiamo scelto di posizionare i ratti affrontando un braccio aperto, per garantire un'alta incidenza di essere in conflitto, si consiglia di che ulteriori studi essere effettuati per garantire che l'effetto di questa differenza di protocollo sui risultati sperimentali sia correttamente studiato.
Le misurazioni di esplorazione del segmento distale di braccia aperte e minuto per minuto analisi fornito extra dettagliate informazioni sul comportamento del tipo di ansia di ratto. Queste misure hanno contribuito a dimostrare le differenze di sensibilità tra i disegni differenti del braccio. Nonostante questo, risultati riferiti di ansia di ricerca utilizzando l'elevato più prova del labirinto non segnalano spesso questi tipi di misurazioni dettagliate13,17,18. Pertanto, consigliamo vivamente che i ricercatori inoltre segnalano ulteriori informazioni sulle attività esplorativa del ratto, tra cui esplorazione distale, minuto per minuto analisi e anche la postura frequentanti allungato.
In conclusione, i nostri risultati suggeriscono che i diversi tipi di apparecchi possono avere le proprie caratteristiche. Da queste prove, abbiamo dimostrato che apparato No-sporgenze/opaco meglio in grado di rilevare l'effetto delle droghe potenzialmente avere un effetto ansiolitico. In opposizione, è immaginabile che sporgenze/Transparent apparato può avere un simile vantaggio durante il test potenziali farmaci ansiogeni. Fin qui, i test comportamentali sono stati utilizzati non solo per lo screening di stupefacenti, ma anche per le analisi phenotyping in animali mutanti. Infatti, tecniche di editing avanzate genoma permettono la rapida produzione di animali mutanti. Pertanto, è molto importante sviluppare procedure di test con una migliore precisione e sensibilità per rilevare meglio le variazioni nel comportamento. Questo rapporto dimostra un'applicazione migliorata di elevato più test per ricerca animale ansia basata sulle funzioni dei geni droga o target previste. Quindi, crediamo che i nostri sforzi contribuiranno a far progredire la ricerca che impiegano l'elevato oltre a labirinto.

Il numero di pazienti affetti da disturbi dell'umore, tra cui disturbi di ansia e depressione, è in aumento. Anche se lo sviluppo di questi disturbi coinvolge fattori sia genetici che ambientali, i meccanismi patogeni dettagliati non sono ancora pienamente compreso1. Pertanto, la ricerca ha bisogno di concentrarsi su scoprendo i meccanismi di fondo dei disturbi dell'umore, come pure lo sviluppo di farmaci efficaci che hanno meno effetti collaterali.
Test comportamentali per animali da laboratorio sono utili per indagare la funzione superiore del cervello, tra cui emozione. Come comportamento animale è altamente variabile, risultati sperimentali spesso differiscono tra laboratori, anche se era un ceppo inbred identico utilizzati2. Così, i ricercatori devono anche comprendere le caratteristiche di base dei dispositivi sperimentali adottate al fine di fornire risultati affidabili, precisi nel laboratorio.
L'elevato più prova del labirinto è stata istituita per esaminare la reattività emozionale in roditori3,4. L'intero apparato è solitamente situato 500 mm sopra il pavimento e si compone di due aperte e due braccia chiuse che fanno una forma plus. Misurazioni di esplorazione di braccio (compresa la durata e la frequenza delle voci su ciascun braccio), passi comportamenti viaggiati e specificati come frequentanti allungato postura degli animali sottoposti sono registrate durante i periodi d'osservazioni. Da queste misure, animale ansia è stimato come un risultato sperimentale.
L'elevato plus prova del labirinto è utilizzato in tutto il mondo, ma non tutti i laboratori utilizzano la stessa apparecchiatura design5,6, e queste differenze possono influenzare i risultati sperimentali. Ad esempio, le differenze includono la presenza o l'assenza di sporgenze lungo le braccia aperte e/o l'utilizzo di pareti trasparenti o opache per bracciolo chiuso5,6. Le sporgenze lungo a braccia aperte e l'uso di pareti trasparenti per bracciolo chiuso sono stati sviluppati per evitare gli animali cadere l' apparato7e per facilitare le osservazioni comportamentali all'interno dei bracci chiusi, rispettivamente8,9. Anche se ci sono stati alcuni studi che hanno esaminato come i singoli differenze nella struttura del braccio possono influenzare la capacità di rilevare animale ansia1,2,5,10,11 , gli effetti combinati di open (con/senza sporgenza breve) e chiuso (trasparente/opaco pareti) braccio caratteristiche il comportamento animale non è stato ancora studiato.
In un recente rapporto, abbiamo discusso l'effetto di queste combinazioni di disegni di braccio sul comportamento del tipo di ansia in ratti12. In breve, sporgenze braccio aperto aumentato significativamente l'ansia-come comportamento in ratti, mentre le braccia trasparenti possono inoltre sono diminuite questo comportamento. Inoltre, abbiamo verificato più alta sensibilità di rilevazione dell'effetto di un farmaco ansiolitico in una combinazione di braccio aperto no-coralline + braccio chiusa murata opaco rispetto con una combinazione di coralline braccio aperto + braccio chiusa murata trasparente. In questo rapporto, sarà a introdurre il nostro protocollo per l'elevato oltre a labirinto prova, insieme con la discussione dei risultati chiave dalla relazione precedente. Riteniamo che questa relazione fornirà informazioni utili per coloro che sono impiegati o che prevede di utilizzare l'elevato più labirinto nei loro studi.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Customized container (W1500 &#215; D1500 &#215; H2000 mm)</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td style="width:167px;">Handmade by Mr. Akihiro Hirano</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LED lighting</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Handmade by Mr. Akihiro Hirano</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Elevated plus maze apparatus</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Handmade by Mr. Akihiro Hirano</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Digital video camera</td>
			<td style="width:71px;">Watec</td>
			<td style="width:119px;">WAT-250D2</td>
			<td>Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hard disk recorder</td>
			<td style="width:71px;">TOSHIBA</td>
			<td style="width:119px;">RD-R200</td>
			<td>Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera.</td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:216px;">Sprague-Dawley rats</td>
			<td style="width:71px;">Charles River Laboratories Japan, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Any suitable rats can be used for your study</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard rat cage</td>
			<td style="width:71px;">Toyoriko</td>
			<td style="width:119px;">TP-105</td>
			<td>Any suitable rat cage be used for your study</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Instrument to measure light intensity</td>
			<td style="width:71px;">AS ONE</td>
			<td style="width:119px;">1-5818-02</td>
			<td>Any suitable instrument to measure light intensity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">EthoVision XT version 8.0</td>
			<td style="width:71px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Any suitable software to measure animal behavior</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Diazepam</td>
			<td style="width:71px;">Taiyo Pharmaceutical Industry</td>
			<td style="width:119px;">1124402A2061</td>
			<td>Any suitable drug can be used for your study</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Tween 80</td>
			<td style="width:71px;">Wako Pure Chemical Industries</td>
			<td style="width:119px;">9005-65-6</td>
			<td>Any suitable drug can be used for your study</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

testing animal anxiety in rats: effects of open arm ledges and closed arm wall transparency in elevated plus maze test

L'elevato più prova del labirinto è un test comportamento per la valutazione animale ansia nei roditori. Anche se questo test è ampiamente applicato nel campo della scienza del comportamento, risultati contraddittori sono spesso forniti da diversi laboratori. Per identificare i motivi per i diversi risultati, precedentemente ci siamo concentrati sulle caratteristiche di braccio, che differiscono tra i laboratori, la maggior parte in particolare la presenza/assenza di sporgenze ai lati delle braccia aperte e la trasparenza/opacità delle pareti braccio chiuso. In un rapporto precedente, abbiamo utilizzato un contenitore personalizzato progettato per confrontare il comportamento di ratto su diverse combinazioni di disegni di braccio aperto e chiuso in condizioni sperimentali altrimenti identiche e ha mostrato che le differenze nelle funzionalità di braccio interferiscano con sperimentale risultati. In breve, sporgenze braccio aperto aumentato significativamente l'ansia-come comportamento in ratti, mentre le braccia trasparenti possono inoltre sono diminuite questo comportamento. Inoltre, abbiamo verificato una maggiore sensibilità di rilevazione dell'effetto di un farmaco ansiolitico in una combinazione di braccio aperto no-coralline + braccio chiusa murata opaco rispetto con una combinazione di coralline braccio aperto + braccio chiusa murata trasparente. In questo rapporto, presentiamo il nostro protocollo per l'elevato più la prova del labirinto, con discussione dei risultati chiavi dalla precedente relazione e la nostra esperienza sperimentale. Riteniamo che questa relazione fornirà informazioni utili per i ricercatori che hanno impiegato o che prevede di utilizzare l'elevato più labirinto nei loro studi.

Nello studio precedente, abbiamo confrontato gli effetti combinati di sporgenze braccio aperto e trasparenza delle pareti braccio chiuso sui comportamenti esplorativi sul labirinto12. Ratti significativamente speso molto meno tempo a braccia aperte senza sporgenze rispetto su braccia aperte con sporgenze (F [1, 60] = 13,49, P = 0,0005) (Figura 2A). Risultati simili inoltre sono stati trovati per il numero di voci in braccia aperte (F [1, 60] = 11.17, P < 0,0014)12, suggerendo che la presenza di sporgenze aumenta il comportamento esplorativo del ratto su braccia aperte. I ratti hanno mostrato significativamente meno postura frequentanti allungato sull'apparato che aveva chiuso le braccia con pareti trasparenti che su apparecchi che avevano chiuso le braccia con pareti opache (F [1,60] = 4,03, P = 0.0492) (Figura 2B), suggerendo che pareti trasparenti braccio chiuso ha fatto diminuire l'ansia-come comportamento in ratti. Ratti ha trascorso più tempo sul segmento distale di braccia aperte sull'apparato che aveva pareti trasparenti braccio chiuso rispetto sull'apparecchiatura con pareti opache braccio chiuso (F [1,60] = 8.00, P = 0.0983) (Figura 2), suggerendo che trasparente pareti maggio anche diminuire il comportamento esplorativo del braccio aperto di ratto. Inoltre, l'esplorazione di braccio aperto sul segmento distale era significativamente più bassa nell'apparato No-sporgenze/opaco rispetto all'apparato di sporgenze trasparente (Figura 2). Presi insieme, questi risultati indicano che la sensibilità di rilevamento per l'ansia-come comportamento potrebbero differire a seconda dei tipi di caratteristiche di progettazione del braccio utilizzati e l'apparato di No-sporgenze/opaco e sporgenze/Transparent apparato può avere un relativamente grande differenza della sensibilità di rilevamento.
Per verificare le differenze nella sensibilità di rilevamento tra diversi tipi di design del braccio, un ulteriore esperimento è stato effettuato usando il diazepam ansiolitico della droga (figure 3A–D). In breve, l'apparato di No-sporgenze/opaco rilevato l'effetto del trattamento della alto-dose di diazepam sul tempo trascorso a braccia aperte, mentre l'apparato di sporgenze trasparente non ha fatto (Figura 3A–B). Risultati simili sono stati trovati anche per il numero di voci in braccia aperte12 (dati non mostrati). La mancanza di alcun effetto significativo sull'apparato sporgenze trasparente potrebbe essere stato dovuto al fatto che l'attività basale (trattamento del veicolo) su questo apparecchio era superiore all'apparato No-sporgenze/opaco, ma quell'esplorazione braccio aperto mai superato il 33% di il tempo in qualsiasi fase o apparato. Di conseguenza, questo intervallo di tempo di esplorazione aperta braccio stretto rendeva più difficile distinguere l'effetto ansiolitico di diazepam sull'apparato Ledged trasparente (Figura 3–D).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56428/56428fig1.jpg"> Figura 1 : Apparecchiature progettate per elevato oltre labirinto test. Pannello (A): elevato più contenitore di test del labirinto. L'apparato viene posizionato nel contenitore nero, e un monitor accanto al contenitore progetti dal vivo film immagini registrate durante l'esperimento. Pannello (B): Plus quadro labirinto nel contenitore che supporta braccia componibile. Tutto l'apparato si trova 500 mm sopra il pavimento. Pannello (C): illuminazione a soffitto che può essere regolato per intensità. Una videocamera digitale (vedi freccia) circondato da movimenti degli animali record di illuminazione. Pannello (D): elevata più labirinto braccia e piattaforma centrale che vengono montate a quadro; da sinistra a destra, rivestimento opaco chiuso braccio, braccio aperto no-sporgenza, coralline braccio aperto, piattaforma centrale, braccio a parete trasparente chiuso. Pannello (E): vista del primo piano di braccia aperte; da sinistra a destra, aperto braccio senza sporgenze, aprire il braccio con sporgenze (H5 mm). Pannello (F): un esempio di un labirinto costruito (sporgenze/Transparent apparato). <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56428/56428fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56428/56428fig2.jpg"> Figura 2 : Sporgenze braccio aperto riducono ansia-come comportamento, e pareti trasparenti parzialmente diminuiscono l'ansia-come comportamento. Ratti maschii hanno subito l'elevato più labirinto test con diverse combinazioni di strutture del braccio (sporgenze/trasparente, sporgenze/opaco, No-sporgenze/Transparent e No-sporgenze/opaco). Ordine di prova è stato normalizzato attraverso i gruppi sperimentali (ciascuna combinazione di tipo di apparecchio). Questa procedura normalizza effetti inattesi che potrebbero essersi verificato a causa dell'ora del giorno di ciascuna prova. Pannello (A): tempo trascorso su braccia aperte; Pannello (B): numero di frequentanti allungato posture; Pannello (C): tempo trascorso nel segmento distale delle braccia aperte. Linee continue e tratteggiate indicano effetti significativi principali delle strutture aperte e chiuse il braccio, rispettivamente (ANOVA a due vie, #P < 0,1, * P < 0,05, * *P < 0.01, * * *P < 0,001). Diverse lettere al lato del bar nel pannello (C) indicano una differenza significativa (test di confronto tra più di Bonferroni, un < b, P < 0,0125). I dati sono stati espressi come media con SEM (n = 16 per ogni gruppo sperimentale). Queste cifre sono state modificate dal nostro precedente rapporto12. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56428/56428fig2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56428/56428fig3.jpg"> Figura 3 : Apparato No-sporgenze/opaco dimostra maggiore sensibilità di rilevazione dell'effetto ansiolitico di diazepam. I ratti maschii hanno subito l'elevato e labirinto di prova, con apparato o No-sporgenze/opaco o trasparente Ledges, 30 min dopo essere stati trattati con il veicolo (0 mg/kg), basso (0,25 mg/kg) o alto (0,5 mg/kg) dosi di diazepam di droga l'ansiolitico (intraperitoneale iniezione). Soluzione di diazepam è stato dissolto in normale soluzione fisiologica 0,9% con un agente di attivazione di superficie. In questo esperimento, l'ordine di prova dei gruppi di trattamento di tre droga e due tipi di progettazione di apparecchi sono stati randomizzati per tenere conto di eventuali effetti che possono verificarsi a causa del tempo del giorno di ogni test. Pannelli (A e B): totale percentuale di tempo (5 min) trascorso su braccia aperte dell'apparato sporgenze trasparente e No-sporgenze/opaco, rispettivamente. Pannelli (C & D): percentuale di tempo trascorso rispettivamente su braccia aperte dell'apparato sporgenze trasparente e No-sporgenze/opaco, minuto per minuto. Diverse lettere al lato bar nel pannello (B) indicano una differenza significativa tra i trattamenti (test di confronto tra più di Bonferroni, un < b, P < 0.0167). Linee continue e tratteggiate in pannelli (C & D) indicano effetti significativi principali dei trattamenti time-lapse e diazepam, rispettivamente (ripetute misure ANOVA, *P < 0,05, * *P < 0.01, * * *P < 0,001). i dati sono stati espressi come media con SEM. numeri nelle colonne indicano gli animali che hanno completato l'esperimento (i numeri tra parentesi indicano animali cadere l'apparecchio). Queste cifre sono state modificate dal nostro precedente rapporto12. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56428/56428fig3large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

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Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

Sperimentazione animale ansia in ratti: effetti di sporgenze braccio aperto e chiuso braccio parete trasparenza in Elevated Plus Maze Test

Comportamento del tipo di ansia dei ratti testati da elevato più labirinto varia molto a seconda dell'ambiente di test. Qui vi mostriamo come impostazioni di apparato, particolare struttura a braccio, influenzano il comportamento sul labirinto, e spieghiamo un protocollo affidabile per rilevare gli effetti di farmaci ansiolitici. Questa relazione contribuirà alla ricerca di ansia.

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

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Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

13.4K Views.  Meiji University. Comportamento del tipo di ansia dei ratti testati da elevato più labirinto varia molto a seconda dell'ambiente di test. Qui vi mostriamo come impostazioni di apparato, particolare struttura a braccio, influenzano il comportamento sul labirinto, e spieghiamo un protocollo affidabile per rilevare gli effetti di farmaci ansiolitici. Questa relazione contribuirà alla ricerca di ansia.

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The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones. Handley, Mithani and File et al. performed the first studies on the plus-maze design we use today, and in 1987 Lister published a design for use with mice. 
Time spent on, and entries into, the open arms are an index of anxiety; the lower these indices, the more anxious the mouse is. Alternatively, a mouse that spends most of its time in the closed arms is classed as anxious. 
One of the problems of the plus-maze is that, while time spent on, and entries into, the open arms is a fairly unambiguous measure of anxiety, time in the central area is more difficult to interpret, although time spent here has been classified as &#x201C;decision making&#x201D;. In many tests central area time is a considerable part of the total test time.
Shepherd et al. produced an ingenious design to eliminate the central area, which they called the &#x201C;zero maze&#x201D;. However, although used by several groups, it has never been as widely adopted as the plus-maze. 
In the present article I describe a modification of the plus-maze design that not only eliminates the central area but also incorporates elements from other anxiety tests, such as the light-dark box and emergence tests. It is a linear series of four alleys, each having increasing anxiogenic properties. It has given similar results to the plus-maze in general. Although it may not be more sensitive than the plus-maze (more data is needed before a firm conclusion can be reached on this point), it provides a useful confirmation of plus-maze results which would be useful when, for example, only a single example of a mutant mouse was available, as, for example, in ENU-based mutagenesis programs.

The plus-maze measures anxiety-like behaviour in rodents. There are two opposite closed and two opposite open arms; anxious rodents avoid the open arms. The central area is neither completely open nor closed, so time spent here is ambiguous and difficult to interpret. Here a modification of the plus-maze protocol eliminating this area is described.

Le successive Vicoli test di ansia nei topi e nei ratti

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

Ricerca

Comportamento

An Alternative to the Traditional Cold Pressor Test: The Cold Pressor Arm Wrap

Recently research on the relationship between stress and cognition, emotion, and behavior has greatly increased. These advances have yielded insights into important questions ranging from the nature of stress&#39; influence on addiction1 to the role of stress in neural changes associated with alterations in decision-making2,3. As topics being examined by the field evolve, however, so too must the methodologies involved. In this article a practical and effective alternative to a classic stress induction technique, the cold pressor test (CPT), is presented: the cold pressor arm wrap (CPAW). CPT typically involves immersion of a participant&#39;s dominant hand in ice-cold water for a period of time4. The technique is associated with robust activation of the sympatho-adrenomedullary (SAM) axis (and release of catecholamines; e.g.&#160;adrenaline and noradrenaline) and mild-to-moderate activation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis with associated glucocorticoid (e.g.&#160;cortisol) release. While CPT has been used in a wide range of studies, it can be impractical to apply in some research environments. For example use of water during, rather than prior to, magnetic resonance imaging (MRI) has the potential to damage sensitive and expensive equipment or interfere with acquisition of MRI signal. The CPAW is a practical and effective alternative to the traditional CPT. Composed of a versatile list of inexpensive and easily acquired components, CPAW makes use of MRI-safe gelpacs cooled to a temperature similar to CPT rather than actual water. Importantly CPAW is associated with levels of SAM and HPA activation comparable to CPT, and can easily be applied in a variety of research contexts. While it is important to maintain specific safety protocols when using the technique, these are easy to implement if planned for. Creation and use of the CPAW will be discussed.

The cold pressor test is a classic stress induction task used in a wide range of research examining the relationship between stress and cognition, emotion, and behavior. In this article, a practical and versatile alternative to the traditional cold pressor test is presented: the cold pressor arm wrap.

Un'alternativa al tradizionale test pressor freddo: l'involucro freddo del braccio pressor

Recently research on the relationship between stress and cognition, emotion, and behavior has greatly increased. These advances have yielded insights into ...

Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food deprivation, and may introduce scent cue confounds. The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs. Specifically, subjects are required to avoid the arms previously used for escape during each testing day (working memory) as well as avoid the fixed arms, which never contain escape platforms (reference memory). Re-entries into arms that have already been used for escape during a testing session (and thus the escape platform has been removed) and re-entries into reference memory arms are indicative of working memory deficits. Alternatively, first entries into reference memory arms are indicative of reference memory deficits. We used this maze to compare performance of rats with neonatal brain injury and sham controls following induction of hypoxia-ischemia and show significant deficits in both working and reference memory after eleven days of testing. This protocol could be easily modified to examine many other models of learning impairment.

The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs.

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food ...

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land (Barnes) mazes. Improved performance over sessions or trials is thought to reflect learning and memory of the escape cage/platform location. Considered less stressful than water mazes, the Barnes maze is a relatively simple design of a circular platform top with several holes equally spaced around the perimeter edge. All but one of the holes are false-bottomed or blind-ending, while one leads to an escape cage. Mildly aversive stimuli (e.g.&#160;bright overhead lights) provide motivation to locate the escape cage. Latency to locate the escape cage can be measured during the session; however, additional endpoints typically require video recording. From those video recordings, use of automated tracking software can generate a variety of endpoints that are similar to those produced in water mazes (e.g.&#160;distance traveled, velocity/speed, time spent in the correct quadrant, time spent moving/resting, and confirmation of latency). Type of search strategy (i.e.&#160;random, serial, or direct) can be categorized as well. Barnes maze construction and testing methodologies can differ for small rodents, such as mice, and large rodents, such as rats. For example, while extra-maze cues are effective for rats, smaller wild rodents may require intra-maze cues with a visual barrier around the maze. Appropriate stimuli must be identified which motivate the rodent to locate the escape cage. Both Barnes and water mazes can be time consuming as 4-7 test trials are typically required to detect improved learning and memory performance (e.g.&#160;shorter latencies or path lengths to locate the escape platform or cage) and/or differences between experimental groups. Even so, the Barnes maze is a widely employed behavioral assessment measuring spatial navigational abilities and their potential disruption by genetic, neurobehavioral manipulations, or drug/ toxicant exposure.

The dry-land Barnes maze is widely used to measure spatial navigation ability in response to mildly aversive stimuli. Over consecutive days, performance (e.g.&#160;latency to locate escape cage) of control subjects improves, indicative of normal learning and memory. Differences between rats and mice necessitate apparatus and methodology changes that are detailed here.

Barnes strategie di sperimentazione Maze con piccole e grandi modelli di roditori

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of the most commonly used platforms to measure behaviors in animal models. It is a fast and relatively easy test that provides a variety of behavioral information ranging from general ambulatory ability to data regarding the emotionality of the subject animal. As it relates to rodent models, the procedure allows the study of different strains of mice or rats both laboratory bred and wild-captured. The technique also readily lends itself to the investigation of different pharmacological compounds for anxiolytic or anxiogenic effects. Here, a protocol for use of the open field maze to describe mouse behaviors is detailed and a simple analysis of general locomotor ability and anxiety-related emotional behaviors between two strains of C57BL/6 mice is performed. Briefly, using the described protocol we show Wild Type mice exhibited significantly less anxiety related behaviors than did age-matched Knock Out mice while both strains exhibited similar ambulatory ability.

A protocol is provided to use an Open Field Maze to access general locomotor activity, anxiety and emotionality in a laboratory mouse model.

L&#39;uso del campo aperto Maze misurare Locomotore e ansia-come comportamento nei topi

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

The Hole Consiglio Modified - Behavior, Cognition e l&#39;interazione sociale in topi e ratti di misura

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their behavioral flexibility and required memory duration, the number of goals and pathways, and also the overall task complexity. A confounding feature in many of these tasks is the lack of control over the strategy employed by the rodents to reach the goal, e.g., allocentric (declarative-like) or egocentric (procedural) based strategies. The double-H maze is a novel water-escape memory task that addresses this issue, by allowing the experimenter to direct the type of strategy learned during the training period. The double-H maze is a transparent device, which consists of a central alleyway with three arms protruding on both sides, along with an escape platform submerged at the extremity of one of these arms.
Rats can be trained using an allocentric strategy by alternating the start position in the maze in an unpredictable manner (see protocol 1; &#167;4.7), thus requiring them to learn the location of the platform based on the available allothetic cues. Alternatively, an egocentric learning strategy (protocol 2; &#167;4.8) can be employed by releasing the rats from the same position during each trial, until they learn the procedural pattern required to reach the goal. This task has been proven to allow for the formation of stable memory traces.
Memory can be probed following the training period in a misleading probe trial, in which the starting position for the rats alternates. Following an egocentric learning paradigm, rats typically resort to an allocentric-based strategy, but only when their initial view on the extra-maze cues differs markedly from their original position. This task is ideally suited to explore the effects of drugs/perturbations on allocentric/egocentric memory performance, as well as the interactions between these two memory systems.

The goal of this protocol is to investigate spatial cognition in rodents. The double-H water maze is a novel test, which is particularly useful to elucidate the different components of learning, consolidation and memory, as well as the interplay of memory systems.

The Double-H labirinto: una prova comportamentale robusto per l&#39;apprendimento e la memoria nei roditori

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris water maze Test: Ottimizzazione per ceppo di topi e Ambiente di prova

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for examining how rats learn to use a place- or response-learning to successfully navigate in an open-field arena. Additionally, this protocol describes how the OFTM differs from other behavioral maze paradigms that are commonly used to study spatial learning in rodents. The OFTM described in this article was adapted from the one previously described by Cole, Clipperton, and Walt (2007). Specifically, the OFTM was created to test spatial learning in rodents without the experimenter having to consider how &#8220;stress&#8221; might play a role as a confounding variable. Experiments have shown that stress-alone can significantly affect cognitive function1. The representative results section contains data from an experiment that used the OFTM to examine the effects of estradiol treatment on place- and response-learning in adult female Sprague Dawley rats2. Future studies will be designed to examine the role of the hippocampus and striatum in place- and response-learning in the OFTM.

The Open-field Tower Maze (OFTM) is a maze created to study the behavioral and neural mechanisms of spatial learning (e.g., place- or response-learning) in rats. This maze is especially useful for experimenters who want to use a non-stressful maze paradigm to investigate spatial learning in their research.

Posizionare e risposta apprendimento nel campo aperto Torre Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

An Objective and Child-friendly Assessment of Arm Function by Using a 3-D Sensor

Progressive and irreversible muscle atrophy characterizes Spinal Muscular Atrophy (SMA) and other similar muscle disorder diseases. Objective assessment of muscle functions is an essential and important, although challenging, prerequisite for successful clinical trials. Current clinical rating scales restrain the movement abnormalities to certain predefined coarse-grained individual items. The Kinect 3-D sensor has emerged as a low-cost and portable motion sensing technology used to capture and track people&#39;s movement in many medical and research fields. A novel approach using this 3-D sensor was developed and a game-like test was designed to objectively measure the upper limb function of patients with SMA. The prototype test targeted joint movement capability. While sitting in a virtual scene, the patient was instructed to extend, flex, and lift the whole arm in order to reach and place some objects. Both kinematic and spatiotemporal characteristics of upper limb movement were extracted and analyzed, e.g., elbow extension and flexion angles, hand velocity, and acceleration. The first study included a small cohort of 18 ambulant SMA patients and 19 age- and gender-matched healthy controls. A comprehensive analysis of arm movement was achieved; however, no significant difference between the groups were found due to the mismatch of patient&#39;s capability and the test difficulty. Based on this experience, a second version of the test consisting of a modified version of the first game with increased difficulties and a second game targeting muscle endurance were designed and implemented. The new test has not been conducted in any patient groups yet. Our work has demonstrated the potential capability of the 3-D sensor in assessing such muscle function and suggested an objective approach to complement the clinical rating scales.

An objective measure of muscle functions is challenging especially in children. Based on a commercially available digital 3-D sensor, a child-friendly gaming test was developed to assess upper limb function for clinical trials.

Una valutazione obiettiva e bambino-amichevole della funzione di braccio usando un sensore 3D

Progressive and irreversible muscle atrophy characterizes Spinal Muscular Atrophy (SMA) and other similar muscle disorder diseases. Objective assessment ...