The authors would like to thank John Kristensen and S&#248;ren Braad Andersen from the Department of Communication, Aarhus University Hospital, Denmark, for their exceptional help with filming and editing. Animal technician Diana Gyldenl&#248;ve and veterinarian Birgitte Kousgaard, Institute of Clinical Medicine Aarhus University Hospital, Denmark for assisting with animal care. This study was supported by the Lundbeck Foundation, the Laerdal Foundation for Acute Medicine, Central Denmark Region&#8217;s Research Foundation, Augustinus Foundation, Aase and Ejnar Danielsens Foundation, the Institute of Clinical Medicine Aarhus University Hospital, Br&#248;drene Hartmanns Foundation, Karen Elise Jensens Foundation, Fonden til L&#230;gevidenskabens Fremme, and Marie Dorthea og Holger From, Haderslevs Fond.

<ol>
	<li>Chakkarapani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenon+enhances+hypothermic+neuroprotection+in+asphyxiated+newborn+pigs.">Xenon enhances hypothermic neuroprotection in asphyxiated newborn pigs.</a> Annals of. 68, 330-341 (2010).</li><li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+augments+hypothermic+neuroprotection+in+a+perinatal+asphyxia+model.">Melatonin augments hypothermic neuroprotection in a perinatal asphyxia model.</a> Brain : a journal of neurology. 136, 90-105 (2013).</li><li>Lawn, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Every+Newborn:+progress,+priorities,+and+potential+beyond+survival.">Every Newborn: progress, priorities, and potential beyond survival.</a> Lancet. 384, 189-205 (2014).</li><li>Lee, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrapartum-related+neonatal+encephalopathy+incidence+and+impairment+at+regional+and+global+levels+for+2010+with+trends+from+1990.">Intrapartum-related neonatal encephalopathy incidence and impairment at regional and global levels for 2010 with trends from 1990.</a> Pediatric research. 74, 50-72 (2013).</li><li>Kurinczuk, J. J., White-Koning, M., Badawi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+neonatal+encephalopathy+and+hypoxic-ischaemic+encephalopathy.">Epidemiology of neonatal encephalopathy and hypoxic-ischaemic encephalopathy.</a> Early human development. 86, 329-338 (2010).</li><li>Shankaran, S., Woldt, E., Koepke, T., Bedard, M. P., Nandyal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+neonatal+morbidity+and+long-term+central+nervous+system+sequelae+of+perinatal+asphyxia+in+term+infants.">Acute neonatal morbidity and long-term central nervous system sequelae of perinatal asphyxia in term infants.</a> Early human development. 25, 135-148 (1991).</li><li>Robertson, C. M., Finer, N. N., Grace, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=School+performance+of+survivors+of+neonatal+encephalopathy+associated+with+birth+asphyxia+at+term.">School performance of survivors of neonatal encephalopathy associated with birth asphyxia at term.</a> The Journal of pediatrics. 114, 753-760 (1989).</li><li>Bennet, L., Booth, L., Gunn, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+biomarkers+for+hypoxic-ischemic+encephalopathy.">Potential biomarkers for hypoxic-ischemic encephalopathy.</a> Seminars in feta., &amp; neonatal medicine. 15, 253-260 (2010).</li><li>Yager, J. Y., Ashwal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+perinatal+hypoxic-ischemic+brain+damage.">Animal models of perinatal hypoxic-ischemic brain damage.</a> Pediatric neurology. 40, 156-167 (2009).</li><li>Buckley, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturation+of+circulatory+system+in+three+mammalian+models+of+human+development.">Maturation of circulatory system in three mammalian models of human development.</a> Comparative biochemistry and physiology. A, Comparative. 83, 1-7 (1986).</li><li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt.">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early human development. 3, 79-83 (1979).</li><li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+growth+and+development+of+human+brain.">Quantitative growth and development of human brain.</a> Archives of disease in childhood. 48, 757-767 (1973).</li><li>Foster, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+survival+model+of+hypoxia/ischaemia+in+the+piglet+suitable+for+neuroprotection+studies.">An improved survival model of hypoxia/ischaemia in the piglet suitable for neuroprotection studies.</a> Brain research. 919, 122-131 (2001).</li><li>LeBlanc, M. H., Li, X. Q., Huang, M., Patel, D. M., Smith, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AMPA+antagonist+LY293558+does+not+affect+the+severity+of+hypoxic-ischemic+injury+in+newborn+pigs.">AMPA antagonist LY293558 does not affect the severity of hypoxic-ischemic injury in newborn pigs.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1908-1914 (1995).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nicotine+affects+the+expression+of+brain-derived+neurotrophic+factor+mRNA+and+protein+in+the+hippocampus+of+hypoxic+newborn+piglets.">Nicotine affects the expression of brain-derived neurotrophic factor mRNA and protein in the hippocampus of hypoxic newborn piglets.</a> J Perinat Med. 37, 553-560 (2009).</li><li>Cheung, P. Y., Gill, R. S., Bigam, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+swine+model+of+neonatal+asphyxia.">A swine model of neonatal asphyxia.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).</li><li>Thoresen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+piglet+survival+model+of+posthypoxic+encephalopathy.">A piglet survival model of posthypoxic encephalopathy.</a> Pediatric research. 40, 738-748 (1996).</li><li>Liu, X., Tooley, J., Loberg, E. M., Suleiman, M. S., Thoresen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immediate+hypothermia+reduces+cardiac+troponin+I+after+hypoxic-ischemic+encephalopathy+in+newborn+pigs.">Immediate hypothermia reduces cardiac troponin I after hypoxic-ischemic encephalopathy in newborn pigs.</a> Pediatric research. 70, 352-356 (2011).</li><li>Bjorkman, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxic/Ischemic+models+in+newborn+piglet:+comparison+of+constant+FiO2+versus+variable+FiO2+delivery.">Hypoxic/Ischemic models in newborn piglet: comparison of constant FiO2 versus variable FiO2 delivery.</a> Brain research. 1100, 110-117 (2006).</li><li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Which+neuroprotective+agents+are+ready+for+bench+to+bedside+translation+in+the+newborn+infant.">Which neuroprotective agents are ready for bench to bedside translation in the newborn infant.</a> The Journal of pediatrics. 160, 544-552 (2012).</li><li>Jacobs, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cooling+for+newborns+with+hypoxic+ischaemic+encephalopathy.">Cooling for newborns with hypoxic ischaemic encephalopathy.</a> Cochrane Database Syst Rev. 1, CD003311 (2013).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resuscitation+with+21+or+100%+oxygen+in+hypoxic+nicotine-pretreated+newborn+piglets:+possible+neuroprotective+effects+of+nicotine.">Resuscitation with 21 or 100% oxygen in hypoxic nicotine-pretreated newborn piglets: possible neuroprotective effects of nicotine.</a> Neonatology. 93, 36-44 (2008).</li><li>Karlsson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+hypothermia+as+selective+head+cooling+or+whole+body+cooling+does+not+protect+brain+or+body+in+newborn+pig+subjected+to+hypoxia-ischemia.">Delayed hypothermia as selective head cooling or whole body cooling does not protect brain or body in newborn pig subjected to hypoxia-ischemia.</a> Pediatric research. 64, 74-78 (2008).</li><li>Kovacs, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asphyxia-induced+release+of+alpha-melanocyte-stimulating+hormone+in+newborn+pigs.">Asphyxia-induced release of alpha-melanocyte-stimulating hormone in newborn pigs.</a> Peptides. 22, 1049-1053 (2001).</li><li>Varvarousi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asphyxial+cardiac+arrest,+resuscitation+and+neurological+outcome+in+a+Landrace/Large-White+swine+model.">Asphyxial cardiac arrest, resuscitation and neurological outcome in a Landrace/Large-White swine model.</a> Laboratory animals. 45, 184-190 (2011).</li><li>Tammela, O., Pastuszko, A., Lajevardi, N. S., Delivoria-Papadopoulos, M., Wilson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity+of+tyrosine+hydroxylase+in+the+striatum+of+newborn+piglets+in+response+to+hypocapnic+hypoxia.">Activity of tyrosine hydroxylase in the striatum of newborn piglets in response to hypocapnic hypoxia.</a> Journal of neurochemistry. 60, 1399-1406 (1993).</li><li>Cote, A., Barter, J., Meehan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+metabolic+effects+of+repeated+hypoxemia+in+piglets.">Age-dependent metabolic effects of repeated hypoxemia in piglets.</a> Canadian journal of physiology and pharmacology. 78, 321-328 (2000).</li><li>Tichauer, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+severity+of+perinatal+hypoxia-ischemia+in+piglets+using+near-infrared+spectroscopy+to+measure+the+cerebral+metabolic+rate+of+oxygen.">Assessing the severity of perinatal hypoxia-ischemia in piglets using near-infrared spectroscopy to measure the cerebral metabolic rate of oxygen.</a> Pediatric research. 65, 301-306 (2009).</li><li>Jasani, M. S., Salzman, S. K., Tice, L. L., Ginn, A., Nadkarni, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic+regimen+effects+on+a+pediatric+porcine+model+of+asphyxial+arrest.">Anesthetic regimen effects on a pediatric porcine model of asphyxial arrest.</a> Resuscitation. 35, 69-75 (1997).</li><li>Chakkarapani, E., Thoresen, M., Liu, X., Walloe, L., Dingley, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenon+offers+stable+haemodynamics+independent+of+induced+hypothermia+after+hypoxia-ischaemia+in+newborn+pigs.">Xenon offers stable haemodynamics independent of induced hypothermia after hypoxia-ischaemia in newborn pigs.</a> Intensive care medicine. 38, 316-323 (2012).</li><li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+piglet+model+for+detection+of+hypoxic-ischemic+brain+injury+with+magnetic+resonance+imaging.">A piglet model for detection of hypoxic-ischemic brain injury with magnetic resonance imaging.</a> Acta radiologica. 49, 1049-1057 (2008).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+piglets+exposed+to+hypoxia+after+nicotine+or+saline+pretreatment:+long-term+effects+on+brain+and+heart.">Newborn piglets exposed to hypoxia after nicotine or saline pretreatment: long-term effects on brain and heart.</a> J Matern Fetal Neonatal Med. 22, 161-168 (2009).</li><li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resuscitation+with+100%+O2+increases+cerebral+injury+in+hypoxemic+piglets.">Resuscitation with 100% O2 increases cerebral injury in hypoxemic piglets.</a> Pediatric research. 56, 783-790 (2004).</li></ol>

יש המחברים אין לחשוף.

בשל מורכבותה, המודל שתואר יכול להיות מיושם רק במתקנים המוכרים ומנוסה במחקר בבעלי חיים. אישור על ידי ועדת אתיקה המקומית יש לקבל לפני תחילת הניסויים, ורווחת בעלי חיים אופטימלית יש להבטיח בכל העת. כמודל מבוסס על הישרדותם של בעלי החיים הבדיקה, חשובה שסביבת סטרילית נשמר במהלך פרוצדורות פולשניות כדי למנוע זיהומים. הבחירה של הרדמה היא חשובה כמו רוב אם לא כל תרופות ההרדמה מאפייני נוירו פוטנציאליים. הבדלים בתוצאות בין דגמים שפורסמו בעבר אולי היו נובעים בחלקו הבדלים בהרדמה משמשים, כגון הלותן או propofol 17,19. זוהי נקודה שנגעה רק לעתים נדירות בספרות, כמו הרדמה לא יכולה להיות מושמטת ויש מחסור בראיות שתהיינה ישים למודל זה. הגישה הפרגמטית שלנו היא להשתמש בכמה בידולהרדמה לא אפשרי, כי הוא sevoflurane משמש לזמן קצר בלבד, ולאחר מכן על propofol ופנטניל הם חדורים ברציפות. בניסויים שלנו בולוס תרופות משפיע על aEEG זמני, תוך שמירה על מסגרת המגבלות שצוינו עבור עירוי מתמשך לא. כאשר בודקים טיפולי נוירו הטיה היא להימנע על ידי שימוש בעיצוב מחקר אקראי. השלב הקריטי ביותר במודל הוא הקמתה של עלבון חוסר חמצן-איסכמי, כמטרה העיקרית היא לגרום למתונה לעלבון חוסר חמצן-איסכמי חמור בעוד באותו הזמן על מנת להבטיח הישרדות של בעלי חיים. האיכות הייחודית של מודל hie זה היא היכולת להתאים את התגובות ביולוגיות השונות להיפוקסיה מחיה לחיה. כותרות של אספקת חמצן לחלק הגבוה ביותר האפשרי וכתוצאה מכך aEEG (&lt;7 μV) מדוכא, מאפשרת להתאמות על פי כל סובלנות piglet&#39;s פרט להיפוקסיה, ובכך להבטיח שיעור הישרדות גבוה בשילוב עם neurolog המרביפציעת iCal 19. משך עקבות שטוחות aEEG במהלך 45 דקות של חוסר חמצן צריך להיות בהשוואה למידת פגיעה היסטופתולוגיות להערכה ואופטימיזציה של חומרת פציעה. חוקרים אחרים תוך שימוש במודל, יש לי דומים מדורגים עלבון חוסר חמצן-איסכמי ממיתון עד חמור בהתאם למשך דיכוי aEEG. כהתקפים במודל זה בעבר הוכחו לתאם עם חומרה של פגיעה מוחית בhistopathology 17 עם פוטנציאל טיפול קטן, אנו ממליצים רמת חומרת היפוקסיה-איסכמיה לא לייצר התקפים. רוב המחקרים באמצעות מודל hie החזרזיר כוללים 10 דקות של MABP הנמוך (MABP &lt;70% מבסיס) 19. ביורקמן et al. מצא שאם אספקת החמצן מגוונת במהלך היפוקסיה, את מידת פגיעה המוחית הייתה עצמאית של תקופת MABP הזמן היה מתחת ל -35 מ&quot;מ כספית 19. ניסויי פיילוט שבוצעו בעת הקמת מודל hie הנוכחי, חשף sustaine שתת לחץ דם ד בי MABP היה נמוך מ -25 מ&quot;מ כספית היה קשור עם פגיעה מוחית קשה ועקבות באופן קבוע שטוחות aEEG. לפיכך, תגובה מיידית לירידה בלחץ דם חמורה יש להבטיח כדי למנוע איסכמיה מוחית נרחבת אחריו מוות מוחי. התקופה שלאחר חוסר חמצן היא גם קריטית. מחקרים קודמים רבים reoxygenated חיות מחקר על ידי שימוש בחמצן 100%, אשר ידוע להחמיר פגיעה מוחית.

חנק סביב הלידה הוא מצב חריף ולעתים קרובות לא צפוי הקשורים לאנצפלופתיה חוסר חמצן-איסכמי (hie). המטרה הכללית של פרוטוקול זה היא להדגים מודל הישרדות חזרזיר של אנצפלופתיה חוסר חמצן-איסכמי סביב הלידה. מודל זה יכול לשמש כדי לחקור את ההשפעה של דרגות שונות של היפוקסיה-איסכמיה על המוח בילוד ושל טיפולים ניסיוניים על נוירופתולוגיה, הדמיה בתהודה מגנטית וספקטרוסקופיה (MRI וMRS) וסמנים ביולוגיים בנוזלי גוף כמו דם, נוזל השדרתי ושתן . המודל גם הוכיח שימושי לחקר מערכת הלב וכלי הדם, מערכת נשימה, כליות וכבד, אשר כולם מושפעות בהיפוקסיה-איסכמיה הגלובלית. חנק סביב הלידה הוא התוצאה של ידתית אספקת חמצן בסכנה או בתקופה שלאחר הלידה המיידית. אירועי חוסר חמצן סבים-לידתית בחשבון 0,660,000 מקרי מוות ברחבי העולם בכל שנה, כרבע מטחנת 2.9 בעולםמות יון בילוד בשנת 2012 3. בשנת 2010 1.15 מיליון תינוקות הוערכו פיתח אנצפלופתיה הילוד הבא חנק הלידה 4. Hie מוגדר כאנצפלופתיה בתינוקות שנולדו לאחר 34 שבועות של הריון מתרחש ב1-3 / 1,000 לידה חי 5 בעולם המתועש ועד 8.5 / 1,000 לידה חי במדינות מתפתחות 4. הסיכון למוות הוא 10-60%, ואת הסיכון לנכי נוירולוגית בניצולי 30-100% 6,7. 50.2 מ&#39;שנות חיים נכות מתואמת (DALYs) מיוחסות לאירועי חוסר חמצן ידתית 4. כיום הטיפול היחיד מלבד תומך לhie הוא היפותרמיה לאחר חוסר חמצן. כך, התקדמות בהליכי אבחון ואסטרטגיות טיפול חיונית כדי לשפר את הניהול של hie 8. שיפורים בפרוגנוזה לאחר חנק וניהול של פגיעה מוחית בילוד סביב הלידה מבוססים על הרחבת ידע של מנגנוני מחלה הבסיסייםטיפולים אפשריים ד. מודלים של בעלי החיים של hie הם שימושיים במיוחד כאירועים קליניים שונים עלולים להוביל לhie ושכיחות בכל מרכז לידה אחת היא 5 נמוכים. הגדרת ניסוי שבו ניתן למזער את ההשפעה של שונות ביולוגיות, היא חיונית בעת בדיקה חדשה כלים פרוגנוסטיים ואבחון ואסטרטגיות טיפול. מודל חיה צריך להתקרב למצב הקליני ככל האפשר, ובכך לתרום להבנתנו את המנגנונים פתולוגיים שבבסיס הפגיעה הנגרמת ולתהליך הדינמי המעורב במחלה ולא האמין, זה התוצאה 9. מודלים של בעלי החיים של hie הילוד כללו מספר המינים, כוללים מכרסמים, כבש, וחזירים. לשם השוואה, יש חזרזיר יילוד דמיון גבוה יותר לתינוק אנושי ביחס לגודל, מערכת לב וכלי דם 10 ובגרות מוח בעת המשלוח 11,12. ניטור, מכשור והערכת תוצאות במודל דומה לחזרזיר thaלא השתמש בטיפול הקליני של תינוקות עם hie. בהתאם לכך, יש מידה גבוהה של תרגום לטיפול שזה עתה נולד ממודל זה. מודלים חזירונים של היפוקסיה סביב הלידה וhie משמשים קבוצות רבות ושונים זה מזה במספר תחומים 13. על פי מטרת הניסוי, תשומת לב קפדנית חייבת להיות משולם לבחירה של תרופות, שיטה של ​​גרימת היפוקסיה-איסכמיה, שיטה של ​​השליטה משך עלבון וחומרה, החייאה לאחר עלבון וטיפול, והערכת תוצאות. כדי למנוע הטיה עיצוב מחקר אקראי יש להשתמש תמיד במחקרים התערבותיים. השיטה מיושמת כאשר גרימת פציעת חוסר חמצן-איסכמי היא חשובה. היפוקסיה עולמית המובילה לhie לעתים קרובות תוצאות כישלון רב-איבר מעורב מוח, לב, ריאות, כליות וכבד. בהתאם לתוצאות ההערכה, מודלים של hie צריכים להיות מבוססים על היפוקסיה ואיסכמיה הגלובליות ולא להסתמך על איסכמיה מוקד, למשל., על ידי קשירה של מכוניתעורקי otid 14. נייר האחרון הוחל בשילוב של היפוקסיה (FiO 2 12%) ודחיסת עורק הראשי תוך שמירה על לחץ דם&gt; 40 מ&quot;מ דם ממוצע כספית 2. קבוצה נוספת הנגרמת היפוקסיה העולמית ב -8% O 2 עד עודף&gt; 20 mmol / L בסיס שלילי או מתכוונת לחץ דם דם (MABP) &lt;15 מ&quot;מ כספית, והקריבה את בעלי החיים על 4 שעות 15. היפוקסיה גם כבר טיטרציה ידי תפוקת לב (30-40% מבסיס), MABP (30-35 מ&quot;מ כספית) ו- pH עורקים (6.95-7.05) 16. מודלים של היפוקסיה-איסכמיה הגלובלית טיטרציה ידי דיכוי aEEG דומה לזו שהוצגה בדוח זה, הוכיחו אנצפלופתיה שהיא קליני, electrophysiologically, וneuropathologically דומה למצב שנמצא בתינוק נחנק לטווח 17,18. מידת hie המושרית היא חיונית. מודל חיה שימושי של hie גם חייב לאפשר לבדיקה של Dia החדשגנוסטי נהלים ואפשרויות טיפול. כדי לאפשר זאת, המודלים צריכים לגרום hie המתון שבם יש פוטנציאל לטיפול בפגיעה מוחית חמורה עם פוטנציאל טיפול קטן או לא יהיה פחות רלוונטי בעת הערכת טיפולים חדשים. סובלנות להיפוקסיה משתנה במידה ניכרת בין בעלי החיים מבחן. המחקרים קודמים הראו כי פגיעה מוחית עקבית יותר ניתן להשיג ושיותר חיות לשרוד 17,19 באינדיווידואליזציה היפוקסיה המושרית על פי התגובה המוחית של כל חזרזיר הוערכה על ידי electroencephalography משרעת משולב (aEEG) ולא באמצעות FiO ערך 2 סט לאורך אירוע חוסר חמצן. משך דיכוי aEEG בקורלציה למידת פגיעה מוחית, עם כמה שינויים בהיסטופתולוגיות &lt;דיכוי aEEG 20 דקות והתקפים חמורים גדלו ב&gt; 45 דקות דיכוי aEEG. סקירה האחרונה של טיפולי נוירו לhie זיהתה את הצורך במודלים הישרדות מאפשרת שקילת משקל הג תוצאת התנהגותures במודלים של בעלי החיים 20. ישנם יתרונות רבים של מודל חזרזיר hie הציג. היא מבוססת על מינים שבם תוצאות הן סבירה מאוד לתרגם לפיסיולוגיה האנושית. מודלים היפוקסיה-איסכמיה גלובליות כישלון רב-איברים וטיטרציה של היפוקסיה-איסכמיה ידי aEEG גורם תואר עקבי של פגיעה מוחית עם תוצאות רלוונטיות קליניות הישרדות כך שסמנים ביולוגיים, MRI והתנהגות ניתן להעריך בנקודות זמן רלוונטיות. המודלים חזרזיר של חנק סביב הלידה וhie לא תרמו באופן משמעותי רק לתובנה נוכחית להפתופיזיולוגיה hie, אלא גם קדמו בהצלחה ניסויים קליניים, וכתוצאה מכך בסופו של טיפולים חדשים בבני אדם. מחקרי מודל חזרזיר מילאו תפקיד מפתח בהקמת היפותרמיה כטיפול לhie 21, ומשמשים במחקר החייאת יילודי 22. קבוצות שונות השתמשו במודלי חזרזיר בעת ביצוע מחקר בחנק וhie,מחקרי ד כוללים היפותרמיה 23, הורמון אלפא-גירוי מלנוציט 24, מדום לב 25, פעילות hydroxylase טירוזין 26, חשיפת חוסר חמצן חזר 27, פעילות הקולטן NMDA 14, וקרובים אינפרא אדום ספקטרוסקופיה 28. מודל hie החזרזיר מוצג בדוח זה הוא מאתגר מבחינה טכנית לעבוד עם, כהתאמות קלות במהלך ההליך עלולות לגרום לפגיעה מוחית או קלה או קשה מדי 29,2. מצאנו שהספרות הקיימת חסרת פירוט מספיק כדי לשחזר דגמים שפורסמו בעבר. לפיכך, אנו כאן להפגין כל שלב של ההליכים הטכניים הנדרשים להקמת מודל הישרדות 72 שעות חזרזיר בדוח זה, המאפשר לחוקרים לקבוע מודל מתקדם לחקר hie.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1034">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Warm-touch-pediatric blanket</td>
			<td style="width:211px;">Covidien</td>
			<td style="width:176px;">5030840</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Adhesive Apertrue Drape</td>
			<td>Barrier</td>
			<td>915447</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Utility Drape (sterile) 75x80 cm</td>
			<td>Barrier</td>
			<td>800530</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Neoflon</td>
			<td>BD - Luer</td>
			<td>391350</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Laryngoscope</td>
			<td style="width:211px;">Miller</td>
			<td style="width:176px;">85-0045</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endotracheal tube 2.5 mm&#160;</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>111-25</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endotracheal tube 3.0 mm with cuff</td>
			<td>Unomedical</td>
			<td>MM61110030</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endotracheal tube 3.5 mm with cuff</td>
			<td>Unomedical</td>
			<td>MM61110035</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Anesthesia machine</td>
			<td style="width:211px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:176px;">1009-9002-000</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">EEG - electrodes/disposable subdermal needle electrode</td>
			<td>Cephalon</td>
			<td>ACCE120550</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ECG - electrodes</td>
			<td>medtronic</td>
			<td>3010107-003</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ECG-electrodes for MR</td>
			<td>philips</td>
			<td>ACCE120550</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Arterial blood sampler - aspirator</td>
			<td>Radiometer medical ApS</td>
			<td>956552</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyurethane Umbilical vein catheter (5 Fr/Ch)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8888160341</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyurethane Umbilical vein catheter (3,5 Fr/ch)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8888160333</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Suture set (size 3-0)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886 623341</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BD Spinal needle 0.7x38mm</td>
			<td>BD needles</td>
			<td>405254</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Gas with 96% Nitrogen / 4% oxygen</td>
			<td style="width:211px;">Air Liquide</td>
			<td style="width:176px;">made on order</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">NeuroMonitor (CFM) system</td>
			<td>Natus Medical Incorporated</td>
			<td>OBM70002</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy

חנק לידה, מה שגורם לחוסר החמצן אנצפלופתיה-איסכמי (hie), מהווה 0,660,000 מקרי מוות ברחבי העולם בכל שנה, כרבע ממקרי המוות של 2.9 מיליון היילודים בעולם. מודלים של בעלי החיים של hie תרמו להבנה של הפתופיזיולוגיה בhie, והדגישו את התהליך הדינמי המתרחש בפגיעה מוחית בשל חנק סביב הלידה. כך, מחקרים בבעלי החיים הראו בזמן חלון לאסטרטגיות טיפול פוסט-עלבון. היפותרמיה נבדקה כטיפול לhie בדגמי pdiglet ולאחר מכן הוכחה כיעיל בניסויים קליניים. וריאציות של המודל יושמו במחקר של שיטות נוירו משלים ומחקרי חזרזיר של קסנון ומלטונין הוביל לשלב קליני I ו- II של ניסויים 1,2. מודל hie החזרזיר משמש עוד ללימודי resuscitation- והמודינמית בילוד, כמו גם בחקירות של היפוקסיה מוחית ברמה תאית. עם זאת, זה מאתגר מבחינה טכניתמודל ושינויים בפרוטוקול עלול לגרום לפגיעה מוחית או קלה או קשה מדי. במאמר זה, אנחנו מדגימים את הנהלים הטכניים הנדרשים להקמת מודל חזרזיר יציב של hie ילוד. ראשית, חזרזיר היילוד (&lt;משקל 1500 גרם 24 שעות ישנות, חציון) הוא הרדים, מחובר לצינורות, ופיקוח בהתקנה דומה לזה שנמצא ביחידה לטיפול נמרצת בילוד. היפוקסיה-איסכמיה עולמית הנגרמת על ידי הורדת חלק חמצן השאיפה להשיג היפוקסיה הגלובלית, איסכמיה דרך תת לחץ דם וEEG משרעת עקבות שטוחות משולב (aEEG) מעיד על חוסר חמצן במוח. הישרדות היא מקודמת על ידי התאמת חמצון פי תגובת aEEG ולחץ דם. פגיעה מוחית היא לכמת ידי histopathology והדמיה בתהודה מגנטית לאחר 72 שעות.

<html> ההשפעות של היפוקסיה-איסכמיה על המוח המתרחשות במהלך העלבון המושרה מתועדות על ידי הקלטת עקבות aEEG. עקבות aEEG נציג מוצגת באיור 6. <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/52454/52454fig6.jpg" /> עקבות איור 6. נציגי aEEG. משרעת נמוכה עקב היפוקסיה-איסכמיה. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/52454/52454fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> הערכים הקיצוניים של חומציות, עודף בסיס, וחומצת חלב במהלך היפוקסיה נרשמים יחד עם קצב לב ולחץ דם. ניקוד נוירולוגיה קליני מתבצע 17. נתונים מבעלי חיים ניסיוניים עם משך זמן של 38 דקות של משרעת הנמוכה aEEG ועלבון המוביל לhie עם pH הנמוך וירידה בלחץ דם יחסית, מוצגים בטבלת 1. <table border="0" ce</html style=";text-align:right;direction:rtl">llpadding = cellspacing &quot;0&quot; = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td> aEEG &lt;7uV (דקות) </td><td> נמוך pH במהלך עלבון </td><td> נמוך עודף בסיס בעלבון </td><td> גבוה חומצת החלב בעלבון </td><td> בסיס MABP </td><td> MABP גבוה </td><td> MABP נמוך </td><td> HR גבוה </td><td> נמוך HR </td></tr><tr><td> 37.5 </td><td> 6.93 </td><td> -19.80 </td><td> 19 </td><td> 48 </td><td> 72 </td><td> 33 </td><td> 219 </td><td> 162 </td></tr></tbody></table> 1. הנתונים פיסיולוגיים נציג השולחן. לחזרזיר עם 38 דקות של aEEG &lt;7 μV הערכים הקיצוניים של חומציות, עודף בסיס, חומצת החלב, קצב לב (HR) ולחץ דם (MABP) בתוך 45 דקות של היפוקסיה רשומים. MRI ב 72 שעות עשוי לחשוף פגיעה בהתאם לשיטות בשימוש. איור 7 מראה T2 משוקלל תמונת MRI עם פציעת חוסר חמצן-איסכמי. <im<html> alt = G &quot;איור 7&quot; src = &quot;/ קבצים / ftp_upload / 52454 / 52454fig7.jpg&quot; /&gt; איור 7. הנציגים T2 משוקלל MRI תמונה. תמונת T2-wighted במטוס צירי, לאחר היפוקסיה-איסכמיה 72 שעות. עוצמת אות רגילה בתוך מוארך mesencephalon, פונס ולשד. לפזר עוצמת אות חריגה בכל החומר הלבן בשתי ההמיספרות. MRI T2 משוקלל תערוכות נגעים המתאימים כדי לפזר אוטם איסכמי. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/52454/52454fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> צביעת H &amp; E תערוכות פגיעה עצבית כפי שניתן לראות בhematoxylin וכתם eosin. קבוצות שונות פרסמו מערכות ניקוד שונות לכימות מידת פגיעה היסטולוגית משני קנה מידה 0.5 מרווח של 0-4 17 או בסולם של 0-9 ל5 אזורים שונים במוח עם ציון פגיעה מרבי של 45 13. דף = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 8" src="/files/ftp_upload/52454/52454fig8.jpg" /> איור 8. histopathology נציג. תמונת מיקרוסקופ אור עם hematoxylin וכתם eosin. נוירונים פגומים הם אאוזינופילית עם גרעין קטן (חיצים). התמונה נתפסה ב200x הגדלה. בר סולם = 50 מיקרומטר. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/52454/52454fig8large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> תוצאה צפויה ממודל: מחקרים שפורסמו בעבר תוך שימוש במודלים דומים שהסתיימו בחזרזירים מתו כ 20%, 10% ללא פגיעה ו -70% שרדו עם פגיעה מוחית 19. מחקרים אלה לתאם גם עם הממצאים שלנו. מניפסטים רב פציעת איבר על ידי 1) חמצת חומצת החלב 2) anuria (פגיעה בכליות) 3 תת לחץ דם) (פציעת לב איסכמית) ועשוי להיות מאומת על ידי בדיקה וhistopathology של איברים חזותיים אחרי מותו. במודל זה, תפקוד לקוי של לבהודגם על ידי גידול בT טרופונין הלבבי ונגעים איסכמיים בבדיקת לב 18. סימנים קליניים של אנצפלופתיה ניתן לכמת ידי ניקוד נוירולוגיות וכוללים שינויים בנשימה, תודעה, נטייה, הליכה, טון, רמת פעילות, מוצץ, ניקוד ונוכחות של תנועות פתולוגי כמתואר על ידי אחרים 17.

Watch this Scientific Journal Video about A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy at JoVE.com

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

דגם חזרזיר של ילודים חוסר חמצן-איסכמי אנצפלופתיה

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

a-piglet-model-of-neonatal-hypoxic-ischemic-encephalopathy

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

19.5K Views.  Institute of Clinical Medicine, Aarhus University Hospital. Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy. 

Video: A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Biochemical Measurement of Neonatal Hypoxia

Neonatal hypoxia ischemia is characterized by inadequate blood perfusion of a tissue or a systemic lack of oxygen. This condition is thought to cause/exacerbate well documented neonatal disorders including neurological impairment 1-3. Decreased adenosine triphosphate production occurs due to a lack of oxidative phosphorylation. To compensate for this energy deprived state molecules containing high energy phosphate bonds are degraded 2. This leads to increased levels of adenosine which is subsequently degraded to inosine, hypoxanthine, xanthine, and finally to uric acid. The final two steps in this degradation process are performed by xanthine oxidoreductase. This enzyme exists in the form of xanthine dehydrogenase under normoxic conditions but is converted to xanthine oxidase (XO) under hypoxia-reperfusion circumstances 4, 5. Unlike xanthine dehydrogenase, XO generates hydrogen peroxide as a byproduct of purine degradation 4, 6. This hydrogen peroxide in combination with other reactive oxygen species (ROS) produced during hypoxia, oxidizes uric acid to form allantoin and reacts with lipid membranes to generate malondialdehyde (MDA) 7-9. Most mammals, humans exempted, possess the enzyme uricase, which converts uric acid to allantoin. In humans, however, allantoin can only be formed by ROS-mediated oxidation of uric acid. Because of this, allantoin is considered to be a marker of oxidative stress in humans, but not in the mammals that have uricase.
We describe methods employing high pressure liquid chromatography (HPLC) and gas chromatography mass spectrometry (GCMS) to measure biochemical markers of neonatal hypoxia ischemia. Human blood is used for most tests. Animal blood may also be used while recognizing the potential for uricase-generated allantoin. Purine metabolites were linked to hypoxia as early as 1963 and the reliability of hypoxanthine, xanthine, and uric acid as biochemical indicators of neonatal hypoxia was validated by several investigators 10-13. The HPLC method used for the quantification of purine compounds is fast, reliable, and reproducible. The GC/MS method used for the quantification of allantoin, a relatively new marker of oxidative stress, was adapted from Gruber et al 7. This method avoids certain artifacts and requires low volumes of sample. Methods used for synthesis of MMDA were described elsewhere 14, 15. GC/MS based quantification of MDA was adapted from Paroni et al. and Cighetti et al. 16, 17. Xanthine oxidase activity was measured by HPLC by quantifying the conversion of pterin to isoxanthopterin 18. This approach proved to be sufficiently sensitive and reproducible.

A method is described to measure biochemical markers of neonatal hypoxia-ischemia. The approach utilizes high pressure liquid chromatography (HPLC) and Gas Chromatography Mass Spectrometry (GC/MS).

מדידה ביוכימית של היפוקסיה ילודים

Neonatal hypoxia ischemia is characterized by inadequate blood perfusion of a tissue or a systemic lack of oxygen. This condition is thought to ...

A Swine Model of Neonatal Asphyxia

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, perfusion deficit, hypoxic-ischemic encephalopathy, pulmonary hypertension, vasculopathic enterocolitis, renal failure and thrombo-embolic complications. Animal models are developed to help us understand the patho-physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. In comparison to rodents and newborn lambs, the newborn piglet has been proven to be a valuable model. The newborn piglet has several advantages including similar development as that of 36-38 weeks human fetus with comparable body systems, large body size (&tilde;1.5-2 kg at birth) that allows the instrumentation and monitoring of the animal and controls the confounding variables of hypoxia and hemodynamic derangements.
We here describe an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia and allow us to examine the systemic and regional hemodynamic changes during the asphyxiating and reoxygenation process as well as the respective effects of interventions. Further, the model has the advantage of studying multi-organ failure or dysfunction simultaneously and the interaction with various body systems. The experimental model is a non-survival procedure that involves the surgical instrumentation of newborn piglets (1-3 day-old and 1.5-2.5 kg weight, mixed breed) to allow the establishment of mechanical ventilation, vascular (arterial and central venous) access and the placement of catheters and flow probes (Transonic Inc.) for the continuously monitoring of intra-vascular pressure and blood flow across different arteries including main pulmonary, common carotid, superior mesenteric and left renal arteries. Using these surgically instrumented piglets, after stabilization for 30-60 minutes as defined by Z&lt;10% variation in hemodynamic parameters and normal blood gases, we commence an experimental protocol of severe hypoxemia which is induced via normocapnic alveolar hypoxia. The piglet is ventilated with 10-15% oxygen by increasing the inhaled concentration of nitrogen gas for 2h, aiming for arterial oxygen saturations of 30-40%. This degree of hypoxemia will produce clinical asphyxia with severe metabolic acidosis, systemic hypotension and cardiogenic shock with hypoperfusion to vital organs. The hypoxia is followed by reoxygenation with 100% oxygen for 0.5h and then 21% oxygen for 3.5h. Pharmacologic interventions can be introduced in due course and their effects investigated in a blinded, block-randomized fashion.

Large animal models have good translational values in the examination of physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. Using newborn piglets, we develop an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia which has advantages of studying the systemic and regional hemodynamics, oxygen transport with biochemical and pathologic pathways and correlations.

דגם חזירים של חנק ילודים

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, ...

Assessment of Perigenital Sensitivity and Prostatic Mast Cell Activation in a Mouse Model of Neonatal Maternal Separation

Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS) has a lifetime prevalence of 14% and is the most common urological diagnosis for men under the age of 50, yet it is the least understood and studied chronic pelvic pain disorder. A significant subset of patients with chronic pelvic pain report having experienced early life stress or abuse, which can markedly affect the functioning and regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis. Mast cell activation, which has been shown to be increased in both urine and expressed prostatic secretions of CP/CPPS patients, is partially regulated by downstream activation of the HPA axis. Neonatal maternal separation (NMS) has been used for over two decades to study the outcomes of early life stress in rodent models, including changes in the HPA axis and visceral sensitivity. Here we provide a detailed protocol for using NMS as a preclinical model of CP/CPPS in male C57BL/6 mice. We describe the methodology for performing NMS, assessing perigenital mechanical allodynia, and histological evidence of mast cell activation. We also provide evidence that early psychological stress can have long-lasting effects on the male urogenital system in mice.

We are measuring perigenital mechanical sensitivity and mast cell activation in the prostate of male C57BL/6 mice that underwent an early life stress paradigm &#8211; neonatal maternal separation, in order to induce a preclinical model of chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome.

הערכה של הפעלת תא Perigenital רגישות וערמונית תורן במודל עכבר של הפרדה אימהית עובריים

Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS) has a lifetime prevalence of 14% and is the most common urological diagnosis for men under the ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

חוט השדרה עכבר בילוד דגם פגיעה דחיסה

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

A Battery of Motor Tests in a Neonatal Mouse Model of Cerebral Palsy

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, standardized battery of neonatal mouse motor tests. These tests can validate injury or disease models, determine treatment efficacy and/or assess motor behaviors in new transgenic strains. This paper presents a series of neonatal motor tests to evaluate general motor function, including ambulation, hindlimb foot angle, surface righting, negative geotaxis, front- and hindlimb suspension, grasping reflex, four limb grip strength and cliff aversion. Mice between the ages of post-natal day 2 to 14 can be used. In addition, these tests can be used for a wide range of neurological and neuromuscular pathologies, including cerebral palsy, hypoxic-ischemic encephalopathy, traumatic brain injury, spinal cord injury, neurodegenerative diseases, and neuromuscular disorders. These tests can also be used to determine the effects of pharmacological agents, as well as other types of therapeutic interventions. In this paper, motor deficits were evaluated in a novel neonatal mouse model of cerebral palsy that combines hypoxia, ischemia and inflammation. Forty-eight hours after injury, five tests out of the nine showed significant motor deficits: ambulation, hindlimb angle, hindlimb suspension, four limb grip strength, and grasping reflex. These tests revealed weakness in the hindlimbs, as well as fine motor skills such as grasping, which are similar to the motor deficits seen in human cerebral palsy patients.

Presented is a concise battery of mouse neonatal motor tests. Using these tests, neonatal motor deficits can be demonstrated in a variety of neonatal motor disorders. By having a standardized set of tests, results from different studies can be compared, allowing for better and accurate reporting between groups.

סדרת מבחנים Motor במודל של עכברים ילודים של שיתוק מוחין

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

אוטם שריר לב עכברים ילודים, מודל התחדשות לב

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity (AIDN): A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children. Recent investigations in animals have raised concerns that anesthesia exposure may lead to neuronal apoptosis, known as anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN). Furthermore, some clinical studies in children have suggested that anesthesia exposure may lead to neurodevelopmental deficits later in life. Nonetheless, an ideal animal model for preclinical study has yet to be developed. The neonatal piglet represents a valuable model for preclinical study, as they share a striking number of developmental similarities with humans.
The anatomy and physiology of piglets allow for implementation of rigorous human perioperative conditions in both survival and non-survival procedures. Femoral artery catheterization allows for close monitoring, thus enabling prompt correction of any deviation of the piglet's vital signs and chemistries. In addition, there are multiple developmental similarities between piglets and human neonates. The techniques required to use piglets for experimentation will require experience to master. A pediatric anesthesiologist is a critical member of the investigative team. We describe, in a general sense, the appropriate use of a piglet model for neurodevelopmental study.

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity AIDN: A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN) research has focused on rodents, which are not broadly applicable to humans. Non-human primate models are more relevant, but are cost-prohibitive and difficult to use for experimentation. The piglet, in contrast, is a clinically relevant, practical animal model ideal for the study of anesthetic neurotoxicity.

שימוש במודל חזירון לחקר נוירוטוקסיות התפתחותית בהרדמה (AIDN): גישה נוירו-מדעית טרנסציונית

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children.  Recent investigations in animals have raised concerns that ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

מודל עכבר BALB /c יילודים של דלקת אנטרוקוליטיס נמק

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight ...

Effect of Hyaluronic Acid 35 kDa on an In Vitro Model of Preterm Small Intestinal Injury and Healing Using Enteroid-Derived Monolayers

In vitro scratch wound assays are commonly used to investigate the mechanisms and characteristics of epithelial healing in a variety of tissue types. Here, we describe a protocol to generate a two-dimensional (2D) monolayer from three-dimensional (3D) non-human primate enteroids derived from intestinal crypts of the terminal ileum. These enteroid-derived monolayers were then utilized in an in vitro scratch wound assay to test the ability of hyaluronan 35 kDa (HA35), a human milk HA mimic, to promote cell migration and proliferation along the epithelial wound edge. After the monolayers were grown to confluency, they were manually scratched and treated with HA35 (50 &#181;g/mL, 100 &#181;g/mL, 200 &#181;g/mL) or control (PBS). Cell migration and proliferation into the gap were imaged using a transmitted-light microscope equipped for live-cell imaging. Wound closure was quantified as percent wound healing using the Wound Healing Size Plugin in ImageJ.&#160;The scratch area and rate of cell migration and the percentage of wound closure were measured over 24 h. HA35 in vitro accelerates wound healing in small intestinal enteroid monolayers, likely through a combination of cell proliferation at the wound edge and migration to the wound area. These methods can potentially be used as a model to explore intestinal regeneration in the preterm human small intestine.

Effect of Hyaluronic Acid 35 kDa on an In Vitro Model of Preterm Small Intestinal Injury and Healing Using Enteroid-Derived Monolayers

This protocol describes a method to establish and perform a scratch wound assay on two-dimensional (2D) monolayers derived from three-dimensional (3D) enteroids isolated from non-human primate ileum.

ההשפעה של חומצה היאלורונית 35 kDa על מודל in vitro של פגיעה מוקדמת במעי הדק וריפוי באמצעות מונולרים שמקורם באנטרואיד

In vitro scratch wound assays are commonly used to investigate the mechanisms and characteristics of epithelial healing in a variety of tissue types. ...