La cromatografia liquida ad alte prestazioni, o HPLC, è una tecnica analitica che separa i campioni liquidi ad alte pressioni. Uno strumento HPLC è formato da bottiglie di vetro per conservare i solventi chiamate serbatoi di fase mobile. I solventi di grado HPLC vengono usati per mantenere un'elevata purezza, e i gas disciolti vengono rimossi usando un degassatore, come un sistema di pompaggio a vuoto o uno sparging con elio. I solventi vengono quindi pompati nella colonna analitica utilizzando una siringa a vite o delle pompe alternative. La maggior parte degli strumenti HPLC moderni usa delle pompe a pistone alternative che creano un flusso di fase mobile pulsato, esso viene attenuato collegandole a uno smorzatore di impulsi. In alcune analisi, viene utilizzata l'eluizione a gradiente. Questa tecnica comporta la modifica graduale della composizione della fase mobile, che può migliorare la separazione di miscele complesse in base alla loro polarità. I ​​controllori di gradiente vengono usati per mantenere la portata dei solventi durante questo processo.

Prima che la fase mobile raggiunga la colonna, il campione viene introdotto nell'iniettore ad anello o nell'autoiniettore. La fase mobile entra nella colonna insieme al campione, ed è riempita con una fase stazionaria. La colonna analitica è posizionata in un forno a colonna per mantenere una temperatura costante. A volte, vengono usate delle pre-colonne come le colonne scavenger e di guardia per proteggere la longevità della colonna. Una volta separati, i componenti dell'analita, viaggiano verso il rilevatore, che li identifica e converte i risultati in un cromatogramma visualizzato dal computer. Infine, l'eluente, il solvente che trasporta i componenti separati, va nei rifiuti o viene raccolto nel collettore frazionario.