Method Article
Qui, descriviamo due misure della funzione polmonare – barometrica pletismografia, che permette la misurazione del volume polmonare e capnografia volumetrica, uno strumento per misurare la spazio morto anatomico e uniformità airways. Queste tecniche possono essere utilizzate in modo indipendente o combinate per valutare la funzione airways a volumi polmonari differenti.
Strumenti per misurare il volume del polmone e le vie respiratorie sono critici per polmonari ricercatori interessati a valutare l'impatto delle terapie di malattia o romanzo sul polmone. Pletismografia barometrica è una tecnica classica per valutare il volume polmonare con una lunga storia di uso clinico. Capnografia volumetrica utilizza il profilo di anidride carbonica espirata per determinare il volume delle vie aeree di conduzione, o dead space e fornisce un indice di omogeneità airways. Queste tecniche possono essere utilizzate indipendentemente o in combinazione per valutare la dipendenza del volume airways e omogeneità il volume polmonare. Questo documento fornisce istruzioni tecniche dettagliate per replicare queste tecniche e nostri dati rappresentativi dimostrano che il volume di airways e omogeneità sono altamente correlati al volume del polmone. Forniamo anche una macro per l'analisi dei dati capnographic, che possono essere modificati o adattati a diversi disegni sperimentali. Il vantaggio di queste misure è loro vantaggi e limitazioni sono supportati da decenni di dati sperimentali, che possono essere realizzati più volte nello stesso soggetto senza costose apparecchiature di imaging o tecnicamente algoritmi di analisi avanzate. Questi metodi possono essere particolarmente utili per i ricercatori interessati a perturbazioni che cambiare sia la capacità residua funzionale del volume del polmone e le vie respiratorie.
Tecniche di washout del gas sono stati utilizzati per decenni per fornire informazioni importanti circa la struttura e l'uniformità dell'albero della via aerea. Il polmone è classicamente descritto come avendo due scomparti – una zona di conduzione che comprende lo spazio morto anatomico e la zona respiratoria dove lo scambio di gas si verifica negli alveoli. Le vie aeree di conduzione sono definite come "dead space" perché non partecipano allo scambio di ossigeno e anidride carbonica. Nel metodo di interruzione gas singolo respiro, il profilo di concentrazione di un gas espirato utilizzabile per determinare il volume dello spazio morto anatomico e ricavare informazioni sull'uniformità della ventilazione. Alcuni metodi si basano sulla respirazione di gas inerti per rendere queste misure (N2, argon, egli, SF6, ecc.). L'uso di gas inerte è ben consolidata, supportato da dichiarazioni di consenso scientifico1, e ci sono attrezzature commerciali disponibili con interfacce user-friendly. Tuttavia, il profilo di espirata di anidride carbonica (CO2) utilizzabile per derivare informazioni simili. Valutando il profilo di CO2 in funzione del volume espirato o capnografia volumetrica, non richiede al partecipante di respirare miscele di gas speciali e permette al ricercatore di raccogliere ulteriori informazioni in modo flessibile su metabolismo e gas scambio con regolazione minima alla tecnica.
Durante un'espirazione controllata, la concentrazione di CO2 può essere tracciata contro il totale volume espirato. All'inizio di un'espirazione, lo spazio morto è riempito di gas atmosferici. Questo si riflette nella fase I di CO nell'aria espirata2 profilo dove c'è una quantità rilevabile di CO2 (Figura 1, alto). Fase II segna il passaggio al gas alveolare, dove lo scambio di gas avviene e CO2 è abbondante. Il volume nel punto medio della fase II è il volume dello spazio morto anatomico (VD). Fase III contiene gas alveolare. Perché airways con diversi diametri vuoti a velocità diverse, la pendenza (S) della fase III fornisce informazioni sull'uniformità airways. Un pendio ripido della fase III suggerisce un meno albero uniforme delle vie aeree prossimale al bronchioli terminali o disomogeneità di convezione-dipendente2. Nel caso in cui una perturbazione può modificare il tasso di produzione di CO2 e per effettuare confronti tra gli individui, la pendenza è divisibile dall'area sotto la curva per normalizzare le differenze nel metabolismo (NS o pendio normalizzato). Capnografia volumetrica è stato utilizzato in precedenza per valutare le variazioni di volume airways e segue uniformità aria inquinante dell'esposizione3,4,5,6.
Trasporto di gas nel polmone è disciplinato dalla convezione e la diffusione. Misure di sbiaditura del singolo respiro dipendono molto dal flusso d'aria e il valore misurato di VD si verifica al contorno di convezione-diffusione. Variare la velocità di flusso dell'espirazione o inalazione precedente cambia la posizione di quel limite7. Capnografia è anche altamente dipendente dal volume del polmone immediatamente precedente la manovra. Più grandi volumi polmonari dilatano le vie aeree, con conseguente più grandi valori di VD8. Una soluzione consiste nel rendere coerente la misura allo stesso volume del polmone – capacità di solito funzionale residua (FRC). Un'alternativa, descritta qui, è per coppia capnografia volumetrica con pletismografia barometrica, al fine di ottenere il rapporto tra VD e del volume polmonare. Il partecipante quindi esegue la manovra a velocità di flusso costante, pur variando il volume polmonare. Questo consente ancora classico capnographic misure da effettuarsi presso FRC, ma anche per il rapporto tra il volume polmonare e il volume dello spazio morto e tra il volume polmonare e omogeneità per essere derivato. Infatti, il valore aggiunto della capnografia di accoppiamento con pletismografia proviene dalla possibilità di testare le ipotesi circa la distensibilità dell'albero airways e la relazione struttura-funzione del polmone. Questo può essere uno strumento prezioso per gli investigatori con l'obiettivo di quantificare l'influenza delle vie aeree meccanica contro compliance polmonare ed elastanza sulla funzione polmonare in popolazioni sane e malate9,10,11 . Inoltre, contabilità per il volume assoluto del polmone in cui vengono eseguite le misurazioni volumetriche capnographic permette ai ricercatori di caratterizzare gli effetti delle condizioni che possono alterare lo stato di inflazione del polmone, come l'obesità, polmone trapianto, o interventi come la reggiatura di parete toracica. Capnografia volumetrica può in definitiva avere utilità clinica a cure intensive impostazione12,13.
Questo protocollo è stato approvato in precedenza dal e segue le linee guida impostate dall'Università di Iowa Institutional Review Board. I dati indicati sono stati raccolti nell'ambito di un progetto approvato dall'Institutional Review Board presso la University of Iowa. I partecipanti hanno dato il consenso informato e gli studi sono stati effettuati in conformità con la dichiarazione di Helsinki.
1. le attrezzature
2. pletismografia
Nota: Pletismografia barometrica è un attrezzo clinico ben descritto e viene eseguita utilizzando attrezzature commerciali secondo le dichiarazioni di consenso sulla standardizzazione del polmone volume misure14,15. Quando necessario, polmone flussi e volumi vengono confrontati con i valori stimati dal set di dati NHANES e Goldman e Becklake16 che sono inclusi nel software pletismografo.
3. volumetrico capnografia
Nota: Passaggi 3.1 – 3.4 vengono eseguiti prima dell'arrivo dell'oggetto di ricerca.
4. analisi dei dati
Pletismografia rappresentante risultati sono riportati in Figura 4. Questo partecipante richiesto quattro tentativi al fine di raccogliere tre valori FRC con < 5% variabilità dalla mean.%Ref riflette la percentuale del valore stimato per ogni variabile basato su equazioni di regressione della popolazione che tengano conto sesso, età, razza, altezza e peso
Figura 1 (in alto) Mostra un rappresentanza capnogramma singolo utilizzato nell'analisi e nella figura 1 (in basso) Mostra i dati grezzi dell'intera sequenza della manovra. In Figura 1 (in basso), il capnogramma e traccia del flusso non sono allineate al conto per il tempo di ritardo. I dati generati dall'esecuzione di una sequenza di respiri attraverso la macro sono mostrati alla fine dei supplementari nella figura 2. Questo individuo aveva uno spazio morto di 0,266 L, un pendio di 0.523% CO2/l e un pendio normalizzato di 0,0826 L-1. Informazioni di qualità sulla manovra sono anche dato nelle colonne F, G, I, J e K. colonna F dà la portata nell'aria espirata media, con la deviazione standard nella colonna G. Il volume corrente espirato è dato nella colonna J e il valore R al quadrato per la pendenza è nella colonna K.
Dead space e pista tracciata come una funzione del volume polmonare sono riportati nella Figura 5. Nei pannelli a sinistra, dead space e pendenza sono tracciati rispetto al volume del polmone relativamente FRC, dove FRC = 0 L. I pannelli di destra, pendenza e del volume polmonare sono tracciati contro volume polmonare assoluta. In entrambi i casi, dead space e pendenza sono significativamente correlati al volume del polmone (p < 0,05 per tutte le analisi di regressione quattro). Questo suggerisce che dead space e omogeneità airways aumentare come aumenti di volume del polmone, anche se piccolo è conosciuto circa questa relazione in popolazioni con l'affezione polmonare o con la terapia del broncodilatatore. Lo sperimentatore può anche scegliere di utilizzare questi dati per descrivere il valore numerico di dead space e pendenza a volumi polmonari specifici (FRC, volume residuo, 50% della capacità polmonare totale, ecc.)3.
Figura 1. Campione capnogramma (in alto), con espirata CO2 (%) tracciata come una funzione del volume esalato. I, II e III indicano le tre fasi del capnogramma. La linea tratteggiata indica il volume dello spazio morto e la linea continua rappresenta la pendenza del plateau alveolare (fase III). La pendenza può essere diviso per l'area sotto il capnogramma (grigio sfumato, con l'etichetta A) cedere il pendio normalizzato. La sequenza di quattro respiro viene visualizzata nel pannello inferiore, seguito da un respiro sospiro per determinare la capacità funzionale residua. Ogni coppia di respiri è analizzata come una singola manovra. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 2. Installazione di apparecchiature per misure di capnographic. Mostrato in questa figura sono l'analizzatore pneumotach e gas richiesta per le misurazioni capnographic. Il monitor di sinistra e l'analisi sono utilizzati dal partecipante come guida nel generare il modello di flusso mentre vengono rispettate dati sul monitor giusto dallo sperimentatore. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 3. Le impostazioni per l'acquisizione del capnogramma volumetrica del canale. Flusso è raccolti nel canale 1, concentrazione di CO2 (%) raccolti nel canale 2, e il volume corrente viene calcolato nel canale 3. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 4. Dati rappresentativi pletismografo da un soggetto sano, maschio. Particolarmente rilevanti per il protocollo riportato che qui sono la capacità polmonare totale (TLC), volume residuo (RV) e la capacità funzionale residua (FRC). Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 5. Morto spazio e alveolare pendio tracciati in funzione del volume polmonare assoluta (pannelli di destra) e come il volume rispetto alla capacità funzionale residua (volume-FRC, a sinistra). Nota la dipendenza dell'eterogeneità vie aeree del polmone e del volume il volume polmonare. Volume polmonare può essere espressa come una funzione del volume assoluto, a seconda del design sperimentale o FRC. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Nella figura 6. Fattori che influenzano la precisione dei dati. Dati sono dati come l'intervallo di confidenza del 95% di media ±. Relazione tra la frequenza di campionamento di CO2 e il tempo di ritardo tra l'analizzatore di gas e pneumotach (in alto). Il tempo di ritardo deve essere accuratamente determinato prima di iniziare l'esperimento. Misura totale otto manovre consente la misurazione dello spazio morto ad un volume di polmone singolo con < 5% variabilità (in basso). Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Qui, viene fornito un protocollo per la misurazione di omogeneità diD e airways V (pendio). Possono essere misurati in FRC, o come una funzione del volume polmonare. FRC di misurazione prima dell'inizio dell'esperimento e dopo una perturbazione permette a VD e pendio di essere tracciati in funzione del volume polmonare e può fornire informazioni utili circa il rapporto struttura-funzione del polmone che non viene ottenuto da capnografia al FRC da solo.
Vie aeree volume e struttura ad alta risoluzione possono essere ottenuti da formazione immagine tomografica computata17,18, ma questo richiede l'esposizione a radiazioni e competenza nell'elaborazione dell'immagine. Con capnografia volumetrica, misure ripetute possono essere fatto senza aumentare il rischio per il partecipante. Inoltre non richiede costose attrezzature o capacità di elaborazione avanzata dei dati. Capnografia volumetrica è un metodo ideale per esperimenti con più punti di tempo e più volumi polmonari e popolazioni in regime di ricovero, cui l'esposizione a radiazioni deve essere ridotto al minimo.
Per quanto riguarda la pletismografia barometrica, si dovrebbe prestare attenzione per eseguire la misurazione secondo dichiarazioni di consenso. Quando è importante confrontare i valori partecipanti ai valori di popolazione prevista, il peso dovrebbe essere misurato con una scala e altezza deve essere verificata con un stadiometro. Come indicato nel protocollo, il componente più critico per misurare prima inizio capnografia volumetrica è il tempo di ritardo tra la pneumotach e l'analizzatore di gas. Il tempo di ritardo dipende fortemente la frequenza di campionamento analizzatore (Figura 5, top) e piccoli cambiamenti del tasso di campionamento possono avere grande influenza sui valori misurati. Il tasso di flusso analizzatore deve essere controllato all'inizio e in tutto l'esperimento. Calibrazione dell'analizzatore e pneumotach sono anche critico e cura dovrebbe essere presa per assicurare la loro esattezza prima di iniziare un esperimento.
Abbiamo anche determinato la precisione della misurazione a un volume di polmone singolo a 3 partecipanti. Figura 5 (in basso) dimostra che è necessario completare quattro manovre (8 respirazioni totale) ad un volume di polmone singolo per misurare lo spazio morto, in modo che la variazione è < 5%. Gli investigatori dovrebbero aver cura di assicurarsi un numero sufficiente di misure quando è importante avere dati a volume polmonare particolare. In un sottogruppo di 36 manovre analizzati in duplicato da due ricercatori, intra-investigatore analisi variabilità è stata inferiore allo 0,5%.
Questi metodi richiedono anche un tecnico o un investigatore che è abile nel coaching il partecipante per rendere le manovre ventilatorie. Una limitazione negli studi di funzione polmonare può essere la capacità del partecipante di eseguire la manovra. Tuttavia, i partecipanti che sono in grado di eseguire la funzione polmonare clinica sono in genere in grado di eseguire le manovre di capnographic. Se lo studio è progettato per capnografia segue pletismografia e spirometria, i partecipanti che sono in grado di eseguire una manovra spirometrica o pletismografica allenata possono essere escluso. Negli studi precedenti 60, un partecipante che ha effettuato spirometria clinica è stato escluso perché non potrebbero seguire il pattern respiratorio capnographic. Attualmente non esistono linee guida consenso definendo criteri di misurazione capnographic accettabile. Tuttavia, la variabilità del intersubject è 8±1% della portata del bersaglio in nostri 10 partecipanti più recente. Variabilità intrasoggettiva (tra manovra) è 4±2%.
Questioni relative alla riproducibilità e accuratezza dei dati sono il risultato di errori nel tempo di ritardo o la calibrazione analizzatore e pneumotach. Prima di ogni esperimento, prendersi cura di calibrare l'analizzatore con un insieme di gas noti e generare una curva standard multi-punto per confermare la precisione dell'analizzatore.
Oltre l'ambito delle informazioni fornite qui, la macro contiene due ulteriori calcoli che possono essere di interesse. Quando le manovre vengono effettuate presso FRC, la colonna FRC fornisce una stima della FRC basato sul metodo ferri19. Calcolo della periferica bronchiale area trasversale si basa sul metodo descritto da Scherer, et al. 20. Infine, se lo si desidera, la fine delle maree CO2 e media scaduto CO2 concentrazione può essere utilizzati per calcolare lo spazio morto fisiologico per il confronto a spazio morto anatomico21,22.
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Questo lavoro è stato finanziato dal dipartimenti di salute e fisiologia umana e medicina interna presso la University of Iowa. Quest'opera è stata sostenuta anche dal vecchio oro Fellowship (Bates) e Grant IRG-15-176-40 dall'American Cancer Society, somministrato attraverso The Holden completa Cancer Center at The University of Iowa (Bates)
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Computer with dual monitor | Dell Instruments | ||
PowerLab 8/35* | AD Instruments | PL3508 | |
LabChart Data Acquisition Software* | AD Instruments | Version 8 | |
Gemini Respiratory Gas Analyzer* (upgraded option) | CWE, Inc | GEMINI 14-10000 | *indicates that part is available in the Exercise Physiology package from AD Instruments |
Heated Pneumotach with Heater Controller* (upgraded option) | Hans Rudolph, Inc | MLT3813H-V | |
3L Calibration Syringe | Vitalograph | 36020 | |
Nose Clip* | VacuMed | Snuffer 1008 | |
Pulse Transducer* | AD Instruments | TN1012/ST | |
Barometer | Fischer Scientific | 15-078-198 | |
Flanged Mouthpiece* | AD Instruments | MLA1026 | |
Nafion drying tube with three-way stopcock* | AD Instruments | MLA0343 | |
Desiccant cartridge (optional for humid environments)* | AD Instruments | MLA6024 | |
Resistor | Hans Rudolph, Inc | 7100 R5 | |
Flow head adapters* | AD Instruments | MLA1081 | |
Modified Tubing Adapter (optional) | AD Instruments | SP0145 | |
Two way non-rebreather valve (optional)* | AD Instruments | SP0146 | |
Plethysmograph | Vyaire | V62J | |
High Purity Helium Gas | Praxair | He 4.8 | |
6% CO2 and 16% O2 Calibration Gas | Praxair | Custom | |
Microsoft Excel | Microsoft | Office 365 |
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