We would like to dedicate this work to the memory of late Dr. William T. Greenough, a great mentor, a colleague and a friend. This work was supported by NIH/NIAAA grant number AA009838 and NIH/NIGMS COBRE: The Delaware Center for Neuroscience research grant 1P20GM103653 to AYK. We are grateful to the former and current members of Klintsova lab.

משפט ואתיקה: הפרוטוקול הבא אושר על ידי הטיפול בבעלי החיים המוסדיים ועדת השימוש (IACUC) מאונ&#39; דלאוור. 1. חשיפה התפתחותית (או דגם של חשיפת אתנול Binge דמוית) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום PD3, לקבוע את מינו של כל חיה ו צולב לטפח כל חיות במידת צורך כדי לשמור על גודל המלטה (8 חיות) והפצת מין (4 זכרים: 4 נקבות) עולה בקנה אחד בתוך כל המלטה. הערה: חשוב לשמור על גודל המלטה והפצת מין עקבי ככל האפשר, כדי למנוע בלבול הניסיון. למרות בפרוטוקול זה משתמש 8 גורים (4 זכרים ו -4 נקבות) בכל המלטה, בגדלי המלטה אלטרנטיביים או הפצות מין עשויים להיות תפורות לצרכי תכנון הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תת עורי להזריק כמות קטנה של בדיו שחור לידיו לזהות חיות בתוך כל המלטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פסיאודו אקראי להקצות המלטות כניסוי (המכיל 50% אלכוהול חשוף (AE) ו -50% שליטה מחובר לצינורות-דמה (SI) הגורים) או לינוק מלא (SC) (בעלי חיים שאינם עוברים כל אינטובציה, גזיר זנב, או פרוטוקולי פרידת PD 4 - 9 למעט במשקל יומי חבטות אוזן). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לשמור על גודל קבוצה עקבי, להקצות כפליים המלטות ניסוי כפי המלטות SC. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול כל חיה ואז להחזיר אותו בכלוב בבית שלה. בעלי חיים במשקל אמור להתרחש מדי יום במהלך תקופת אינטובציה (PD 4 - 9). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את האפריון כולו מן הסכר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח גורים על משטח לוהט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את המשקל של כל גור פרט. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום PD4, לאחר שקילת כל חיה לחשב את כמות אלכוהול הכרחי עבור סכום כולל של 5.25 גר &#39;/ ק&quot;ג / ליום כל חיה (מבוסס על משקל הגור משלב 1.4) 8. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נהל אלכוהול 11.9% אתנול-ב-חלב תחליף (כרך / כרך). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל בשעה 9 בבוקר, להסיר גורים של המלטה אחד מהאם בכל פעם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל את אתנול-ב-חלב לכל גור AE <sעד class = &quot;Xref&quot;&gt; 34. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Sham-לצנרר כל גור 8 SI. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 1.5. דרך 1.8. עבור כל המלטה ניסיונית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שעות לאחר המנה הראשונה, לחזור על תהליך המינון (שלבי 1.5 דרך 1.8) עבור מנת אלכוהול שנייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחת וחצי שעות לאחר מנת האלכוהול השנייה (הנקודה שבה שיא תוכן אלכוהול בדם יומי מושגת), לאסוף ודם צנטריפוגות מן גורי AE ו SI באמצעות זנב גזיר לניתוח תוכן אלכוהול בדם בעתיד 35. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף 60 μL של דם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים דם בתוך שפופרת microcentrifuge 1 מ&quot;ל. דם צנטריפוגה ב 1.5 XG במשך 25 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לאסוף את בסרום supernatant מהצינור צנטריפוגות ולשמור לניתוח תוכן אלכוהול בדם בעתיד. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על תהליך המינון (שלבי 1.5 דרך 1.8) באמצעות חלב במקום אתנול-ב-חלב כדי למנוע גירעונות תזונתיים מחוסר יכולת סיעוד ב AEגורים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע סך של 2 מנות חלב משלימות 2 שעות זה מזה על PD 4. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 1.4 דרך 1.12 (למעט צעד 1.11) על PD 5 - 9. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות מינון חלב המשלימה הסופי על PD9, אוזן אגרוף כל הגורים לזיהוי בכלוב EC. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתאם אגרוף באוזן עם מידה מסוימת של מספר המלטה או מזהה (למשל, המלטות אי-זוגיות בתוך עוקבה תקבלנה האוזן השמאלית שלהם אגרוף בעוד חי המלטות זוגיות תקבלנה אוזני זכותם אגרוף). זה יעשה את זה קל יותר לזהות חיות בכלוב EC צריכים בעלים חיים רבים מן ההמלטות שונות יש אותו דפוס pawmark. </li></ol></li></ol> גמילה 2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום PD 23, בבית כל החיות בכלובים של 2 - 3. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שכל החיות שוכנו באותו הכלוב הן מאותו המין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלול SC אחד, אחד SI, ובעלי חיים אחד AE לכל כלוב במידת האפשר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צמצם את מספר כלוב mates הבבית הם מאותו ההמלטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שכל החיות שמסוגלות לגשת מזון ומים. </li></ol></li></ol> ריצת גלגל 3. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום PD30, להקצות מחצית כלובים עם חיות כדי WR. בית החיות האלה בכלובים עם גישה חופשית גלגל ריצה נירוסטה המצורפת. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שיש גלגלים מונה להעריך את המספר הכולל של מהפכות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את כל החיות על PD 30 ו PD 36. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את מספר המהפכות של כל גלגל בשעה 9 בבוקר כל יום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השאר חיות במצב הדיור שלהם במשך 12 ימים. </li></ol> 4. מורכבות הסביבה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכינים את הכלוב EC לפני 9 בבוקר ביום שמתאים PD 42 עבור בחיות מעבדה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבל 30 &quot;x 18&quot; x 36 &quot;כלוב פלדה מגולוון. הערה: צריך הכלוב מספר רמות, להיות מסוגל לתמוך את המשקל של חולדות מרובות, להתמלא תקןיש מצעים, ומיקומים מרובים לצרף בקבוקי מים ומגשי האוכל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח רומן, אובייקטים צבעוניים בגדלים משתנים וצורות בכלוב. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 6 צעצועים גדולים בכלוב EC. ודא כי כל צעצוע הוא מספיק גדול בשביל 3 או יותר חולדות כדי אינטראקציה עם בעת ובעונה אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח 6 צעצועים בינוניים בכלוב EC. ודא כי כל צעצוע הוא מספיק גדול בשביל 3 - 4 חולדות כדי אינטראקציה עם בעת ובעונה אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים הרבה (לפחות 20) של צעצועים קטנים בכלוב EC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משתמש באביזרים של צבעים שונים, צורות, גודל, וכו &#39;החידושים הם קריטיים להתערבות זו (ראה דיון). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים שתי מנות של מזון בקצוות מנוגדים של הכלוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים שני בקבוקי מים בקצוות מנוגדים של הכלוב. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשעה 9 בבוקר על PD 42, לשקול את כל החיות להעביר את החיות WR לכלוב EC. כל כלוב EC אמור להכיל 9 - 12 בעלי חיים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לוודא שאין חיות לשניהם באותו pawmark ואוזן-משחק מליםדפוסי ch. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדקו את כל ימי המזון ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל יומיים, להסיר את הצעצועים מהכלוב EC ולהחליף אותם (על פי השלב 4.1.2.). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל שלושה ימים, לנקות את הכלוב EC. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את החיות מן כלוב EC ולשים אותם בכלובים שהייה זמניים של 2 - 3 חיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל המצעים מן בתחתית הכלוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור אותם הצעצועים לכלוב אלא עצם היום הזה עולה בקנה אחד עם לוח זמני החלפת צעצוע (לפי צעד 4.4.). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלף את כל האוכל והמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלף החולדות לתוך כלוב EC. </li></ol></li></ol> רקמות 5. אסוף הערה: אוסף רקמות (למשל, זלוף עם paraformaldehyde) ואחסון (למשל, מקפיא, הטבעת פרפין) יכולה להתבצע עם מגוון רחב של שיטות. להלן יסביר את התהליך של זלוף עם paraformaldehyde 4% ב 0.1 M פוספט בופר (4% paraformaldehyde ב PBSפתרון) 8. זהירות: Paraformaldehyde הוא מסרטן ועלול גם לגרום לגירוי עור, תגובה אלרגית בעור, או פגיעה בעין. השתמש הגנת עיניים / עור מתאים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף חולדה אחת בכל פעם כדי isoflurane כדי להרדים את החיה קלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Intraperitoneally להזריק עכברוש עם 2 מ&quot;ל / ק&quot;ג של תערובת קטמין / xylazine (1.5 מ&quot;ל xylazine מעורבב עם 10 מ&quot;ל של קטמין). הערה: קטמין ו xylazine הן בריכוזים מלאי של 100 מ&quot;ג / מ&quot;ל ​​לפני שילוב עבור תערובת ההזרקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר עכברוש הוא כבר לא מגיבים, perfuse החיה עם 0.1 M פוספט בופר (PBS; pH = 7.2) ואחריו paraformaldehyde 4% ב PBS (pH = 7.2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סר מוח ולאחסן paraformaldehyde 4% PBS ב 4 מעלות צלזיוס למשך 48 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי 2 ימים, העברת הפתרון של סוכרוז 30% נוספים paraformaldehyde 4% PBS ב 4 ° C. </li></ol>

The authors have nothing to disclose.

בפרוטוקול לעיל, הראינו התערבות רצויה להציל גירעונות neuroanatomical בעקבות חשיפת אלכוהול בילוד. התערבות זו יכולה לשמש טיפולי במודלים של בעלי חיים אחרים בשל חוסנו של כל אחד ממרכיבי ההתערבות. פעילות לב וכלי דם מרצון בצורה של WR הוכחה להועיל כמה תוצאות התנהגותיות 38, 39 ו להשרות שינויי פלסטיק מעשיים באזורים במוח כגון ההיפוקמפוס (הנסקרת ב 40). מדובר בין השאר בשל הביטוי של גורמי גדילה ומנגנונים נוירו אחרים parenchyma המוח בשני מכרסמים ובני אדם 21, 41. השלמת השפעות אלו, EC יכול לגרום 6 הסלולר מועיל, 11, 42, 43, מבני 2 תרופתי 12, 44 שינוי במכרסמים. על מנת WR כיעיל מקסימאלי במודל המסוים הזה של תסמונת האדם, קיימת חשיבות ראשונה במעלה לתת לחיות גישה מרצון גלגל ריצה פונקציונלי; גישת גלגל יומית צריכה להימשך במשך פרק הזמן ממושך 45 לפחות 10-12 שעות ליום ועדיף 24 שעות (כמה תופעות לוואי של נסיגה מן גלגל הריצה דווחו). הפרדיגמה WR זה נמשך 12 ימים כדי לאפשר את השילוב של WR ו- EC להשתלב גיל ההתבגרות והבגרות. המשך, הגיל בעת החשיפה, ומודאליות של פעילות גופנית (בין שאר) יכולים להשפיע על היעילות של פעילות גופנית כמו התערבות טיפולית 46, וגורמים קריטיים כגון צריכים להילקח בחשבון כאשר מתכננים ליישם פרוטוקול זה או כל הפרדיגמה WREC אחרת. אחד המרכיבים היסודיים הפרדיגמה EC זהו לאvelty של מספר אובייקטים בסביבה ואינטראקציה חברתית (הנסקרת ב 14, 47). לכן, זה קריטי עבור הפריטים הפרדיגמה הזו להיות מוחלף כל 48 שעות. בהתבסס על צורך הפריטים מרובים, האינטראקציה עם הפריטים והחקר שלהם, והאינטראקציה חברתית, אנו מוצאים כי המספר שלנו של פריטים ייחודיים, תדירות החלפת פריט, ומספר חבריהם לכלוב הוא מספיק כדי לגרום לתוצאות טיפוליות על אמצעי neuroanatomical כי אנו בוחנים. מצאנו כי חשיפה ממושכת במשך 30 ימים הוא מתאים יותר להתגבר גירעונות המושרה על ידי חשיפת אלכוהול בילוד מ אינטראקצית חשיפה מוגבלת בסביבת רומן. מטרת פרוטוקול זה היא להציג פרדיגמה WREC כי תעסוק הוא הפעילות האירובית ורכיבי חידוש סביבתיים של התערבות פלסטיק. מסיבה זו, נתייחס השינוי שיכול להתבצע על paradigמ &#39;אבל היה מזהיר השימוש שינויים שעשויים לשנות את הדרכים שבהן חיות אינטראקציה בתוך הפרדיגמה וכן מסקנות הניסוי שניתן להסיק. שינוי אפשרי אחד יהיה המבוא של הפעלת גלגלי לסביבה EC. בעשותו כן, זה יהיה קשה לקבוע את התרומה היחסית של כל רכיב. זה גם יהיה קשה להבטיח שכל החיות להשתתף בשני רכיבי WR ורכיבי EC של הפרדיגמה דיור של 8 - 10 בעלי חיים יחד נדרשו עבור EC. עם זאת, מאז גישה לטווח ארוכה כדי פעילות גופנית היא קריטית לגבי יעילותן של התערבות זו 45, מחקר נוסף עשוי להתייחס היחס האופטימלי של גישת WR לגשת EC (למרות השיטות בפרוטוקול זה הראו השלכות neuroanatomical והתנהגותיים חזקות 8, 33) . שינויים בפריטים בודדים בשימוש בסביבת EC כשרים, אבל זה critical עבור הפריטים להיות מעניין, מורכב, רומן, מגרה ולעתים קרובות רענון 14. פרדיגמה זו מכילה מספר מגבלות מולד בידינו, אשר צריכים להילקח בחשבון כאשר מתכננים ליישם את זה &quot;התערבות סופר&quot;. מגבלה אחת לרכיב WR של הפרדיגמה היא חוסר היכולת להעריך את המרחק מנוהל על ידי חיות אדם. אחד הפתרונים הברורים ופשוטים יהיה דיור בודד של החיות במהלך רכיב WR. עם זאת, היא צריכה להיות הדגישה כי דיור בודד מקובל כמו מזיק חיות ואפילו יכול ישירות לנטרל את ההשפעות המיטיבות של גלגל ריצה 48. חלופה נוספת (אם כי זמן רב לא מושלם) יהיה להקליט וידאו ההגה ריצה בכל העת כי יש חיות גישה. זה ידרוש מזהה ייחודי עבור כל חיה בכלוב (למשל, ציור צבעים ייחודיים או patterns על הפרווה של כל חיה) 49. טכניקה זו עדיין תהיה כפופה מקעקעת של בעלי חיים רבים ניצול ההגה במקביל. קושי דומה נושאת אל EC שבו הוא הופך להיות קשה מזון להגביל בעלי חיים בודדים (מבלי להגביל את פרק הזמן של צריכת מזון). כדי לצמצם את ההשפעה של זה, הייתי ממליץ דיור EC במשך 30 ימים מלאים ואחריו פרדיגמה הגבלת מזון מיידית. כמויות מורחבות של פסק זמן של EC יכולות לעכב מושרה פלסטיות המתרחשת במהלך הפרדיגמה הזו. כאמור, את החשיבות של מאמר זה היא לאפשר לאפיון עקבי של הפרדיגמה EC ויישומו לאחר פעילות גופנית לב וכלי דם בצורת WR. פרדיגמות EC הקודמות חשפו חיות לדיור EC ללא חשיפה WR 12, 50, WR בתוך כלוב EC עבור כמות זמן קצרה יותר 51או עם בעלי חיים פחות 52, או החיות נחשפו בסביבת EC עבור כמות זמן ארוכה יותר עם שינוי תכוף פחות של פריטי כלוב 13. סביר להניח כי ההשפעות המועילות של EC דורשות פלסטיות המושרית מ WR בחלון זמן רלוונטי באופן זמני לקבלה להראות תועלת בטווח ארוך. בדרך זו, אנו מאמינים כי צימוד WR ו- EC עבור 12 ו -30 ימים מאפשר בהתאמה עבור התערבות מועילה ותמציתי מקסימאלי. בשלב זה, השימוש במודל זה הוגבל לתקופות זמן מבוגר מתבגרים מוקדם. בדיקה נוספת על חוסנו של התערבות זו בשלבים שונים, ואת ontogeny תועלת neuroplastic יש לבחון עוד יותר בעתיד. בנוסף, השימוש של גירעונות התפתחותיים שונים הוא מאוד באופנה, כמו זה יסייע בפיתוח התערבויות טיפוליות יעילות עבור אנשים נגועים הפרעות כאלה. ספרות קודמות דהmonstrated תופעות עצמאיות של WR או EC על neurogenesis למבוגרים, למידה וזיכרון, או התנהגויות דמויות חרדה במודל של עכברים גנטי כלשהו לחרדה 53. חוסנו של שתי ההתערבויות הללו ואת אפקט סינרגיסטי של EC כדי לקיים את ההשפעות קצרות הטווח של הטבות WR-induced מוגברת (כלומר, התפשטות תאים בהיפוקמפוס נוירוגנזה) עושה את זה גם צפוי להשתלבות במגוון רחב של שאלות מחקר.

גידול בסביבות שונות כבר זמן רב ידוע כדי לגרום לשינויים במדדים שונים של בריאות נוירולוגיות. מחקרים רבים בודקים את ההשפעות המיטיבות של גידול בסביבה מורכבת (EC) החל מחקר פורץ דרך על ידי דיאמונד רוזנצוויג (למשל, 1, 2) ו Greenough (למשל, 3, 4). EC הוכח יש השפעות חיוביות להכחיש על שינויים סינפטיים וסלולר במוח 5, 6, 7. EC יכול להשפיע על ריבוי אזור המוח כולל ההיפוקמפוס 8, 9 ו בקליפת המוח הראייתית 10, 11, הסטריאטום גחון 12, 13, כמו גםכפונקציה neuroimmune המוח-רחב (הנסקרת ב 14). עניין רב במיוחד פתח ממחקרי על ההיפוקמפוס כשזה הודגם כי EC יכול להגדיל את שיעור ההישרדות של תאי גרגיר נולד-מבוגר של gyrus המשוננת באמצעות פלסטיות דנדריטים 9, 13. הנקודה האחרונה אסף עניין רב בשל הגוף הולך וגדל של ספרות המציין כי פעילות אירובית מקדמת neurogenesis למבוגרים הם במוח הבריא הפגום 15, 16, 17, 18. ריצת עגלה (WR) היא קל ליישם בצורה של פעילות לב וכלי דם מהרצון כי הוכח להועיל במודלים של מכרסמים של הפרעות נוירולוגיות או הזדקנות 17, 19, 20. WR משפיע על הביטוי של גורמי גדילה<html> הן במערכת העצבים המרכזית וההיקפית 21, 22, 23. שילוב (לימים) WR ו- EC לתוך &quot;superintervention&quot; (WR-EC) (כלומר, 12 ימים של WR ואחריו 30 ימים EC) מספקים עלייה חזקה neurogenesis למבוגרים בהיפוקמפוס הישרדות המוגבר של התאים התרבו לאחרונה 8, אפקט כי במודל חיה של FASD אינה מושגת על ידי רכיבים בודדים (ראה להלן). מאז הן רכיבים של WR-EC להשפיע על מגוון רחב של מבנים בתוך המוח 13 (WR הנסקרת ב 22, EC הנסקרת ב 24), יישום התערבות זו ניתן ליישם בקלות במודלים של מכרסמים של שני הדגמים הופעת החיים התפתחותיים מאוחרים יותר של נוירולוגיות ירידת ערך (למשל, חשיפת אלכוהול בילוד, הזדקנות, מתח בתחילת חיים). NT &quot;&gt; שילוב של WR-EC בתקופות המבוגרות מתבגר מוקדם (כלומר, ימים לאחר לידה 30 - 72) יכולים לשפר כמה מן ההשפעות השליליות של מודל עכברוש של פרעות ספקטרום אלכוהול עובריות (FASDs) 8 אוסף של מחקרים. מכרסמים הפגינו שחשף לאלכוהול מיום הלידה (PD) 4 עד 9 התצוגה גירעונות משמעותיים צעדים neuroanatomical כגון מורכבות הדנדריטים 25, פיתוח המוח הקטן 26, 27 והיענות neuroimmune 28 כמו גם גילויי למידה לקוי וזיכרון 29, 30, 31 . אפילו כמות מופחתת של חשיפת אלכוהול בתוך חלון זמן זה (כלומר, פ&quot;ד 7 עד 9) יכולה להוביל גירעונות למידה וזיכרון בחולדות מתבגרות ומבוגר 32 בעוד כמה מבנים כבר לא רואים sigליקוי neuroanatomical תופעה משמעותי, 27. רבי גירעונות אלה - בנוסף ליקויי התנהגותי במשימות ההיפוקמפוס תלויה - כבר מתנו בעקבות חשיפה הפרדיגמה WR-EC זה 8, 33 או WR לבד 25, 31. למרות WR לבד כבר התערבות בשימוש נרחב, השילוב של WR-EC טרם נוצל בספרות למרות יכולתה לקיים את היתרונות יחסית לטווח קצר של WR 8. מאמר זה יעסוק ביישום של התערבות WR-EC בגיל ההתבגרות. למרות פרדיגמה זו משמשת בהקשר של חשיפה אלכוהול לאחר הלידה המוקדמת, זה יכול להיות מוצג בפני במודלים של מכרסמים שונים כדי להעריך את הפוטנציאל של המוח עבור פלסטיות עצבית במודלים של הפרעות במוח.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="698">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">Female Time-pregnant Long Evans Rats</td>
			<td style="width:124px;">Envigo (Formerly: Harlan, Inc.)</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:191px;">Average litter size is 8-10 pups</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">Black India Ink</td>
			<td style="width:124px;">Higgins (Chartpak, Inc.)</td>
			<td style="width:136px;">44201</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:247px;">Syringes and Injection Needles</td>
			<td style="width:124px;">Becton, Dickinson and Company (BD)</td>
			<td style="width:136px;">Assorted</td>
			<td style="width:191px;">For injection of pawmarking ink, administration of milk-alcohol solution</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">Ear Punch</td>
			<td style="width:124px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:136px;">INS750076</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:247px;">Running Wheels</td>
			<td style="width:124px;">Wahmann Labs</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:191px;">Wahmann Running Wheel is discontinued. Substitute with&#160; One per cage</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">EC Cage</td>
			<td style="width:124px;">Martin&#39;s Cages, Inc.</td>
			<td style="width:136px;">R-695</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Small EC Toys</td>
			<td style="width:124px;">Assorted</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:247px;">Medium EC Toys</td>
			<td style="width:124px;">Assorted</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:191px;">Should be able to fit 1-2 rats inside of/ on top of object</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:247px;">Large EC Toys</td>
			<td style="width:124px;">Assorted</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:191px;">Should be able to fit 3 or more rats inside of/on top of object</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

wheel running and environmental complexity as a therapeutic intervention in an animal model of fasd

התעמלות אירובית (למשל, פועל גלגל (WR) בשימוש נרחב במחקר בבעלי חיים) באופן חיובי משפיע אמצעים רבים של פוטנציאל neuroplastic במוח, כגון שיעורי neurogenesis למבוגרים, אנגיוגנזה, וביטוי של גורמים neurotrophic במכרסמים. התערבות זו גם הוכח כדי להקטין היבטים התנהגותיים neuroanatomical של ההשפעות השליליות של teratogens (כלומר, חשיפה התפתחותי לאלכוהול) ו ניוון מוחיים הקשורים בגיל במכרסמים. מורכבות סביבה (EC) הוכחו לייצר הטבות neuroplastic רבות במבנים הקורטיקלית קורטיקליים וניתנות בשילוב עם ריצה גלגל להגדיל את ההתפשטות והישרדות של תאים חדשים בהיפוקמפוס המבוגר. השילוב של שתי ההתערבויות הללו מספק חזק &quot;superintervention&quot; (WR-EC) כי ניתן ליישם במגוון במודלים של מכרסמים של הפרעות נוירולוגיות. אנו נדון יישום WR / EC ו המהוות אותהterventions לשימוש התערבות טיפולית חזקה יותר בחולדות באמצעות במודל חיה של חשיפה טרום לידתית אלכוהול אצל בני אדם. כמו כן נדונו בו אלמנטים של הנהלים הם הכרחיים עבור ההתערבויות ואלו עשויים להשתנות בהתאם לשאלה או המתקנים של הנסיין.

על מנת להעריך את השפעת ההתערבות סופר, אנחנו חייבים להסתכל על ההשפעות של כל אחד מבני היסוד שלה - WR ו- EC - על אמצעים שלנו של עניין. דמויות 1 עד 3 (להלן) הופיעה בפרסום קודם ניצול הפרדיגמה 8 זה. איור 4 הופיע עבודת דוקטור 36. נתונים אלה ממחישים את ההשפעה של WR-EC על neurogenesis למבוגרים בהיפוקמפוס gyrus המשוננת. כל הגרפים להמחיש אמצעי קבוצה, עם ברי שגיאה על שגיאת תקן יחיד מממוצע. איור 1 מדגים עליות שגשוג תאים הבאים חלק WR התערבותנו, המציין כי רכיב WR מסוגל וחסון של הגדלת תרבות תאים של DG של ההיפוקמפוס מתפתח בצורה תקינה, בתחילת החיים הדגישו, ובעלי חיים חשופים אלכוהול. איור 2בא להמחיש את יכולות EC להגדיל הישרדות של תאים שנוצרו בוגרת DG בחיות שנחשפו ללחץ או אלכוהול או neonatally. איור 3 מדגים את הגידול תא להתמיין פנוטיפ עצבי, המציין כי WR-EC יכול להגדיל התפשטות והישרדות של תאי גרגיר מבוגרי יליד המשונן gyrus בחיות שעוברות חשיפה בילוד לאלכוהול או אינטובציה מתח, שסבך את זה בתור טיפולי גירעונות הצלה neurogenesis למבוגרים בהיפוקמפוס. לבסוף, איור 4 מאשרת את השפעת WR-EC על פלסטיות דנדריטים: אורך דנדריטים doublecortin החיובי של תאי הגרגיר &#39;gyrus המשוננת בחולדות AE הוא כבר לא שונה משליטה. תוכן דם אלכוהול (BAC) על PD 4 היה 321.19 ± 14.03 מ&quot;ג / ד&quot;ל (ממוצע ± SEM), להשוות מחקרים אחרים באמצעות פרדיגמה חשיפה זו 28, 37. מחקרים קודמים הראו כי חיותלחצות קבוצות הטיפול אלה אינם שונים מרחקים לפעול במהלך WR 15. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54947/54947fig1.jpg" /> WR באיור 1. וחסונה מגדילה התפשטות תאים ב בהיפוקמפוס DG. Photomicrographs להמחיש הבדלים התפשטות תאים של DG על PD42 (הפסקת WR) כפי שכותרתו עם Bromo-deoxyuridine (BrdU) אצל בעלי חיים AE הבאים WR (א) ו דיור ציבורי (B). WR וחסונה מגבירה proliferations תא ללא קשר לטיפול בילוד (C). ANOVA דו סטרי חשף השפעה עיקרית של מצב דיור (WR לעומת SH) (F 1,40 = 19.703, p &lt;0.001), אך לא השפעה עיקרית משמעותית של טיפול לאחר לידה (SC vs. SI vs. AE) או אינטראקציה בין שני הגורמים נצפו. השוואות הוק הודעה בוצעו כבדיקות של Tukey. כל הערכים repreנשלח ממוצע ± סטיית התקן של הממוצע (SEM). * P &lt;0.05, #p &lt;0.01. נתון זה שוחזר מאל et המילטון. 2012 8. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54947/54947fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54947/54947fig2.jpg" /> WR איור 2. ואחריו גירעונות מצילים במטבע הישרדות תא בעקבות חשיפה ילודה אלכוהול או מתח שאם. Photomicrographs להמחיש הבדלים תא שכותרתו עם BrdU בחיות AE מ WR-EC (א) ו תנאי שוכנו חברתיים (B) הוזרקו BrdU על PD41. באירועי חיות שוכנו מציגות ירידה בעקבות חשיפת אלכוהול ביחס לינוק שולטים. בעלי חיים שעברו את שיעורי ההישרדות WR-EC גדל superintervention התצוגה של תאים מתרבים לאחר PD41 בשתי הקבוצות SI ו AE (C). ANOVA דו סטרי חשף ההשפעה העיקרית של מצב הדיור (WR לעומת SH) (F 1,29 = 11.402, p &lt;0.01) ו אינטראקציה מובהקת בין טיפול לאחר הלידה ומצב הדיור (F 1,29 = 3.870, p &lt; 0.05), אך לא השפעה עיקרית משמעותית של טיפול לאחר לידה (SC לעומת SI לעומת AE) נצפתה. ANOVA חד כיווני בתוך חי SH חשף השפעה עיקרית של טיפול לאחר לידה (F 1,19 = 3.727, p &lt;0.05) ואילו ANOVA חד כיווני בתוך חי WREC עולה כי אין הבדלים משמעותיים בין טיפולים לאחר לידה. השוואות הוק הודעה בוצעו כבדיקות של Tukey. כל הערכים מייצגים ממוצע ± SEM. * P &lt;0.05, #p &lt;0.01. נתון זה שוחזר מאל et המילטון. 2012 8. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54947/54947fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של figu זה</a>מִחָדָשׁ. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54947/54947fig3.jpg" /> גירעונות איור 3. WR-EC מצילים ב Neurogenesis בעקבות חשיפת אלכוהול ילודים או מתח שאם. שיתוף לוקליזציה של BrdU (ירוק) הביטוי NeuN (אדום) בתאי גרגיר בהיפוקמפוס. תמונות confocal פלורסנט נרכשו בעקבות הליכים immunohistochemical. BrdU הוזרק על רקמת PD41 נאסף על PD72. שניהם BrdU ו NeuN נצפו DG (A, B). למרות החיות SC לא הראו עלייה משמעותית במספר מתרבים נוירונים, הן חיות AE ו SI הראו עלייה נוירוגנזה (כפי שצוין על ידי תיוג כפול עם BrdU ו NeuN) בעקבות הפרדיגמה WR-EC לעומת בעלי חיים שוכנו חברתית (C) . ANOVA דו סטרי חשף השפעה עיקרית של מצב דיור (WR לעומת SH) (F 1,28 = 20.48, p &lt;0.001), אך לא effe העיקרית משמעותיתct של טיפול לאחר לידה (SC לעומת SI לעומת AE) או אינטראקציה בין שני הגורמים נצפה. השוואות הוק הודעה בוצעו כבדיקות של Tukey. כל הערכים מייצגים ממוצע ± SEM. * P &lt;0.05, #p &lt;0.01. נתון זה שוחזר מאל et המילטון. 2012 8. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54947/54947fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/54947/54947fig4.jpg" /> גירעונות מציל איור 4. WR-EC הדנדריטים המורכבים של תאי הגרגיר בהיפוקמפוס DG. Sholl מנתח צומת הדנדריטים להמחיש התופעות להקל עליו של WR-EC על מורכבות הדנדריטים gyrus המשוננת של חולדות בוגרות בעקבות חשיפת אלכוהול בילוד. בתנאי דיור ציבוריים, חיות AE יש מספר מופחת תא גרגיר DG<html> דנדריט בצמתים יחסית לשלוט בעלי חיים (א). דיור WREC מגדיל את מספר צמתים בחיות AE בהשוואה לביקורות שוכנו החברתי (ב). חיות AE שגדלו בפרדיגמה WREC שלנו להציג מספרים דומים של צמתים יחסית לשלוט חיות שוכנו WREC (ג). ANOVAs מידה החוזרת בוצעה על הנתונים בכל גרף. פנל הדגים השפעה עיקרית של טיפול לאחר לידה (F 1,11 = 6.265, p = 0.029). לוח ב &#39;ממחיש מגמה של השפעה עיקרית בין תנאי דיור (F 1,6 = 4.181, p = 0.087). ג לוח מדגים הבדל משמעותי בין SC וחיות AE בתוך מצב הדיור WREC. כל השוואות פוסט הוק בוצעו כבדיקות של Tukey. כל הערכים מייצגים ממוצע ± SEM. ^ P &lt;0.01, * p &lt;0.05. נתון זה שוחזר מן המילטון, 2012 36.&quot;Target =&quot; pg _ blank &quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Watch this Scientific Journal Video about Wheel Running and Environmental Complexity as a Therapeutic Intervention in an Animal Model of FASD at JoVE.com

Wheel Running and Environmental Complexity as a Therapeutic Intervention in an Animal Model of FASD

יש תרגיל לב וכלי דם וחוויות מגרה בסביבה מורכבת יתרונות חיוביים על אמצעים מרובים של פלסטיות עצבית במוח המכרסם. מאמר זה יעסוק ביישום של התערבויות אלה בתור &quot;superintervention&quot; המשלב ריצה גלגל ומורכבות סביבתיות יעסוק המגבלות של התערבויות אלה.

ריצת גלגל וסביבתי מורכב כמו התערבות טיפולית במודל חיה של FASD

Aerobic exercise (e.g., wheel running (WR) extensively used in animal research) positively impacts many measures of neuroplastic potential in the brain, ...

wheel-running-environmental-complexity-as-therapeutic-intervention-an

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

6.7K Views.  University of Delaware.  יש תרגיל לב וכלי דם וחוויות מגרה בסביבה מורכבת יתרונות חיוביים על אמצעים מרובים של פלסטיות עצבית במוח המכרסם. מאמר זה יעסוק ביישום של התערבויות אלה בתור "superintervention" המשלב ריצה גלגל ומורכבות סביבתיות יעסוק המגבלות של התערבויות אלה. 

Video: Wheel Running and Environmental Complexity as a Therapeutic Intervention in an Animal Model of FASD

The Crossmodal Congruency Task as a Means to Obtain an Objective Behavioral Measure in the Rubber Hand Illusion Paradigm

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden hand is touched. If the viewed and felt touches are given at the same time then this is sufficient to induce the compelling experience that the rubber hand is one's own hand. The RHI can be used to investigate exactly how the brain constructs distinct body representations for one's own body. Such representations are crucial for successful interactions with the external world. To obtain a subjective measure of the RHI, researchers typically ask participants to rate statements such as "I felt as if the rubber hand were my hand". Here we demonstrate how the crossmodal congruency task can be used to obtain an objective behavioral measure within this paradigm.
The variant of the crossmodal congruency task we employ involves the presentation of tactile targets and visual distractors. Targets and distractors are spatially congruent (i.e. same finger) on some trials and incongruent (i.e. different finger) on others. The difference in performance between incongruent and congruent trials - the crossmodal congruency effect (CCE) - indexes multisensory interactions. Importantly, the CCE is modulated both by viewing a hand as well as the synchrony of viewed and felt touch which are both crucial factors for the RHI.
The use of the crossmodal congruency task within the RHI paradigm has several advantages. It is a simple behavioral measure which can be repeated many times and which can be obtained during the illusion while participants view the artificial hand. Furthermore, this measure is not susceptible to observer and experimenter biases. The combination of the RHI paradigm with the crossmodal congruency task allows in particular for the investigation of multisensory processes which are critical for modulations of body representations as in the RHI.

We demonstrate how an objective measure can be employed in the widely employed rubber hand illusion paradigm. This measure is obtained by modifying the well-established crossmodal congruency task. This task allows the investigation of multisensory processes which are critical for modulations of body representations as in the rubber hand illusion.

משימת קונגרואנסי Crossmodal כאמצעי להשיג מדוד התנהגות אובייקטיבי בפרדיגמה האשליה יד גומי

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden ...

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

The minimization and alleviation of suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this negative experience one must be able to identify when an animal is actually in distress. Pain, illness, or distress cannot be managed if unrecognized. Evaluation of pain or illness typically involves the measurement of physiologic and behavioral indicators which are either invasive or not suitable for large scale assessment. The observation of nesting behavior shows promise as the basis of a species appropriate cage-side assessment tool for recognizing distress in mice. Here we demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an ethologically relevant indicator of welfare. The methods presented can be successfully used to identify thermal stressors, aggressive cages, sickness, and pain. Observation of nest building behavior in mouse colonies provides a refinement to health and well-being assessment on a day to day basis.

We demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an indicator of welfare. Nest scoring is a sensitive technique that is altered by temperature, illness, and aggression. The time to integrate into nest test (TINT) is a simple cage-side assessment that can detect postoperative pain.

The minimization and alleviation of  suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this  negative experience one must be able to ...

The Use of the Puzzle Box as a Means of Assessing the Efficacy of Environmental Enrichment

Environmental enrichment can dramatically influence the development and function of neural circuits. Further, enrichment has been shown to successfully delay the onset of symptoms in models of Huntington&#8217;s disease 1-4, suggesting environmental factors can evoke a neuroprotective effect against the progressive, cellular level damage observed in neurodegenerative disorders. The ways in which an animal can be environmentally enriched, however, can vary considerably. Further, there is no straightforward manner in which the effects of environmental enrichment can be assessed: most methods require either fairly complicated behavioral paradigms and/or postmortem anatomical/physiological analyses. This protocol describes the use of a simple and inexpensive behavioral assay, the Puzzle Box 5-7 as a robust means of determining the efficacy of increased social, sensory and motor stimulation on mice compared to cohorts raised in standard laboratory conditions. This simple problem solving task takes advantage of a rodent&#8217;s innate desire to avoid open enclosures by seeking shelter. Cognitive ability is assessed by adding increasingly complex impediments to the shelter&#8217;s entrance. The time a given subject takes to successfully remove the obstructions and enter the shelter serves as the primary metric for task performance. This method could provide a reliable means of rapidly assessing the efficacy of different enrichment protocols on cognitive function, thus paving the way for systematically determining the role specific environmental factors play in delaying the onset of neurodevelopmental and neurodegenerative disease.

Environmental enrichment provides a potential protective effect against neurodegenerative disorders. Currently, however, there is no easy way of determining the efficacy of enrichment procedures. This protocol describes a simple &#8220;Puzzle Box&#8221; method for assessing an animal&#8217;s cognitive function, in order to reveal the effectiveness of environmental enrichment.

השימוש בתיבת פאזל כאמצעי להערכת היעילות של הסביבה העשרה

Environmental enrichment can dramatically influence the development and function of neural circuits.  Further, enrichment has been shown to successfully ...

The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like behavior in rodents. The FST is based on the assumption that when placing an animal in a container filled with water, it will first make efforts to escape but eventually will exhibit immobility that may be considered to reflect a measure of behavioral despair. This test has been extensively used because it involves the exposure of the animals to stress, which was shown to have a role in the tendency for major depression. Additionally, the FST has been shown to share some of the factors that are influenced or altered by depression in humans, including changes in food consumption, sleep abnormalities and drug-withdrawal-induced anhedonia. The main advantages of this procedure are that it is relatively easy to perform and that its results are easily and quickly analyzed. Moreover, its sensitivity to a broad range of antidepressant drugs that makes it a suitable screening test is one of the most important features leading to its high predictive validity. Despite its appeal, this model has a number of disadvantages. First, the issue of chronic augmentation is problematic in this test because in real life patients need to be treated for at least several weeks before they experience any relief from their symptoms. Last, due to the aversiveness of the FST, it is important to take into account possible influences it might have on brain structure/function if brain analyses are to be carried out following this procedure.

This protocol describes the forced swim test, which is used for the study of depressive-like behavior in rodents. This procedure involves placing an animal in a container filled with water that eventually will lead to the exhibition of immobility behavior, which is considered to reflect behavioral despair.

המבחן לשחות בכפייה כמודל להתנהגות דמוית דיכאון

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

An Innovative Running Wheel-based Mechanism for Improved Rat Training Performance

This study presents an animal mobility system, equipped with a positioning running wheel (PRW), as a way to quantify the efficacy of an exercise activity for reducing the severity of the effects of the stroke&#160;in rats. This system provides more effective animal exercise training than commercially available systems such as treadmills and motorized running wheels (MRWs). In contrast to an MRW that can only achieve speeds below 20 m/min, rats are permitted to run at a stable speed of 30 m/min on a more spacious and high-density rubber running track supported by a 15 cm wide acrylic wheel with a diameter of 55 cm in this work. Using a predefined adaptive acceleration curve, the system not only reduces the operator error but also trains the rats to run persistently until a specified intensity is reached. As a way to evaluate the exercise effectiveness, real-time position of a rat is detected by four pairs of infrared sensors deployed on the running wheel. Once an adaptive acceleration curve is initiated using a microcontroller, the data obtained by the infrared sensors are automatically recorded and analyzed in a computer. For comparison purposes, 3 week training is conducted on rats using a treadmill, an MRW and a PRW. After surgically inducing middle cerebral artery occlusion (MCAo), modified neurological severity scores (mNSS) and an inclined plane test were conducted to assess the neurological damages to the rats. PRW is experimentally validated as the most effective among such animal mobility systems. Furthermore, an exercise effectiveness measure, based on rat position analysis, showed that there is a high negative correlation between the effective exercise and the infarct volume, and can be employed to quantify a rat training in any type of brain damage reduction&#160;experiments.

This study presents an innovative running wheel-based animal mobility system to quantify an effective exercise activity in rats. A rat-friendly testbed is built, using a predefined adaptive acceleration curve, and a high correlation between the effective exercise rate and the infarct volume suggests the protocol&#39;s potential for stroke prevention experiments.

מנגנון גלגלים מבוססי ריצה חדשני עבור ביצועי הדרכת עכברוש משופרים

This study presents an animal mobility system, equipped with a positioning running wheel (PRW), as a way to quantify the efficacy of an exercise activity ...

Introducing Clicker Training as a Cognitive Enrichment for Laboratory Mice

Establishing new refinement strategies in laboratory animal science is a central goal in fulfilling the requirements of Directive 2010/63/EU. Previous research determined a profound impact of gentle handling protocols on the well-being of laboratory mice. By introducing clicker training to the keeping of mice, not only do we promote the amicable treatment of mice, but we also enable them to experience cognitive enrichment. Clicker training is a form of positive reinforcement training using a conditioned secondary reinforcer, the "click" sound of a clicker, which serves as a time bridge between the strengthened behavior and an upcoming reward. The effective implementation of the clicker training protocol with a cohort of 12 BALB/c inbred mice of each sex proved to be uncomplicated. The mice learned rather quickly when challenged with tasks of the clicker training protocol, and almost all trained mice overcame the challenges they were given (100% of female mice and 83% of male mice). This study has identified that clicker training for mice strongly correlates with reduced fear in the mice during human-mice interactions, as shown by reduced anxiety-related behaviors (e.g., defecation, vocalization, and urination) and fewer depression-like behaviors (e.g., floating). By developing a reliable protocol that can be easily integrated into the daily routine of the keeping of laboratory mice, the lifetime experience of welfare in the mice can be improved substantially.

The development of new refinement strategies for laboratory mice is a challenging task that contributes towards fulfilling the 3R principle. This protocol introduces clicker training as a cognitive enrichment program for laboratory mice.

היכרות הדרכת Clicker בתור העשרה קוגניטיבית עבור עכברי מעבדה

Establishing new refinement strategies in laboratory animal science is a central goal in fulfilling the requirements of Directive 2010/63/EU. Previous ...

Establishment of a Valuable Mimic of Alzheimer's Disease in Rat Animal Model by Intracerebroventricular Injection of Composited Amyloid Beta Protein

Alzheimer&#39;s disease (AD) is an irreversible, progressive brain disease that slowly destroys memory and is accompanied by neuron loss and structure change. With the increase of AD patients worldwide, the pathology and treatment of the disease has become a focus in the International Pharmaceutical Industry. Thus, the establishment of the animal model to mimic AD in the laboratory is of great importance.
Here, we describe a detailed protocol for establishing a mimic of AD in a rat animal model though intracerebroventricular injection of amyloid beta protein 25-35 (A&#946;25-35) combined with aluminum trichloride (AlCl3) and anterodorsal thalamic nucleus injection of recombinant human transforming growth factor-&#946;1 (RHTGF-&#946;1) to rats. The related markers of AD were measured, including: spatial memory, neuronal structure and substructure, neuronal A&#946;, and neurofibrillary tangles (NFT) production. This rat model demonstrates spatial memory impairment, neuronal structure and substructure pathological changes, neuron intracellular A&#946; burden, and NFT aggregation, and provides a close mimic of the neuronal structure and function disorder to that of clinical AD patients. Thus, the presented AD rat modelprovides a valuable in vivo tool for exploring neuronal function, neuronal pathology, and drug screening of AD.

This is a protocol to mimic Alzheimer&#39;s Disease in rats by evaluation of spatial memory impairment, neuronal pathological changes, neuronal amyloid beta protein (A&#946;) burden, and neurofibrillary tangles aggregation, induced by the injection of A&#946;25-35 combined with aluminum trichloride and recombinant human transforming growth factor-&#946;1.

הקמת לחקות יקר של מחלת אלצהיימר במודל בעלי חיים עכברים באמצעות הזרקת Intracerebroventricular החלבון בטא עמילואיד שערכת

Alzheimer&#39;s disease (AD) is an irreversible, progressive brain disease that slowly destroys memory and is accompanied by neuron loss and structure ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

בדיקות בבעלי חיים חרדה אצל חולדות: ההשפעות של אדני היד פתוחה סגורה זרוע קיר שקיפות מוגבר בתוספת מבחן מבוך

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

Nest Building Behavior as an Early Indicator of Behavioral Deficits in Mice

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents synthetic and/or natural materials (such as twine, tissue, cotton, paper, and hay) as a gauge of their overall well-being and as an ancillary assessment to predict the possible decline in cognition. Typically, changes in nesting behaviors, such as failure to create a nest, indicate a change in health or welfare. In addition, nesting behavior is sensitive to many environmental and physiological challenges, as well as many genetic mutations underlying pathological disease states. The following protocol describes a nesting behavior paradigm that explores the usage of four types of nesting material. In addition, the protocol utilizes intraclass correlations to demonstrate that inter-rater reliability is higher when nests are constructed out of shredded paper compared to other common nesting materials such as cotton squares, paper twists, and soft cob bedding. The chosen methodology and statistical considerations (i.e., intraclass correlation) for this assay may be of interest for those conducting experiments assessing the quality of living of mice.&#160;

Here, we present a protocol to quantify nest building behavior in mice, which is known to be impaired in several neurological disorders and diseases. This protocol examines the utility of four materials and offers the opportunity to quantify the rater agreement in scoring, improving the validity and reliability of the assay.

קן התנהגות בניין כאינדיקציה מוקדמת של התנהגות בעכברים

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents ...

The Use of Traditional Fear Tests to Evaluate Different Emotional Circuits in Cattle

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli may facilitate breeding selections and identify animals that are better suited to specific management strategies. Multiple tests have been developed to evaluate cattle temperament (e.g., exit velocity, chute score, pen score, open field test, startle test, bovine zero maze), but each of these tests evaluates the animal&#39;s response to different stimuli (e.g., isolation, novel environment, startle, willingness to enter an enclosed area). Cattle temperament has been observed to be relatively stable over time. However, the evaluation of temperament has the potential to be influenced by current conditions, previous experiences, and observer bias. Many of these temperament tests have been improperly categorized as fear tests and have also been criticized for being subjective. This paper provides a framework for standardizing behavioral tests for cattle and suggests that these different evaluations assess different aspects of the animal&#39;s overall temperament.

Here, we present a protocol to conduct a variety of behavioral tests in cattle that have been designed to evaluate emotions. A battery of behavioral tests (open field test, startle test, bovine zero maze, exit velocity, pen score, and chute score) were conducted to evaluate different components of animal temperament.

השימוש של בדיקות פחד מסורתיות להערכת מעגלים רגשיים שונים בבקר

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli ...