מדידה טמפרטורת גוף העכבר באמצעות מד חום אינפרא אדום במהלך אנפילקסיס מערכתית פסיבי והערכה אלרגיה למזון

מתודולוגיה זו מסייעת לטפל בשאלות מפתח בתחום האלרגיה והאימונולוגיה, במיוחד אלה הנוגעות לפנוטיפים שעשויים להיות קשורים לשינויים בטמפרטורת הגוף. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא זולה, לא פולשנית, ואינו דורש הרדמה. ההשלכות של טכניקה זו מאפשרות לחוקרים להפחית את הלחץ והכאב של עכברים במהלך מדידת הטמפרטורה תוך ביטול ההשפעות של הרדמה, ו / או לדמיין פנוטיפים התנהגותיים.

כדי למדוד את טמפרטורת גוף העכבר לאחר הרדמה, לאשר הרדמה על ידי קצב הנשימה או חוסר תנועה ולתפוס את העכבר על ידי העורף של הצוואר עם אצבע ואגודל אינדקס והזנב עם אצבע זרת. תוך החזקת העכבר במקביל לפני השטח של ספסל המעבדה, מניחים חיישן מדחום אינפרא אדום מתחת לבטן התחתונה עם המשטח השטוח החיצוני של המדחום במרחק של שניים עד חמישה מילימטרים מפני השטח של הבטן בין שתי הפטמות העליונות. ואז לדכא את ההדק של המדחום כדי למדוד את הטמפרטורה של החיה, דואג לשמור על העכבר ואת המדחום יציב.

כדי למדוד את טמפרטורת גוף העכבר ללא הרדמה, להרים את העכבר עד אמצע הזנב ולחשוף את הבטן. אפשר לעכבר להיאחז במשטח קצה ישר עם התרפסות שלו ולהחזיק את ההדק כדי למדוד את הטמפרטורה. לחלופין, אפשר לעכבר להיאחז בקצה הישר העליון של המדחום ולהפוך את העכבר לשבת על פני השטח השטוחים החיצוניים של המדחום עם הבטן שלו ממש מעל חיישן אינפרא אדום במהלך מדידת הטמפרטורה.

עבור רגישות אנפילקסיס מערכתית פסיבית להשתמש מזרק אחד מיליליטר מצויד מחט מד 26 להזריק 200 microliters של Anti-Dinitrophenol מוכן טרי, או DNP, IgE ב PBS, לתוך הצפירה של כל חיה הנמען רק צדי עד קו האמצע בין הפטמות הנחותות ביותר והשני הנחות ביותר. 24 שעות לאחר ההזרקה, למדוד את טמפרטורת הגוף של כל חיה הנמען כפי שהוכח, טען מזרק אחד מיליליטר מצויד מחט 30 מד עם 100 microliters של אלבומין סרום אנושי DNP מוכן טרי. כדי לגרום לאנפילקסיס מערכתי פסיבי, הכנס את המחט בצד המדיאלי של העין בזווית רדודה המכוונת מאחורי העין, והזרק את כל נפח הפתרון דרך הווריד לסינוס הוורידי רטרו-מסלולית.

לאחר מכן מניחים את העכבר לבד בכלוב התאוששות עם ניטור עד שיקום מלא, ולמדוד את טמפרטורת הגוף ופעילות כל 10 דקות במשך 70 דקות. עכברים רגישים IgE להדגים ירידה בטמפרטורה מקסימלית של שלוש מעלות צלזיוס ב 20 דקות בעוד עכברים שליטה PBS להפגין ירידה מקסימלית של 1.1 מעלות צלזיוס בתוך אותה תקופה לאחר האתגר. תצפיות התנהגותיות יכולות להתבצע גם בבעלי חיים שאינם הרדמה כדי להעריך את הקשר בין טיפות הטמפרטורה שנצפו לבין פעילות העכבר.

באתגר זה של אלרגיה למזון עכברים, קבוצת הביקורת PBS הראתה ירידה משמעותית בטמפרטורה 10 דקות לאחר האתגר בהשוואה לקבוצת המעכבים 2CA שטופלו. הערכת ציוני הפעילות וירידה בטמפרטורה מאתגר אלרגיה למזון זה חשפה מתאם מובהק סטטיסטית בין שתי קבוצות הנתונים. בעקבות הליך זה, ניסויים אחרים מעורבים מדידות טמפרטורת הגוף של העכבר יכול להתבצע כדי לענות על שאלות נוספות לגבי פנוטיפים התנהגותיים הקשורים לשינוי טמפרטורת הגוף.