שיטה זו מסייעת לענות אם פיצוץ פגיעה מוחית טראומטית גורמת לפגיעה בכלי הדם במוח ואם היקף ההשפעות משתרע על תגובה לקויה של כלי הדם המיוגניים. ההכנה העורקית בלחץ מבודד מאפשרת לנו להפריד את ההשפעות הישירות של חשיפה לפיצוץ על העורקים המוחיים מההשפעות עקיפות הנגרמות על ידי חשיפה לפיצוץ למוח. ניתן להשתמש בתכשירים עורקיים מבודדים בלחץ כדי לחקור את תפקוד כלי הדם במגוון מחלות או תנאים, כולל שבץ, יתר לחץ דם ולאחר מכן סוכרת.
מטרת המחקרים שלנו היא לזהות את הטיפולים לשמור על היכולת של זרימת הדם במוח כדי להגן על המוח מפני ההשפעות המזיקות של דימום. תדגים את הנהלים היום תהיה מגי פטרוזיליה, עוזרת מנהל המעבדה שלנו ויפינג זנג, טכנאי המחקר הראשי שלנו. כדי להכין את סימולטור הפיצוץ המתקדם, או ABS, השתמש בפיסת סרט מיסוך באורך 2.54 ס"מ כדי קלטת לאורך הקצה העליון של ארבעה גיליונות Mylar מוערמים מראש.
באמצעות פיסת קלטת שנייה, לאבטח את הקצה העליון של קרום Mylar לראש תא ההרחבה מעל מרכז הפתח בין הנהג ותאי הרחבה. החלף את שני מוטות כל החוט בחלק העליון של התא ולהדק ביד את כל אגוזי הכובע המקיפים את התא כדי לאבטח את תא הנהג נגד קרום Mylar. הדקו את ידית משאבת היד ההידראולית והתבוננו בסף לחץ מתמיד על המד ההידראולי כדי לאשר שתא הנהג נותר בלחץ ללא דליפות.
לאחר מכן פתח את קובץ רכישת הגורם המפעיל שרשומות ABS פיצוץ התקן לחץ עקבות במחשב התקן הפיצוץ ABS. כדי להכין את החולדה הרדמה לפציעה, להשתמש פינצטה להרים ארוך למקם את הלשון בצד ולנגב לאורך החלק הפנימי של הגרון עם קצה צמר גפן ספוג לידוקאין לפני בעדינות החדרת stylette המכיל צינור endotracheal לתוך קנה הנשימה. לאחר צנרור, להכניס את הקצה של צינור ההנשמה לקצה החיצוני של הצינור endotracheal ולצפות ולאשר כי החולדה נושמת בהתמדה וללא קושי.
לאחר מכן, הסר את מגש הדגימה ABS מתוך תא הדגימה וחמם את המגש מתחת למנורת חום. בזמן שהמגש מתחמם, מגלחים את החלק העליון של הקרקפת מלמעלה לעיניים אל בין האוזניים ולהשתמש במספריים כדי לחתוך תקע אוזניים קצף בגודל סטנדרטי מהבסיס לקצה מעוגל לתוך חצאים אנכיים זהים. לאחר מכן הכנס חתיכה חצויה לתוך כל קצה האוזן, תחילה לאורך תעלת האוזן, עד למגע עם הממברנה הטימפנית.
הסרת צינור מכונת ההנשמה מצינור ההנשמה, במהירות אך בעדינות להחליק את החולדה לתוך הקצה העליון של מגש הדגימה, בזהירות מנחה את הראש דרך פתח מחזיק הראש צווארון גומי. כאשר החולדה נמצאת במקום, הכנס מחדש את צינור ההנשמה בחזרה לצינור ההנשמה וודא כי צווארון הגומי מאובטח היטב, אך לא בחוזקה סביב הצוואר, כי החולדה שוכבת בתחנה נוטה לאורך. לאחר מכן לנעול ולאבטח את מגש דגימת ABS המכיל את החולדה הרדמה לתוך תא הדגימה ABS בעדינות לצבוט את בהונות הכפות האחוריות עם פינצטה ארוכה כל שלוש שניות עד תגובת רפלקס נסיגה הוא עורר.
לחץ על התחל בדף הרכישה שנפתח במחשב התקן הפיצוץ ABS ולחץ והחזק את ההדק של התקן הפיצוץ ABS בחלון הרכישה עד הפיצוץ מתפוצץ, קרע את קרום Mylar וניהול פציעת הפיצוץ ABS. מיד לאחר הפיצוץ מתפוצץ, להתחיל שעון משנה שני כדי לעקוב אחר כמה זמן יעבור בתוך דקות ושניות עד זכויות החולדה עצמה, לאחר פציעה, ולמקם את החולדה בתדר supine על כרית כחולה והתחממות להערכת דיכוי רפלקס הדירוג. כדי לחלץ את עורק המוח האמצעי, השתמש בלהב אזמל מספר 10 כדי ליצור חתך מרכזי בעומק עצם של 1.5 אינץ' מהחלק העליון של הקפסה המגולחת לתרנגול העורפי ולהשתמש ברונגורים עצם קטנים כדי לפתוח ולהפריד את עור הקרקפת מעצם הגולגולת.
באמצעות רונגורים עצם גדולים, לחתוך ולחלץ את העורף, interparietal, ואת החצי התחתון של העצמות הקדמיות העוטפות את המוח ולהשתמש מרית כירורגית כדי לחלץ בזהירות את המוח מן הגולגולת ברגע שהוא שוחרר של העצם שמסביב. הפקידו את המוח שנקטף לתוך צלחת פטרי קטנה מזכוכית המכילה תמיסת מלח פיזיולוגית צוננת, או PSS, על גוש קרח מוצק מתחת למיקרוסקופ מנתח, והסירו בזהירות הן את העורקים המוחיים האמצעיים השמאליים והימין, או MCAs, החל במעגל של ויליס והמשך צידי ודורסי במשך כארבעה עד חמישה מילימטרים. השתמש במקלפות מיקרו כדי לנקות בעדינות את מקטעי MCA שנאספו ולהוות את העורקים על עורק.
ניתן לאכלס את הקצה הפרוקסימלי של כל מקטע עם מיקרופיגט בקוטר 70 מיקרומטר ולאבטח את הפיפס עם תפרים של ניילון 10-O. לבלבל בעדינות את לומינה עם PSS כדי להסיר כל דם שיורית cannulate הקצה הדיסטלי של כל קטע עם micropipette השני מבלי למתוח את רקמת העורקים. אבטחו את המיקרופיטים עם סט שני של תפרים של ניילון 10-O והצבו את העורקים על הבמה של מיקרוסקופ הפוך המצויד במצלמה ובצג.
העלה את בקבוקי המאגר המחוברים למיקרופיטים לגובה המתאים מעל המקטעים כדי לצייד את מקטעי ה- MCA בלחץ של 50 מילימטרים של כספית למשך 60 דקות. בתום תקופת האקוויבילציה, קבעו את הבקבוקים בגבהים שונים זה לזה כדי לבחון את התגובות המשתלחות של כלי השיט, הורידו את בקבוקי המאגר כדי להפחית את הלחץ התוך-וסקולרי ל-80 מילימטרים של כספית ולאפשר למקטעים לצייד במשך 10 דקות. לאחר מכן, להפחית את הלחץ החוץ וסקולרי ל 60, 40, ו 20 מילימטרים של כספית, המאפשר למקטעים לצייד לאחר כל שינוי לחץ.
בגרף מייצג זה, קוטר העורקים מתואר על ציר Y כאחוז השינוי של הקוטר בלחץ בסיסי של 100 מילימטרים של כספית. על ציר ה-X, הלחצים האינטרוו-וסקולריים השונים שבהם נבדקו תגובות ההידולטור של העורקים מוצגים. עבור קבוצת הפציעות המזויפות, קטר ה-MCA עלה מעל קו הבסיס והמשיך להתהוות כרגיל כאשר הלחץ הבין-אלומינלי הופחת מ-100 ל-20 מילימטרים של כספית.
לעומת זאת, התגובות המתוחות של MCA לירידה המתמשכת בלחץ החוץ-וסקולרי בקבוצות הפציעות המוחיות הטראומטיות שנצפו במשך 30 ו-60 דקות הופחתו באופן משמעותי ביכולתן להתרחץ לאחר החשיפה לפיצוץ, מה שמצביע על פגיעה משמעותית בתגובות הוודילטוריות המוחיות ללחץ מופחת. טכניקות מיצוי כלי השיט, התאוששות, הרכבה ו שפע הן מורכבות ביותר, ויש לנקוט בכל מאמץ של טיפול מדויק בעת ביצוע הליכים אלה.
