1 הגדרה של סטרילי שדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבוש ההולם דון כוללים כובע ומסכה. משקפי מגן בעת ​​בחדר העיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את השטח לעיבוד. בעת השימוש בחדר עיבוד, לשמור על פעולה רציפה של המאוורר כדי ליצור לחץ חיובי בחדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף את כל הציוד. בדוק את תאריכי תפוגה, שלמות חבילה, ומחוון עיקור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את הידיים ודון כפפות שאינן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את ערכות סטריליות להקמת שדה סטרילי. בעת השימוש בחדר עיבוד, למקם את ערכות על השולחן וסביבה נקי מחיידקים לפתוח עוטף. אל לנצל ½ 1 סנטימטר החיצוני של לעטוף כחלק משדה סטרילי כמגזר זה נחשב לא סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות טכניקת ספטית, פתוח ושחרר את פריטים סטריליים על שדה סטרילי, אלא אם כן כבר חלק מחבילת התערובת של העוגיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז מיקרוסקופ, כך שהוא נמצא מעל לשדה סטרילי, פונה במקור אור של מיקרוסקופ, ולהתאים oculars לפי צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> OBTרקמת קרנית עין להיות חשופה (בתקשורת שימור) ומקום בסמוך לאזור העיבוד סטרילי מוכן. שחרר כובע של חדר צפייה ולתת לו לנוח על גבי הצפייה קאמרית בסיס ללא אשכולות עוסקים. בטל כפפות שאינן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זוג אחד פתוח של כפפות סטריליות ושמלה סטרילי עם מגבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע לקרצף כירורגית. לשים על שמלת סטרילי, אז כפפות סטריליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיבות מכשיר פתוחות, כך שכל האספקה ​​נגישות. לחות פתוחה וילון אטום כדי ליצור את אזור העבודה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף מחט למזרק 5 סמ&quot;ק. באמצעות hemostat, להכין את מחט G 30 ידי הצבת מ&quot;מ עיקול 1 מפוע, ומ&quot;מ עיקול 1 אחר מהבסיס (כדי ליצור צורה &quot;S&quot;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרכב את מזרק הזכוכית לכתם הכחול trypan על ידי הצבת הבוכנה לתוך המזרק והאצבע להדק את הבוכנה. צרף צינורית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף את הצינורית לבקבוק תמיסת מלח מאוזנת (BSS). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את אגרוף המקדחה מגוש הוואקוםומניח בצד. מרכז את בלוק הוואקום בתוך שדה הראייה של המיקרוסקופ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להביא את בלוק הוואקום אל מוקד על ידי התאמת הגדרות מיקרוסקופ. </li></ol> 2 נוהל הכנת רקמות התורמות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה Lift צפייה קאמרי באמצעות כיכר רדיד כמחסום. עם יד נגדית ובאמצעות מלקחיים, בעדינות לתפוס קרנית על ידי לובן העין מעטרת כדי להסיר קרנית. להחליף מכסה של צפייה קאמרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגמרי לדכא את מזרק השאיבה, ואז למקם את צד אפיתל קרנית על בלוק הוואקום ולוודא שהוא מרוכז. (איור 1) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טבעת ישיבה בעדינות נמוכה יותר לבלוק הוואקום באמצעות הודעות המדריך. לעסוק ואקום על ידי שחרור בוכנה של מזרק היניקה לאט. הסר את טבעת הישיבה ומניח בצד. (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע trephination חלקי להבקיע דרך הקרום של Descemet. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם זום מיקרוסקופ ולהתמקד באופן שהרקמה דמיין גם. </li><li&gt; הטה את בלוק הוואקום ולהשתמש חנית ספוגית סטרילית הונחה בימבוס כדי להסיר בינוני עודף. (איור 3) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מספיק כתם בימבוס להכתים את הקצה של הקרום של Descemet הבקיע. לאפשר את הכתם להישאר על האנדותל ל60-90 שניות. (איור 4) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר את הכתם: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הטה את בלוק הוואקום לשפוך את הכתם של הקרנית ועל תחבושת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בחניתות כירורגי כדי להסיר כתם עודף מאזור limbal של הקרנית, נזהר שלא לגעת בהאנדותל. (איור 5) </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בכמה טיפות של BSS לשטוף את הקרנית של פתרון מכתים, וחניתות ספוגית סטרילית כדי להסיר BSS העודף. (איור 6) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 1-2 טיפות של BSS על שפת לובן העין כדי למנוע רקמות מייבוש. חזור על צורך לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע נתיחה חלקית של הקרום של Descemet: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל שבו צינורות להתחברים לבלוק הוואקום, באמצעות מלקחיים פתוחים, מקום קצה אחד בקצה של סימן הציון והקרום של Descemet עדינות הנפרד והאנדותל מסטרומה. (איור 7). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקרום של Descemet הנפרד והאנדותל מ&quot;מ לא יותר מ 1 מקצה הבקיע ולהמשיך לנתיחה 360 ° מסביב. (איור 8). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערה מיקום של כל מיקרו דמעות על ידי הצבת נקודה על בלוק הוואקום עם סמן העור. הערה: אם המקדחה לא חדרה לחלוטין דרך הממברנה של Descemet, להשתמש בקצה המשופע של מחט G 30 מוכנה להשלים הציון דרך הקרום של Descemet במידת צורך, ואחריו יישום שני של צביעה במידת הצורך. אם דביק של הקרום של Descemet מפריע לנתיחה החלקית, להסיר את האנדותל מחוץ לאזור trephinated לפי צורך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים כדי להסיר כל תגי האנדותל חופפים סימן הציון. </li> &lt;li&gt; קחו למשל את המיקום של דמעות מיקרו מסומנים בעבר ולסובב את בלוק הוואקום כך הגדול ביותר הוא בשעה 6. זה יהפוך את הציר של הדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים, לתפוס הקרום של Descemet בשעה 12. בעדינות להפריד הקרום של Descemet מstroma על ידי קילוף לכיוון הציר. צור הציר על ידי עצירת מ&quot;מ הפרדת 2 מסימן הציון. הערה: קצוות היקפיים של כנף יתחילו לגלול בהפרדה. (איור 9). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להניח את הדש למקום בסטרומה. השתמש בחניתות BSS והספוגית לunscroll האנדותל ולהחזיר אותו למקומו המקורי. (איור 10A-C) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר נוזל שיורי מבין הקרום וסטרומה של Descemet עם חניתות ספוגית סטרילית כך הדש נשאר בעמדה. (איור 11) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בחניתות ספוגית סטרילית כדי לספוג את כל לחות עודפת מלובן העין ליד הציר. השתמש בסמן העור לציירn ראש החץ על שפת לובן העין מצביעה על מרכז הציר, להסיר כל דיו עודף באמצעות חנית ספוגית סטרילית. (איור 12) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשחרר ואקום על ידי לחיצה על הבוכנה של המזרק מחובר לבלוק הוואקום. בעוד הוואקום מתנתק, להשתמש במלקחיים כדי להסיר את הקרנית מגוש הוואקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה Lift צפייה קאמרי באמצעות כיכר רדיד כמחסום. מניחים את הקרנית בתא הצפייה, צד אנדותל, ולהחליף את המכסה של הצגה קאמרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על צעדי הליך עם קרנית בן זוג, אם קיימים. השתמש בגזה כדי לנקות את בלוק הוואקום לפני עיבוד הרקמות השניה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדק את מכסה תא צפייה (ות) ולהסיר רקמה מאזור העיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשבור את שדה סטרילי על ידי סילוק של פריטים על פי ביולוגית מסוכנת פסולת תכנית ניהול. הסר את כפפות מזוהמות, ושמלה. שטוף את הידיים ודון כפפות שאינן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע הערכת מנורת סדק לחתוך הודעה ומיקרוסקופיה specular של הקרנית (ים)ולהקליט את הממצאים. </li></ol>

<ol>
	<li>Fernandez, M., Afshari, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Keratoplasty:+From+DLEK+to+DMEK.">Endothelial Keratoplasty: From DLEK to DMEK.</a> Middle East African Journal of Ophthalmology. 17 (1), 5-8 (2010).</li><li>Kruse, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Stepwise+Approach+to+Donor+Preparation+and+Insertion+Increases+Safety+and+Outcome+of+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty.">A Stepwise Approach to Donor Preparation and Insertion Increases Safety and Outcome of Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li><li>Dapena, I., Moutsouris, K., Droutsas, K., Ham, L., van Dijk, K., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+'No-Touch'+Technique+for+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty.">Standardized 'No-Touch' Technique for Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Archives of Ophthalmology. 129, 88-94 (2011).</li><li>Tourtas, T., Laaser, K., Bachmann, B., Cursiefen, C., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty+versus+Descemet+Stripping+Automated+Endothelial+Keratoplasty.">Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty versus Descemet Stripping Automated Endothelial Keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 153 (6), 1082-1090 (2012).</li><li>Guerra, F., Anshu, A., Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Keratoplasty:+fellow+eyes+comparison+of+Descemet+stripping+automated+endothelial+keratoplasty+and+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">Endothelial Keratoplasty: fellow eyes comparison of Descemet stripping automated endothelial keratoplasty and Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (12), 1382-1386 (2011).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 2012 Eye Banking Statistical Report: Surgical Use and Indications for Corneal Transplant Statistical Report Analysis. , (2012).</li><li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet's+stripping+endothelial+keratoplasty.">Descemet's stripping endothelial keratoplasty.</a> Current Opinion Ophthalmology. 18 (4), 290-294 (2007).</li><li>Woodward, M., Titus, M., Mavin, K., Shtein, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Donor+Tissue+Preparation+for+Endothelial+Keratoplasty.">Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e3847 (2012).</li><li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet's+membrane+endothelial+keratoplasty+surgery:+update+on+the+evidence+and+hurdles+to+acceptance.">Descemet's membrane endothelial keratoplasty surgery: update on the evidence and hurdles to acceptance.</a> Current Opinion Ophthalmology. 24 (4), 329-335 (2013).</li><li>Venzano, D., Pagani, P., Randazzo, N., Cabiddu, F., Traverrso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet+Membrane+air-bubble+separation+in+donor+cornea.">Descemet Membrane air-bubble separation in donor cornea.</a> Journal of Cataract and Refractive Surgery. 36 (12), 2022-2027 (2010).</li><li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> DSEK: What you need to know about endothelial keratoplasty. , (2009).</li><li>Studeny, P., Sivekova, D., Lieheova, K., Vokrojova, M., Kuchynka, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hybrid+technique+of+lamellar+keratoplasty+(DMEK-S).">Hybrid technique of lamellar keratoplasty (DMEK-S).</a> Journal of Ophthalmology. 2013, 2013.254383 (2013).</li><li>Muraine, M., Gueudry, J., He, Z., Piselli, S., Lefevre, S., Toubeau, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+for+the+preparation+of+corneal+grafts+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">Novel technique for the preparation of corneal grafts for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 156 (5), 851-859 (2013).</li><li>Lie, J. T., Birbal, R., Ham, L., van der Wees, J., Melles, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+tissue+preparation+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">Donor tissue preparation for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Journal of Cataract Refractive Surgery. 34 (9), 1578-1583 (2008).</li><li>Kruse, F. E., Laaser, K., Cursiefen, C., Heindl, L. M., Schlotzer-Schrehardt, U., Riss, S., Bachmann, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+stepwise+approach+to+donor+preparation+and+insertion+increases+safety+and+outcome+of+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">A stepwise approach to donor preparation and insertion increases safety and outcome of Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li><li>Rudolph, M., Kaaser, L., Bachmann, B., Cursiefen, C., Epstein, D., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+higher-order+aberrations+after+Descemet&#8217;s+membrane+endothelial+keratoplasty.">Corneal higher-order aberrations after Descemet&#8217;s membrane endothelial keratoplasty.</a> Ophthalmology. 119 (3), 528-535 (2012).</li><li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+endothelial+keratoplasty.">Evolution of endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 32, 28-32 (2013).</li><li>Dapena, I., Dapena, L., Dirisamer, M., Ham, L., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+and+endothelial+cell+density+following+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty+(DMEK).">Visual acuity and endothelial cell density following Descemet membrane endothelial keratoplasty (DMEK).</a> Arch Soc Esp Oftalmol. 86 (12), 395-401 (2011).</li></ol>

יש לי חסן Tausif וד&quot;ר Navasuja Chandrasekaran שום דבר לגלות. בני הזוג. מיאן, שטיין, וודוורד הינו דירקטורים רפואיים לבנק העיניים מישיגן. מר Mavin, מר טיטוס, והגב &#39;ג&#39; ונסון הם עובדי הבנקים העין המערב התיכון.

שכבת תאי האנדותל בקרנית משחקת תפקיד קריטי בשמירה על בהירות בקרנית באמצעות התייבשות. מחלות של תאי האנדותל יכולות לגרום לפגיעה בראייה משמעותית. DMEK שואף להחליף את תאי האנדותל החולים עם שתל תורם המורכב משכבת ​​תאי הקרום ואנדותל של Descemet. הכנת רקמת תורם עם DM שלם וספירת תאי אנדותל נאותה הן קריטיות להישרדותה של רקמת השתל. קריעה של DM במהלך הכנת רקמת תורם יכולה לגרום לאובדן ובזבוז של רקמות תורמות רקמה. יישום נרחב של DMEK היה מוגבל על ידי האתגרים בהכנת רקמת השתל ומאסטרינג הטכניקה ניתוחית המורכבת. עם שיפורים במכשור וזמינות של רקמות שנחתכו מראש פוזר עיניים בנק מוכנה, יש בהליך זה הפוטנציאל להפוך לטיפול הסטנדרטי במחל האנדותל בקרנית. שיטות קיימים כיום להכנת רקמת תורם כוללות שימוששל אוויר בועות להפריד DM מסטרומה כדי להקל על ההסרה של רקמת שתל מתורם קרנית 10. טכניקת הצלילה (קרנית שקועה באמצעות משם רקעים) של הכנת שתל DMEK כרוכה קצירת הרקמות התורמות תחת Optisol או תמיסת מלח מאוזנת (BSS), מזעור המתח הפנים וסיכויים של קריעת 11. עם זאת, טכניקה נוספת בהכנת שתל DMEK עוזבת שפה היקפית של סטרומה מניב שתל שהוא קל יותר לידית והכנס ב12. הרקמות התורמות עשויות גם להיות מוכנות עם מקדחה מותאמת אישית לעזוב צירים של DM שלם בעודך מרים את השתל עם 13 BSS. שיעור ההצלחה הכולל עם הטכניקה שלנו להכנת שתל DMEK היה מוגבל בהשוואה לטכניקות שפורסמו בעבר ל76% אשר עשוי לשקף כי אלה היו 50 הרקמות הראשונות שהוכנו על ידי שני טכנאי בנק עין 14,15. עם זאת, התוצאות לא תשתפרנה במחצית השנייה של קדם רקמהpared. בנוסף, הטכניקה שלנו אינה דורשת מכשירים מיוחדים, מה שהופך את DMEK נגיש בקלות, כמו גם יותר חסכוני. ההתאוששות החזותית יכולה להיות מהירה יותר וטוב יותר עם ​​DMEK בשל חוסר ממשק סטרומה 5. מחקרים גם הראו סטיות מסדר גבוהות יותר פחות על פני השטח האחורי של הקרנית מאשר DSEK או PKP 16. שכיחות של דחיית שתל היא נמוכה באופן משמעותי עם DMEK מאשר עם טכניקות keratoplasty אחרות 17. צפיפות תאי האנדותל הבא DMEK דומה לשלילה האוטומטית של האנדותל Keratoplasty של Descemet (DSAEK) 18. DMEK מציע ניתוחים זעירים פולשניים שמירה על השלמות המבנית של העין ולהקטין את הסיכון של אסטיגמציה שלאחר ניתוח, דליפות פצע וגלאוקומה לאחר ניתוח קשור לשימוש בסטרואידים אקטואלי ממושך. לסיכום, DMEK מאפשר החלפת האנדותל חולה מבלי להסיר סטרומה קרנית נמען או נוספתרקמה. הטכניקה הניתוחית היא מאתגרת בין שאר בשל שחזור של הכנת רקמות תורמות. הכנת בנק עין DMEK עשויה לאפשר להסתגלות משופרת של DMEK הדומה לטכניקות keratoplasty האנדותל קודמות.

אנדותל Keratoplasty (EK) החליף במהירות חודר keratoplasty (PKP) כהליך של בחירה לטיפול במחל אנדותל והיוו מעל 50% מכל ההשתלות שבוצעו בארצות הברית ב2012 6. PKP מוגבל על ידי שיקום חזותי ממושך עם גבוהה אסטיגמציה וחוסר יציבות שבירה, אובדן שלמות העולם וסיבוכים הקשורים לתפר. נהלים מוקדם דור EK, כוללים העמוק טבלית האנדותל Keratoplasty (dlek) מעורבים נתיחה ידנית של סטרומה הקרנית עם השתלה של רקמות תורמות עובי חלקיים. נהלים אלה היו מוצלחים בהשתלת רקמת האנדותל תורם, תוך שמירה על פני השטח של קרנית ללא פגע אבל היו מאתגרים מבחינה טכנית וגרמו למוגבלים חדות ראייה מתוקנות הטוב ביותר בשל ממשק שבשבת קרנית לא סדיר 1. הליך EK הנוכחי של בחירה הוא שלילת האנדותל Keratoplasty של Descemet (DSEK) אשר מציע קלאר קרניity עם התאוששות מהירה יותר של חזון, ממזער שגיאה שבירה שלאחר הניתוח ואסטיגמציה, ומקטין את סיכון של בקיעת פצע טראומטית, תוך שמירה על פני השטח של קרנית 7. הליך זה כרוך הסרת הקרום של Descemet החולה והאנדותל והחלפה עם רקמת קרנית תורם עובי חלקי הכוללת שכבת תאי האנדותל חדשה. קרנית התורם גזור עם microkeratome להכין את הרקמה האחורית שהושתלה 8. הכנה של הרקמות התורמות בעין-הבנקים כבר סייעה בצמיחה המהירה ו, ניתן לטעון, ההצלחה של הליך זה. העלייה ליד 16 של פי נהלי DSEK בארצות הברית בין 2005 ו 2012 מתכתבת עם כמעט מחצית מהרקמה אשר נמצאים בהכנה על ידי העין הבנקים 6. למרות DSEK יכול לשפר את חדות ראייה ל20/40 או טוב יותר, רוב החולים אינם משיגים חזון 20/20 בשל אובך ממשק סטרומה ואור מוגברלפזר מהתוספת של רקמת סטרומה תורם 7. הטכניקה הניתוחית EK התקדמה לממברנה האנדותל Keratoplasty של Descemet (DMEK) הכולל השתלה של הקרום של התורם רק Descemet (DM) והאנדותל. יש הליך זה שיעור גבוה יותר של חולים שהשיגו 20/20 חזון, התאוששות חזותית מהר יותר, וסיכון נמוך יותר לאנדותל דחייה 9. עם זאת, הכנה של רקמות תורמות היא מאתגרת יותר בשל ממדי שתל דקים יותר.

<table><tbody><tr><td>VisionBlue</td><td>D.O.R.C., Zuiland, The Netherlands</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Barron vacuum punch</td><td>Katena, Denville, New Jersey</td><td>K20-2112</td><td></td></tr></tbody></table>

corneal donor tissue preparation for descemet's membrane endothelial keratoplasty

ממברנה האנדותל Keratoplasty של Descemet (DMEK) הוא סוג של השתלת קרנית שבו רק שכבה אחת של תאים, האנדותל בקרנית, יחד עם הממברנה שלו במרתף (הקרום של Descemet) הוא הציג על סטרומה האחורית של הנמען 3. בניגוד לשלילה האוטומטי של האנדותל Keratoplasty של Descemet (DSAEK), שבו stroma תורם נוסף הוא הציג, אין ממשק סטרומה לסטרומה לא טבעי נוצר. כתוצאה מכך, את האנטומיה הטבעית של הקרנית נשמרה ככל האפשר ומאפשר לזמן התאוששות משופר וחדות ראייה 4. אנדותל Keratoplasty (EK) הוא ההליך של בחירה לטיפול בתפקוד לקוי של האנדותל. היתרונות של EK כוללים התאוששות מהירה של חזון, שימור שלמות עינית ושינוי שבירה מינימאלי עקב שימוש בחתך קטן, בפריפריה 1. DSAEK מנצל רקמות תורמות מוכנות עם סטרומה עובי חלקית והאנדותל. Succ המהירess והניצול של הליך זה ניתן לייחס לזמינות של העין בנק מוכן רקמות שנחתכו מראש פוזר. היתרונות של הכנת העין בנקאית של רקמות תורמות כוללים חיסול צורך בציוד מיוחד בחדר הניתוח והזמינות של גיבוי רקמות תורמות במקרה של ניקוב רקמות במהלך הכנה. בנוסף, הכנת כמות גדולה של רקמות תורמות ידי טכנאי עיניים בנק עשויה לספק איכות משופרת של רקמות תורמות. DSAEK אולי מוגבל חדות ראייה מתוקנות הטוב ביותר עקב יצירת ממשק סטרומה בין התורם וקרנית נמען. ביעור של ממשק זה עם השתלה של הקרום של התורם רק Descemet והאנדותל בDMEK עשוי לשפר את התוצאות חזותיות ולהפחית סיבוכים לאחר EK 5. בדומה לDSAEK, הצלחה לטווח ארוכה וקבלת DMEK תלוי בקלות הזמינות של חתוך, עיניים בנק מוכן רקמות תורמות. כאן אנו מציגים גישת שלבים להכנת רקמת תורם אשר עשוי להפחית חלק Barriהעיניים הבנקים ERS פנים במתן שתלי DMEK.

הפרדה נאותה של DM והאנדותל מסטרומה היא חיונית בהכנת רקמות שנחתכו מראש פוזר לDMEK. חמישים קרניות תורם בגיל ממוצע של 65 ± 6 שנים (טווח 55-75), מוות לזמן עיבוד של 5.9 ± 2.3 ימים (טווח 1-10) וצפיפות תאי האנדותל (ECD) של 2,616 ± 321 תאים / מ&quot;מ 2 ( טווח 2,049-3,247) שימש להערכת היתכנות ושחזור של טכניקת הכנת ניתוח על ידי שני טכנאי בנק עין. שיעור ההצלחה היה 72% ב25 המקרים הראשונים ועלה ל 80% במחצית השנייה עם שיעור הצלחה כולל של 76%. מתאם הנקודה biserial (RPB) שימש כדי לקבוע מתאם עם גורמי רקמות לפני ניתוח. גיל התורם (RPB = 0.18), המוות לזמן עיבוד (RPB = 0.07) וECD (RPB = -0.11) לא לתאם עם הכנה מוצלחת של רקמה. ההודעה ההכנה-ECD (n = 37) של 2,676 ± 284 (טווח 2,041-3,205) לא הייתה שונה באופן משמעותי מלפני ההכנה ECD (p = 0.72). Unsuccess<html> תוצאות פול נבעו מדמעות DM (10%), ואובדן חמור תא (14%). מקרים אלה גם היו קשורים עם קושי לתלות שוב רקמה וצביעה חלקית של קצה DM. הערכת Eye-בנק של תוצאות מטופל מספקת נתונים חיוניים להצלחה קלינית ותופעות לוואי הקשורות לDMEK אשר עשוי לעזור לשפר את ההתאמה של הטכניקה הניתוחית בפועל וניצול של העין בנק מוכן רקמה. תשע רקמת DMEK מראש לחתוך נמסרו לחמישה מנתחים ל9 חולים. מקרה אחד היה נקע ביום 1 ובשבוע ללא צורך בrebubbling 1. חדות ראייה ביום 1 נעו בין 20/400 לתפיסת אור ועל ידי 1 שבוע השתפר ל20 / 103 (טווח 20 / 30-20 / 200). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig1highres.jpg" /> רקמות .1 איור הרכבה. רקמת הקרנית היא רכובה ומרוכזות בשכונה trephination. <html> ss = &quot;jove_content&quot; FO: לשמור-together.within-page = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig2highres.jpg" /> איור 2 trephination רקמות. טבעת הוואקום יושבת ורקמת קרנית trephined באופן חלקי כולל הקרום של Descemet. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig3highres.jpg" /> איור 3 הסרת מדיית אחסון. אמצעי אחסון עודף מוסר לפני להכתים יישום. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig4highres.jpg" /> איור 4 יישום כחול Trypan. החל כתם כחול trypan על פני השטח הקרום של Descemet עם מילוי של הבאר ל60-90 שניות. <html> _upload / 51919 / 51919fig5highres.jpg &quot;/&gt; איור 5 הסרת כתמים. יש לשטוף trypan כחול עם BSS. <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig6highres.jpg" /> איור 6 הסרת כתמים. הסרה מלאה של כתם. <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig7highres.jpg" /> מלקחיים איור 7 נתיחת הקרום של Descemet. קשירה משמשים לביצוע 360 ° נתיחה חלקית. <img alt="איור 8" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig8highres.jpg" /> איור 8 הפשטת הקרום של Descemet. בגין להתפשט הקרום של Descemet. <img alt="&lt;/ Html"><html> src = /&gt; &quot;/ קבצים / ftp_upload / 51919 / 51919fig9highres.jpg&quot; &quot;9 איור&quot; איור 9 הפשטת הקרום של Descemet. המשך להתפשט הקרום של Descemet. <img alt="איור 10" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig10highres.jpg" /> איור 10. הקרום של המיקום מחדש Descemet. הקרום של חזרה Descemet למיטת סטרומה, () יישום (B) BSS כדי לסייע בהנפת הקרום של Descemet, והנפה מלאה (C) של הקרום של Descemet למיקום מקורי. <img alt="איור 11" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig11highres.jpg" /> איור 11. מאוזן מלח פתרון ההסרה. הסרת BSS הנוסף מתחת לדש. 2 &quot;src =&quot; / קבצים / ftp_upload / 51919 / 51919fig12highres.jpg &quot;/&gt; סימן איור 12. צירים. זיהוי של ציר עם סמן עור.

Watch this Scientific Journal Video about Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty at JoVE.com

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

keratoplasty האנדותל הוא טכניקה כירורגית ברציפות מתפתחת כמו התקדמות לגרום להשתלת שתלי דקים יותר עם ​​כל רצף 1. כאן אנו מציגים טכניקה לנתיחה רקמה ידנית מבוקרת על מנת לאפשר הפרדה בטוחה ודיר של האנדותל והקרומים של Descemet מכפתורי corneoscleral תורם להשתלה 2.

הכנת רקמות התורמות קרנית לממברנה האנדותל Keratoplasty של Descemet

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

corneal-donor-tissue-preparation-for-descemet-s-membrane-endothelial

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

15.2K Views.  University of Michigan.  keratoplasty האנדותל הוא טכניקה כירורגית ברציפות מתפתחת כמו התקדמות לגרום להשתלת שתלי דקים יותר עם ​​כל רצף 1. כאן אנו מציגים טכניקה לנתיחה רקמה ידנית מבוקרת על מנת לאפשר הפרדה בטוחה ודיר של האנדותל והקרומים של Descemet מכפתורי corneoscleral תורם ל?...

Video: Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Adenoviral Gene Therapy for Diabetic Keratopathy: Effects on Wound Healing and Stem Cell Marker Expression in Human Organ-cultured Corneas and Limbal Epithelial Cells

The goal of this protocol is to describe molecular alterations in human diabetic corneas and demonstrate how they can be alleviated by adenoviral gene therapy in organ-cultured corneas. The diabetic corneal disease is a complication of diabetes with frequent abnormalities of corneal nerves and epithelial wound healing. We have also documented significantly altered expression of several putative epithelial stem cell markers in human diabetic corneas. To alleviate these changes, adenoviral gene therapy was successfully implemented using the upregulation of c-met proto-oncogene expression and/or the downregulation of proteinases matrix metalloproteinase-10 (MMP-10) and cathepsin F. This therapy accelerated wound healing in diabetic corneas even when only the limbal stem cell compartment was transduced. The best results were obtained with combined treatment. For possible patient transplantation of normalized stem cells, an example is also presented of the optimization of gene transduction in stem cell-enriched cultures using polycationic enhancers. This approach may be useful not only for the selected genes but also for the other mediators of corneal epithelial wound healing and stem cell function.

An example of adenoviral gene therapy in the human diabetic organ-cultured corneas is presented towards the normalization of delayed wound healing and markedly reduced epithelial stem cell marker expression in these corneas. It also describes the optimization of this process in stem cell-enriched limbal epithelial cultures.

תרפיה adenoviral ג&#39;ין עבור סוכרתית keratopathy: השפעות על ריפוי פצע גזע ביטוי נייד מרקר ב קרניות אדם איברים בתרבית תאים לימבלית אפיתל

The goal of this protocol is to describe molecular alterations in human diabetic corneas and demonstrate how they can be alleviated by adenoviral gene ...

Developmental Biology

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the retrieval of ocular tissues, especially cornea, by cutting it separate from the ocular globe. Evisceration is the process of removing the internal organs referred here as retina. The ocular globe consists of the cornea, the sclera, the vitreous body, the lens, the iris, the retina, the choroid, muscles etc (Suppl. Figure 1). When a patient is suffering from corneal damage, the cornea needs to be removed and a healthy one must be transplanted by keratoplastic surgeries. Genetic disorders or defects in retinal function can compromise vision. Human ocular globes can be used for various surgical procedures such as eye banking, transplantation of human cornea or sclera and research on ocular tissues. However, there is little information available on human corneal and retinal excision, probably due to the limited accessibility to human tissues. Most of the studies describing similar procedures are performed on animal models. Research scientists rely on the availability of properly dissected and well-conserved ocular tissues in order to extend the knowledge on human eye development, homeostasis and function. As we receive high amount of ocular globes out of which approximately 40% (Table 1) of them are used for research purposes, we are able to perform huge amount of experiments on these tissues, defining techniques to excise and preserve them regularly.
The cornea is an avascular tissue which enables the transmission of light onto the retina and for this purpose should always maintain a good degree of transparency. Within the cornea, the limbus region, which is a reservoir of the stem cells, helps the reconstruction of epithelial cells and restricts the overgrowth of the conjunctiva maintaining corneal transparency and clarity. The size and thickness of the cornea are critical for clear vision, as changes in either of them could lead to distracted, unclear vision. The cornea comprises of 5 layers; a) epithelium, b) Bowman's layer, c) stroma, d) Descemet's membrane and e) endothelium. All layers should function properly to ensure clear vision4,5,6. The choroid is the intermediate tunic between the sclera and retina, bounded on the interior by the Bruch's membrane and is responsible for blood flow in the eye. The choroid also helps to regulate the temperature and supplies nourishment to the outer layers of the retina5,6. The retina is a layer of nervous tissue that covers the back of the ocular globe (Suppl. Figure 1) and consists of two parts: a photoreceptive part and a non-receptive part. The retina helps to receive the light from the cornea and lens and converts it into the chemical energy eventually transmitted to the brain with help of the optic nerve5,6.
The aim of this paper is to provide a protocol for the dissection of corneal and retinal tissues from human ocular globes. Avoiding cross-contamination with adjacent tissues and preserving RNA integrity is of fundamental importance as such tissues are indispensable for research purposes aimed at (i) characterizing the transcriptome of the ocular tissues, (ii) isolating stem cells for regenerative medicine projects, and (iii) evaluating histological differences between tissues from normal/affected subjects. In this paper we describe the technique we currently use to remove the cornea, the choroid and retinal tissues from an ocular globe. Here we provide a detailed protocol for the dissection of the human ocular globe and the excision of corneal and retinal tissues. The accompanying video will help researchers to learn an appropriate technique for the retrieval of precious human tissues which are difficult to find regularly.

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

The paper describes a simplified technique to excise corneal and to eviscerate retinal tissues from the ocular globe of human cadaveric donors. The technique described here will help to excise good quality tissues to be used for transplantation, surgical or research purposes without damaging other tissues of the ocular globe.

טכניקה פשוטה עבור<em&gt; באתרו</em&gt; כריתת של הקרנית ואת הוצאת הקרביים של רקמת רשתית מ גלוב Ocular האדם

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the ...

Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full thickness corneal transplantation has been the treatment to restore sight in those limited by corneal disease. Some disadvantages to this approach include a high degree of post-operative astigmatism, lack of predictable refractive outcome, and disturbance to the ocular surface. The development of Descemet's stripping endothelial keratoplasty (DSEK), transplanting only the posterior corneal stroma, Descemet's membrane, and endothelium, has dramatically changed treatment of corneal endothelial disease. DSEK is performed through a smaller incision; this technique avoids 'open sky' surgery with its risk of hemorrhage or expulsion, decreases the incidence of postoperative wound dehiscence, reduces unpredictable refractive outcomes, and may decrease the rate of transplant rejection3-6.
Initially, cornea donor posterior lamellar dissection for DSEK was performed manually1 resulting in variable graft thickness and damage to the delicate corneal endothelial tissue during tissue processing. Automated lamellar dissection (Descemet's stripping automated endothelial keratoplasty, DSAEK) was developed to address these issues. Automated dissection utilizes the same technology as LASIK corneal flap creation with a mechanical microkeratome blade that helps to create uniform and thin tissue grafts for DSAEK surgery with minimal corneal endothelial cell loss in tissue processing.
Eye banks have been providing full thickness corneas for surgical transplantation for many years. In 2006, eye banks began to develop methodologies for supplying precut corneal tissue for endothelial keratoplasty. With the input of corneal surgeons, eye banks have developed thorough protocols to safely and effectively prepare posterior lamellar tissue for DSAEK surgery. This can be performed preoperatively at the eye bank. Research shows no significant difference in terms of the quality of the tissue7 or patient outcomes8,9 using eye bank precut tissue versus surgeon-prepared tissue for DSAEK surgery. For most corneal surgeons, the availability of precut DSAEK corneal tissue saves time and money10, and reduces the stress of performing the donor corneal dissection in the operating room. In part because of the ability of the eye banks to provide high quality posterior lamellar corneal in a timely manner, DSAEK has become the standard of care for surgical management of corneal endothelial disease.
The procedure that we are describing is the preparation of the posterior lamellar cornea at the eye bank for transplantation in DSAEK surgery (Figure 1).

Endothelial corneal transplantation is a surgical technique for treatment of posterior corneal diseases. Mechanical microkeratome dissection to prepare tissue results in thinner, more symmetric grafts with less endothelial cell loss and improved outcomes. Dissections can be performed at the eye bank prior to corneal transplantation surgery.

קרנית התורם רקמות הכנה Keratoplasty האנדותל

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full ...

Corneal Tissue Engineering: An In Vitro Model of the Stromal-nerve Interactions of the Human Cornea

Tissue engineering has gained substantial recognition due to the high demand for human cornea replacements with an estimated 10 million people worldwide suffering from corneal vision loss1. To address the demand for viable human corneas, significant progress in three-dimensional (3D) tissue engineering has been made2,3,4. These cornea models range from simple monolayer systems to multilayered models, leading to 3D full-thickness corneal equivalents2.
However, the use of a 3D tissue-engineered cornea in the context of in vitro disease models studied to date lacks resemblance to the multilayered 3D corneal tissue structure, function, and the networking of different cell types (i.e., nerve, epithelium, stroma, and endothelium)2,3. In addition, the demand for in vitro cornea tissue models has increased in an attempt to reduce animal testing for pharmaceutical products. Thus, more sophisticated models are required to better match systems to human physiological requirements, and the development of a model that is more relevant to the patient population is absolutely necessary. Given that multiple cell types in the cornea are affected by diseases and dystrophies, such as Keratoconus, Diabetic Keratopathy, and Fuchs, this model includes a 3D co-culture model of primary human corneal fibroblasts (HCFs) from healthy donors and neurons from the SH-SY5Y cell line. This allows us for the first time to investigate the interactions between the two cell types within the human corneal tissue. We believe that this model could potentially dissect the underlying mechanisms associated with the stromal-nerve interactions of corneal diseases that exhibit nerve damages. This 3D model mirrors the basic anatomical and physiological nature of the corneal tissue in vivo and can be used in the future as a tool for investigating corneal defects as well as screening the efficacy of various agents before animal testing.

Corneal Tissue Engineering: An In Vitro Model of the Stromal-nerve Interactions of the Human Cornea

This protocol describes a novel three-dimensional in vitro model, where corneal stromal cells and differentiated neuronal cells are cultured together to assist in the examination and understanding of the interactions of the two cell types.

הנדסת רקמות הקרנית: במבחנה מודל של אינטראקציות סטרומה-עצב של הקרנית האנושית

Tissue engineering has gained substantial recognition due to the high demand for human cornea replacements with an estimated 10 million people worldwide ...

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as Aniridia or Steven Johnson Syndrome as well as by external factors such as chemical burns or radiation. Current treatments are (i) the use of corneal grafts and (ii) the use of stem cell expanded in the laboratory and delivered on carriers (e.g., amniotic membrane); these treatments are relatively successful but unfortunately they can fail after 3-5 years. There is a need to design and manufacture new corneal biomaterial devices able to mimic in detail the physiological environment where stem cells reside in the cornea. Limbal stem cells are located in the limbus (circular area between cornea and sclera) in specific niches known as the Palisades of Vogt. In this work we have developed a new platform technology which combines two cutting-edge manufacturing techniques (microstereolithography and electrospinning) for the fabrication of corneal membranes that mimic to a certain extent the limbus. Our membranes contain artificial micropockets which aim to provide cells with protection as the Palisades of Vogt do in the eye.

We report a technique for the fabrication of micropockets within electrospun membranes in which to study cell behavior. Specifically, we describe a combination of microstereolithography and electrospinning for the production of PLGA (Poly(lactide-co-glycolide)) corneal biomaterial devices equipped with microfeatures.

שילוב של Microstereolithography וElectrospinning כדי לייצר ממברנות מצויד בגומחות להתחדשות קרנית

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

Bioengineering

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each year. While several animal models exist for this procedure and mice are the species that is most commonly used. The reasons for using mice are the relative cost of using this species, the existence of many genetically defined strains that allow for the study of immune responses, and the existence of an extensive array of reagents that can be used to further define responses in this species. This model has been used to define factors in the cornea that are responsible for the relative immune privilege status of this tissue that enables corneal allografts to survive acute rejection in the absence of immunosuppressive therapy. It has also been used to define those factors that are most important in rejection of such allografts. Consequently, much of what we know concerning mechanisms of both corneal allograft acceptance and rejection are due to studies using a murine model of corneal transplantation. In addition to describing a model for acute corneal allograft rejection, we also present for the first time a model of late-term corneal allograft rejection.

Mice have been used as a model for studying many forms of transplantation, including corneal transplantation. We describe in this report a murine model for both acute and late-term corneal transplantation.

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an intended depth, and a near infrared diode laser to weld the corneal tissue. The proposed technique enables to reach the three main goals in endothelial keratoplasty: a precise control in the thickness of the donor tissue; its easy insertion in the recipient bed and a reduced risk of donor lenticule dislocation. The donor cornea thickness is measured in the surgery room with optical coherence tomography (OCT), in order to correctly design the donor tissue dimensions. A femtosecond laser is used to cut the donor cornea. The recipient eye is prepared by manual stripping of the descemetic membrane. The donor endothelium is inserted into a Busin-injector, the peripheral inner side is stained with a proper chromophore (a water solution of Indocyanine Green) and then it is pulled in the anterior chamber. The transplanted tissue is placed in the final and correct location and then diode laser welding is induced from outside the eyeball. The procedure has been performed on more than 15 patients evidencing an improvement in surgery performances, with a good recovery of visual acuity and a reduced donor lenticule dislocation event.

An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.

השתלות &quot;All-הלייזר&quot; האנדותל

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is deleterious for the cells as it reduces their ability to form a mature and functional layer. Here, we present a method for establishing and subculturing human and sheep corneal endothelial cell cultures that minimizes the loss of cell-to-cell contact. Explants of corneal endothelium/Descemet&#39;s membrane are taken from donor corneas and placed into tissue culture under conditions that allow the cells to collectively migrate onto the culture surface. Once a culture has been established, the explants are transferred to fresh plates to initiate new cultures. Dispase II is used to gently lift clumps of cells off tissue culture plates for subculturing. Corneal endothelial cell cultures that have been established using this protocol are suitable for transferring to biomaterial membranes to produce tissue-engineered cell layers for transplantation in animal trials. A custom-made device for supporting biomaterial membranes during tissue culture is described and an example of a tissue-engineered graft composed of a layer of corneal endothelial cells and a layer of corneal stromal cells on either side of a collagen type I membrane is presented.

This protocol describes the critical steps required to establish and grow corneal endothelial cell cultures from explants of human or sheep tissue. A method for subculturing corneal endothelial cells on membranous biomaterials is also presented.

צמיחת הקרנית של האדם והכבשים שכבות של תאי-על ביומטריה

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Full-Field Optical Coherence Microscopy for Histology-Like Analysis of Stromal Features in Corneal Grafts

The quality of donor corneal stroma, which makes up about 90% of total corneal thickness, is likely to be one of the main, if not the major, limiting factor(s) for success of deep anterior lamellar and penetrating keratoplasty. These are surgical procedures that involve replacing part or all of the diseased corneal layers, respectively, by donated tissue, the graft, taken from a recently deceased individual. However, means to evaluate stromal quality of corneal grafts in eye banks are limited and lack the capability of high-resolution quantitative assessment of disease indicators. Full-field optical coherence microscopy (FF-OCM), permitting high-resolution 3D imaging of fresh or fixed ex vivo biological tissue samples, is a non-invasive technique well suited for donor cornea assessment. Here we describe a method for the qualitative and quantitative analysis of corneal stroma using FF-OCM. The protocol has been successfully applied to normal donor corneas and pathological corneal buttons, and can be used to identify healthy and pathologic features on both the macroscopic and microscopic level, thereby facilitating the detection of stromal disorders that could compromise the outcome of keratoplasty. By improving the graft quality control, this protocol has the potential to result in better selection (and rejection) of donor tissues and hence decreased graft failure.

We describe use of full-field optical coherence microscopy as a method for high quality assessment of corneal donor stroma. This protocol can be used to identify features indicative of health or disease, and is aimed at improving the screening and selection of donor tissues, and hence the results of keratoplasty.

מיקרוסקופ קוהרנטיות אופטית בשדה מלא לניתוח דמוי היסטולוגיה של תכונות סטרומה בשתלי קרנית

The quality of donor corneal stroma, which makes up about 90% of total corneal thickness, is likely to be one of the main, if not the major, limiting ...

Immunology and Infection

Development of a Noninvasive, Laser-Assisted Experimental Model of Corneal Endothelial Cell Loss

Nd:YAG lasers have been used to perform noninvasive intraocular surgery, such as capsulotomy for several decades now. The incisive effect relies on the optical breakdown at the laser focus. Acoustic shock waves and cavitation bubbles are generated, causing tissue rupture. Bubble sizes and pressure amplitudes vary with pulse energy and position of the focal point. In this study, enucleated porcine eyes were positioned in front of a commercially available Nd:YAG laser. Variable pulse energies as well as different positions of the focal spots posterior to the cornea were tested. Resulting lesions were evaluated by two-photon microscopy and histology to determine the best parameters for an exclusive detachment of corneal endothelial cells (CEC) with minimum collateral damage. The advantages of this method are the precise ablation of CEC, reduced collateral damage, and above all, the non-contact treatment.

Here, we present a protocol to detach corneal endothelial cells (CEC) from Descemet&#8217;s membrane (DM) using a neodymium:YAG (Nd:YAG) laser as an ex vivo disease model for bullous keratopathy (BK).

פיתוח של מודל פולשני, בסיוע לייזר של הקרנית הפסד של תא אנדותל

Nd:YAG lasers have been used to perform noninvasive intraocular surgery, such as capsulotomy for several decades now. The incisive effect relies on the ...

הכנת רקמות התורמות קרנית לממברנה האנדותל Keratoplasty של Descemet

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

תרפיה adenoviral ג'ין עבור סוכרתית keratopathy: השפעות על ריפוי פצע גזע ביטוי נייד מרקר ב קרניות אדם איברים בתרבית תאים לימבלית אפיתל

טכניקה פשוטה עבור