הפיתוח של פרוטוקול זה הוקם על ידי IPA האדריאטי מעבר לגבול שיתוף פעולה תוכנית 2007-2013, במסגרת הפרויקט DeFishGear (1 ° str / 00,010).

1. דגימה של חלקיקים על פני הים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפרוס את הרשת מאנטה מהצד של כלי שיט באמצעות בום Spinnaker או »A-מסגרת« באמצעות קווים karabiners. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפרוס את רשת מאנטה מחוץ לאזור בעקבות (כ 3 -. מרחק 4 מ מהסירה) כדי למנוע איסוף מים מושפעי מערבולת בתוך אזור השרות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את נקודות ציון הראשוניות וזמן ראשוני בגיליון הנתונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל לנוע בכיוון אחד ישר עם מהירות של כ. 2 - 3 קשרים למשך 30 דקות ולהתחיל מדידת הזמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 30 דקות לעצור את הסירה ולרשום קואורדינטות GPS סופיים, אורך המסלול (הדרך הנכונה ביותר היא לחשב את האורך מן קואורדינטות GPS) ואת מהירות סירה הממוצעת לתוך גיליון הנתונים המסופק ולהרים את רשת מאנטה מתוך המים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את רשת מאנטה ביסודיות מהחלק החיצוני של הרשת עם מי ים באמצעות משאבת צוללת או מים מן wa הסירהמאגר ter. לשטוף בכיוון מפיו מאנטה עד הסוף בקלה כדי לרכז את כל חלקיקי דבקה נטו לתוך סוף בקלה. הערה: לעולם אל לשטוף את המדגם דרך הפתח של הרשת על מנת למנוע זיהום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בבטחה להסיר סוף בקלה מסננת את הדוגמה בקלה לסיים דרך מסננת גודל רשת 300 מיקרומטר או פחות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוטפים את סוף בקלה ביסודיות מבחוץ ויוצקים את שאר המדגם דרך המסננת. חזור על שלב זה עד שאין עוד כל חלקיקים בתוך סוף בקלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכז את כל החומר על המסננת בחלק אחד של המסננת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם השימוש של משפך, לשטוף את המסננת לתוך צנצנת זכוכית או בקבוק פלסטיק באמצעות אתנול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את הבקבוק, לנגב אותו עם מגבות נייר לתייג את המכסה החיצוני של הצנצנת עם שם המדגם ותאריך עם סמן עמיד למים (כדאי גם לשים תווית שנייה כתובה בעיפרון על נייר וִילוֹנוֹת בצנצנת על מנת להימנע מהפגיעה האפשרית שֶׁלשם המדגם בשל התווית נמחקה על הצנצנת). עבר בקבוק פלסטיק שכותרתו לתוך התיבה המגניבה. הערה לתנאי דגימה כלליות: מהירות הרוח לא צריכה להיות יותר מ -2 בופור, מאז הגלים גבוהים מדי ואת הנקי אינו יציב על פני הים. חשוב לשמור על מסלול ליניארי יציב במהירות קבועה במהלך trawls. מחצית הפתיחה נטו מאנטה צריכה להיות קומטי במהלך דגימה. משך הדגימה צריך להיות 30 דקות (במקרים בהם קיימת כמות גדולה של חומר טבעי, בלום פלנקטון למשל, משך הדגימה יכול להיות קצר יותר). יש להימנע משימוש של כלי פלסטיק ומיכלי. הימנעו בגדים סינטטיים (צמר למשל), חבלי קשר של נטו מאנטה עם כלי על מנת למנוע זיהום של המדגם. להיזהר מאוד שלא לפגוע נטו מאנטה או גוף הסירה תוך פריסת לכידת הרשת. </li></ol> 2. הפרדת חלקיקי ממדגמים פני הים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם המדגם אינו מכילכל פריט גדול מ -25 מ&quot;מ ומופיע להיות נקי, להמשיך ישירות לשלב 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יוצקי מדגם דרך המסנן (גודל רשת מיקרומטר ≤300) ולהסיר את כל אובייקטי ההמלטה טבעיות או מלאכותיים של מ&quot;מ גודל&gt; 5 (המלטת מאקרו מצו) מן המדגם, באמצעות זיהוי פינצטה חזותי. היזהר לשטוף כל אובייקט סיר בזהירות עם מים מזוקקים כדי להסיר כל המלטת חלקיקי פלסטיק דבקה בו. אחסן את כל אובייקטי ההמלטה טבעיים ומלאכותיים מיכלים נפרדים. לייבש את כל אובייקטי ההמלטה טבעיות ומלאכותיים ייבוש (או באוויר הפתוח, אבל בצלחת סגורה) ולשקול אותם. לזהות את כל אובייקטי המלטה&gt; 25 המ&quot;מ (המלטת מאקרו) על פי רשימת ריבונו של קטגוריות של פריטי זבל 16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הסרת כל האובייקטים הגדולים, לרכז את כל החלקים הנותרים בחלק אחד של המסננת באמצעות בקבוקי לחיצים או מי ברז. יוצק את המדגם לתוך מיכל זכוכית באמצעות כמות מינימאלית של אתנול 70% עם העזרה של funnאל. הערה: בשלב זה את השימוש באתנול 70% הוא חיוני כדי לשמר את המדגם. גם בשלב של בדיקה ויזואלית של המדגם, אתנול עוזר לטשטש את האורגניזמים פלסטיק צבעוני ולכן להיות קל יותר למצוא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח כמות קטנה של המדגם (subsample) ושופכים אותו לתוך צלחת זכוכית פטרי. לנתח את המדגם עם שימוש סטראו (20 - 80x זום) ולחפש חלקיקי חלקיקי פלסטיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל חלקיק חלקיקי פלסטיק צריך להיות מסווג לתוך אחת הקטגוריות המפורטות בטבלת 1 והכניס לתוך צלחת פטרי או צלוחיות זכוכית אחרות, מסמנת בשם קטגוריה. צלחת פטרי צריכה להיסגר בכל העת. הערה: כאשר מפרידים חלקיקים מהמדגם שלך להיות שמרניים ובוחרים יותר ולא חלקיקים פחות לניתוח. המבנה הכימי האמיתי של חלקיקים עדיין ייקבע בהמשך. הקפד לנתח עצמים גדולים מכל העבר כמו חלקיקים עלולים להיתקע ולכן מוסתרים תחת פריטים גדולים יותר.זה יכול להיות גם מועיל להזיז חפצים נתחו כבר בצד אחד של צלחת פטרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את צלחת פטרי תחת מיקרוסקופ עם ציוד המדידה (שליט עיני מכויל על ידי תוכנת ניתוח שקופיות או תמונת מיקרומטר) ולמדוד את הגודל של כל חלקיק (למדוד את הארוך באלכסון), למעט חוטים, ושים לב צבעיו. כל subsample צריך להיבדק על ידי אדם אחר. היזהר לשטוף את מכל הזכוכית המכיל את המדגם כך שכל החלקיקים דבקים קירות הזכוכית נשטפים לתוך צלחת פטרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את חלקיקי חלקיקי הפלסטיק של כל קטגוריה בנפרד על ידי שימוש בקנה מידה אנליטית. חלקיקי חלקיקי פלסטיק צריכים להיות מיובשים לפני השקילה. צלחת פטרי הסגורה ניתן להכניס ייבוש או הדגימות ניתן לייבוש בצלחת סגורה עד חלקיקים התייבשו (המשקל של צלחת פטרי סגורה עם חלקיקים הוא קבוע). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה המלטה מיקרו. כשמנתחי מדגם בחיפוש אחר חלקיקים, אנא שקלו כיחלקיקים מסוימים יהיו גלויים בקלות (צבע, צורה, גודל), בעוד שאחרים עשויים להיות מסובכים למצוא. להלן כמה תכונות לזהות חלקיקי חלקיקי פלסטיק במדגם: לדוגמה, אין מבנה תא, אחידות, חד, זוויות עקומות, עובי אחיד, צבעים מיוחדים (כחול, ירוק, צהוב, וכו &#39;). </li></ol> 3. זיהוי כימי של חלקיקים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספקטרוסקופיה ATR-FTIR <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני הניתוח לנקות את מערכת זיהוי עם אלכוהול ומטלית חינם מוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קלט ספקטרום רקע. מניחים את המדגם על בעל מדגם ולאסוף את הספקטרום. זהה את ספקטרום ATR- FTIR שהושג באמצעות השוואה אוטומטית של הספקטרום המתקבל עם ספקטרום במסד נתונים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספקטרוסקופיה מיקרו ATR-FTIR <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני הניתוח לנקות את מערכת זיהוי עם אלכוהול ומטלית חינם מוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המדגם על פילטר זכוכית. הערה: מסננים אחרים יכולים להיות לנוed אבל טבע הפולימר שלהם יכול להפריע אפיון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את המסנן עם המדגם על שולחן הסריקה האוטומטי ולהשתמש ג&#39;ויסטיק לאתר המדגם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקליט תמונה אופטית ולסמן בשטח (למשל 20 ב -20 מיקרומטר) שבו המדגם יאופיין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קלט ספקטרום רקע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המדגם על בעל מדגם ולאסוף את הספקטרום במיקום מוגדר מראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את ספקטרום ATR-FTIR מיקרו שהושג באמצעות השוואה אוטומטית של הספקטרום המתקבל עם ספקטרום במסד נתונים. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Law, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plastic+accumulation+in+the+North+Atlantic+subtropical+gyre.">Plastic accumulation in the North Atlantic subtropical gyre.</a> Science. 329 (5996), 1185-1188 (2010).</li><li>Thompson, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastics+in+the+marine+environment:+Sources,+consequences+and+solutions.">Microplastics in the marine environment: Sources, consequences and solutions.</a> Marine anthropogenic litter. , 185-200 (2015).</li><li>Lusher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastics+in+the+marine+environment:+distribution,+interactions+and+effects.">Microplastics in the marine environment: distribution, interactions and effects.</a> Marine anthropogenic litter. , 245-307 (2015).</li><li>Arthur, C., Baker, J., Bamford, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Proceedings of the International Research Workshop on the Occurrence, Effects, and Fate of Microplastic Marine Debris, September 9-11. , (2008).</li><li>Andrady, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastics+in+the+marine+environment.">Microplastics in the marine environment.</a> Marine pollution bulletin. 62 (8), 1596-1605 (2011).</li><li>Browne, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sources+and+pathways+of+microplastics+to+habitats.">Sources and pathways of microplastics to habitats.</a> Marine anthropogenic litter. , 229-244 (2015).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marine+litter:+an+analytical+overview.">Marine litter: an analytical overview.</a> UNEP's REGIONAL SEAS PROGRAMME. , (2005).</li><li>van der Wal, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> SFRA0025: Identification and Assessment of Riverine Input of (Marine) Litter, Final Report for the European Commission DG Environment under Framework Contract No ENV.D.2/FRA/2012/0025. , (2015).</li><li>Set&#228;l&#228;, O., Fleming-Lehtinen, V., Lehtiniemi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ingestion+and+transfer+of+microplastics+in+the+planktonic+food+web.">Ingestion and transfer of microplastics in the planktonic food web.</a> Environmental pollution. 185, 77-83 (2014).</li><li>Farrell, P., Nelson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trophic+level+transfer+of+microplastic:+Mytilus+edulis.+(L.)+to+Carcinus+maenas+(L).">Trophic level transfer of microplastic: Mytilus edulis. (L.) to Carcinus maenas (L).</a> Environmental Pollution. 177, 1-3 (2013).</li><li>Wright, S. L., Thompson, R. C., Galloway, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+physical+impacts+of+microplastics+on+marine+organisms:+a+review.">The physical impacts of microplastics on marine organisms: a review.</a> Environmental Pollution. 178, 483-492 (2013).</li><li>Bakir, A., Rowland, S. J., Thompson, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transport+of+persistent+organic+pollutants+by+microplastics+in+estuarine+conditions.">Transport of persistent organic pollutants by microplastics in estuarine conditions.</a> Estuarine, Coastal and Shelf Science. 140, 14-21 (2014).</li><li>Cole, M., Lindeque, P., Halsband, C., Galloway, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastics+as+contaminants+in+the+marine+environment:+a+review.">Microplastics as contaminants in the marine environment: a review.</a> Marine pollution bulletin. 62 (12), 2588-2597 (2011).</li><li>Zarfl, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastics+in+oceans.">Microplastics in oceans.</a> Marine Pollution Bulletin. 62, 1589-1591 (2011).</li><li>Hanke, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> MSFD GES technical subgroup on marine litter. Guidance on monitoring of marine litter in European Seas. , (2013).</li><li>L&#246;der, M. G. J., Gerdts, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methodology+used+for+the+detection+and+indentification+of+microplastics+-+A+critical+appraisal.">Methodology used for the detection and indentification of microplastics - A critical appraisal.</a> Marine anthropogenic litter. , 201-227 (2015).</li><li>Kang, J. H., Kwon, O. Y., Lee, K. W., Song, Y. K., Shim, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marine+neustonic+microplastics+around+the+southeastern+coast+of+Korea.">Marine neustonic microplastics around the southeastern coast of Korea.</a> Marine pollution bulletin. 96 (1), 304-312 (2015).</li><li>Lusher, A. L., Tirelli, V., O'Connor, I., Officer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastics+in+Arctic+polar+waters:+the+first+reported+values+of+particles+in+surface+and+sub-surface+samples.">Microplastics in Arctic polar waters: the first reported values of particles in surface and sub-surface samples.</a> Scientific reports. 5, (2015).</li><li>Shu, J. -. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+Marangoni+waves+due+to+impulsive+motion+of+a+submerged+body.">Transient Marangoni waves due to impulsive motion of a submerged body.</a> International Applied Mechanics. 40 (6), 709-714 (2004).</li><li>Rabaud, M., Moisy, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ship+wakes:+Kelvin+or+Mach+angle.">Ship wakes: Kelvin or Mach angle.</a> Physical Review Letters. 110 (21), 214503 (2013).</li><li>Hidalgo-Ruz, V., Gutow, L., Thompson, R. C., Thiel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastics+in+the+marine+environment:+a+review+of+the+methods+used+for+identification+and+quantification.">Microplastics in the marine environment: a review of the methods used for identification and quantification.</a> Environmental science &amp; technology. 46 (6), 3060-3075 (2012).</li><li>L&#246;der, M. G. J., Kuczera, M., Mintenig, S., Lorenz, C., Gerdts, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+plane+array+detector-based+micro-Fourier-transform+infrared+imaging+for+the+analysis+of+microplastics+in+environmental+samples.">Focal plane array detector-based micro-Fourier-transform infrared imaging for the analysis of microplastics in environmental samples.</a> Environmental Chemistry. 12 (5), 563-581 (2009).</li><li>Ioakeimidis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+degradation+potential+of+PET+bottles+in+the+marine+environment:+An+ATR-FTIR+based+approach.">The degradation potential of PET bottles in the marine environment: An ATR-FTIR based approach.</a> Scientific reports. 6, 23501 (2016).</li><li>McDermid, K. J., McMullen, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+small-plastic+debris+on+beaches+in+the+Hawaiian+archipelago.">Quantitative analysis of small-plastic debris on beaches in the Hawaiian archipelago.</a> Marine pollution bulletin. 48 (7), 790-794 (2004).</li><li>Eriksen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microplastic+pollution+in+the+surface+waters+of+the+Laurentian+Great+Lakes.">Microplastic pollution in the surface waters of the Laurentian Great Lakes.</a> Marine pollution bulletin. 77 (1-2), 177-182 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

<html> דגימת חלקיקים על פני הים על ידי נטו מאנטה היא שיטה בשימוש נרחבת עבור הדגימה של חלקיקים על פני הים, אך עד כה לא חלה כל מתודולוגיה אחידה. כמויות גדולות של מים ניתן לסנן דרך רשת מאנטה, ובכך את האפשרות של לכידת מספר רלוונטי של חלקיקי גבוה והתוצאות נתפסות כאמינה. השוואה של תוצאות בקרב מדגמים שונים מובטחת על ידי נורמליזציה. במקרה שלנו, הריכוזים היו קשורים לאזור שנדגמו על ידי הכפלת מרחק מכמורת ידי הרוחב האופקי של הפתח נטו. אפשרות נוספת היא להשתמש מד זרימה, קבוע בפתיחת נטו. שימוש מד זרימה אפשרי מאז נטו מאנטה עם הכנפיים לרוחב שלה הוא מאוד יציב על פני הים ולכן מקפץ על הגלים הוא מינימאלי. מד זרימה מתעד את נפח מים מסוננים ובכך מאפשר הנורמליזציה של תוצאות בכל נפח המים שנדגמו 16. &gt; רשתות מאנטה השכיחות ביותר יש סביב 300 מיקרומטר רשת בגודל 3 - 4.5 מ &#39;ארוכים. ממדים אלה היו אופטימיזציה כדי למנוע סתימה של הרשת כדי לאפשר דגימת נפח מים גדולים ככל האפשר. Trawling מהירות מומלץ להיות בין 2 - 3 קשרים, אבל זה תלוי גובה הגל, מהירות הרוח והזרמים בים. זה מאוד חשוב כי נטו מאנטה מצוי בהשגחה כל הזמן במהלך הדגימה ואם זה מתחיל לדלג, מהירות trawling חייב להיות מופחת. השעה trawling מומלץ להיות כ -30 דקות, אך הדבר תלוי בריכוזים seston. זה יכול לקרות כי seston לפעמים סותם את נטו מאנטה. במקרה זה trawling צריך להיפסק מיד, אחרת חלקיקים חלקיקי הפלסטיק יכול להיאבד ברשת יכול להיפגע. נטו Manta הוא קבוע בדרך כלל מהצד של כלי השיט. זהו גם באפשרות המתאימה ביותר, בעוד נטו מאנטה הוא בוודאי מחוץ לאזור בעקבות. בסקרים מסוימים נטו מאנטה נקבע מן הירכתיים של כלי השיט17, 18, אבל במקרה זה אתה צריך להיות בטוח כי נטו הוא מחוץ לאזור בעקבות. המרחק, שעליו המכמורת מוגדרת לדגימה, צריך להיקבע בנפרד, שכן האזור של מערבולות שנגרם על ידי הכלי נע בין הגודל של כלי השיט מן המהירות של הסירה 19, 20. הפרדת חלקיקי חלקיקי פלסטיק מן הדגימות פני הים היא לרוב נעשתה רק על ידי זיהוי חזותי 21. חלקיקים גדול מ -1 מ&quot;מ ניתן לזהות בקלות על ידי בעין בלתי מזוינת, ואילו חלקיקים קטנים מ -1 מ&quot;מ דורשים שימוש סטראו. כדי לצמצם את האפשרות של מבלבל החלקיקים הלא פלסטיק בכאלו מפלסטיק, באמצעות אור קיטוב על stereomicroscopes מומלץ. האפשרות של זיהוי שגוי של חלקיקי פלסטיק מקבלת גבוהה עם חלקיקים קטנים. כך חלקיקים&gt; 0.5 מ&quot;מ ניתן לזהות רק 21 חזותית, על ידי שימוש סטראו. עבור חלקיקים קטנים מ -0.5 מ&quot;משיטה נוספת, מדויקת יותר נדרשת ספקטרוסקופיה ATR-FTIR מייקרו למשל 21. במהלך תהליך היפרדות חלקיקים מדגימת האפשרות של זיהום המדגם עם החוטים המוטסים היא גבוהה מאוד. מסיבה זו, לשלוט צלחות פטרי נותרות פתוח על שולחן העבודה מומלץ בחום לזיהוי חלקיקים הנישאים באוויר מזהמים פוטנציאליים. כלומר, את איכות הנתונים מאוד תלוי: 1) את הדיוק של אדם עובד עם המדגם, 2) איכות והגדלה של סטראו, ו -3) את כמות החומר האורגני המדגם 16. לאחר זיהוי חזותי מומלץ מאוד לנתח את חלקיקי מיון עם אחת הטכניקות הזמינות עבור זיהוי כימי של החומר 8. שיטות קיימות מספר זיהוי פולימר, בקרב שבו ספקטרוסקופיה FTIR ו ספקטרוסקופיית ראמאן הם הכי frequently בשימוש 22. ספקטרוסקופיה FTIR ראמאן טכניקות משלימות והדיוק שלהם דומה. בפרוטוקול שלנו, FTIR וספקטרוסקופיה FTIR מיקרו עם &quot;ההחזרה הכולל נחלש&quot; (ATR) מוצגים. הם פשוט לשימוש, והם מאפשרים תוצאות מהירות ומדויקות. פולימרי פלסטיק להחזיק ספקטרום אינפרא אדום מאוד ספציפי (IR) עם דפוסי להקה נפרדים, ובכך IR ספקטרוסקופיה טכניקה אופטימלית לזיהוי החלקיקים 21. האנרגיה של קרינת IR שמרגשת רטט מולקולרי ספציפי בעת אינטראקציה עם מדגם, המאפשר מדידת ספקטרום IR מאפיין 22. ספקטרוסקופיה FTIR יכול גם לספק מידע נוסף על חלקיקים, כגון עוצמת חמצון 23 ורמת השפלה 24. בעוד ATR-FTIR מתאים זיהוי כימי של חלקיקים גדולים יותר (&gt; 0.5 מ&quot;מ), ספקטרוסקופיה ATR-FTIR מיקרו יכולים לספק מידע על המבנה הכימי של החלקיקים &amp; #60; 0.5 מ&quot;מ, כפי שהוא משלב את הפונקציה של מיקרוסקופ ספקטרומטר אינפרא אדום. לפני השימוש FTIR וספקטרוסקופיה FTIR מיקרו, חלקיקים חלקיקי הפלסטיק צריך להיות מיובש בעבר, מאז מים בחום סופג IR קרינה 22, ומטוהר, למקרה שהם מכוסים biofilms ו / או חסידי אורגניים ואי-אורגניים אחרים, אשר יכולים להשפיע על ספקטרום IR. הדרך לא פולשנית ביותר לטהר דגימות ידי ערבוב ושטיפה במים מתוקים 25. אם זה לא מספיק, אז השימוש של מי חמצן 30% מומלץ. כל שיטות אחרות יכולות להיות השפעות שליליות על חלקיקים חלקיקי הפלסטיק (ניקוי קולי למשל יכול להמשיך ולפצל חלקיקים, פתרונות חומצי או בסיסי חזק יכול לפגוע פולימרים פלסטיים כמה, וכו &#39;) ולכן השימוש בהם אינו מומלץ. עוד מבטיח הוא השימוש של עיכול אנזימטי רציפים כצעד טיהור פלסטיק ידידותי. טיהור באמצעות אנזימים טכניים שונים (lipase למשל,mylase, proteinase, chitinase, cellulase, proteinase-K) יושם בהצלחה לצמצום מטריצה ביולוגית של פלנקטון ובכך הוכיח שהוא טכניקה יקרה כדי למזער חפצים מטריקס במהלך מדידות ספקטרוסקופיה FTIR 22. הפרדת החלקיקים ידי זיהוי חזותי והזדהות כימית של חלקיקים שנבחרו הן שני תהליכי הזמן רבים מאוד. יש המון עבודה, זה חייב להיעשות על ידי אדם מדויק חולה שיש לו ניסיון עם stereomicroscopes, לא רק לזהות את חלקיקי הפלסטיק, אלא גם הכרת חומר ביולוגי. אפילו אדם מנוסה אינו יכול להפלות כל חלקיקי חלקיקי פלסטיק הפוטנציאל חד משמעי מרסיסים כיטין או diatom 22. לפיכך, שיעור השגיאה של מיון ויזואלי נע בין 20% 26 עד 70% 21 ומגביר עם הפחתת גודל חלקיקים.

Microplastic pollution in the sea represents a growing concern to contemporary society, due to the constant increase in plastic production and its subsequent disposal and accumulation in the marine environment1. Even if plastic macro litter would no longer enter the seas, microplastic pollution would continue to grow due to fragmentation of already existing plastic litter in the sea2. The majority of microplastic pollution studies were carried out in marine and fresh water ecosystems and mainly addressed sea surface pollution3.
The term microplastic refers to plastic particles smaller than 5 mm in size4. This term describes a heterogeneous mixture of particles, which can differ in size (from a few microns to several millimeters), color and shape (from very different shapes of fragments to long fibers). Microplastic particles can be of a primary or secondary origin5. Microplastic of primary origin is manufactured as small particles used in the cosmetics industry (pilling cr&#232;me etc.) or chemical industry as precursor for other plastic products (e.g. plastic pellets used in plastic industry). Microplastic of secondary origin arise via the degradation of larger plastic pieces in the environment due to physical and chemical processes, induced by light, heat, oxygen, water and organisms6. In 2015, four types of microplastic sources were defined: larger plastic litter, cleaning products, medicines and textiles6. The main source (80 %) of larger plastic litter is assumed to be land based7. Microplastic from cosmetic products, medicines and textile enters water ecosystems through sewage and storm waters6. Microplastic particles most frequently found in water ecosystems are fragments from larger plastic litter and textile fibers8. 
Microplastics have several negative effects on the environment. Their small size allows them to enter the food web through ingestion by marine organisms9, 10. Ingested particles can cause physical damage or block the digestive system of animals11. Particles can also be carriers of persistent organic pollutants (POPs). Their hydrophobic surface and favorable ratio of large surface area to small volume, enables POPs to adsorb onto the microplastics12. In the environment or digestive systems of animals who ingest them, POPs and other plastic additives can be leached from microplastic particles13. 
Previous studies reported the ubiquitous presence of microplastics in the marine environment3, from the water column to the bottom sediments. The threat of microplastic pollution was already identified by the Marine Strategy Framework Directive in the EU and, consequently, mandatory monitoring of microplastics was advised14. Accordingly, the EU Technical Subgroup on Marine Litter (TSG-ML) prepared recommendations for monitoring of microplastics in the European seas15. Thus, the video guidelines for microplastics sampling are of high importance, as they support comparative monitoring and a coherent management process all over the world.
This protocol was developed within the DeFishGear project for the first monitoring of microplastic pollution in the Adriatic Sea. Recommendations from the document "Guidance on Monitoring of Marine Litter in European Seas" by TSG-ML15 were taken into account. This protocol describes the methodology for microplastics sampling on the sea surface, separation of microplastics from the samples, and chemical analysis of microplastic particles to confirm that particles are from plastic material and to identify the type of plastic. Sampling was done by the use of a manta net, which is the most suitable equipment for sampling in calm waters16. Separation of microplastics from the samples was carried out by visual identification using a stereomicroscope. Isolated particles were later chemically identified using Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy and micro FTIR spectroscopy.

<table><tbody><tr><td>In this protocol no specific equipment or reagents were used.</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

protocol for microplastics sampling on the sea surface and sample analysis

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of scientific publications address microplastic pollution of the sea surface. The protocol below describes the methodology for sampling, sample preparation, separation and chemical identification of microplastic particles. A manta net fixed on an &#187;A frame&#171; attached to the side of the vessel was used for sampling. Microplastic particles caught in the cod end of the net were separated from samples by visual identification and use of stereomicroscopes. Particles were analyzed for their size using an image analysis program and for their chemical structure using ATR-FTIR and micro FTIR spectroscopy. The described protocol is in line with recommendations for microplastics monitoring published by the Marine Strategy Framework Directive (MSFD) Technical Subgroup on Marine Litter. This written protocol with video guide will support the work of researchers that deal with microplastics monitoring all over the world.

התוצאה הראשונה של הפרוטוקול המתואר הן חלקיקי חלקיקי פלסטיק מסווגים לשש קטגוריות על פי המאפיינים החזותיים שלהם (טבלת 1). הקטגוריה הראשונה, ובדרך כלל אחד הנפוץ ביותר, הם שבר (איור 1). הם נוקשים, עבים, עם קצוות חדים עקומים צורה לא סדירה. הם יכולים להיות במגוון צבעים שונים. הקטגוריה השנייה הם סרטים (איור 2). הם מופיעים גם צורות לא סדירות, אך בהשוואת שברים, הם דקים וגמישים ובדרך כלל שקופים. הקטגוריה השלישית הם כדורי (איור 3), בדרך כלל שמקורן בתעשיית הפלסטיק. הם צורות חריגות, עגול, ובדרך כלל בגודל גדול יותר, כ -5 מ&quot;מ קוטר. הם בדרך כלל שטוח בצד אחד יכולים להיות בצבעים שונים. הקטגוריה הרביעית הן גרגירים (איור 4). לשם השוואה עם כדורים, יש להם צורה עגולה קבועה ובדרך הכלל לגודל קטן יותר, סביב 1 מ&quot;מ הקוטר. הם מופיעים בצבעים טבעיים(לבן, בז &#39;, חום). הקטגוריה החמישית הן חוטים (איור 5). הם, לצד שבר, הסוג הנפוץ ביותר של חלקיקי חלקיקי פלסטיק. הם יכולים להיות קצרים או ארוכים, עם עובי וצבעים שונים. הקטגוריה האחרונה הם קצף (איור 6). הם לרוב מגיעים חלקיקים גדולים של קלקר. הם צורה רכה, לא סדיר מלבן לצהוב בצבע. התוצאה העיקרית של דגימת חלקיקים וניתוח מדגם היא מספר חלקיקי חלקיקי פלסטיק לדגימה. נתונים אלה יכולים להיות מנורמלים נוספים לקילומטר 2. הנוסחה המשמשת לנורמליזציה היא: חלקיקי חלקיקי פלסטיק ליחידת שטח מדגם / דגימה, איפה באזור הדגימה מחושב על ידי הכפלת מרחק דגימה על ידי הרוחב של פתיחת נטו מאנטה (לוחות 2, 3; איור 7). בנוסף, ניתן לנתח חלקיקים עם imתוכנת ניתוח גיל. התוצאות כוללות אורך מרבי ואזור של כל חלקיק (לוח 4). חלקיקי איור צג 8a לפני ניתוח תמונה והאיור 8b הוא אחרי ניתוח תמונה, שבה כל חלקיק נמדד וממוספרים. לבסוף, ניתוח כימי של המספר הכולל או הגבוה ביותר האפשרי של חלקיקים לדגימה מומלץ. באמצעות ספקטרוסקופיית פורה ספקטרום של החלקיק שנבחר נרכש, כפי שמוצג על איור 9. ספקטרום זה אז לעומת הספקטרום מספריית התוכנה (איור 10). התוצאה הסופית תוצג אם חלקיק נתון הוא פלסטיק או לא לציין את הסוג של פלסטיק מן המבנה הכימי. <table fo:keep-together.within-page="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> 1 </td><td> שבר </td></tr><tr><td> 2 </td><td> סרטים </td></tr><tr><td> 3 </td><td> פלטות </td></tr><tr><td> 4 </td><td> גרגרים </td></tr><tr><td> 5 </td><td> חוטים </td></tr><tr><td> 6 </td><td> קֶצֶף<html> הים </td></tr></tbody></table> טבלה 1: קטגוריות של חלקיקים חלקיקי הפלסטיק. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig1.jpg" /> איור 1: דוגמא של חלקיקים מתוך קטגוריה: שברים. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig2.jpg" /> איור 2: דוגמא של חלקיקים מתוך קטגוריה: סרטים. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <html> /55161fig3.jpg &quot;/&gt; איור 3: דוגמה של חלקיקים מתוך הקטגוריה: פלטות. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig4.jpg" /> איור 4: דוגמא של חלקיקים מתוך קטגוריה: גרגרים. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig5.jpg" /> איור 5: דוגמה של חלקיקים מתוך הקטגוריה: חוטי זיכרונות. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> ילדה = &quot;jove_content&quot; FO: keep-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig6.jpg" /> איור 6: דוגמה של חלקיקים מתוך הקטגוריה: קצף. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <table fo:keep-together.within-page="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מרחק דגימה [ק&quot;מ] </td><td> 2 </td></tr><tr><td> רוחב מנטה [ק&quot;מ] </td><td> 0.0006 </td></tr><tr><td> באזור דגימה [ק&quot;מ 2] </td><td> .0012 </td></tr></tbody></table> טבלה 2: דוגמא של נתונים מסקרים, המשמשים לחישוב של חלקיקי חלקיקי פלסטיק לקילומטר 2. <table fo:keep-together.within-page="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td> לא </td><td> אין / ק&quot;מ 2 </td></tr><tr><td>שבר </td><td> 301 </td><td> 250,833 </td></tr><tr><td> סרטים </td><td> 45 </td><td> 37500 </td></tr><tr><td> כדורים </td><td> 15 </td><td> 12500 </td></tr><tr><td> גרגרים </td><td> 8 </td><td> 6667 </td></tr><tr><td> קצף </td><td> 33 </td><td> 27500 </td></tr><tr><td> חוטים </td><td> 223 </td><td> 185,833 </td></tr></tbody></table> טבלה 3: דוגמה של תוצאות הסקר, שבו נתונים מסווגים 6 קבוצות נספרים מנורמל לקילומטר 2 (אין - מספר החלקיקים). <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig7.jpg" /> איור 7: דוגמה של תוצאות נציג לאחר קטגוריזציה החזותי של pמאמרים (לא - מספר החלקיקים). <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <table fo:keep-together.within-page="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> אזור אינדקס </td><td> פינה [ממ&quot;ר] </td><td> אורך מרבי [מ&quot;מ] </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 8.010 </td><td> 5.506 </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 10.517 </td><td> 5.628 </td></tr><tr><td> 3 </td><td> 12.185 </td><td> 5.429 </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 3.367 </td><td> 3.367 </td></tr><tr><td> 5 </td><td> 2.475 </td><td> 2.155 </td></tr><tr><td> 6 </td><td> 1.809 </td><td> 2.943 </td></tr><tr><td> 7 </td><td> 6.604 </td><td> 5.238 </td></tr><tr><td> 8 </td><td> 5.779 </td><td> 4.037 </td></tr><tr><td> 9 </td><td> 4.472 </td><td> 3.791 </td></tr><html><tr><td> 10 </td><td> 16.907 </td><td> 5.355 </td></tr><tr><td> 11 </td><td> 7.246 </td><td> 3.733 </td></tr><tr><td> 12 </td><td> 7.867 </td><td> 4.622 </td></tr><tr><td> 13 </td><td> 6.411 </td><td> 5.056 </td></tr><tr><td> 14 </td><td> 3.281 </td><td> 3.070 </td></tr><tr><td> 15 </td><td> 12.937 </td><td> 5.554 </td></tr><tr><td> 16 </td><td> 6.709 </td><td> 3.716 </td></tr></tbody></table> לוח 4: דוגמה של תוצאות ניתוח התמונה איפה באזור [מ&quot;מ 2] ו [מ&quot;מ] האורך המרבי של כל חלקיק נמדדים. <img alt="הספרה 8" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig8.jpg" /> איור 8: דוגמא של תמונת רכש א) לפני ב) לאחר ניתוח תמונה של חלקיקים עם תוכנת ניתוח תמונה.ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55161/55161fig8large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 9" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig9.jpg" /> איור 9: דוגמא ספקטרום נמדד על חלקיק שנבחר עם פסגות מסומנות אורכי הגל שלהם [-1 סנטימטר]. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig9large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 10" src="/files/ftp_upload/55161/55161fig10.jpg" /> איור 10: דוגמה של השוואה של ספקטרה שנרכש החלקיקים שנבחרו ההתאמה הטובה ביותר מספריית ספקטרה ATR-FTIR. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55161/55161fig10large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של f זה</a>igure.

Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Microplastics Sampling on the Sea Surface and Sample Analysis at JoVE.com

Protocol for Microplastics Sampling on the Sea Surface and Sample Analysis

הפרוטוקול שלהלן מתאר את המתודולוגיה: דגימת חלקיקים על פני הים, הפרדת זיהוי חלקיקי פלסטיק והכימי של חלקיקים. פרוטוקול זה עולה בקנה אחד עם ההמלצות לניטור חלקיקים בהוצאה בתת הטכנית MSFD על זבל ימי.

פרוטוקול עבור דגימת חלקיקים על פני הים וניתוח לדוגמא

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of ...

protocol-for-microplastics-sampling-on-sea-surface-sample

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Environment

49.3K Views.  Institute for water of the Republic of Slovenia.  הפרוטוקול שלהלן מתאר את המתודולוגיה: דגימת חלקיקים על פני הים, הפרדת זיהוי חלקיקי פלסטיק והכימי של חלקיקים. פרוטוקול זה עולה בקנה אחד עם ההמלצות לניטור חלקיקים בהוצאה בתת הטכנית MSFD על זבל ימי. 

Video: Protocol for Microplastics Sampling on the Sea Surface and Sample Analysis

Unraveling the Unseen Players in the Ocean - A Field Guide to Water Chemistry and Marine Microbiology

Here we introduce a series of thoroughly tested and well standardized research protocols adapted for use in remote marine environments. The sampling protocols include the assessment of resources available to the microbial community (dissolved organic carbon, particulate organic matter, inorganic nutrients), and a comprehensive description of the viral and bacterial communities (via direct viral and microbial counts, enumeration of autofluorescent microbes, and construction of viral and microbial metagenomes). We use a combination of methods, which represent a dispersed field of scientific disciplines comprising already established protocols and some of the most recent techniques developed. Especially metagenomic sequencing techniques used for viral and bacterial community characterization, have been established only in recent years, and are thus still subjected to constant improvement. This has led to a variety of sampling and sample processing procedures currently in use. The set of methods presented here provides an up to date approach to collect and process environmental samples. Parameters addressed with these protocols yield the minimum on information essential to characterize and understand the underlying mechanisms of viral and microbial community dynamics. It gives easy to follow guidelines to conduct comprehensive surveys and discusses critical steps and potential caveats pertinent to each technique.

Here, we present a comprehensive protocol to assess the organic and inorganic nutrient availability and the abundance and structure of microbial and viral communities in remote marine environments.

להתיר את השחקנים הנעלמת באוקיינוס ​​- מדריך שדה לכימיה מים והימי מיקרוביולוגיה

Here we introduce a series of thoroughly tested and well standardized research protocols adapted for use in remote marine environments. The sampling ...

Clean Sampling and Analysis of River and Estuarine Waters for Trace Metal Studies

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination control. Developments of some techniques aiming to reduce trace metal contamination in the last couple of decades have resulted in concentrations reported now being orders of magnitude lower than those in the past. These low concentrations often necessitate preconcentration of water samples prior to instrumental analysis of samples. Since contamination can appear in all phases of trace metal analyses, including sample collection (and during preparation of sampling containers), storage and handling, pretreatments, and instrumental analysis, specific care needs to be taken in order to reduce contamination levels at all steps. The effort to develop and utilize "clean techniques" in trace metal studies allows scientists to investigate trace metal distributions and chemical and biological behavior in greater details. This advancement also provides the required accuracy and precision of trace metal data allowing for environmental conditions to be related to trace metal concentrations in aquatic environments.
This protocol that is presented here details needed materials for sample preparation, sample collection, sample pretreatment including preconcentration, and instrumental analysis. By reducing contamination throughout all phases mentioned above for trace metal analysis, much lower detection limits and thus accuracy can be achieved. The effectiveness of "clean techniques" is further demonstrated using low field blanks and good recoveries for standard reference material. The data quality that can be obtained thus enables the assessment of trace metal distributions and their relationships to environmental parameters.

Special care using "clean techniques" is required to properly collect and process water samples for trace metal studies in aquatic environments. A protocol for sampling, processing, and analytical procedures with the aim of obtaining reliable environmental monitoring data and results with high sensitivity for detailed trace metal studies is presented.

נקי דיגום ואנליזה של נהר ושפכי הנהרות ווטרס ללימודי מתכת עקבות

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination ...

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and detritus, and excreting particulate and dissolved compounds, they serve as important agents for benthic-pelagic coupling. Accurately measuring the compounds removed and excreted by suspension feeders (such as sponges, ascidians, polychaetes, bivalves) is crucial for the study of their physiology, metabolism, and feeding ecology, and is fundamental to determine the ecological relevance of the nutrient fluxes mediated by these organisms. However, the assessment of the rate by which suspension feeders process particulate and dissolved compounds in nature is restricted by the limitations of the currently available methodologies. Our goal was to develop a simple, reliable, and non-intrusive method that would allow clean and controlled water sampling from a specific point, such as the excurrent aperture of benthic suspension feeders, in situ. Our method allows simultaneous sampling of inhaled and exhaled water of the studied organism by using minute tubes installed on a custom-built manipulator device and carefully positioned inside the exhalant orifice of the sampled organism. Piercing a septum on the collecting vessel with a syringe needle attached to the distal end of each tube allows the external pressure to slowly force the sampled water into the vessel through the sampling tube. The slow and controlled sampling rate allows integrating the inherent patchiness in the water while ensuring contamination free sampling. We provide recommendations for the most suitable filtering devices, collection vessel, and storing procedures for the analyses of different particulate and dissolved compounds. The VacuSIP system offers a reliable method for the quantification of undisturbed suspension feeder metabolism in natural conditions that is cheap and easy to learn and apply to assess the physiology and functional role of filter feeders in different ecosystems.

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

We introduce the VacuSIP, a simple, non-intrusive, and reliable method for clean and accurate point sampling of water. The system was developed and evaluated for the simultaneous collection of the water inhaled and exhaled by benthic suspension feeders in situ, to cleanly measure removal and excretion of particulate and dissolved compounds.

VacuSIP, שיטת INEX משופרת<em&gt; באתרו</em&gt; מדידה של חלקיקים מומס תרכובות מעובד על ידי האכלת השעית Active

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and ...

Extraction of Organochlorine Pesticides from Plastic Pellets and Plastic Type Analysis

Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment during manufacturing and transport. Because of their environmental persistence, they are widely distributed in the oceans and on beaches all over the world. They can act as a vector of potentially toxic organic compounds (e.g., polychlorinated biphenyls) and might consequently negatively affect marine organisms. Their possible impacts along the food chain are not yet well understood. In order to assess the hazards associated with the occurrence of plastic pellets in the marine environment, it is necessary to develop methodologies that allow for rapid determination of associated organic contaminant levels. The present protocol describes the different steps required for sampling resin pellets, analyzing adsorbed organochlorine pesticides (OCPs) and identifying the plastic type. The focus is on the extraction of OCPs from plastic pellets by means of a pressurized fluid extractor (PFE) and on the polymer chemical analysis applying Fourier Transform-InfraRed (FT-IR) spectroscopy. The developed methodology focuses on 11 OCPs and related compounds, including dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) and its two main metabolites, lindane and two production isomers, as well as the two biologically active isomers of technical endosulfan. This protocol constitutes a simple and rapid alternative to existing methodology for evaluating the concentration of organic contaminants adsorbed on plastic pieces.

Microplastics act as vector of potentially toxic organic contaminants with unpredictable effects. This protocol describes an alternative methodology for assessing the levels of organochlorine pesticides adsorbed on plastic pellets and identifying the polymer chemical structure. The focus is on pressurized fluid extraction and attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectroscopy.

הפקת חומרי הדברה אורגנוכלורינים מפלסטיק וגלגול סוג פלסטיק

Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment ...

An Ultra-clean Multilayer Apparatus for Collecting Size Fractionated Marine Plankton and Suspended Particles

The distributions of many trace elements in the ocean are strongly associated with the growth, death, and re-mineralization of marine plankton and those of suspended/sinking particles. Here, we present an all plastic (Polypropylene and Polycarbonate), multi-layer filtration system for collection of suspended particulate matter (SPM) at sea. This ultra-clean sampling device has been designed and developed specifically for trace element studies. Meticulous selection of all non-metallic materials and utilization of an in-line flow-through procedure minimizes any possible metal contamination during sampling. This system has been successfully tested and tweaked for determining trace metals (e.g., Fe, Al, Mn, Cd, Cu, Ni) on particles of varying size in coastal and open ocean waters. Results from the South China Sea at the South East Asia Time-Series (SEATS) station indicate that diurnal variations and spatial distribution of plankton in the euphotic zone can be easily resolved and recognized. Chemical analysis of size-fractionated particles in surface waters of the Taiwan Strait suggests that the larger particles (&#62;153 &#181;m) were mostly biologically derived, while the smaller particles (10 - 63 &#181;m) were mostly composed of inorganic matter. Apart from Cd, the concentrations of metals (Fe, Al, Mn, Cu, Ni) decreased with increasing size.

Plankton and suspended particles play a major role in the biogeochemical cycles in the ocean. Here, we provide an ultra-clean, low stress method for the collection of various sizes of particles and plankton at sea with the capability of handling large volumes of seawater.

מנגנון רב שכבתי אולטרה נקי של איסוף פלנקטון ימית גודל Fractionated וחלקיקים מושעה

The distributions of many trace elements in the ocean are strongly associated with the growth, death, and re-mineralization of marine plankton and those ...

Sampling, Sorting, and Characterizing Microplastics in Aquatic Environments with High Suspended Sediment Loads and Large Floating Debris

The ubiquitous presence of plastic debris in the ocean is widely recognized by the public, scientific communities, and government agencies. However, only recently have microplastics in freshwater systems, such as rivers and lakes, been quantified. Microplastic sampling at the surface usually consists of deploying drift nets behind either a stationary or moving boat, which limits the sampling to environments with low levels of suspended sediments and floating or submerged debris. Previous studies that employed drift nets to collect microplastic debris typically used nets with &#8805;300 &#181;m mesh size, allowing plastic debris (particles and fibers) below this size to pass through the net and elude quantification. The protocol detailed here enables: 1) sample collection in environments with high suspended loads and floating or submerged debris and 2) the capture and quantification of microplastic particles and fibers &lt;300 &#181;m. Water samples were collected using a peristaltic pump in low-density polyethylene (PE) containers to be stored before filtering and analysis in the lab. Filtration was done with a custom-made microplastic filtration device containing detachable union joints that housed nylon mesh sieves and mixed cellulose ester membrane filters. Mesh sieves and membrane filters were examined with a stereomicroscope to quantify and separate microplastic particulates and fibers. These materials were then examined using a micro-attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectrometer (micro ATR-FTIR) to determine microplastic polymer type. Recovery was measured by spiking samples using blue PE particulates and green nylon fibers; percent recovery was determined to be 100% for particulates and 92% for fibers. This protocol will guide similar studies on microplastics in high velocity rivers with high concentrations of sediment. With simple modifications to the peristaltic pump and filtration device, users can collect and analyze various sample volumes and particulate sizes.

Most microplastic research to date has occurred in marine systems where suspended solid levels are relatively low. Focus is now shifting to freshwater systems, which may feature high sediment loads and floating debris. This protocol addresses collecting and analyzing microplastic samples from aquatic environments that contain high suspended solid loads.

דגימה, מיון של אפיון Microplastics בסביבות מימיות עם המון משקעים מושעה גבוהה ופסולת צף גדול

The ubiquitous presence of plastic debris in the ocean is widely recognized by the public, scientific communities, and government agencies. However, only ...

Data Collection on Marine Litter Ingestion in Sea Turtles and Thresholds for Good Environmental Status

The following protocol is intended to respond to the requirements set by the European Union&#39;s Marine Strategy Framework Directives (MSFD) for the D10C3 Criteria reported in the Commission Decision (EU), related to the amount of litter ingested by marine animals. Standardized methodologies for extracting litter items ingested from dead sea turtles along with guidelines on data analysis are provided. The protocol starts with the collection of dead sea turtles and classification of samples according to the decomposition status. Turtle necropsy must be performed in authorized centers and the protocol described here explains the best procedure for gastrointestinal (GI) tract isolation. The three parts of the GI (esophagus, stomach, intestine) should be separated, opened lengthways and contents filtered using a 1 mm mesh sieve. The article describes the classification and quantification of ingested litter, classifying GI contents into seven different categories of marine litter and two categories of natural remains. The quantity of ingested litter should be reported as total dry mass (weight in grams, with two decimal places) and abundance (number of items). The protocol proposes two possible scenarios to achieve the Good Environmental Status (GES). First: &#34;There should be less than X% of sea turtles having Y g or more plastic in the GI in samples of 50-100 dead turtles from each sub-region&#34;, where Y is the average weight of plastic ingested and X% is the percentage of sea turtles with more weight (in grams) of plastic than Y. The second one, which considers the food remain versus plastic as a proxy of individual health, is: &#34;There should be less than X% of sea turtles having more weight of plastic (in grams) than food remains in the GI in samples of 50-100 dead turtles from each sub-region&#34;.

The protocol focuses on the collection of sea turtle samples, describing all the steps from the animal recovery and necropsy to the classification and quantification of ingested marine litter. Moreover, the representative results show how to use the collected data to elaborate the possible thresholds for Good Environmental Status.

איסוף נתונים על בליעה ימית בצבי ים וסף למצב סביבתי טוב

The following protocol is intended to respond to the requirements set by the European Union&#39;s Marine Strategy Framework Directives (MSFD) for the ...

Seawater Sampling and Collection

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses. For today's demonstration samples were collected from the deck of the HMS John Strickland operating in Saanich Inlet. An A-frame derrick, with a multi-purpose winch and cable system, is used in combination with Niskin or Go-Flo water sampling bottles. Conductivity, Temperature, and Depth (CTD) sensors are also used to sample the underlying water mass. To minimize outgassing, trace gas samples are collected first.  Then, nutrients, water chemistry, and cell counts are determined. Finally, waters are collected for biomass filtration. The set-up and collection time for a single cast is ~1.5 hours at a maximum depth of 215 meters. Therefore, a total of 6 hours is generally needed to complete the collection series described here.

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses.

מי ים דגימה אוסף

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

Biology

Small Volume (1-3L) Filtration of Coastal Seawater Samples

The workflow begins with the collection of coastal marine waters for downstream microbial community, nutrient and trace gas analyses. For today s demonstration samples were collected from the deck of the HMS John Strickland operating in Saanich Inlet. This video documents small volume (~1 L) filtration of microbial biomass from the water column. The protocol is an extension of the large volume sampling protocol described earlier, with one major difference: here, there is no pre-filtration step, so all size classes of biomass are collected down to the 0.22 &mu;m filter cut-off. Samples collected this way are ideal for nucleic acid analysis. The set-up, filtration, and clean-up steps each take about 20-30 minutes. If using two peristaltic pumps simultaneously, up to 8 samples may be filtered at the same time. To prevent biofilm formation between sampling trips, all filtration equipment must be rinsed with dilute HCl and deionized water and autoclaved immediately after use.

Small Volume 1-3L Filtration of Coastal Seawater Samples

This video documents small volume (~1 L) filtration of microbial biomass from the water column.

נפח קטן (1-3L) סינון של דגימות מי ים החוף

The workflow begins with the collection of coastal marine waters for downstream microbial community, nutrient and trace gas analyses. For today s ...

Sampling, Identification and Characterization of Microplastics Release from Polypropylene Baby Feeding Bottle during Daily Use

Microplastics (MPs) are becoming a global concern due to the potential risk to human health. Case studies of plastic products (i.e., plastic single-use cups and kettles) indicate that MP release during daily use can be extremely high. Precisely determining the MP release level is a crucial step to identify and quantify the exposure source and assess/control the corresponding risks stemming from this exposure. Though protocols for measuring MP levels in marine or freshwater has been well developed, the conditions experienced by household plastic products can vary widely. Many plastic products are exposed to frequent high temperatures (up to 100 &#176;C) and are cooled back to room temperature during daily use. It is therefore crucial to develop a sampling protocol that mimics the actual daily-use scenario for each particular product. This study focused on widely used polypropylene-based baby feeding bottles to develop a cost-effective protocol for MP release studies of many plastic products. The protocol developed here enables: 1) prevention of the potential contamination during sampling and detection; 2) realistic implementation of daily-use scenarios and accurate collection of the MPs released from baby feeding bottles based on WHO guidelines; and 3) cost-effective chemical determination and physical topography mapping of MPs released from baby feeding bottles. Based on this protocol, the recovery percentage using standard polystyrene MP (diameter of 2 &#181;m) was 92.4-101.2% while the detected size was around 102.2% of the designed size. The protocol detailed here provides a reliable and cost-effective method for MP sample preparation and detection, which can substantially benefit future studies of MP release from plastic products.

This study detailed a reliable and cost-effective protocol for microplastics collection and detection from the daily use of plastic products.

דגימה, זיהוי ואפיון של מיקרופלסטיק שחרור מבקבוק האכלה לתינוק פוליפרופילן במהלך השימוש היומי

Microplastics (MPs) are becoming a global concern due to the potential risk to human health. Case studies of plastic products (i.e., plastic single-use ...

פרוטוקול עבור דגימת חלקיקים על פני הים וניתוח לדוגמא

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

להתיר את השחקנים הנעלמת באוקיינוס - מדריך שדה לכימיה מים והימי מיקרוביולוגיה

נקי דיגום ואנליזה של נהר ושפכי הנהרות ווטרס ללימודי מתכת עקבות

VacuSIP, שיטת INEX משופרת

הפקת חומרי הדברה אורגנוכלורינים מפלסטיק וגלגול סוג פלסטיק

מנגנון רב שכבתי אולטרה נקי של איסוף פלנקטון ימית גודל Fractionated וחלקיקים מושעה

דגימה, מיון של אפיון Microplastics בסביבות מימיות עם המון משקעים מושעה גבוהה ופסולת צף גדול

איסוף נתונים על בליעה ימית בצבי ים וסף למצב סביבתי טוב

מי ים דגימה אוסף

נפח קטן (1-3L) סינון של דגימות מי ים החוף

דגימה, זיהוי ואפיון של מיקרופלסטיק שחרור מבקבוק האכלה לתינוק פוליפרופילן במהלך השימוש היומי

פרוטוקול עבור דגימת חלקיקים על פני הים וניתוח לדוגמא

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

להתיר את השחקנים הנעלמת באוקיינוס ​​- מדריך שדה לכימיה מים והימי מיקרוביולוגיה

נקי דיגום ואנליזה של נהר ושפכי הנהרות ווטרס ללימודי מתכת עקבות

VacuSIP, שיטת INEX משופרת

הפקת חומרי הדברה אורגנוכלורינים מפלסטיק וגלגול סוג פלסטיק

מנגנון רב שכבתי אולטרה נקי של איסוף פלנקטון ימית גודל Fractionated וחלקיקים מושעה

דגימה, מיון של אפיון Microplastics בסביבות מימיות עם המון משקעים מושעה גבוהה ופסולת צף גדול

איסוף נתונים על בליעה ימית בצבי ים וסף למצב סביבתי טוב

מי ים דגימה אוסף

נפח קטן (1-3L) סינון של דגימות מי ים החוף

דגימה, זיהוי ואפיון של מיקרופלסטיק שחרור מבקבוק האכלה לתינוק פוליפרופילן במהלך השימוש היומי

להתיר את השחקנים הנעלמת באוקיינוס - מדריך שדה לכימיה מים והימי מיקרוביולוגיה