The investigations were financially supported by the Division for Earth and Life Sciences of the Netherlands Organization for Scientific Research (grant 833.13.004), the Sci-Tech Landing Projection of Higher Education of Jiangxi Province (KJLD14030) and The Cultivation Plan for Young Scientists of Jiangxi Province (Jinggang star 20153BCB23014). We thank Daomeng Fu, Zhigang Li and Xiaolong Huang for their help in producing the movie.

1. Modifica di una Leaf Blower-Vac per il campionamento di aspirazione <ol><li> Raccogliere tutte le parti elencate nella Lista dei materiali. </li><li> Collegare tutte cloruro di polivinile (PVC) tubi di cloruro di polivinile non plastificato (PVC-U) colla (tubi 1-2-3-4-5 e 6-7). </li><li> Praticare tre fori che sono uniformemente distribuite attorno alla bocca di aspirazione della macchina. </li><li> Collegare la macchina alla fine 1 di tubo in PVC 1-5 inserendo una vite in ciascuno dei tre fori. Non utilizzare la colla per collegare estremità del tubo 1 alla macchina perché la connessione dovrebbe essere reversibile per la pulizia della ventola. Nota: Nel caso il diametro della bocca di aspirazione della macchina differisce dal modello qui descritto, il diametro della estremità del tubo 1 deve essere regolato per adattarsi perfettamente alla macchina. </li><li> Aggiungere 2 strati di nastro di tenuta filetto di tubo di estremità 5 e 6. </li><li> Mettere il pezzo di garza metallica tra il tubo e la parte della bocca (tubi in PVC 6 e 7) per evitare che la rete di campionamento di essere risucchiati nel mAchine. Utilizzare garza del metallo con un diametro di maglia compresa tra 0,5 mm e 0,5 cm. </li><li> Collegare il tubo al tubo di estremità 5 e 6 con cerchi fascetta metallica. </li></ol> 2. Preparare il contenitore di campionamento <ol><li> Rimuovere il fondo da un secchio di plastica (50 L, 40 cm di diametro inferiore). Questa grandezza della custodia copre 2-4 colline di riso in un campo di riso trapiantato, a seconda della fase delle colture 24. </li><li> Attaccare un manicotto rete di nylon, con una lunghezza di 1 m, all&#39;inizio del secchio con un elastico. Per questo manicotto, utilizzare una dimensione di maglia che è abbastanza piccolo da impedire la fuga dei più piccoli artropodi bersaglio. Utilizzare un diametro inferiore a 0,5 mm. </li></ol> 3. Il campo di applicazione della Modified Leaf Blower-Vac per il campionamento di aspirazione <ol><li> Utilizzare due persone per operare il dispositivo nel campo. Una persona gestisce il ventilatore-vac e l&#39;altro gestisce il recinto secchio e le reti di campionamento. </li><li> Avviare la macchina. </li><li> Inserire una ne campionamentot nella parte bocca del ventilatore-vac e fissarlo con un elastico. Per la rete, usare una dimensione di maglia che è abbastanza piccolo per catturare i più piccoli artropodi non bersaglio, ma non crea evidenti resistenza del flusso d&#39;aria. Utilizzare il materiale in nylon leggero con un diametro di maglia compresa tra 0,2-0,5 mm. </li><li> Posizionare il contenitore rapidamente sopra le piante in una posizione casuale nel campo e spingere il fondo del secchio saldamente nel terreno. Assicurarsi che il manicotto è chiusa per impedire artropodi fuoriuscita dalla parte superiore del contenitore. </li><li> Rimuovere tutti gli artropodi dall&#39;interno del contenitore in modo spirale top-down, per una durata di campionamento standardizzato. Per le colture di riso nelle fasi vegetative e riproduttive, utilizzare durate di campionamento di 1 e 2 min, rispettivamente. </li><li> Dopo aver terminato il campione, rimuovere l&#39;elastico dalla rete campionamento, chiudere rapidamente la rete e portarlo dalla parte di bocca della soffiante-vac e chiudere con un nodo, mantenendo la macchina in funzione. </li><li> s RipeterePTO da 3.2 a 3.5 in posizioni casuali nel campo per i prossimi campioni. Il numero di repliche dipende dalla variazione della distribuzione spaziale degli artropodi nel campo, la precisione richiesta della stima e lo scopo dello studio. In genere, sei repliche darà una buona impressione della comunità artropodi e specie abbondanze. </li></ol>

<ol>
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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fallowing+did+not+disrupt+invertebrate+fauna+in+Philippine+low-pesticide+irrigated+rice+fields.">Fallowing did not disrupt invertebrate fauna in Philippine low-pesticide irrigated rice fields.</a> J Appl Ecol. 47 (3), 593-602 (2010).</li><li>de Kraker, J., van Huis, A., van Lenteren, J. C., Heong, K. 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C., Rabbinge, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Population+dynamics+of+rice+leaffolders+(Lepidoptera:+Pyralidae)+and+their+natural+enemies+in+irrigated+rice+in+the+Philippines.">Population dynamics of rice leaffolders (Lepidoptera: Pyralidae) and their natural enemies in irrigated rice in the Philippines.</a> Bull Entomol Res. 89 (5), 411-421 (1999).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

campionamento di aspirazione è uno dei tanti possibili metodi per assaggiare le comunità di artropodi nelle colture. Per la ricerca scientifica nei sistemi di riso, il campionamento di aspirazione è una scelta appropriata perché il metodo fornisce stime assolute della densità di artropodi, è non distruttivo, e - in contrasto con i conteggi visive - consente la raccolta e la conservazione dei campioni per la successiva elaborazione. Rispetto alla D-vac disponibile in commercio, il ventilatore-aspiratore è più piccola, più leggera e maneggevole in campi (allagata) riso ed anche più facile da combinare con un involucro. Ad esempio, un soffiatore-Vac pesa circa 6 kg, mentre il modello D-vac zaino, presentato come lo standard internazionale per il campionamento degli insetti, ha un peso 12 kg 11. Ancora più importante, l&#39;efficienza di campionamento della soffiante-vac è superiore alla D-vac 16,17, mentre il costo della soffiante-vac è inferiore. La modifica di una foglia soffiatore-vac in un campionatore di aspirazione non richiede abilità o attrezzature specialie prende meno di un&#39;ora dopo che tutte le parti addizionali sono stati raccolti. Il ventilatore-vac qui descritto è più facile da costruire e gestire rispetto alle versioni precedentemente descritte in letteratura 16,17, e le parti necessarie (Tabella 1) sono materiali di costruzione standard che sono ampiamente disponibili. Questo rende il soffiatore-vac accessibile anche ai ricercatori con piccoli budget nei paesi in via di sviluppo. La potenza e la cilindrata del motore determina la forza di aspirazione della soffiante-vac. Qui si consiglia una macchina con una potenza tra 0,7-1,2 kW e una cilindrata tra i 25-35 cc, che è adeguata per il campionamento della comunità artropodi-impianto che abita in riso. La lunghezza del tubo flessibile ed il diametro della parte di bocca di aspirazione (condotto 7) sono fondamentali per una buona prestazione di campionamento. Un tubo troppo lungo riduce la potenza di aspirazione, mentre un tubo che è troppo breve sarà scomodo da utilizzare durante il campionamento. Analogamente,una parte di bocca con troppo grande diametro riduce la potenza di aspirazione, mentre un diametro che è troppo piccolo ridurrà l&#39;efficienza di campionamento a causa della piccola superficie. L&#39;efficienza di campionamento dipende in modo critico dalla durata di campionamento. Se il campionamento viene effettuata per tutto il periodo della crescita, della durata di campionamento può essere adattato alle dimensioni dell&#39;impianto, la struttura, e la densità di impianto di mantenere un livello simile di efficienza. l&#39;efficienza di campionamento dovrebbe essere controllato da un accurato controllo visivo dell&#39;area racchiusa dopo il campionamento. Se ci sono ancora artropodi presenti, la durata di campionamento deve essere aumentata. Le durate di campionamento raccomandato per le colture di riso nella fase vegetativa è di 1 minuto e nelle fasi riproduttive e di maturazione è di 2 minuti. campionamento di aspirazione con il soffiatore-vac può essere condotta in campi allagati, mentre i metodi alternativi, come insidia e battere il campionamento foglio non sono realizzabili in acqua stagnante. Il soffiatore-vac può anche essereusato per campionare la comunità artropodi sulla superficie dell&#39;acqua delle risaie allagate (ad esempio, insetti predatori d&#39;acqua), in quanto la macchina è in grado di succhiare in poca acqua. Tuttavia, non è consigliabile per campionare artropodi acquatici come il motore potrebbe interrotta quando la parte di bocca è inserita profondamente in acqua e il flusso d&#39;aria viene bloccato. Oltre riso, il ventilatore-aspiratore può essere utilizzato anche in altri granella e habitat non-raccolto, purché l&#39;altezza e la struttura della vegetazione consente il corretto posizionamento del contenitore 25. Il nostro metodo di campionamento di aspirazione del ventilatore-vac è non distruttiva. Quasi tutti gli artropodi raccolti nella rete di campionamento sono sopravvissuti, tra cui quei corpi morbidi come zanzare e damigelle. L&#39;applicazione di questo metodo, tuttavia, presenta alcuni limiti ed inconvenienti. Il ventilatore-vac ha bisogno di essere gestito da due persone. Portare il soffiatore-vac nel campo risulterà in qualche disturbo, e quindi questo metodo può sottovalutarespecie sensibili alle alterazioni, come grilli. posizionamento rapido e brusco del contenitore in una zona relativamente indisturbata nella direzione in avanti di movimento può limitare questo potenziale bias. Il forte rumore della macchina soffiante-vac può anche causare disturbi, e il campionamento di notte in zone residenziali non è raccomandato. Il metodo non è adatto per il campionamento di insetti volanti altamente mobili, come ad esempio predatori Odonata o più grandi parassitoidi imenotteri. Come con qualsiasi metodo di campionamento, la combinazione del soffiatore-vac con altri metodi, come ad esempio il campionamento rete a strascico o raccolta distruttiva delle piante, in grado di fornire una valutazione più completa ed equilibrata della comunità artropodi 26.

è necessaria una valutazione ripetuta l&#39;abbondanza e la diversità degli artropodi fitofagi e entomofagi nelle colture per gli studi ecologici delle dinamiche demografiche e interazioni specie, tra cui lo studio del controllo biologico. Il riso è un alimento di base importante, con un alto potenziale di biocontrollo da artropodi entomofagi 1,2, ma che può essere interrotta da insetticidi 3. La diversità degli artropodi nelle colture di riso può essere alto, e specie di artropodi occupare varie colture strati (ad esempio, a terra, gambo, baldacchino, fiori), si differenziano per la modalità di movimento (ad esempio, camminare, saltare, volare) e foraggiamento strategia (ad esempio, sessili insetti succhiatori, predatori di caccia e di fiori impollinatori che visitano) 4. Vi è una vasta gamma di tecniche di campionamento di artropodi, ognuno con pregi e difetti. Per esempio, trappole a caduta può essere utilizzato per campionare artropodi terra-dimora, ma forniscono rela attività-dipendentepopolazione tiva stime 5,6. Reti sweep possono essere utilizzati per campionare gli insetti volanti veloce nel baldacchino 7-9, ma fornire stime relative di artropodi abbondanza. Il metodo di foglio di battuta può essere usato per campionare la comunità artropodi-impianto abitazione e fornisce stime di abbondanza assoluta artropodi, ma non può essere utilizzata efficacemente in campi coltivati ​​allagati come risaie 10. campionamento di aspirazione, quando condotta in combinazione con un involucro che copre un&#39;area standardizzata del campo, fornisce stime assolute delle densità di artropodi-pianta abitazione. Questo metodo può essere utilizzato anche in riso allagato. I campioni possono essere conservati per la successiva elaborazione e l&#39;identificazione. Il vuoto Dietrick (D-vac) 11 è il primo campionatore di aspirazione sviluppato commercialmente. Sebbene D-vacs sono ancora ampiamente utilizzati 12-14, sono relativamente costosi, hanno una forza di aspirazione limitata 15 e sono relativamente pesanti, che li rende difficilegestire in risaie allagate 16. Arida e Heong 16 hanno sviluppato un campionatore di aspirazione mediante una foglia soffiatore-vac a benzina, e questo prototipo è stata ulteriormente raffinata dai Domingo e Schoenly 17. Vantaggi del campionatore aspirante soffiante-vac rispetto alla D-vac sono che è molto più economico e più facile da gestire. Sebbene il metodo di campionamento aspirante soffiante-vac è stato usato in molti studi ecologici 18-23, le istruzioni per la sua modifica e applicazione non sono stati chiaramente descritti. Qui vi presentiamo una descrizione dettagliata di video-based della modifica e l&#39;applicazione di una foglia soffiatore-vac a benzina per il campionamento di aspirazione delle popolazioni di artropodi nelle risaie allagate. La modifica si ispira Arida e Heong 16 e Domingo e Schoenly 17, ma il design è stata ulteriormente semplificata rispetto a queste pubblicazioni originali, facilitando la costruzione e l&#39;uso.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Machine</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leaf blower-vac</td>
			<td>We used Oleo-Mac BV300, Made in Italy</td>
			<td>Power: 1.0 kW, Displacement: 30.5 cc, Max air volume: 720 m&#179;/h, Max air speed: 70 m/sec, Weight: 4.5 kg, Diameter of suction mouth: 113 mm&#160;</td>
			<td>There are many different brands and models available. For comparable performance, the specifications concerning power and air speed should be similar to those presented here.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Additional parts for modification</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe 1</td>
			<td></td>
			<td>Outer &#248; of end connected to the machine: 112 mm, Inner &#248; of end connected to PVC pipe 2: 110 mm</td>
			<td>This is the cover of a &#248; 110 mm PVC pipe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe 2</td>
			<td></td>
			<td>Outer &#248;: 110 mm, Length: 10 cm</td>
			<td>Normal outer &#248; 110 mm PVC pipe; to connect PVC pipe 1 and 3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe 3</td>
			<td></td>
			<td>Inner &#248; of big end: 110 mm, Inner &#248; of small end: 50 mm</td>
			<td>PVC &#248; 110 mm to &#248; 50 mm downpipe reducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe 4</td>
			<td></td>
			<td>Outer &#248;: 50 mm, Length: 5 cm</td>
			<td>Normal &#248; 50 mm PVC pipe; to connect PVC pipe 3 and 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe 5</td>
			<td></td>
			<td>Inner &#248;: 50 mm and 32 mm, Outer &#248; of small part: 38 mm</td>
			<td>PVC &#248; 50 mm to &#248; 32 mm downpipe reducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hose</td>
			<td></td>
			<td>Outer &#248;: 40 mm</td>
			<td>Wire-fortified, flexible plastic hose&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal gauze</td>
			<td></td>
			<td>Mesh &#248;: 1 mm, &#248;: 60 mm</td>
			<td>Prevent the sampling net from being sucked into the machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe 6</td>
			<td></td>
			<td>Outer &#248; of small end: 38 mm, Inner &#248; of big end: 63 mm</td>
			<td>PVC &#248; 32 mm to &#248; 63 mm reducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe 7</td>
			<td></td>
			<td>Outer &#248;: 63 mm, Length: 25 cm</td>
			<td>Normal outer &#248; 63mm PVC pipe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U-PVC glue</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>U-PVC glue; to connect PVC parts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Metal clamp hoops (2)</td>
			<td>Flexible between &#248; 35 mm - 51 mm</td>
			<td>To connect the hose with the PVC pipes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Thread seal tape</td>
			<td>Width: 18mm</td>
			<td>Seal the hose-PVC connections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screws (3)</td>
			<td></td>
			<td>Length: 25mm</td>
			<td>To connect PVC pipe 1 with the suction mouth of the machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Sampling net and enclosure</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Sampling net</td>
			<td>Mesh size &#248;: 0.3 mm, Width of the mouth: 10 cm, Height: 30 cm</td>
			<td>The sampling net has a conical shape.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bucket</td>
			<td></td>
			<td>Bottom &#248;: 40 cm, Volume: 50 L</td>
			<td>Cut the bottom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon sleeve</td>
			<td></td>
			<td>Mesh size &#248;: 0.3 mm, Length: 1 m</td>
			<td>To cover the bucket as enclosure</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modification and application of a leaf blower-vac for field sampling of arthropods

Risaie ospitano una grande diversità di artropodi, ma indagare le dinamiche di popolazione e le interazioni è impegnativo. Qui si descrive la modifica e l&#39;applicazione di una foglia soffiatore-Vac per il campionamento di aspirazione delle popolazioni di artropodi in riso. Quando utilizzato in combinazione con un recinto, l&#39;applicazione di questo dispositivo di campionamento fornisce stime assoluti delle popolazioni di artropodi come numeri per area di campionamento standardizzato. L&#39;efficienza di campionamento dipende in modo critico dalla durata di campionamento. In un raccolto di riso maturo, un campione di due minuti in un recinto di 0,13 m 2 produce più del 90% della popolazione artropodi. Il dispositivo permette anche il campionamento degli artropodi che abitano sulla superficie dell&#39;acqua o del suolo in risaie, ma non è adatto per il campionamento di insetti volanti veloce, come Odonata predatori o parassitoidi grandi imenotteri. Il ventilatore-vac modificata è semplice da costruire, e più economico e più facile da gestire rispetto sampli aspirazione tradizionaledispositivi NG, come D-Vac. Il basso costo rende modificato soffiatore-vac accessibile anche ai ricercatori dei paesi in via di sviluppo.

<html> Un totale di 295 artropodi sono stati raccolti in 8 tre minuti campioni blower-Vac da una coltura di riso in fase di maturazione in provincia di Jiangxi, in Cina, nel mese di settembre 2015. Per determinare la relazione tra rendimento relativo (percentuale di artropodi raccolti nel campione ) e di campionamento la durata, ogni campione è stato suddiviso in sei sotto-campioni di 30 secondi ciascuno. Il numero medio di individui per campione era 36,9 ± 4,1 (media ± SEM). Un totale di otto ordini di artropodi sono stati trovati, con Hemiptera (28,8%), Araneae (27,5%) e Ditteri (17,6%) essendo dominante (Figura 1). Il rendimento relativo, espresso come percentuale del numero di artropodi raccolti dopo tre minuti, era 52,9% ± 5,1, 92,4% ± 1,9 e 97,3 ± 0,9% dopo 30 secondi, 2 e 2,5 minuti, rispettivamente (figura 2). <html> 5 / 54655fig1.jpg &quot;/&gt; Figura composizione 1. Specie (a livello di ordine) dei campioni di artropodi nella periferia della città di Nanchang nella provincia di Jiangxi, in Cina. Otto campioni sono state scattate con un soffiatore-Vac di tre minuti ciascuno. Le barre di errore rappresentano l&#39;errore standard della media. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54655/54655fig1large.jpg" target="_blank">Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <img alt="figura 2" src="/files/ftp_upload/54655/54655fig2.jpg" /> Figura 2. resa relativa cumulativa in funzione della durata complessiva di campionamento sulla base sottocampioni di 30 secondi ciascuno. Il numero totale di artropodi raccolti su un periodo di campionamento di tre minuti è fissato a 100%. Non artropodi sono stati trovati su ispezione visiva dopo l&#39;ultimo campione soffiatore-vac. barre di errore rappresentano gli errori standard della media di otto campioni di tre minuti.= &quot;Https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54655/54655fig2large.jpg&quot; target = &quot;_ blank&quot;&gt; Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.

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Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

La valutazione di artropodi abbondanza in colture è fondamentale per studiare la dinamica delle popolazioni e le interazioni delle specie. Qui si descrive la modifica e l&#39;applicazione di una foglia soffiatore-Vac per il campionamento di aspirazione degli artropodi in riso.

Modifica e applicazione di una Leaf Blower-Vac per Campo di campionamento di Artropodi

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

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8.7K Views.  Wageningen University.  La valutazione di artropodi abbondanza in colture è fondamentale per studiare la dinamica delle popolazioni e le interazioni delle specie. Qui si descrive la modifica e l'applicazione di una foglia soffiatore-Vac per il campionamento di aspirazione degli artropodi in riso. 

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Integrated Field Lysimetry and Porewater Sampling for Evaluation of Chemical Mobility in Soils and Established Vegetation

Potentially toxic chemicals are routinely applied to land to meet growing demands on waste management and food production, but the fate of these chemicals is often not well understood. Here we demonstrate an integrated field lysimetry and porewater sampling method for evaluating the mobility of chemicals applied to soils and established vegetation. Lysimeters, open columns made of metal or plastic, are driven into bareground or vegetated soils. Porewater samplers, which are commercially available and use vacuum to collect percolating soil water, are installed at predetermined depths within the lysimeters. At prearranged times following chemical application to experimental plots, porewater is collected, and lysimeters, containing soil and vegetation, are exhumed. By analyzing chemical concentrations in the lysimeter soil, vegetation, and porewater, downward leaching rates, soil retention capacities, and plant uptake for the chemical of interest may be quantified. Because field lysimetry and porewater sampling are conducted under natural environmental conditions and with minimal soil disturbance, derived results project real-case scenarios and provide valuable information for chemical management. As chemicals are increasingly applied to land worldwide, the described techniques may be utilized to determine whether applied chemicals pose adverse effects to human health or the environment.

Field lysimetry and porewater sampling allow researchers to evaluate the fate of chemicals applied to soils and established vegetation. The goal of this protocol is to demonstrate how to install required instrumentation and collect samples for chemical analysis during integrated field lysimetry and porewater sampling experiments.

Integrato Campo Lysimetry e Porewater campionamento per la valutazione della chimica Mobilità nel suolo e alla vegetazione Fondata

Potentially toxic chemicals are routinely applied to land to meet growing demands on waste management and food production, but the fate of these chemicals ...

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Soil Sampling and Isolation of Entomopathogenic Nematodes (Steinernematidae, Heterorhabditidae)

Entomopathogenic nematodes (a.k.a. EPN) represent a group of soil-inhabiting nematodes that parasitize a wide range of insects. These nematodes belong to two families: Steinernematidae and Heterorhabditidae. Until now, more than 70 species have been described in the Steinernematidae and there are about 20 species in the Heterorhabditidae. The nematodes have a mutualistic partnership with Enterobacteriaceae bacteria and together they act as a potent insecticidal complex that kills a wide range of insect species.
Herein, we focus on the most common techniques considered for collecting EPN from soil. The second part of this presentation focuses on the insect-baiting technique, a widely used approach for the isolation of EPN from soil samples, and the modified White trap technique which is used for the recovery of these nematodes from infected insects. These methods and techniques are key steps for the successful establishment of EPN cultures in the laboratory and also form the basis for other bioassays that consider these nematodes as model organisms for research in other biological disciplines. The techniques shown in this presentation correspond to those performed and/or designed by members of S. P. Stock laboratory as well as those described by various authors.

Soil Sampling and Isolation of Entomopathogenic Nematodes Steinernematidae, Heterorhabditidae

Entomopathogenic nematodes are soil-inhabiting roundworms that parasitize a wide range of insects. We demonstrate sampling methods used for the isolation of these nematodes from the soil using two techniques: the insect baiting and the modified White trap, for the recovery of nematodes from soil samples and infected insect cadavers, respectively.

Campionamento e Isolamento di Nematodi entomopatogeni Suolo (Steinernematidae, Heterorhabditidae)

Entomopathogenic nematodes (a.k.a. EPN) represent a group of soil-inhabiting nematodes that parasitize a wide range of insects. These nematodes belong to ...

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% fine dust formation within the EU15. But NH3 emissions also mean a considerable loss of nutrients. Many studies on NH3 emission from organic and mineral fertilizer application have been performed in recent decades. Nevertheless, research related to NH3 emissions after application fertilizers is still limited in particular with respect to relationships to emissions, fertilizer type, site conditions and crop growth. Due to the variable response of crops to treatments, effects can only be validated in experimental designs including field replication for statistical testing. The dominating ammonia loss methods yielding quantitative emissions require large field areas, expensive equipment or current supply, which restricts their application in replicated field trials. This protocol describes a new methodology for the measurement of NH3 emissions on many plots linking a simple semi-quantitative measuring method used in all plots, with a quantitative method by simultaneous measurements using both methods on selected plots. As a semi-quantitative measurement method passive samplers are used. The second method is a dynamic chamber method (Dynamic Tube Method) to obtain a transfer quotient, which converts the semi-quantitative losses of the passive sampler to quantitative losses (kg nitrogen ha-1). The principle underlying this approach is that passive samplers placed in a homogeneous experimental field have the same NH3 absorption behavior under identical environmental conditions. Therefore, a transfer co-efficient obtained from single passive samplers can be used to scale the values of all passive samplers used in the same field trial. The method proved valid under a wide range of experimental conditions and is recommended to be used under conditions with bare soil or small canopies (&#60;0.3 m). Results obtained from experiments with taller plants should be treated more carefully.

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Ammonia emissions are a major threat to the environment by eutrophication, soil acidification and fine particle formation and stem mainly from agricultural sources. This method allows ammonia loss measurements in replicated field trials enabling statistical analysis of emissions and of relationships between crop development and emissions.

Calibrato passivo di campionamento - Multi-trama di campo Misure di NH<sub&gt; 3</sub&gt; Emissioni con una combinazione di metodo del tubo dinamico e campionatori passivi

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% ...

Administering and Detecting Protein Marks on Arthropods for Dispersal Research

Monitoring arthropod movement is often required to better understand associated population dynamics, dispersal patterns, host plant preferences, and other ecological interactions. Arthropods are usually tracked in nature by tagging them with a unique mark and then re-collecting them over time and space to determine their dispersal capabilities. In addition to actual physical tags, such as colored dust or paint, various types of proteins have proven very effective for marking arthropods for ecological research. Proteins can be administered internally and/or externally. The proteins can then be detected on recaptured arthropods with a protein-specific enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Here we describe protocols for externally and internally tagging arthropods with protein. Two simple experimental examples are demonstrated: (1) an internal protein mark introduced to an insect by providing a protein-enriched diet and (2) an external protein mark topically applied to an insect using a medical nebulizer. We then relate a step-by-step guide of the sandwich and indirect ELISA methods used to detect protein marks on the insects. In this demonstration, various aspects of the acquisition and detection of protein markers on arthropods for mark-release-recapture, mark-capture, and self-mark-capture types of research are discussed, along with the various ways that the immunomarking procedure has been adapted to suit a wide variety of research objectives.

Proteins are often used to mark arthropods for dispersal research. Methods for administering internal and external protein marks on arthropods are demonstrated. Protein mark detection techniques, either through indirect or sandwich enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs), are also illustrated.

Amministrazione e Rilevamento di segni di proteine ​​su artropodi per Dispersione ricerca

Monitoring arthropod movement is often required to better understand associated population dynamics, dispersal patterns, host plant preferences, and other ...

Clean Sampling and Analysis of River and Estuarine Waters for Trace Metal Studies

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination control. Developments of some techniques aiming to reduce trace metal contamination in the last couple of decades have resulted in concentrations reported now being orders of magnitude lower than those in the past. These low concentrations often necessitate preconcentration of water samples prior to instrumental analysis of samples. Since contamination can appear in all phases of trace metal analyses, including sample collection (and during preparation of sampling containers), storage and handling, pretreatments, and instrumental analysis, specific care needs to be taken in order to reduce contamination levels at all steps. The effort to develop and utilize "clean techniques" in trace metal studies allows scientists to investigate trace metal distributions and chemical and biological behavior in greater details. This advancement also provides the required accuracy and precision of trace metal data allowing for environmental conditions to be related to trace metal concentrations in aquatic environments.
This protocol that is presented here details needed materials for sample preparation, sample collection, sample pretreatment including preconcentration, and instrumental analysis. By reducing contamination throughout all phases mentioned above for trace metal analysis, much lower detection limits and thus accuracy can be achieved. The effectiveness of "clean techniques" is further demonstrated using low field blanks and good recoveries for standard reference material. The data quality that can be obtained thus enables the assessment of trace metal distributions and their relationships to environmental parameters.

Special care using "clean techniques" is required to properly collect and process water samples for trace metal studies in aquatic environments. A protocol for sampling, processing, and analytical procedures with the aim of obtaining reliable environmental monitoring data and results with high sensitivity for detailed trace metal studies is presented.

Pulire campionamento e analisi del fiume e di estuario Acque per Trace Studi di metallo

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination ...

Reliable Method for Assessing Seed Germination, Dormancy, and Mortality under Field Conditions

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester fabric and glue can be folded and glued to construct a strip of compartments that house seeds and identifying information, while allowing contact with soil leachate, water, microorganisms, and ambient temperature. Strips may be constructed with a wide range of compartment numbers and sizes and allow the researcher to house a variety of genotypes within a single species, different species, or seeds that have experienced different treatments. As opposed to individual seed packets, strips are more easily retrieved as a unit. While replicate packets can be included within a strip, different strips can act as blocks or can be retrieved at different times for observation of seed behavior over time. We used a high temperature glue gun to delineate compartments and sealed the strips once the seed and tags identifying block and removal times were inserted. The seed strips were then buried in the field at the desired depth, with the location marked for later removal. Burrowing animal predators were effectively excluded by use of a covering of metal mesh hardware cloth on the soil surface. After the selected time interval for burial, strips were dug up and seeds were assessed for germination, dormancy and mortality. While clearly dead seeds can often be distinguished from ungerminated living ones by eye, dormant seeds were conclusively identified using a standard Tetrazolium chloride colorimetric test for seed viability.

Here we present a protocol for assessing seed survivorship, germination and dormancy under field conditions using buried, labeled seed strips and tetrazolium chloride (TZ) viability testing.

Metodo affidabile per valutare la germinazione dei semi, dormienza, e mortalità in normali condizioni operative

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester ...

Wastewater Irrigation Impacts on Soil Hydraulic Conductivity: Coupled Field Sampling and Laboratory Determination of Saturated Hydraulic Conductivity

Since the early 1960s, an alternative wastewater discharge practice at The Pennsylvania State University has been researched and its impacts monitored. Rather than discharging treated wastewater to a stream, and thereby directly impacting the stream quality, the effluent is applied to forested and cropped land managed by the University. Concerns related to reductions in soil hydraulic conductivity occur when considering wastewater reuse. The methodology described in this manuscript, matching soil sample size with the size of the laboratory-based hydraulic conductivity measurement apparatus, provides the benefits of a relatively rapid collection of samples with the benefits of controlled laboratory boundary conditions. The results suggest that there may have been some impact of wastewater reuse on the soil&#39;s ability to transmit water at deeper depths in the depressional areas of the site. Most of the reductions in the soil hydraulic conductivity in the depressions appear to be related to the depth from which the sample was collected, and by inference, associated with the soil structural and textural differences.

Here we present a methodology which matches a soil sample size and a hydraulic conductivity measurement device to prevent the so-called wall flow along the inside of the soil container from being erroneously included in water flow measurements. Its use is demonstrated with samples collected from a wastewater irrigation site.

Gli impatti di irrigazione delle acque reflue su conducibilità idraulica del suolo: accoppiata campo campionamento e determinazione in laboratorio della conducibilità idraulica satura

Since the early 1960s, an alternative wastewater discharge practice at The Pennsylvania State University has been researched and its impacts monitored. ...

Construction of a Low-cost Mobile Incubator for Field and Laboratory Use

Incubators are essential for a range of culture-based microbial methods, such as membrane filtration followed by cultivation for assessing drinking water quality. However, commercially available incubators are often costly, difficult to transport, not flexible in terms of volume, and/or poorly adapted to local field conditions where access to electricity is unreliable. The purpose of this study was to develop an adaptable, low-cost and transportable incubator that can be constructed using readily available components. The electronic core of the incubator was first developed. These components were then tested under a range of ambient temperature conditions (3.5 &#176;C - 39 &#176;C) using three types of incubator shells (polystyrene foam box, hard cooler box, and cardboard box covered with a survival blanket). The electronic core showed comparable performance to a standard laboratory incubator in terms of the time required to reach the set temperature, inner temperature stability and spatial dispersion, power consumption, and microbial growth. The incubator set-ups were also effective at moderate and low ambient temperatures (between 3.5 &#176;C and 27 &#176;C), and at high temperatures (39 &#176;C) when the incubator set temperature was higher. This incubator prototype is low-cost (&lt; 300 USD) and adaptable to a variety of materials and volumes. Its demountable structure makes it easy to transport. It can be used in both established laboratories with grid power or in remote settings powered by solar energy or a car battery. It is particularly useful as an equipment option for field laboratories in areas with limited access to resources for water quality monitoring.

This paper describes a method for building an adaptable, low-cost and transportable incubator for microbial testing of drinking water. Our design is based on widely available materials and can operate under a range of field conditions, while still offering the advantages of higher-end laboratory-based models.

Costruzione di un incubatore Mobile a basso costo per campo e di laboratorio

Incubators are essential for a range of culture-based microbial methods, such as membrane filtration followed by cultivation for assessing drinking water ...

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) in vitro exposure systems are often large and bulky, making transport to the field and operation at the source of emission or within the breathing zone difficult. Through miniaturization of these systems, the lab can be brought to the field, expediting processing time and providing a more appropriate exposure method that does not alter the aerosol prior to contacting the cells. The Portable In vitro Exposure Cassette (PIVEC) adapts a 37 mm filter cassette to allow for in vitro toxicity testing outside of a traditional laboratory setting. The PIVEC was characterized using three sizes of copper nanoparticles to determine deposition efficiency based on gravimetric and particle number concentration analysis. Initial cytotoxicity experiments were performed with exposed lung cells to determine the ability of the system to deposit particles while maintaining cell viability. The PIVEC provides a similar or increased deposition efficiency when comparing to available perpendicular flow in vitro exposure devices. Despite the lower sample throughput, the small size gives some advantages to the current in vitro ALI exposure systems. These include the ability to be worn for personal monitoring, mobility from the laboratory to the source of emission, and the option to set-up multiple systems for spatial resolution while maintaining a lower user cost. The PIVEC is a system capable of collecting aerosols in the field and within the breathing zone onto an air-interfaced, in vitro model.

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

Here, we present a protocol to perform portable cellular aerosol exposures and measure cellular response. The method uses cells, grown at the air-liquid interface, mimicking in vivo physiology. Cellular response to copper nanoparticle aerosols was observed as oxidative stress through reactive oxygen species generation and cytotoxicity as lactate dehydrogenase release.

Una nuovo portatile In Vitro l'esposizione Cassette per il campionamento di Aerosol

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) ...

Sampling for Estimating Frankliniella Species Flower Thrips and Orius Species Predators in Field Experiments

The western flower thrips, Frankliniella occidentalis (Pergande), is a polyphagous pest that has been spread worldwide. The extensive use of insecticides in attempts to control its populations eliminates natural enemies and competitor flower thrips species, thereby increasing its populations. An unsustainable situation develops with concomitant resistant pest populations, secondary pest outbreaks, and environmental degradation. Integrated pest management utilizes knowledge of pest and natural enemy relationships to implement tactics that are environmentally friendly and sustainable. Minute pirate bugs are the most important worldwide predators of thrips. They can suppress and ultimately control Frankliniella species flower thrips. Flower samples taken at least weekly are needed to understand predator-prey dynamics. Shown here is the sampling of the flowers of fruiting vegetables and companion plants to estimate the densities of individual thrips and minute pirate bug species. Representative data illustrates how the protocol is used to determine the efficacy of management tactics over time and how to evaluate the benefits of predation by minute pirate bugs. The sampling protocol is similarly adaptable to sampling thrips and minute pirate bugs in other plant species hosts.

Sampling for Estimating Frankliniella Species Flower Thrips and Orius Species Predators in Field Experiments

Presented here is a protocol to determine the number of thrips and minute pirate bug predators in crops over multiple dates in field experiments. Also illustrated is how to determine the efficacy of management tactics against thrips and evaluate the benefits of predation by minute pirate bugs.

Campionamento per la stima delle specie di Frankliniella Dei corci e dei predatori delle specie di Orio negli esperimenti sul campo

The western flower thrips, Frankliniella occidentalis (Pergande), is a polyphagous pest that has been spread worldwide. The extensive use of insecticides ...