<ol>
	<li>Urboniene, D., Haber, I., Fang, Y. H., Thenappan, T., Archer, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+high-resolution+echocardiography+and+magnetic+resonance+imaging+vs.+high-fidelity+catheterization+in+experimental+pulmonary+hypertension.">Validation of high-resolution echocardiography and magnetic resonance imaging vs. high-fidelity catheterization in experimental pulmonary hypertension.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 299, 401-412 (2010).</li><li>Rottman, J. N., Ni, G., Brown, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+evaluation+of+ventricular+function+in+mice.">Echocardiographic evaluation of ventricular function in mice.</a> Echocardiography. 24, 83-89 (2007).</li><li>West, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hypertension+in+transgenic+mice+expressing+a+dominant-negative+BMPRII+gene+in+smooth+muscle.">Pulmonary hypertension in transgenic mice expressing a dominant-negative BMPRII gene in smooth muscle.</a> Circ. Res. 94, 1109-1114 (2004).</li><li>Ghofrani, H. A., Seeger, W., Grimminger, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imatinib+for+the+treatment+of+pulmonary+arterial+hypertension.">Imatinib for the treatment of pulmonary arterial hypertension.</a> N. Engl. J. Med. 353, 1412-1413 (2005).</li><li>Gomberg-Maitland, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dosing/cross-development+study+of+the+multikinase+inhibitor+sorafenib+in+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension.">A dosing/cross-development study of the multikinase inhibitor sorafenib in patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Clin. Pharmacol. Ther. 87, 303-310 (2010).</li><li>Brittain, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+plasticity+and+functional+imaging.">Right ventricular plasticity and functional imaging.</a> Pulm. Circ. 2, 309-326 (2012).</li><li>Yang, X. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+conscious+and+anesthetized+mice.">Echocardiographic assessment of cardiac function in conscious and anesthetized mice.</a> Am. J. Physiol. 277, 1967-1974 (1999).</li><li>Suehiro, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+segmental+wall+motion+abnormalities+using+contrast+two-dimensional+echocardiography+in+awake+mice.">Assessment of segmental wall motion abnormalities using contrast two-dimensional echocardiography in awake mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ Physiol. 280, 1729-1735 (2001).</li><li>Jones, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+noninvasive+assessment+of+progressive+pulmonary+hypertension+in+a+rat+model.">Serial noninvasive assessment of progressive pulmonary hypertension in a rat model.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, 364-371 (2002).</li><li>Devaraj, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+pulmonary+hypertension+with+multidetector+CT+and+echocardiography+alone+and+in+combination.">Detection of pulmonary hypertension with multidetector CT and echocardiography alone and in combination.</a> Radiology. 254, 609-616 (2010).</li><li>Kitabatake, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+evaluation+of+pulmonary+hypertension+by+a+pulsed+Doppler+technique.">Noninvasive evaluation of pulmonary hypertension by a pulsed Doppler technique.</a> Circulation. 68, 302-309 (1983).</li><li>Yared, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+artery+acceleration+time+provides+an+accurate+estimate+of+systolic+pulmonary+arterial+pressure+during+transthoracic+echocardiography.">Pulmonary artery acceleration time provides an accurate estimate of systolic pulmonary arterial pressure during transthoracic echocardiography.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 24, 687-692 (2011).</li><li>Cheung, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+surface+area+prediction+in+normal,+hypermuscular,+and+obese+mice.">Body surface area prediction in normal, hypermuscular, and obese mice.</a> J. Surg. Res. 153, 326-331 (2009).</li><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+models+of+heart+failure:+development+of+novel+therapies,+past+and+present.">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ. Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li><li>Baumgartner, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+valve+stenosis:+EAE/ASE+recommendations+for+clinical+practice.">Echocardiographic assessment of valve stenosis: EAE/ASE recommendations for clinical practice.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 22, 1-23 (2009).</li><li>Arkles, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shape+of+the+right+ventricular+Doppler+envelope+predicts+hemodynamics+and+right+heart+function+in+pulmonary+hypertension.">Shape of the right ventricular Doppler envelope predicts hemodynamics and right heart function in pulmonary hypertension.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 183, 268-276 (2011).</li><li>Wiesmann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+right+ventricular+function+in+healthy+mice+and+a+murine+model+of+heart+failure+by+in+vivo+MRI.">Analysis of right ventricular function in healthy mice and a murine model of heart failure by in vivo MRI.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, 1065-1071 (2002).</li><li>West, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+potential+role+for+Insulin+resistance+in+experimental+pulmonary+hypertension.">A potential role for Insulin resistance in experimental pulmonary hypertension.</a> Eur. Respir. J. , (2012).</li><li>Johnson, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytoskeletal+defects+in+Bmpr2-associated+pulmonary+arterial+hypertension.">Cytoskeletal defects in Bmpr2-associated pulmonary arterial hypertension.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 302, L474-L484 (2012).</li><li>Johnson, J. A., West, J., Maynard, K. B., Hemnes, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACE2+improves+right+ventricular+function+in+a+pressure+overload+model.">ACE2 improves right ventricular function in a pressure overload model.</a> PLoS One. 6, e20828 (2011).</li></ol>

יש המחברים אין לחשוף.

מודלים של עכברים של מחלה, או מהונדס או הקשורים להרעל, דורשים אימות פנוטיפי כי המודל בעצם מסכם את המחלות של בני האדם הוא נועד לחקות. אימות זה לעתים קרובות ניתן להשיג על ידי הנוכחות או היעדר של תכונה מסוימת, לדוגמא פיתוח של גידול. עם זאת, מודלים שיגרמו למומים המודינמית כגון מודלים התכווצות אב העורקים של היפרטרופיה של חדר השמאלי או הדגם המהונדס שלנו של PAH קשים יותר כדי לאמת. מודלים אלה דורשים גם מדידה סופית של פרמטרים המודינמיים או כלים למדוד noninvasively פרמטרים המודינמיים וליקויים בתפקוד לב. אקו הוא קריטי למודלים כאלה, כי זה מאפשר כימות של פרמטרים המודינמיים ותפקוד לב בזמן אמת ללא צורך בהקרבה של בעלי חיים חולים 14. בנוסף, ניתן הדמיה חיות בודדות באופן סדרתי כדי לעקוב אחר המהלך הטבעי של מחלה או תגובה לטיפול. אנו מעריכים כי proficienCY באקו הלב תקין על פי פרוטוקול זה יכול להיות שנרכש לאחר ביצוע כ 20 בחינות. היכולת להעריך את תפוקת לב על אקו היא גם קריטית לחישוב של התנגדות כלי דם ריאתי (PVR) בזמן של הקרבה. מדידה של תפוקת לב באמצעות צנתרים מוליכות היא לעתים קרובות לא אמינה במודל שלנו בגלל הגודל הקטן של קרוואנים. בעת ההקרבה, אנו מודדים את לחץ הסיסטולי רשות פולשנית באמצעות קטטר מוליכות ולשלב את זה עם תפוקת לב מאקו כדי לקבוע PVR (לחץ טריז ריאתי הנחה הוא להיות נמוך והוא התעלם). זה מאפשר לנו לכמת את מידת מחלת כלי דם ריאתי במודל שלנו עוד יותר. מגבלות תיאורטיות ומעשיות של אקו חשוב להכיר בכך שהיישום של פיזיקת אולטרסאונד לבני אדם ובעלי חיים יש מגבלות.מדידה מדויקת של מהירות דם באמצעות דופלר תלויה בזווית של זרימה ביחס לזווית של insonation (זווית שבה מתמר מיועדת). עבור כל תואר שתי הזוויות האלה הן מעוות, המדידה של דם מהירות תהיה ירד ב cos (θ) 15. מבחינה קלינית, אם שתי הזוויות הן על ידי יותר מ 20 ° המדידה הרגיש להיות לא אמין. יש לכך השלכות שעשויים להיות חשובות לפרוטוקול זה במדידה של LVOT וRVOT VTI. אם זווית PW לא יכולה להיות מיושרת היטב עם כיוון זרימת דם בLVOT וRVOT, SV נמדד ותפוקת לב יהיה באופן כוזב נמוכים. עוד טעות מדידה פוטנציאלית היא בחישוב של הרשות הפלסטינית ואזור אב העורקים אשר לאחר מכן משמשים לחישוב SV ותפוקת לב. מכיוון ששטחיו של מעגל הוא πr 2, אי דיוק כלשהו במדידת הקוטר של אב העורקים או בעורק ריאה בריבוע והשגיאה מורכבת. בבניים, קטרי RVOT וLVOT משמשים לחישוב SV במקום הקוטר של אב העורקים ועורקי ריאתי, עם זאת, בעכברים שקשה מאוד לזהות במדויק LVOT וRVOT כדי שנחליף את אב העורקים ועורק ריאה האזורים. סיפק את אותה הטכניקה משמשת בבעלי חיים אחד למשנהו, שונים קטין זה לא צריך להשפיע על תוצאות מחקר. תפקוד לקוי של חדר ממני הוא הביטוי העיקרי של יתר לחץ דם ריאתי בבני אדם. מספר המגבלות מעשיות נוגע להערכה לא פולשנית של הלב תקין. בבני אדם ועכברים, החדר ממני ממוקם צמוד לקיר החזה. סמיכות זו למתמר עושה הדמיה הקיר בחינם RV הקדמי קשה מאוד. RV הוא צורת סהר לא סדירה אשר מונעת הנחות נפחית כמו אלה המשמשים לקביעת גודל LV ותפקוד. גודל קרוואנים בעכברים בדרך כלל ניתן לקבוע רק באופן רגיל או מוגדל עקב המתקשים בראיית קרוואנים בחינםקיר. עם זאת, סיווג זה עדיין מועיל כדי לאמת את קיומו או העדר מחלת כלי דם ריאתי. אקו עשויה להתבצע על עכברים עם או בלי הרדמה. אנחנו מעדיפים להשתמש בהרדמה על מנת למקסם את האיכות והדיוק של המדידות שלנו, אבל מכירים בכך שההרדמה תוריד את קצב הלב. כאשר היא מבוצעת ללא הרדמה, איכות תמונה עלולה לסבול והתהליך הוא מקור של לחץ לבעלי החיים אשר יהיה להעלות את קצב לב ואת לחץ דם. אנו מבצעים את כל echocardiograms עם תואר זהה של הרדמה על מנת לאפשר השוואה של תוצאות בין ובתוך עכברים. כימות של RV ותפקוד כלי דם ריאתי בעכברים מסתמכת על הערכת דופלר של קצב כדי לנצח את הזרימה על פני המסתם הריאתי, VTI RVOT. זה יכול לשמש כמשתנה דיכוטומי (גבוהים / נמוך), אבל כאשר נמדד בקפידה יכול לשמש כמדידה סידורי בעכבר או בהשוואה בין קבוצות עם הבדלהתערבויות erent. ציוד מתקדם זמין מסחרי להשתמש בהערכת דופלר צבע לנוכחות והמהירות של regurgitation tricuspid סילון (TR), המשמש בבני אדם כדי לכמת את החומרה של יתר לחץ דם ריאתי. בבני אדם בלי סילון TR measureable, PAT משמש כפונדקאי כדי לקבוע אם יתר לחץ דם ריאתי הוא בהווה או נעדר 11. PAT יקצר כPH מחמיר בגלל פליטת RV תפסיק מוקדם נגד לחץ מוגבר. שיטה זו גם אומתה במודלים של עכברים של PAH כאומדן מדויק של החומרה של יתר לחץ דם ריאתי 1. לבסוף, את הצורה של מעטפת RVOT VTI יכולה לשפוך אור על צימוד בין קרוואנים וכלי דם ריאתי בבני אדם 16. חרוק של המעטפה עולה בקנה אחד עם התנגדות גבוהה ריאות כלי דם עם חרוק מאוחר יותר מצביעה על עמידות גבוהה יותר. עם זאת, יש לנו לא נצפו הדפוסים הללו בעכברים במודל של PAH שלנו, גם בעכברים בהמשך שיתוףnfirmed יש PH החמור על ידי מדידה פולשנית. מלבד אקו, הדמיה בתהודה המגנטית של הלב (CMR) היא החלופה לא פולשנית רק להערכה של תפקוד RV. בחולדות, CMR מספק מדידה מדויקת של עובי RV, מסה ונפח (ובכך מקטע פליטה ותפוקת לב) 17. בנוסף, CMR-PAT נמדד ועקומות זרימת זמן (מקבילות לVTI) מתואמות חזקות עם אקו ופרמטרים המודינמיים נמדדו פולשני. למרות כמה יתרונות ברורים, CMR הוא יקר יותר וזמן אינטנסיבי מאשר אקו ועבור אלה סיבות כמעט ולא משתמשים בניסויים שלנו. למיטב ידיעתנו אין מחקר יש תוקף את מדידות אקו המתוארות כאן עם מדידות או CMR פולשנית. עם זאת, אנו משתמשים באופן שגרתי המדידות שהוצגו בפרוטוקול זה כדי להעריך penetrance מחלה וחומרה 18-20.

לחץ ריאתי מוגבר ועל שמאל חדרית חוסר תפקוד (RV) הם סימני ההיכר של מחלת כלי דם ריאתי במודלים של בעלי חיים ובני אדם חולים עם יתר לחץ דם ריאתי עורקים (PAH). מהונדס ומודלים רעילים (למשל monocrotaline או היפוקסיה) של PAH נמצאים בשימוש נרחב כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של PAH ולחקור טיפולים פוטנציאליים. בהתחשב בהוצאות והזמן הכרוכים ביצירת מודלים של בעלי חיים למחלות, זה קריטי, כי יש לחוקרים כלים כדי להעריך ביטוי פנוטיפי של מחלה באופן מדויק. אקו הוא עמוד התווך של ההערכה לא פולשנית של תפקוד חדר במודלים של מכרסמים 1,2. יש אקו היתרון של תרגום ברור לבני אדם בהם נעשה שימוש באותו הכלי. בנוסף, בחלק מהדגמים גנטיים תערוכת חדירנות לא מושלמת 3; היכולת לזהות noninvasively חיות מושפעות חוסכת זמן יקר ומשאבים. הערכה לא פולשנית של diseaחומרת se מבלי להקריב בעלי חיים גם מאפשרת לחוקרים ללמוד סדרתי את ההשפעות של טיפולי חקירה. זה חשוב במיוחד לאור המהירות שבה טיפולי translational יכולים להתקדם לניסויים בבני אדם 4,5. בבני אדם, הערכת אקו בגודל קרוואנים ויתר לחץ דם ריאתי היא מאתגרת במיוחד בשל מיקום retrosternal וצורה לא סדירה של קרוואנים 6. יש מודלים של מכרסמים אתגרים נוספים של גודל קטן ושיעורים מהירים מאוד לב (300-700 פעימה / min). ההתקדמות שחלה באחרונה, כולל מסגרת חליפין גבוהות יותר, זרם קטן יותר שיפרה את איכות תמונה והדמיה מודעת אף אפשרה בכמה פרוטוקולי ניסוי, למרות שרוב ההדמיה מכרסמים נעשית תחת ההרדמה 7,8. פרוטוקולי ניסוי מצוינים של אקו במודלים של עכברים של PAH תוארו ותוקפים נגד שני MRI ופרמטרים המודינמיים פולשנית 1,9. עם זאת אקו שפורסם,פרוטוקולים במודלים עכבריים של PAH חסרים. במאמר זה, אנו מתארים פרוטוקול להערכת RV ותפקוד כלי דם ריאתי במודל של עכברים של PAH עם מוטציה דומיננטית שלילית BMPRII ומודל של afterload קרוואנים הבודד לאחר פסי עורק ריאה, עם זאת, פרוטוקול זה הוא ישים לכל מחלות המשפיעים על כלי דם ריאתי או לב ימני. נתאר הכנת בעלי חיים והערכה מפורטת של גודל RV ותפקוד, כמו גם עורק ריאה ראשי גודל (הרשות הפלסטינית). אנחנו גם מדגימים את הטכניקות וחישובים דרושים כדי להעריך נפח פעימה ותפוקת לב. מגבלות טכניות מונעות הערכות דופלר מדויקות של לחץ ריאתי, אבל יש לנו ליישם פונדקאית תוקף היטב אדם, זמן האצת עורק ריאה, להעריך לחץ הרשות הפלסטינית.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="55">
			<td height="55" style="height:55px;width:251px;">Vevo 770 High Resolution Micro-Ultrasound System</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="66">
			<td height="66" style="height:66px;width:251px;">RMV (Real-Time MicroVisualization) 704B 40 mH Scanhead w/ Encapsulated Transducer</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:251px;">Vevo Integrated Rail System including the Physioogical Monitoring System</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Computer Monitor set up for use with the Vevo770</td>
			<td style="width:164px;">DELL or other General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:251px;">Computer Mouse set up for use with the Vevo770</td>
			<td style="width:164px;">General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:251px;">Vevo770 Cardiac Package Software</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="86">
			<td height="86" style="height:86px;width:251px;">VetEquip Portable Tabletop Anesthesia Machine with an Isoflurane Vaporizer</td>
			<td style="width:164px;">VetEquip</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at vetequip.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Activated Charcoal Waste Gas Containers</td>
			<td style="width:164px;">VetEquip/Vaporguard</td>
			<td style="width:188px;">931401</td>
			<td>get more info at vetequip.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Puralube Eye Ointment</td>
			<td style="width:164px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at henryschein.com</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:251px;">Ecogel 100 Ultrasound Gel</td>
			<td style="width:164px;">EcoMed Pharmaceuticals</td>
			<td style="width:188px;">30GB</td>
			<td>get more info at ecomed.com</td>
		</tr>
		<tr height="59">
			<td height="59" style="height:59px;width:251px;">3M Transpore Tape</td>
			<td style="width:164px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:188px;">1527-0</td>
			<td>get more info at fishersci.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Small Flathead Screwdriver</td>
			<td style="width:164px;">General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:251px;">Sterile H2O</td>
			<td style="width:164px;">DDI H2O from faucet and then autoclave</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="59">
			<td height="59" style="height:59px;width:251px;">6 in Cotton Tipped Applicators</td>
			<td style="width:164px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at fishersci.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Nair (depilatory cream)</td>
			<td style="width:164px;">General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:251px;">2 in x 2 in Gauze Sponges</td>
			<td style="width:164px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at fishersci.com</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

echocardiographic assessment of the right heart in mice

מהונדס ומודלים רעילים של יתר לחץ דם ריאתי עורקים (PAH) נמצאים בשימוש נרחב כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של PAH ולחקור טיפולים פוטנציאליים. בהתחשב בהוצאות והזמן הכרוכים ביצירת מודלים של בעלי חיים למחלות, זה קריטי, כי יש לחוקרים כלים כדי להעריך ביטוי פנוטיפי של מחלה באופן מדויק. תפקוד לקוי של חדר ממני הוא הביטוי העיקרי של יתר לחץ דם ריאתי. אקו הוא עמוד התווך של ההערכה לא פולשנית של תפקוד חדר ממני במודלים של מכרסמים ויש את היתרון של תרגום ברור לבני אדם בהם נעשה שימוש באותו הכלי. פרוטוקולי אקו פורסם במודלים עכבריים של PAH חסרים. במאמר זה, אנו מתארים פרוטוקול להערכת RV ותפקוד כלי דם ריאתי במודל של עכברים של PAH עם מוטציה BMPRII שלילית דומיננטית, עם זאת, פרוטוקול זה הוא ישים לכל מחלות המשפיעות על כלי דם ריאתי או לב ימני. אנחנולספק תיאור מפורט של הכנת בעלי חיים, רכישת תמונה וחישוב המודינמית של נפח פעימה, תפוקת לב והערכה של לחץ בעורק ריאה.

המטרות העיקריות של פרוטוקול זה הן לכמת גודל RV ותפקוד, וכדי להבין את המידה שבה כלי דם ריאתי הוא חולה. ההיערכות מתאימה של ציוד הן את העכבר ואקו היא חיונית לקבלת תוצאות מדויקות ושחזור. עכברים צריכים להיות מקולף החזה שלהם וגפיים מאובטחים לפלטפורמת ההדמיה עם קלטת. הרדמה, במקרה isoflurane הזה, הוא מנוהלת באמצעות חרטומו. המתמר צריך להיבדק לפגמים, בעיקר בועות אוויר, אשר יכול לפגוע באיכות תמונה. קבלת עמדות 4 קאמריות באיכות טובה של הלב היא די קשה בעכברים ולכן פרוטוקול זה מתמקד בהערכת RV באמצעות צירים קצרים וארוכים parasternal. האנטומיה רלוונטית בתצוגות אלה מוצגת באיורי 1 א ו-1B. גודל RV מוערך ביותר בתצוגת ציר זמן parasternal ונמדד כמרחק מהקיר החופשי interventriculמחץ ar באמצעות M-mode (איור 2). מדידה זו אפשרית רק כאשר RV הוא מורחב כRV הרגיל הוא קטן מאוד. בעכברים, שלא ניתן למדוד במדויק את המדדים הרגילים של תפקוד RV בבני אדם כגון שינוי אזור השבר והטיול הסיסטולי מטוס טבעתי tricuspid. מדידות אלה דורשים נופים באיכות גבוהה של הקיר החופשי RV אשר קשים מאוד להשיג בעכברים. עם זאת, שימוש PW דופלר כדי למדוד את מהירות הזמן נפרד (VTI) ברמה של דרכי הנכונה חדרית יצוא (RVOT) והקוטר של עורק הריאה, ניתן להעריך RV נפח פעימה (איור 3). נפח פעימה ותפוקת לב מחושבים מהנוסחות בטבלה 1. קצב לב מתקבל הדמיה מ-mode. קוטר הרשות עיקרי משקף חומרת PAH בבני אדם 10 וניתן למדוד בעכברים בתצוגה קצר ציר parasternal (איור 3). זה important לקבל תצוגה ברורה של שני הצדדים של הרשות הפלסטינית העיקרית, כי ערך זה בריבוע במשוואה המשמשת לחישוב תפוקת לב. אם גודל הרשות הפלסטינית שלא ניתן למדוד באופן מדויק, קוטר חדר שמאלי יצוא בדרכי וLVOT VTI יכולים להיות מוכנס לתוך המשוואות לעיל כRV ופלט LV שווים בהעדר עיתוק. RV VTI יכול להיחקר נוסף להעריך לחץ של הרשות הפלסטינית על ידי מדידת הזמן להגיע לשיא מהירות (זמן עורק ריאה ההאצה [PAT], איור 4). בבני האדם PAT משמש לdichotomize לחץ הרשות הפלסטינית גבוה או נמוך 11 כ, וניתן להשתמש כדי להעריך את הלחץ של הרשות הפלסטינית, כאשר סילון regurgitant tricuspid אינו נוכח. 12 <img alt="איור 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50912/50912fig1.jpg" /> איור 1. צפיות אקו של Murine האנטומיה. לוח מראה אנטומיה נורמלית בראייה ארוך ציר parasternal. לוחB מראה אנטומיה בתצוגת הציר הקצרה parasternal. החדר ממני מוגדל בלוח ב &#39;. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/50912/50912fig1highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <img alt="איור 2" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50912/50912fig2.jpg" /> איור 2. מדידה מורחב ימני החדר. נתון זה מדגים () גודל RV רגיל בעכבר שליטה (ב) הרחבת RV חמורה בעכבר שעבר דגם פסי עורק ריאה. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/50912/50912fig2highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <img alt="איור 3" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50912/50912fig3.jpg" /> איור 3. מדידה וחישוב נפח שבץ הימני חדרית. נתון זה מראה את המדידות עבורr גם חדר ממני VTI וקוטר עורק ריאה. השיטה לחישוב נפח פעימה עם נתונים אלה היא גם הפגין. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/50912/50912fig3highres.jpg" target="_blank">לחצו כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <img alt="איור 4" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50912/50912fig4.jpg" /> איור 4. מדידה של PAT. זמן האצת ריאה נמדד כזמן להגיע לשיא מהירות בVTI RVOT. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/50912/50912fig4highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> טבלת 1: חישובים שימושיים באקו. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מדידה </td><td> נוסחה </td></tr><tr><td> עורק ריאה / אב העורקים באזור </td><td> π (קוטר / 2) <sעד&gt; 2 </td></tr><tr><td> העכבר שבץ חדרית נפח </td><td> אזור הרשות הפלסטינית x VTI </td></tr><tr><td> תפוקת לב </td><td> קצב לב X נפח פעימה </td></tr><tr><td> אינדקס לבבי </td><td> שטח פן תפוקת לב / גוף </td></tr><tr><td> קיצור החלקי </td><td> (ממד LV קצה הדיאסטולי - ממד קצה הסיסטולי LV) / ממד סוף דיאסטולי LV </td></tr></tbody></table> שטח גוף = 10.5 (גרם) 2/3 13

Watch this Scientific Journal Video about Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice at JoVE.com

Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

מאמר זה מספק פרוטוקול להערכת אקו בגודל חדר ממני ויתר לחץ דם ריאתי בעכברים. יישומים כוללים קביעת הפנוטיפ והערכה סידורי במהונדס ומודלי עכבר מושרה רעל של קרדיומיופתיה ומחלת כלי דם ריאתי.

אקו הערכה של הלב הימני בעכברים

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

echocardiographic-assessment-of-the-right-heart-in-mice

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

22.7K Views.  Vanderbilt University Medical Center.  מאמר זה מספק פרוטוקול להערכת אקו בגודל חדר ממני ויתר לחץ דם ריאתי בעכברים. יישומים כוללים קביעת הפנוטיפ והערכה סידורי במהונדס ומודלי עכבר מושרה רעל של קרדיומיופתיה ומחלת כלי דם ריאתי. 

Video: Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Magnetic Resonance Derived Myocardial Strain Assessment Using Feature Tracking

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF. Current technologies for CMR are time consuming and difficult to implement in clinical practice. Feature tracking is a technology that can lead to more automization and robustness of quantitative analysis of medical images with less time consumption than comparable methods.
Methods: An automatic or manual input in a single phase serves as an initialization from which the system starts to track the displacement of individual patterns representing anatomical structures over time. The specialty of this method is that the images do not need to be manipulated in any way beforehand like e.g. tagging of CMR images.
Results: The method is very well suited for tracking muscular tissue and with this allowing quantitative elaboration of myocardium and also blood flow.
Conclusions: This new method offers a robust and time saving procedure to quantify myocardial tissue and blood with displacement, velocity and deformation parameters on regular sequences of CMR imaging. It therefore can be implemented in clinical practice.

An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF.

תהודה מגנטית נגזר מסננים הערכה שריר הלב באמצעות מעקב אחר תכונות

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

אוטם שריר לב והערכת תוצאה תפקודית בחזירים

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient&#8217;s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

Heterotopic צוואר הרחם לב השתלה בעכברים

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. Pulmonary Hypertension (PH) was induced in 3-week-old piglets by a progressive obstruction of the pulmonary vascular bed. A ligation of the left Pulmonary Artery (PA) was performed first through a mini-thoracotomy. Second, weekly embolizations of the right lower pulmonary lobe were done under fluoroscopic guidance with n-butyl-2-cyanoacrylate during 5 weeks. Mean Pulmonary Arterial Pressure (mPAP) measured by ritght heart catheterism, increased progressively, as well as Right Atrial pressure and Pulmonary Vascular Resistances (PVR) after 5 weeks compared to sham animals. Right Ventricular (RV) structural and functional remodeling were assessed by transthoracic echocardiography (RV diameters, RV wall thickness, RV systolic function). RV elastance and RV-pulmonary coupling were assessed by Pressure-Volume Loops (PVL) analysis with conductance method. Histologic study of the lung and the right ventricle were also performed. Molecular analyses on RV fresh tissues could be performed through repeated transcutaneous endomyocardial biopsies. Pulmonary microvascular disease in obstructed and unobstructed territories was studied from lung biopsies using molecular analyses and pathology. Furthermore, the reliability and the reproducibility was associated with a range of PH severity in animals. Most aspects of the human CTEPH disease were reproduced in this model, which allows new perspectives for the understanding of the underlying mechanisms (mitochondria, inflammation) and new therapeutic approaches (targeted, cellular or gene therapies) of the overloaded right ventricle but also pulmonary microvascular disease.

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

תרומבואמבוליים כרוני יתר לחץ דם ריאה והערכה של תפקוד ימין חדרית בחזרזיר

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in rodents, with detailed descriptions of the appropriate methods for anesthesia, the echocardiographic windows used, the imaging planes and probe orientations for image acquisition, the methods for data analysis, and the limitations of emerging technologies for the evaluation of cardiac and valvular function. Importantly, we also highlight several future areas of research in cardiac and heart valve imaging that may be leveraged to gain insights into the pathogenesis of valve disease in preclinical animal models. We propose that using a systematic approach to evaluating cardiac and heart valve function in mice can result in more robust and reproducible data, as well as facilitate the discovery of previously underappreciated phenotypes in genetically-altered and/or physiologically-stressed mice.

This protocol provides a detailed description of the echocardiographic approach for comprehensive phenotyping of heart and heart valve function in mice.

גישות פרוטוקולים אקו לאפיון פנוטיפי מקיף של מסתמית מחלות לב בעכברים

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed in mice is high. Phenotypic characterization of these mouse models also requires the examination of cardiac function and morphology. Echocardiography and magnetic resonance imaging (MRI) are commonly used approaches to characterize cardiac function and morphology in mice. Echocardiographic and MRI equipment specialized for use in small rodents is&#160;expensive and requires a dedicated space. This protocol describes cardiac measurements in mice using a clinical echocardiographic system with a 15 MHz human vascular probe. Measurements are performed on anesthetized adult mice. At least three image sequences are recorded and analyzed for each animal in M-mode in the parasternal short-axis view. Afterwards, cardiac histological examination is performed, and cardiomyocyte diameters are determined on hematoxylin-eosin- or wheat germ agglutinin (WGA)-stained paraffin sections. Vessel density is determined morphometrically after Pecam-1 immunostaining. The protocol has been applied successfully to pharmacological studies and different genetic animal models under baseline conditions, as well as after experimental myocardial infarction by the permanent ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD). In our experience, echocardiographic investigation is limited to anesthetized animals and is feasible in adult mice weighing at least 25 g.

Echocardiographic examination is frequently used in mice. Expensive high-resolution ultrasound devices have been developed for this purpose. This protocol describes an affordable echocardiographic procedure combined with histological morphometric analyses to determine cardiac morphology.

בבדיקה היסטולוגית ו echocardiographic של מורפולוגיה לב העכבר

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

המדידה האקוקרדיוגרפית של פרמטרים של הימני החדרית בעכבר

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

Assessment and Characterization of Hyaloid Vessels in Mice

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed regression of hyaloid vessels can be seen in diseases such as persistent hyperplastic primary vitreous (PHPV), leading to an obstructed light path and impaired visual function. Understanding the mechanisms underlying the hyaloid vessel regression may lead to new molecular insights into the vascular regression process and potential new ways to manage diseases with persistent hyaloid vessels. Here we describe the procedures for imaging hyaloid in live mice with optical coherence tomography (OCT) and fundus fluorescein angiography (FFA) and a detailed technical protocol of isolating and flat-mounting hyaloid ex vivo for quantitative analysis. Low-density lipoprotein receptor-related protein 5 (LRP5) knockout mice were used as an experimental model of persistent hyaloid vessels, to illustrate the techniques. Together, these techniques may facilitate a thorough assessment of hyaloid vessels as an experimental model of vascular regression and studies on the mechanism of persistent hyaloid vessels.

This protocol describes both in vivo and ex vivo methods to fully visualize and characterize hyaloid vessels, a model of vascular regression in mouse eyes, using optical coherence tomography and fundus fluorescein angiography for the live imaging and ex vivo isolation and subsequent flat mount of hyaloid for quantitative analysis.

הערכה ואפיון של אוניות היאלואיד בעכברים

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to that of humans and that of other large animal models such as dogs and pigs. However, the rabbit model has the additional advantage of lower maintenance costs compared to other large animal models. The longitudinal evaluation of cardiac function using echocardiography, when appropriately implemented, is a useful methodology for preclinical assessment of novel therapies for heart failure with reduced ejection fraction (e.g. cardiac regeneration). The correct use of this non-invasive tool requires the implementation of a standardized examination protocol following international guidelines. Here we describe, step by step, a detailed protocol supervised by veterinary cardiologists for performing echocardiography in the rabbit model, and demonstrate how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Here we describe, step by step, a detailed protocol for performing echocardiography in the rabbit model. We show how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

בחינת החזה הקרדיוגרפית במודל הארנב

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

פולשנית הערכה היפודינמית עבור מערכת המוח הימני ואת ההיפוקסיה המושרה לחץ דם ריאתי בעכברים

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...