צנרור שבעל-פה של דג זברה למבוגרים: מודל להערכת ספיגת מעיים של תרכובות ביו

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום חיסון רירית, כגון כיצד רירית המעי ספיגת תרכובות ביולוגיות וכיצד ביולוגים כאלה לווסת את המערכת החיסונית באתר המקומי לאחר צנרור. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שזה פשוט להגדיר, מהיר, ומראה שיעורי תמותה נמוכים. שיטה זו יכולה לספק תובנה על חיסון ריר.

זה יכול להיות מיושם גם על תרכובות אחרות, כגון כימיקלים, רעילים, או פתוגנים. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית כמו צנרור הפה וצעדי ניתוח מעיים, אתה צריך להיות זהיר כי באינקובציה אתה יכול לפגוע זברה ולגרום למוות. בניתוח, סוף המעי הוא עדין מאוד שביר.

מניחים כ סנטימטר אחד של צינורות סיליקון עדין על מחט 31-מד Luer-lock. חותכים קצה פיפטה סטרילי 10 מיקרוליטר מסנן, לקחת את הקצה עדין, ולמקום אותו על צינור הסיליקון כמו נדן. כדי להתחיל, חבר את מנגנון המחט למזרק 100 מיקרוליטר לואר-לוק.

ראשית, להעביר את הדגים למיכלי הניסוי לילה אחד לפני הניסוי. Vortex פתרון חלקיקים מוכן היטב, ולצייר את הנפח הרצוי של ההשעיה. לאחר הרדמה בטוחה של הדגים, השתמש ברשת כדי להעביר במהירות את הדגים למגש פלסטיק רטוב.

לכוון את החיה אופקית כדי להתמודד עם המחט. בזהירות לתמוך בדגים ביד אחת, ולפתוח את הפה עם המחט מוגנת. לאחר מכן, הכנס בעדינות את המחט במורד הוושט לס"מ אחד מפתיחת הפה.

קשה לראות כמה רחוק המחט צריכה ללכת, וזה עניין של תרגול. אתה תרגיש את המחט כפי שהוא מוצא עצירה, ולאחר מכן על ידי מניפולציה המחט, תמצא את הזווית הנכונה כדי להכניס את המכשיר קצת יותר. לאט להזריק את ההשעיה חלקיקים לתוך הדג, להבטיח את ההשעיה לא לזרום החוצה דרך הזימים או הפה.

לאחר מכן, בעדינות להסיר את המחט, ולמקום את הדגים לתוך מיכל התאוששות. בעוד הדג מתאושש, לפקח על הדגים לכל חריגות. ברגע שהדגים התאוששו, תחזירו אותו לאחד ממיכלי הניסוי.

לאחר המתת חום הדגים על פי פרוטוקול הטקסט, מניחים את הדגים על פיסת נייר סינון. באמצעות מספריים ניתוח חד, לעשות חתך מעגלי למחצה מן פי הטבעת אל אופרקולום, ולפתוח את החתך עם פינצטה עדינה. לאחר מכן, לחתוך את שני הקצוות של המעי, להוציא את כל האיברים הפנימיים, ולה מניח אותם על נייר המסנן.

לאחר מכן, להפריד את המעי מן האיברים הפנימיים, למתוח אותו, דואג להשיג את כל המעי. לבסוף, להשתמש פינצטה לגלגל את המעי על נייר המסנן כדי לנתק את רקמת דבק. באמצעות פרוטוקול זה, זברה של סקס מעורב היו צנרר בהצלחה עם חלקיקי חלבון רקומביננטי שונים.

באמצעות מכשיר צנרור אוראלי תוצרת בית, אחוז ממוצע נמוך של תמותה הושג. כדי להעריך את המסירה של גופי הכללת חלקיקים פלואורסצנטיים שנעשו עם אלפא TNF רקומביננטי, בוצע ניתוח ציטומטריה. הכמות הכוללת של תאים פלואורסצנטיים הייתה גבוהה משמעותית בקבוצה עם צנר-חלקיקים מאשר בקבוצת הביקורת הן חמש והן 24 שעות לאחר צנרור.

ציוד ההטמעה זול, מדויק וניתן לשימוש חוזר. כל הליך צנרור יכול להיעשות מהר מאוד על ידי אופרטור אחד, וחשוב, השיטה עקבית בין אופרטורים שונים. השילוב של שיטת הינטובציה שלנו עם ניתוח במורד הזרם יכול להיות אידיאלי לפיתוח חיסון אוראלי.