This work was supported by the Huffington Center on Aging at Baylor College of Medicine, Geriatrics, CVS DeBakey Heart Center at Houston Methodist Hospital and BCM, NIH RO-1 HL 13870 to ML Entman, as well as a Career Development Award # IK2BX002410 from the United States Department of Veterans Affairs (LMP), Biomedical Laboratory Research and Development Program.
We are immensely grateful to Mark Entman M.D. for sharing his wisdom and supporting this work.

Tutti gli animali sono stati curati in conformità con le linee guida del National Institutes of Health Guide per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio al Baylor College of Medicine. 1. Set-up <ol><li> Accendere il sistema ecocardiografico. Avviare il software selezionando &quot;Misure cardiache&quot; dal menu a discesa visualizzato e fare clic su &quot;Inizializza&quot;. </li><li> Per iniziare un nuovo studio clic sul pulsante &quot;Nuovo&quot; nella parte superiore dello schermo e immettere le informazioni demografiche del mouse in studio. Ad esempio ID mouse, sesso, data di nascita e il nome dell&#39;operatore facendo lo studio. </li><li> Attivare la scheda ECG a temperatura controllata facendo clic sul pulsante &quot;TEMP ON / OFF&quot;. Impostare ad una temperatura di 39 ° C utilizzando le frecce su e giù. </li><li> Per avviare la creazione della camera di anestesia, prima assicurarsi che i livelli di ossigeno e isoflurano sono appropriati in ciascuno dei sistemi di consegna. </li><li&gt; posizionare il mouse nella camera di anestesia e inducono con isofluorano e ossigeno fino reclinata e poi il trasferimento a faccia maschera. Verificare che il mouse sia correttamente anestetizzato da pizzicare la sua zampa e il controllo per mancanza di movimento. Mantenere la isoflurano al livello più basso possibile che eviti una risposta zampa ritiro positiva. </li><li> Posizionare il mouse in posizione supina sulla scheda ECG a temperatura controllata e il nastro ogni zampa all&#39;elemento trasduttore corrispondente sulla scheda. Facoltativamente, utilizzare la crema trasduttore per migliorare il segnale. </li><li> Applicare lacrime artificiali lubrificante unguento oftalmico sugli occhi del mouse per prevenire la secchezza. </li><li> Una volta che il mouse è registrato alla scheda di ECG, osservare un ECG tracing nella parte inferiore del monitor. Monitorare la frequenza cardiaca durante l&#39;intero studio per garantire migliori risultati. Una frequenza cardiaca di 400 battiti / min è l&#39;ideale. Le frequenze cardiache inferiori a questo intervallo possono suggerire effetti isoflurano. </li><li> Assicurarsi che il mouse continua a ricevere ossigeno eisoflurano dalla maschera. </li><li> Utilizzare un rasoio elettrico per radersi il corpo pelliccia dal torace anteriore del topo e la zona addominale superiore. Usare una crema depilatoria, se necessario, per garantire ulteriormente la rimozione pelliccia. </li><li> Mettere una generosa quantità di gel trasduttore nel petto del mouse. </li></ol> 2. Acquisizione di immagini <ol><li> Misurazione Sinistra Atrium <ol><li> Individuare l&#39;impugnatura sotto la scheda ECG. Utilizzare la maniglia per regolare l&#39;angolo della tavola mobile EKG in cui è stato posto il mouse. Iniziare regolando la scheda EKG a 30 - 45 ° lungo l&#39;asse X e 0 ° angolo lungo l&#39;asse Y. Gli autori riferiscono come posizione &quot;supina&quot;. Utilizzare questa posizione per tutto l&#39;acquisizione misure Sinistra Atrium. </li><li> Mettere la testa di scansione di 25 MHz nella ecocardiografica morsetto braccio mobile in una vista lunga asse. Assicurarsi di selezionare il filtro di misura cardiaco e B-Mode 2D nel sistema ecocardiografico. </li><li> Si noti che l&#39;ecoset cardiographic ha coppie di regolazione assi X e Y che possono essere spostati in senso orario o antiorario. Ruotare loro per ottenere una vista lungo l&#39;asse del cuore a livello del tratto di efflusso aortico e acquisire un 5 s registrazione del filmato. Acquisire la scansione premendo il tasto &quot;Cine Store&quot; sulla tastiera del sistema ecocardiografico. Usare questo per calcolare la misura superiore-inferiore del Los Angeles. </li><li> Dopo l&#39;acquisizione filmato, commutare la vista ecocardiografico a M-Mode premendo il tasto &quot;M-Mode&quot; sulla tastiera del sistema ecocardiografico. </li><li> Osservare una vista sagittale e un cursore. Posizionare il cursore in modo da comprendere l&#39;intera LA a livello del tratto di efflusso aortico. Acquisire 3 immagini di questo nuovo punto di vista. Acquisire la scansione premendo il tasto &quot;Store Frame&quot; sulla tastiera del sistema ecocardiografico. Usare questo per calcolare la misura anteriore-posteriore del Los Angeles. </li><li> Torna a B-Mode premendo il tasto &quot;B-Mode&quot;, ma<html> ton sulla tastiera del sistema ecocardiografico. </li><li> Ruotare il morsetto braccio mobile del set 90 ° in senso orario. Questo imposterà la testa di scansione in un asse corto. </li><li> Utilizzando la coppia sull&#39;asse Y trovare il setto intra-articolare. Assicurarsi di visualizzare la parete dell&#39;atrio. Acquisire un 5 s registrazione di filmati. Acquisire la scansione premendo il tasto &quot;Cine Store&quot; sulla tastiera del sistema ecocardiografico. Usare questo per calcolare la misura medio-laterale del Los Angeles. </li></ol></li></ol><img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig1.jpg" /> Figura 1: Posizione &quot;supina&quot;. Rappresentazione di un mouse nella posizione &quot;supina&quot;. Circa 30 - 45 ° Angolo lungo l&#39;asse X e 0 ° angolo lungo l&#39;asse Y. Questa posizione è utilizzato per acquisire tutte le misurazioni atrio sinistro.t = &quot;_ blank&quot;&gt; Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura. <ol start="2"><li> Grandi vasi di misura <ol><li> Continuare scambiando la testa di scansione di 25 MHz per la testa di scansione di 30 MHz. Rimuovere la testa di scansione 25 MHz dal morsetto braccio mobile e posizionare la testina di scansione di 30 MHz, invece. Assicurarsi di selezionare il Misure addominale Filtro e B-Mode 2D nel sistema ecocardiografico. </li><li> Individuare l&#39;impugnatura sotto la scheda ECG. Utilizzare la maniglia per regolare l&#39;angolo della tavola mobile ECG in cui il mouse si trova. Iniziare regolando la scheda EKG ad un angolo di 5 ° lungo l&#39;asse X e 60 ° Angolo di lungo l&#39;asse Y. Utilizzare questa podition per l&#39;acquisizione della aorta e arteria polmonare misurazioni. Fare riferimento a questo come posizione di &quot;standing-up&quot;. </li><li> Utilizzando le coppie X e regolazione Y nel set ecocardiografica, una vista lungo l&#39;asse del cuore a livello del tratto di efflusso aortico e acquisire un 5 s registrazione del filmato. acquisire °e la scansione premendo il tasto &quot;Cine Store&quot; sulla tastiera del sistema ecocardiografico. Usare questo per calcolare il diametro dell&#39;aorta. </li><li> Dopo l&#39;acquisizione filmato, ruotare il morsetto braccio mobile del set di 90 ° in senso orario. Questo imposterà la testa di scansione in un asse corto. </li><li> Utilizzando la coppia all&#39;asse Y individuare l&#39;arteria polmonare a livello della sua biforcazione e acquisire un 5 s registrazione del filmato. Acquisire la scansione premendo il tasto &quot;Cine Store&quot; sulla tastiera del sistema ecocardiografico. Usare questo per calcolare il diametro dell&#39;arteria polmonare. NOTA: Il ricercatore può utilizzare immagini Doppler come strumento per garantire la corretta identificazione dell&#39;arteria polmonare. Se lo si desidera, una volta completato il passaggio 2.2.5 premere il tasto &quot;PW&quot; sulla tastiera del sistema ecocardiografico per ottenere Doppler. Se tracciati onda polmonari caratteristici sono visti, il ricercatore può essere rassicurati sul fatto che la posizione corretta è stata identificata. </li></ol></li></ol<html> &gt; <img alt="figura 2" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig2.jpg" /> Figura 2: &quot;Standing-up&quot; Posizione. Rappresentazione di un mouse nella posizione &quot;Standing-up&quot;. Circa 5 ° angolo lungo l&#39;asse X e un angolo di 60 ° lungo l&#39;asse Y. Questa posizione viene utilizzata per acquisire i diametri aorta e polmonare. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig3.jpg" /> Figura 3: Pulmonary Artery Doppler. Caratteristica di imaging Doppler dell&#39;arteria polmonare. Il ricercatore può utilizzare immagini Doppler come strumento per garantire la corretta identificazione dell&#39;arteria polmonare.blank &quot;&gt; Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura. 3. Messaggio procedura di recupero degli animali <ol><li> Per rimuovere in modo sicuro il mouse dalla scheda ECG, rimuovere il gel dal petto del mouse e rimuovere il nastro dalle estremità. </li><li> Spegnere il sistema per anestesia e di ossigeno. Ritorna il mouse per la sua gabbia e non lasciare incustodita il mouse fino a quando non ha ripreso conoscenza sufficiente a mantenere decubito sternale. </li></ol> Analisi 4. Immagine <ol><li> immagine Trasferimento <ol><li> Utilizzare un flash drive USB per trasferire le immagini raccolte nel sistema ecocardiografico in un computer. Inserire l&#39;unità flash USB in una porta USB del sistema ecocardiografico. </li><li> Selezionare lo studio o gli studi di trasferire facendo clic sul nome (s) di studio. </li><li> Clicca su &quot;Copia&quot; pulsante che si trova sulla parte superiore dello schermo. Una nuova finestra che mostra i file e le directory saranno Apporecchio. Selezionare la directory corrispondente al flash drive USB appena inserito e fare clic su &quot;OK&quot;. </li><li> Rimuovere l&#39;unità flash USB dal sistema ecocardiografico e inserirlo in una porta USB del computer da utilizzare per l&#39;analisi. </li><li> Avviare il software ecocardiografica. Clicca sulla &quot;Copy From&quot; pulsante situato sulla parte superiore dello schermo. Osservare una nuova finestra che mostra i file e le directory. Selezionare gli studi da copiare dalla directory corrispondente al flash drive USB appena inserito e fare clic su &quot;OK&quot;. </li><li> Dopo aver copiato i file, osservarli nella lista studio. Per iniziare l&#39;analisi di uno studio, fare doppio clic sul suo nome e selezionare il nome del analisi dell&#39;operatore. </li></ol></li><li> Analisi Sinistra Atrium NOTA: Per tutte le seguenti misurazioni atriali usa il EKG come guida per selezionare l&#39;onda P come il punto in cui il ricercatore vuole misurare il LA. Questo corrisponde al tempo di contrazione pre-atriale quando the LA è al suo più grande capacità. <ol><li> Selezionare il clip filmato corrispondente alla dimensione superiore-inferiore dell&#39;atrio sinistro (punto 2.1.3). Determinare il tempo di contrazione pre-atriale utilizzando l&#39;ECG come guida. In questo modo la cavità è misurata alla sua massima capacità. </li><li> Dalla barra degli strumenti sulla parte superiore dello schermo, fare clic su &quot;Strumenti&quot; e poi &quot;Misure&quot;. Apparirà una nuova finestra. Fare clic sull&#39;icona &quot;distanza lineare Measurement Tool&quot; (che corrisponde alla prima icona in alto a sinistra della finestra). Misurare la cavità al suo diametro più grande. </li><li> Selezionare l&#39;immagine corrispondente alla dimensione antero-posteriore dell&#39;atrio sinistro (punto 2.1.5). Determinare il tempo di contrazione pre-atriale utilizzando l&#39;ECG come guida. In questo modo la cavità è misurata alla sua massima capacità. Per misurarla ripetere il passaggio 4.2.2. </li><li> Selezionare l&#39;immagine corrispondente alla dimensione medio-laterale dell&#39;atrio sinistro (Fase 2.1.8). Determinare la Contrac pre-atrialeTempo zione usando l&#39;ECG come guida. In questo modo la cavità è misurata alla sua massima capacità. Misurare la cavità dal setto interatriale alla parete opposta in senso diagonale. Per misurarla ripetere il passaggio 4.2.2. NOTA: Ripetere i punti 4.2.1 thru 4.2.4 almeno 3 volte e di acquisire i valori medi per ridurre al minimo errore. </li></ol></li><li> Grandi vasi Analisi NOTA: Per tutte le seguenti misurazioni grandi vasi usa il EKG come guida per selezionare un tempo dopo il complesso QRS come il punto in cui il ricercatore vuole misurare. Questo corrisponde al punto in cui le grandi navi sono al loro più grande capacità. <ol><li> Selezionare il clip filmato corrispondente al Aorta (Step 2.2.3). Determinare un punto dopo le QRS utilizzando l&#39;ECG. Misurare il diametro a 90 ° con la parete del vaso come riferimento. Per misurarla ripetere il punto 4.2.2 </li><li> Selezionare il clip filmato corrispondente al polmonare (fase 2.2.5). Determinare un punto dopo la QRS utilizzando l&#39;ECG. Misurare il diametro a 90 ° con la parete del vaso come riferimento. Selezionare un piano al di sopra della biforcazione dell&#39;arteria polmonare. Per misurarla ripetere il passaggio 4.2.2. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Upadhya, B., Taffet, G. E., Ping, C., Kitzman, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+failure+with+preserved+ejection+fraction+in+the+elderly:+scope+of+the+problem.">Heart failure with preserved ejection fraction in the elderly: scope of the problem.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 83, 73-87 (2015).</li><li>Mclaughlin, V. V., Archer, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACCF+/+AHA+Expert+Consensus+Document+Expert+Consensus+Document+ACCF+/+AHA+2009+Expert+Consensus+Document+on+Pulmonary+Hypertension+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology+Foundation+Task+Force+on+Expert+Consensus+Documents+and+the+American+Heart+Association.">ACCF / AHA Expert Consensus Document Expert Consensus Document ACCF / AHA 2009 Expert Consensus Document on Pulmonary Hypertension A Report of the American College of Cardiology Foundation Task Force on Expert Consensus Documents and the American Heart Association.</a> Circulation. , 2250-2294 (2009).</li><li>Cieslik, K. A., Taffet, G. E., Carlson, S., Hermosillo, J., Trial, J., Entman, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune-inflammatory+dysregulation+modulates+the+incidence+of+progressive+fibrosis+and+diastolic+stiffness+in+the+aging+heart.">Immune-inflammatory dysregulation modulates the incidence of progressive fibrosis and diastolic stiffness in the aging heart.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 50 (1), 248-256 (2011).</li><li>Tate, C. A., Taffet, G. E., Hudson, E. K., Blaylock, S. L., McBride, R. P., Michael, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+calcium+uptake+of+cardiac+sarcoplasmic+reticulum+in+exercise-trained+old+rats.">Enhanced calcium uptake of cardiac sarcoplasmic reticulum in exercise-trained old rats.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 258 (2), H431-H435 (1990).</li><li>Kitzman, D. W., Daniel, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diastolic+Heart+Failure+in+the+Elderly.">Diastolic Heart Failure in the Elderly.</a> Heart Failure Clinics. 3 (4), 437-453 (2007).</li><li>Sanderson, J. E., Rusconi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+diagnose+diastolic+heart+failure+a+consensus+statement+on+the+diagnosis+of+heart+failure+with+normal+left+ventricular+ejection+fraction+by+the+Heart+Failure+and+Echocardiography+Associations+of+the+European+Society+of+Cardiology.">How to diagnose diastolic heart failure a consensus statement on the diagnosis of heart failure with normal left ventricular ejection fraction by the Heart Failure and Echocardiography Associations of the European Society of Cardiology.</a> Eur Heart J. , 2539-2550 (2007).</li><li>Medrano, G., Hermosillo-Rodriguez, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+Atrial+Volume+and+Pulmonary+Artery+Diameter+Are+Noninvasive+Measures+of+Age-Related+Diastolic+Dysfunction+in+Mice.">Left Atrial Volume and Pulmonary Artery Diameter Are Noninvasive Measures of Age-Related Diastolic Dysfunction in Mice.</a> The Journals of Gerontology Series A: Biological Sciences and Medical Sciences. (16), 1-10 (2015).</li><li>Franco, F., Thomas, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+Resonance+Imaging+and+Invasive+Evaluation+of+Development+of+Heart+Failure+in+Transgenic+Mice+With+Myocardial+Expression+of+Tumor+Necrosis+Factor-+.">Magnetic Resonance Imaging and Invasive Evaluation of Development of Heart Failure in Transgenic Mice With Myocardial Expression of Tumor Necrosis Factor- .</a> Circulation. 99, 448-454 (1999).</li><li>Jenkins, C., Bricknell, K., Marwick, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+real-time+three-dimensional+echocardiography+to+measure+left+atrial+volume:+Comparison+with+other+echocardiographic+techniques.">Use of real-time three-dimensional echocardiography to measure left atrial volume: Comparison with other echocardiographic techniques.</a> Journal of the American Society of Echocardiography. 18 (9), 991-997 (2005).</li><li>Ujino, K., Barnes, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-dimensional+echocardiographic+methods+for+assessment+of+left+atrial+volume.">Two-dimensional echocardiographic methods for assessment of left atrial volume.</a> The American journal of cardiology. 98 (9), 1185-1188 (2006).</li><li>Scalia, G. M., Scalia, I. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ePLAR+-+The+echocardiographic+Pulmonary+to+Left+Atrial+Ratio+-+A+novel+non-invasive+parameter+to+differentiate+pre-capillary+and+post-capillary+pulmonary+hypertension.">ePLAR - The echocardiographic Pulmonary to Left Atrial Ratio - A novel non-invasive parameter to differentiate pre-capillary and post-capillary pulmonary hypertension.</a> International Journal of Cardiology. 212, 379-386 (2016).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Ci sono tre passi fondamentali per misurare con successo la LAV, aorta e PA diametri. Durante il set-up è importante rimuovere completamente il pelo sul petto; in caso contrario si comporterà l&#39;interferenza con la qualità delle immagini. Durante l&#39;acquisizione di immagini passaggi è importante per ottenere ogni immagine con il loro corrispondente sonda e filtro come i fotogrammi al secondo variano da sonda per sondare: ovvero 25 MHz e filtro cardiaca per la valutazione della LAV e 30 MHz e filtro addominale per la valutazione dei diametri dell&#39;aorta e PA. Il ricercatore può essere limitata a volte per l&#39;acquisizione dell&#39;immagine scadente se il mouse ha una grande quantità di grasso o se una costola rende difficile ottenere una buona finestra. Durante l&#39;Image Analysis passaggi è importante misurare le cavità nelle loro capacità massime come descritto nella sezione Risultati rappresentativa. Utilizzare l&#39;ECG come guida. L&#39;ecocardiografia è conosciuto per essere operatore dipendente. Questa tecnica richiedefamiliarità con l&#39;anatomia cardiaca e finestre ecocardiografiche per migliore acquisizione dell&#39;immagine così da ridurre il tempo di studio. Familiarizzazione diventa rilevante per evitare complicazioni derivanti dall&#39;uso prolungato di isoflurano, come rallentamento della frequenza cardiaca e la compromissione emodinamica. Per evitare questo, attento monitoraggio dell&#39;animale deve essere assicurata mantenendo la frequenza cardiaca superiore a 400 battiti / min per tutto lo studio. Questa tecnica offre numerosi vantaggi rispetto ad altre tecniche disponibili per valutare la funzione cardiaca nei topi. Rispetto alla cateterizzazione invasiva è un non-invasiva, tecnica non terminale che permette misurazioni seriali; rispetto a risonanza magnetica, è più economico e più veloce 8. Questa nuova tecnica per misurare LAV e diametro PA attraverso l&#39;ecocardiografia 2D apre le porte ad interventi di monitoraggio e ulteriori ricerche nelle scienze cardiopolmonari.

L&#39;attuale metodologia insegna l&#39;investigatore come misurare e utilizzare la LAV, il diametro dell&#39;aorta e diametro PA con l&#39;ecocardiografia 2D nei topi sotto isoflurano. Insufficienza cardiaca con frazione di eiezione preservata (HFpEF) in persone anziane colpisce fino al 10% in quegli 80 anni e più 1 e si traduce in significativa morbidità e mortalità. significativa mortalità si verificano anche da ipertensione polmonare (PH), un processo di malattia insidiosa che presentano sintomi simili, come HFpEF, in quali elevate pressione arteriosa polmonare portare a dispnea da sforzo, insufficienza cardiaca destra progressiva, e spesso la morte. 2 La crescente prevalenza sia HFpEF e PH significare la necessità di sviluppare un metodo che permette la valutazione accurata e monitoraggio degli interventi in modelli murini in modo non invasivo, approccio non terminale. L&#39;invecchiamento porta ad un deterioramento della funzione diastolica tramite alterazioni nel ventricolo-artirrigidimento erial, disfunzione vascolare, infiammazioni 3, regolazione del calcio compromessa 4, diminuita reattività β-adrenergici, e decondizionamento fisico producendo rallentato rilassamento attivo e una maggiore rigidità passiva. Nel corso del tempo questo porta ad un aumento della pressione di riempimento LV e l&#39;ampliamento di compensazione del Los Angeles. 5 Anche se altre eziologie, come la disfunzione valvolare (rigurgito mitralico o stenosi) e processi infiltrative causare aumenti di pressione e volume nel LA 1, la Società Europea di Cardiologia supporta l&#39;aggiunta di dimensioni LA come riflesso non invasiva della funzione ventricolare sinistra. 6 Le correlazioni tra volume LA e misure invasive di funzione diastolica è stata studiata nei topi. LA volumi correlata con differenze in funzione determinata invasivo all&#39;interno di gruppi di età sia per il 14 e 31 mesi di età mghiaccio. Nei 14 mesi di età topi, volume LA correlata con tre misure invasive standard della funzione diastolica -dP / dTmin (r 2 = 0,5, p &lt;0,05), Tau (costante di tempo di rilassamento, (r 2 = 0,6, p &lt;0,05), e sinistra del ventricolo pressione diastolica (r 2 = 0,25, p &lt;0,05). Per i 31 mesi di età topi, le correlazioni tra volume lA e -dP / dTmin (r 2 = 0,92, p &lt; 0.05) e LVEDP (R 2 = 0,61, p &lt;0.05) erano evidenti anche se il rapporto con Tau era meno chiaro. Pertanto, il volume lA aumentata con compromissione diastolica non solo tra gruppi, ma all&#39;interno di gruppi di età. 7 Gli studi di funzione cardiaca in modelli murini utilizzando tecniche catetere per valutare le prestazioni cardiache, anche se rigoroso e affidabile, sono limitati a causa della loro incompatibilità con le valutazioni ripetute. 8 alternative alle misure invasive come la risonanza magnetica e 3D l&#39;ecocardiografia può anche esserepiù accurato di tecniche ecocardiografiche 2D, ma sono più costosi; ecocardiografia 2D è ritenuto congruo per LA la valutazione del volume. 9, 10 Valutazione del volume LA e diametro PA con ecocardiografia consente la discriminazione tra i modelli che producono aumenti primarie resistenza polmonare conseguente aumento del diametro PA senza variazione della pressione LA o LAV da quelle in cui l&#39;arteria polmonare e Atrium sinistro sia ingrandire come a seguito di pressioni di riempimento elevate sul lato sinistro del cuore. Questo approccio è stata scattata dal Scalia et al. che ha mostrato che nelle persone, l&#39;arteria polmonare ecocardiografico Rapporto atriale sinistra (ePLAR) è un parametro per differenziare accuratamente tra i pazienti con pre-ipertensione polmonare capillare e post-capillaryhypertension. 11

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="673">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:203px;">Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system</td>
			<td style="width:85px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:119px;">Vevo 770-120</td>
			<td style="width:267px;">Echocardiographic Equipment</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:203px;">707B RMV (Real time MicroVisualization) 30 MHz Scanhead with encapsulated transducer&#160;</td>
			<td style="width:85px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:119px;">707B-256</td>
			<td>Real Time Microvisualization Scanhead</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:203px;">710B RMV (Real time MicroVisualization) 25 MHz Scanhead with encapsulated transducer&#160;</td>
			<td style="width:85px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:119px;">710B-159</td>
			<td>Real Time Microvisualization Scanhead</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:203px;">Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit&#160;</td>
			<td style="width:85px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Inhalation Anesthesia System</td>
			<td style="width:85px;">VetEquip</td>
			<td style="width:119px;">VE2627</td>
			<td>Anesthesia System</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:203px;">Isofluorane</td>
			<td style="width:85px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">50033</td>
			<td style="width:267px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Electric razor&#160;</td>
			<td style="width:85px;">Wahl</td>
			<td style="width:119px;">General supply</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Hair removal cream</td>
			<td style="width:85px;">Nair</td>
			<td style="width:119px;">General supply</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Transductor cream</td>
			<td style="width:85px;">Parker</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Transductor gel</td>
			<td style="width:85px;">Parker</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Standard Gauze pads&#160;&#160;</td>
			<td style="width:85px;">McKeeson</td>
			<td style="width:119px;">General supply</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Tape</td>
			<td style="width:85px;">Durapore</td>
			<td style="width:119px;">General supply</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Nose cone&#160;</td>
			<td style="width:85px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>For anesthesia delivery</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Water&#160;</td>
			<td style="width:85px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Vet eye ointment&#160;</td>
			<td style="width:85px;">Puralube</td>
			<td style="width:119px;">General supply&#160;</td>
			<td>To prevent dryness&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">Cotton tipped applicators&#160;</td>
			<td style="width:85px;"></td>
			<td style="width:119px;">General supply</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:203px;">USB Flash Drive</td>
			<td style="width:85px;"></td>
			<td style="width:119px;">General supply</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine echocardiography of left atrium, aorta, and pulmonary artery

Il presente metodo insegna l&#39;investigatore come misurare e utilizzare la LAV come un surrogato di elevazioni croniche in ventricolare sinistra pressione diastolica mediante ecocardiografia, così da ottenere misurazioni del diametro dell&#39;aorta e PA nei topi. I topi di età superiore a 10 giorni di età possono essere analizzati utilizzando la tecnica attuale. La tecnica si compone di 3 fasi principali: set-up, acquisizione di immagini e di analisi delle immagini. Il passo set-up consiste di ottenere il mouse anestetizzato con 1% isoflurano, rasatura e nastratura in una posizione supina ad una tavola riscaldata EKG dove l&#39;acquisizione dell&#39;immagine avrà luogo. La fase di acquisizione immagine consiste di imparare a identificare le strutture cardiache e ottenere tutte le immagini richieste con la sua sonda corrispondente e asse per poter calcolare volumi e diametri. La fase di analisi dell&#39;immagine consiste nel misurare le immagini precedentemente acquisite con l&#39;ausilio di software. <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; I vantaggi della tecnica proposta includono una procedura rapida (15 min), che permetterebbe al ricercatore di valutare gli interventi in modo non invasivo, approccio non terminale, e quindi seguire la stessa del mouse nel corso del tempo; ogni mouse può essere utilizzato come proprio controllo. Questo fatto più avere lo stesso operatore eseguire tutte l&#39;acquisizione e analisi per l&#39;intero esperimento minimizza la limitazione dell&#39;operatore dipendenza. L&#39;attuale metodologia è utile per i ricercatori del mouse in medicina cardiovascolare e polmonare.

Valutazione del volume LA e diametro PA con l&#39;ecocardiografia permette la discriminazione tra modelli in cui è aumentato risultati di resistenza delle arterie polmonari a diametro maggiorato PA con nessun cambiamento nella LAV da quelli in cui l&#39;arteria polmonare e atriale sinistra allargamento sono entrambi il risultato di pressioni di riempimento elevate sulla lato sinistro del cuore. Immagini che mostrano le differenze nei due pathophysiologies sono mostrati nella Figura 4. Le immagini del Los Angeles e PA sono da giovane, ipossia indotta ipertensione polmonare e disfunzione ventricolare sinistra diastolica legati all&#39;età. I modelli ipertensione polmonare sviluppano un aumento del diametro PA senza variazione di volume atrio sinistro su un periodo di 4 settimane. In confronto, gli animali vecchi sviluppano un aumento sia loro diametro dell&#39;arteria polmonare e il volume atrio sinistro suggerendo che la propagazione all&#39;indietro della pressione guidare l&#39;aumento del diametro PA in questo gruppo. Figura 4: LA superiore-inferiore e PA diametro su un normale mouse, una ipertensione polmonare modello murino e un mouse Vecchio con associate all&#39;età LV disfunzione diastolica. Immagini (A) e (B) mostrano il diametro superiore-inferiore e PA LA, rispettivamente di un 15 settimane di vita normale mouse. Immagini (C) e (D) indicano il diametro superiore-inferiore e PA LA, rispettivamente di un 15 settimane vecchio mouse modello di ipertensione polmonare. L&#39;ipertensione polmonare è stata indotta dall&#39;esposizione al 10% ipossia per quattro settimane e la pressione sistolica PA è stato aumentato del 75% da studi cuore catetere destra. Si prega di notare la differenza di diametro PA. Immagini (E) e (F) mostrano il diametro superiore-inferiore e PA LA, rispettivamente, di un 21 mesi di età mouse con elevata fine LV pressione diastolica. La pressione di riempimento wcome è aumentato quasi del 300% nei vecchi topi. Si prega di notare che sia il Los Angeles e il diametro PA sono più grandi rispetto alle 15 settimane di età topi. Scala Unità in millimetri. Il marker &quot;Δ&quot; indica il punto in ECG in cui è stata ottenuta l&#39;immagine mostrata. LA SI: Sinistra Atrium superiore-inferiore, PA: polmonare. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig4large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> Per garantire la precisione dei risultati è necessario siano misurati al loro temporizzazione appropriata nel ciclo cardiaco. Quando si misura la LAV, il ricercatore vuole misurare l&#39;atrio alla sua grande capacità di tutte e tre le misure, vale a dire prima contrazione atriale. Se l&#39;appendice LA è visto in qualsiasi topi nella vista superiore-inferiore, gli autori raccomandano di ignorarlo quando si fa la misurazione. Quando si misura dei grossi vasi del ricercatore wants a loro misura in loro maggiore capacità, cioè dopo che i QRS o subito dopo i ventricoli hanno pompato il sangue nei vasi. Le figure da 5 a 9 mostrano immagini corrispondenti allo stesso animale, misurata a differenti tempi sul ECG per illustrare le differenze tra una misura corretta e scorretta. Il ricercatore può ora calcolare la LAV utilizzando la formula dell&#39;ellisse prolata 9, 10 come il seguente esempio: (4 * π * Dimension superiore-inferiore * antero-posteriore Dimensione * medio-laterale Dimension) / (3 * 2 * 2 * 2) Nella Figura 5, una misura &quot;corretta&quot; è quello ottenuto usando l&#39;ECG come guida per garantire il ricercatore sta misurando alla maggiore capacità della cavità. In questo caso tegli atri è al suo più grande capacità misurata solo alla P-wave. (AC). Una misurazione &quot;corretto&quot; è quello ottenuto in qualsiasi punto diverso dal P-onda. Si tende a dare dimensioni più piccole, come i contratti atrio sinistro o riempimenti. (B, D). Nella figura 6, una misura &quot;corretta&quot; è quello ottenuto usando l&#39;ECG come guida per garantire il ricercatore sta misurando alla maggiore capacità della cavità. In questo caso atri è al suo più grande capacità misurata solo alla P-wave (LA (1)). Una misurazione &quot;corretto&quot; è quello ottenuto in qualsiasi punto diverso dal P-onda. Si tende a dare dimensioni più piccole, come i contratti atrio sinistro o riempimenti. (LA (2)). Nella Figura 7, una misura &quot;corretta&quot; è quello ottenuto usando l&#39;ECG come guida per garantire il ricercatore sta misurando alla maggiore capacità della cavità. La atri è al suo più grande capacità misurata solo alla P-wave. (AC). Una misura &quot;non corretta&quot; è che ottenereEd in qualsiasi punto diverso dal P-wave. (B, D). * Gli autori pensano che il cinema è estremamente utile per determinare i limiti del Los Angeles. Il ricercatore deve essere in grado di vedere la mossa LA per tutto il ciclo cardiaco. In figura 8, una misura &quot;corretta&quot; è quello ottenuto usando l&#39;ECG come guida per garantire il ricercatore sta misurando alla grande capacità del recipiente. In questo caso l&#39;aorta è al suo più grande capacità appena dopo il complesso QRS. (AC). Una misurazione &quot;corretto&quot; è quello ottenuto in qualsiasi punto diverso da quello appena dopo il complesso QRS. Si tende a dare dimensioni più piccole, come i contratti aorta o riempimenti. (B, D). In figura 9, una misura &quot;corretta&quot; è quello ottenuto usando l&#39;ECG come guida per garantire il ricercatore sta misurando alla grande capacità del recipiente. In questo caso l&#39;arteria polmonare è al suo più grande capacità appena dopo il complesso QRS. (AC). Una misura &quot;non corretto&quot;, è quello ottenuto in qualsiasi pmisto diverso subito dopo il complesso QRS. Si tende a dare dimensioni più piccole, come i contratti arterie polmonari o riempimenti. (B, D). <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig5.jpg" /> Figura 5: Misure LA superiore-inferiore. Immagini (A) e (B) corrispondono agli stessi campioni del mouse. Scala Unità in millimetri. Immagine (C) corrisponde al frammento in basso a destra di ECG di immagine (A). Non in scala. Immagine (D) corrisponde al frammento in basso a destra della ECG di immagine (B). Non in scala. Notare il marker &quot;Δ&quot; in immagini (C) e (D). Il marker &quot;Δ&quot; indica il punto in ECG in cui è stata ottenuta l&#39;immagine mostrata. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig5large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig6.jpg" /> Figura 6: LA antero-posteriore Misure. Vista M-Mode di Atrio sinistro. L&#39;immagine corrisponde ad una visione M-Mode di Atrio sinistro, al fine di ottenere la misura anteriore-posteriore. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig6large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig7.jpg" /> Figura 7: Misure LA medio-laterale. immagini (A) e (B) corrispondono agli stessi campioni mouse. Scala Unità in millimetri. (C) corrisponde a un frammento di EKG di (A). Non in scala. (D) corrisponde ad un frammento di EKG di (B). Nonscala. Notare il marker &quot;Δ&quot; in immagini (C) e (D). Il marker &quot;Δ&quot; indica il punto in ECG in cui è stata ottenuta l&#39;immagine mostrata. LV: ventricolo sinistro, RA: atrio destro, LA: atrio sinistro. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig7large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig8.jpg" /> Figura 8: Misure aorta. immagini (A) e (B) corrispondono agli stessi campioni mouse. Scala Unità in millimetri. (C) corrisponde a un frammento di EKG di (A). Non in scala. (D) corrisponde ad un frammento di EKG di (B). Non in scala. Notare il marker &quot;Δ&quot; in immagini (C) e (D). Il marker &quot;Δ&quot; indica il punto in ECG in cuil&#39;immagine mostrata è stata ottenuta. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig8large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="Figura 9" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig9.jpg" /> Figura 9: Pulmonary Artery misurazioni. Immagini (A) e (B) corrispondono agli stessi campioni del mouse. Scala Unità in millimetri. (C) corrisponde a un frammento di EKG di (A). Non in scala. (D) corrisponde ad un frammento di EKG di (B). Non in scala. Notare il marker &quot;Δ&quot; in immagini (C) e (D). Il marker &quot;Δ&quot; indica il punto in ECG in cui è stata ottenuta l&#39;immagine mostrata. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig9large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> Per dimostrare la riproducibilità e la coerenza di questa tecnica, gli autori offrono due esempi derivati ​​dal proprio lavoro. Il primo presenta un gruppo di 19 mesi di età i topi che ha subito l&#39;ecocardiografia basale e la successiva ecocardiografia una settimana più tardi. Gli autori hanno raccolto le misure per Atrio sinistro e dei grossi vasi come descritto in precedenza e ottenuti i seguenti risultati. Il grafico a sinistra mostra di ogni singolo topo Volume sinistro Atrium calcolato con la formula ellisse allungata 9, 10. Il grafico a destra mostra polmonare Diametro Arteria di ogni singolo mouse. I dati hanno mostrato variazioni di pochi percento. <img alt="Figura 10" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig10.jpg" /> Figura 10: Sinistra Atrium Volume e polmonare Arteria diametro su due successive ass<html> essments. (A) mostra il volume Sinistra Atrium in mm³ di sei 19 mesi topi su 2 valutazioni successive. (B) mostra il diametro dell&#39;arteria polmonare in mm del vecchio gruppo topi stessi 19 mesi. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig10large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> Come secondo esempio, presenti gli autori due immagini dello stesso 21 mesi di età del mouse acquisito lo stesso giorno da due ricercatori differenti. I primi due pannelli corrispondono alle immagini acquisite da Ricercatore # 1 e la seconda due pannelli corrispondere alle immagini acquisite dal Ricercatore # 2. Si prega di notare che la differenza di &quot;Time Gain Compensation&quot; non influisce sulle misurazioni. Questo esempio dimostra la grande importanza di selezionare il punto giusto in QRS mentre si misura la dimensione della cavità, come precedentemente descritto. jove_content &quot;fo: keep-together.within-page =&quot; 1 &quot;&gt; <img alt="Figura 11" src="/files/ftp_upload/55214/55214fig11.jpg" /> Figura 11: LA superiore-inferiore e diametro PA degli stessi 19 mesi di età del mouse acquisita da due ricercatori differenti. (A) indica il diametro superiore-inferiore sinistra Atrium. (B) mostra il diametro PA del mouse stesso. Entrambe le immagini sono state acquisite dalla stessa ricercatore nello stesso giorno. (C) mostra il diametro superiore-inferiore sinistra Atrium. (D) indica il diametro PA del mouse stesso. Entrambe le immagini sono state acquisite da un secondo ricercatore nello stesso giorno. Scala Unità in millimetri. Il marker &quot;Δ&quot; indica il punto in ECG in cui è stata ottenuta l&#39;immagine mostrata. LA SI: Sinistra Atrium superiore-inferiore. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55214/55214fig11large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a>

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Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Il protocollo che segue descrive la metodologia per l&#39;acquisizione e l&#39;analisi di immagini ecocardiografiche utilizzati per ottenere il diametro, Aorta (Ao) Volume atriale sinistra (LAV), e il diametro dell&#39;arteria polmonare (PA) nei topi. Questa tecnica è un non-invasivo, procedura non terminale che permette la valutazione della funzione cardiopolmonare.

Murine ecocardiografia di Sinistra Atrium, Aorta, e l&#39;arteria polmonare

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

murine-echocardiography-of-left-atrium-aorta-and-pulmonary-artery

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

14.2K Views.  Baylor College of Medicine.  Il protocollo che segue descrive la metodologia per l'acquisizione e l'analisi di immagini ecocardiografiche utilizzati per ottenere il diametro, Aorta (Ao) Volume atriale sinistra (LAV), e il diametro dell'arteria polmonare (PA) nei topi. Questa tecnica è un non-invasivo, procedura non terminale che permette la valutazione della funzione cardiopolmonare. 

Video: Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1 Echocardiography provides a powerful, non-invasive tool to serially assess cardiac morphometry and function in a living animal.2 However, using this technique on mice poses unique challenges owing to the small size and rapid heart rate of these animals.3 Until recently, few ultrasound systems were capable of performing quality echocardiography on mice, and those generally lacked the image resolution and frame rate necessary to obtain truly quantitative measurements. Newly released systems such as the VisualSonics Vevo2100 provide new tools for researchers to carefully and non-invasively investigate cardiac function in mice. This system generates high resolution images and provides analysis capabilities similar to those used with human patients. Although color Doppler has been available for over 30 years in humans, this valuable technology has only recently been possible in rodent ultrasound.4,5 Color Doppler has broad applications for echocardiography, including the ability to quickly assess flow directionality in vessels and through valves, and to rapidly identify valve regurgitation. Strain analysis is a critical advance that is utilized to quantitatively measure regional myocardial function.6 This technique has the potential to detect changes in pathology, or resolution of pathology, earlier than conventional techniques. Coupled with the addition of three-dimensional image reconstruction, volumetric assessment of whole-organs is possible, including visualization and assessment of cardiac and vascular structures. Murine-compatible contrast imaging can also allow for volumetric measurements and tissue perfusion assessment.

This video demonstrates use of a rail-mounted high-frequency ultrasound probe to perform echocardiography on an anesthetized mouse. The methods describe both conventional two-dimensional and M-mode measurements of cardiac function in addition to newer, more powerful tools such as color Doppler, strain analysis, as well as general and targeted contrast imaging.

L&#39;ecocardiografia murini e imaging a ultrasuoni

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1  ...

Ricerca

Medicina

Murine Fetal Echocardiography

Transgenic mice displaying abnormalities in cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding the molecular mechanisms underlying both normal cardiovascular function and the pathophysiological basis of human cardiovascular disease. Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development 1-3. In order to study the role of genetic or pharmacologic alterations in the early development of cardiac function, ultrasound imaging of the live fetus has become an important tool for early recognition of abnormalities and longitudinal follow-up. Noninvasive ultrasound imaging is an ideal method for detecting and studying congenital malformations and the impact on cardiac function prior to death 4. It allows early recognition of abnormalities in the living fetus and the progression of disease can be followed in utero with longitudinal studies 5,6. Until recently, imaging of fetal mouse hearts frequently involved invasive methods. The fetus had to be sacrificed to perform magnetic resonance microscopy and electron microscopy or surgically delivered for transillumination microscopy. An application of high-frequency probes with conventional 2-D and pulsed-wave Doppler imaging has been shown to provide measurements of cardiac contraction and heart rates during embryonic development with databases of normal developmental changes now available 6-10. M-mode imaging further provides important functional data, although, the proper imaging planes are often difficult to obtain. High-frequency ultrasound imaging of the fetus has improved 2-D resolution and can provide excellent information on the early development of cardiac structures 11.

Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development. High-frequency ultrasound imaging has improved 2-D resolution and can provide excellent information on early cardiac development and is an ideal method to detect the impact on cardiac structure and function prior to death.

Murine ecocardiografia fetale

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

Assessment of Right Ventricular Structure and Function in Mouse Model of Pulmonary Artery Constriction by Transthoracic Echocardiography

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, the RV is significantly affected in pulmonary diseases such as pulmonary artery hypertension (PAH). In addition, the RV is remarkably sensitive to cardiac pathologies, including left ventricular (LV) dysfunction, valvular disease or RV infarction4. To understand the role of RV in the pathogenesis of cardiac diseases, a reliable and noninvasive method to access the RV structurally and functionally is essential.
A noninvasive trans-thoracic echocardiography (TTE) based methodology was established and validated for monitoring dynamic changes in RV structure and function in adult mice. To impose RV stress, we employed a surgical model of pulmonary artery constriction (PAC) and measured the RV response over a 7-day period using a high-frequency ultrasound microimaging system. Sham operated mice were used as controls. Images were acquired in lightly anesthetized mice at baseline (before surgery), day 0 (immediately post-surgery), day 3, and day 7 (post-surgery). Data was analyzed offline using software.
Several acoustic windows (B, M, and Color Doppler modes), which can be consistently obtained in mice, allowed for reliable and reproducible measurement of RV structure (including RV wall thickness, end-diastolic&#160;and end-systolic dimensions), and function (fractional area change, fractional shortening, PA peak velocity, and peak pressure gradient) in normal mice and following PAC.
Using this method, the pressure-gradient resulting from PAC was accurately measured in real-time using Color Doppler mode and was comparable to direct pressure measurements performed with a Millar high-fidelity microtip catheter. Taken together, these data demonstrate that RV measurements obtained from various complimentary views using echocardiography are reliable, reproducible and can provide insights regarding RV structure and function. This method will enable a better understanding of the role of RV cardiac dysfunction.

Right ventricle (RV) dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease, yet limited methodologies are available for its evaluation. Recent advances in ultrasound imaging provide a noninvasive and accurate option for longitudinal RV study. Herein, we detail a step-by-step echocardiographic method using a murine model of RV pressure overload.

Valutazione del ventricolo destro Struttura e funzione in modello murino di polmonare Arteria Costrizione da ecocardiografia transtoracica

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

Un modello murino di ischemia miocardica e riperfusione lesioni da legatura della arteria discendente anteriore sinistra

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular failure. Current treatments are limited. Physiologically, pulsatile blood flow is detrimental to the vasculature. In response to sustained pulsatile stress, vessels release nitric oxide (NO) to induce vasodilation for self-protection. Based on this observation, this study developed a protocol to assess whether an artificial pulmonary pulsatile blood flow could induce an NO-dependent decrease in pulmonary artery pressure. One group of piglets was exposed to chronic hypoxia for 3 weeks and compared to a control group of piglets. Once a week, the piglets underwent echocardiography to assess PAH severity. At the end of hypoxia exposure, the piglets were subjected to a pulsatile protocol using a pulsatile catheter. After being anesthetized and prepared for surgery, the jugular vein of the piglet was isolated and the catheter was introduced through the right atrium, the right ventricle and the pulmonary artery, under radioscopic control. Pulmonary artery pressure (PAP) was measured before (T0), immediately after (T1) and 30 min after (T2) the pulsatile protocol. It was demonstrated that this pulsatile protocol is a safe and efficient method of inducing a significant reduction in mean PAP via an NO-dependent mechanism. These data open up new avenues for the clinical management of PAH.

Pulmonary hypertension is associated with a significant reduction in pulmonary artery pulsatility, contractility and elasticity, contributing to an increase in pulmonary artery pressure and pulmonary resistance. Using a hypoxic piglet model, this study demonstrated that improving pulmonary artery plasticity using a newly developed pulsatile catheter improves hypoxic pulmonary hypertension.

Aumentare polmonare Arteria flusso pulsatile Migliora ipossica Ipertensione polmonare nei suinetti

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular ...

Transthoracic Speckle Tracking Echocardiography for the Quantitative Assessment of Left Ventricular Myocardial Deformation

The value of conventional echocardiography is limited by differences in inter-individual image interpretation and therefore largely dependent on the examiners&#39; expertise. Speckle tracking Echocardiography (STE) is a promising but technically challenging method that can be used to quantitatively assess regional and global systolic and diastolic myocardial performance. Myocardial strain and strain rate can be measured in all three dimensions&#160;&#8212; radial, circumferential, longitudinal &#8212; of myocardial deformation. Standard cross-sectional two-dimensional B-mode images are recorded and subsequently postprocessed by automated continuous frame-by-frame tracking and motion analysis of speckles within the myocardium. Images are recorded as digital loops and synchronized to a 3-lead EKG for timing purposes. Longitudinal deformation is assessed in the apical 4-, 3-, and 2-chamber views. Circumferential and radial deformation are measured in the parasternal short axis plane.
Optimal image quality and accurate tissue tracking are paramount for the correct determination of myocardial performance parameters. Utilizing transthoracic STE in a healthy volunteer, the present article is a detailed outline of the essential steps and potential pitfalls of quantitative echocardiographic myocardial deformation analysis.

Speckle tracking echocardiography is an emerging diagnostic imaging technique for the quantitative assessment of global and regional myocardial performance. Standard view echocardiographic motion images are recorded and deformation parameters are subsequently measured by automated continuous frame-by-frame tracking and motion analysis of speckles within the B-mode images of the myocardium.

Transtoracica Speckle monitoraggio ecocardiografia per la valutazione quantitativa del ventricolo sinistro del miocardio Deformazione

The value of conventional echocardiography is limited by differences in inter-individual image interpretation and therefore largely dependent on the ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by reduced blood supply to the heart, resulting in the loss of oxygen to and the ensuing necrosis of the heart muscle. The MI model has gained popularity for its use as a short-term ischemia-reperfusion model and a long-term permanent ligation model. Below, we describe a reliable method for the permanent ligation of the LAD. With mouse genetic engineering technology becoming more advanced, and with an increasing availability of quality murine surgical instruments, the mouse has become a popular model for MI surgeries. Our surgical model incorporates the use of an easily reversible anesthetic for the rapid recovery of the mouse; a minimally invasive endotracheal intubation without involving a tracheotomy; and a thoracentesis through the original thoracotomy site without creating an additional incision in the chest, as is done in some other methods, to effectively remove excess blood and air from the chest cavity. This method is comparatively less invasive than other methods, which dramatically reduces surgical and post-surgical complications and mortality and improves reproducibility.

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

We provide a reliable method for left anterior descending artery (LAD) ligation in a mouse model. This method is comparatively less invasive than other methods, involving endotracheal intubation, a left-sided thoracotomy approach, and thoracentesis. This method can be used as a model for both acute and chronic myocardial infarction (MI).

Murino discendente anteriore sinistra (LAD) Coronary legatura dell&#39;arteria: una migliore e semplificata del modello di infarto miocardico

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ischemia and infarction in children. If left untreated, it results in a 90% mortality rate in the first year of life. In patients who survive to the adulthood, the coronary steal phenomenon and retrograde left-sided coronary flow provide a substrate for chronic subendocardial ischemia, which may lead to left ventricular dysfunction, ischemic mitral regurgitation, malignant ventricular arrhythmias, and sudden cardiac death. The average age of life-threatening presentation is 33 years and of sudden cardiac death 31 years. Therefore, surgical correction is highly recommended as soon as the diagnosis is made, regardless of age. In adult-type ALCAPA originating from the right-facing sinus of the pulmonary artery, direct re-implantation of the ALCAPA into the aorta is the more physiologically sound repair technique to re-establish the dual-coronary perfusion system and is recommended. This protocol describes the technique of direct re-implantation of adult-type ALCAPA into the aorta.

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Surgical correction of ALCAPA is highly recommended, regardless of age or the degree of intercoronary collateralization. This protocol presents a technique for the direct re-implantation of adult-type ALCAPA into the aorta to re-establish the dual-coronary perfusion. Whenever feasible, direct re-implantation is preferred to other surgical correction techniques.

Diretto Re-impianto di sinistra coronarica nell&#39;aorta in Adulti con Anomala origine della coronaria sinistra dall&#39;arteria polmonare (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of group 2 PH, due to mitral stenosis (MS), to facilitate the investigation of disease mechanisms and potential therapeutic strategies. We present a novel rat model of pulmonary venous congestion-induced pulmonary venous arterialization and group 2 PH caused by left atrial stenosis (LAS). LAS is achieved by constricting the left atrium using a half-closed titanium clip. After the LAS surgery, a rat model with a transmitral inflow velocity greater than or equal to 2.0 m/s on echocardiography gradually develops pulmonary venous arterialization and group 2 PH over an 8- to 10-week period. In this protocol, we provide the step-by-step procedure of how to perform the LAS surgery. The presented LAS rat model mimics MS in humans and is useful for studying the underlying molecular mechanism of pulmonary venous arterialization and for the preclinical evaluation of therapies for group 2 PH.

Left atrial stenosis (LAS) is a novel surgical technique used for studying group 2 pulmonary hypertension (PH) and mechanisms underlying pulmonary venous arterialization. Here, we present a protocol to constrict the left atrium using a titanium clip to cause pulmonary venous arterialization and moderate PH in a rat.

Stenosi di sinistra atriale indotta arterializzazione venosa polmonare e l'ipertensione polmonare gruppo 2 nel ratto

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine models of MI with permanent ligation of left-anterior descending (LAD) coronary artery closely mimics MI in humans. Murine models benefit from the extensive genetic engineering available nowadays. Here we propose a reproducible murine surgical model of myocardial infarction by permanent LAD coronary ligation. Our technique comprises anesthesia with ketamine/xylazine that can be rapidly reversed by administration of an antagonist, intubation without tracheotomy for mechanical-assisted ventilation, ventilation with application of extrinsic positive end-expiratory pressure (PEEP) to avoid alveolar collapse, a thoracotomy method limiting to the minimum surgical lesions made to skeletal muscles, and lung inflation without thoracentesis. This method is sparsely invasive, reproducible and reduces post-surgery mortality and complications.

Herein we describe a surgical procedure showing how to achieve permanent ligation of the left-anterior descending coronary artery in mice. This model is of high relevance to investigate the pathophysiology of myocardial infarction and the concomitant biological processes.

Modello di infarto miocardico Murine utilizzando la legatura permanente dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...