Method Article
ניתוח עלות-תועלת היא גישה שקילה-קנה-מידה שמבצע המוח במהלך הקורס של קבלת החלטות. כאן, אנו מציעים פרוטוקול לאמן חולדות על operant קבלת ההחלטות שצורת בו חולדות לבחור תגמולים גבוהים יותר על חשבון מחכה 15 s כדי לקבל אותם.
החלטות מונחה חיזוק היא היכולת לבחור בין מתחרים דרכי פעולה המבוסס על הערך היחסי של היתרונות וההשלכות שלהם. תהליך זה הוא חלק בלתי נפרד ההתנהגות האנושית הרגילה, הוכח להיות מובסים נוירולוגיות והפרעות פסיכיאטריות כגון התמכרות, סכיזופרניה ודיכאון. מכרסמים זמן רב השתמשו כדי לחשוף לנוירוביולוגיה של ההכרה האנושית. לשם כך, פותחו מספר פעילויות התנהגותיות; עם זאת, רוב הלא-ממוחשב והם מהגידולים. ההתפתחות האחרונה של מיקרו פתוח איפשר לחוקרים למכן משימות מבוססות operant להערכת מגוון משימות קוגניטיביות, סטנדרטיזציה המצגת גירוי, לשפר את נתוני ההקלטה ושיפור כתוצאה מכך, הפלט מחקר. כאן, אנו מתארים ממוכנת המבוססת על עיכוב מונחה חיזוק קבלת ההחלטות משימה, תוך שימוש operant של T-maze נשלט על ידי תוכנות מותאמות אישית בכתב. באמצעות משימות החלטות אלה, אנו מראים את השינויים בפעילות פוטנציאליים שדה מקומי cingulate cortex הקדמי של חולדה בזמן שהיא מבצעת המבוסס על עיכוב עלות-תועלת קבלת ההחלטות משימה.
קבלת החלטות הוא התהליך של זיהוי ובחירת בחירות המבוססות על ערכים ועל העדפות של ההחלטות ואת ההשלכות של הפעולה הנבחרת1. למרות החלטות נחקרה בהרחבה בתחומים שונים (כלומר, כלכלה, פסיכולוגיה, מדעי המוח), מנגנונים עצביים שבבסיס כאלה יכולות קוגניטיביות אינם עדיין לגמרי מובנים. שתי קטגוריות משנה של קבלת ההחלטות הן החלטות תפיסתי וקבלת החלטות מונחה חיזוק. למרות שהם לשלב אלמנטים חופפים ניכר ומושגים, החלטות תפיסתי מסתמך על1,זמינות מידע חושי2, ואילו החלטות מונחה חיזוק עוסק הערך היחסי פעולות צבר מעל ציר זמן מסוים3. היבט אחד חשוב של החלטות מחוזק הוא ניתוח עלות-תועלת אשר מבוצע באופן אינטואיטיבי על ידי המוח על ידי הפחתה של העלויות של כל חלופה1ומחשוב היתרונות של הבחירות נתון.
את T-maze (או variant Y-מבוך) הוא אחד מבוכי שהשתמשו בניסויים קוגניטיבית באמצעות מכרסמים. חיות יכניסו את היד התחלה (הבסיס של ה-T), רשאית לבחור את הזרוע המטרה (אחת הזרועות בצד). פעילויות כגון חילוף בכפייה או אפליה משמאל משמשים בעיקר עם מכרסמים T-maze כדי לבדוק התייחסות ופועל זיכרון4. T-מבוכים נמצאים גם בשימוש נרחב קבלת החלטות ניסויים5,6,7. עיצוב הפשוטה ביותר, הפרס ממוקמת בזרוע מטרה אחת בלבד. הבחירה הצפויה, חיות בהחלט מעדיף את הפרס ולא כלום, ללא קשר לערך גמול. אפשרות נוספת היא למקם את התגמולים בשתי הזרועות. המטרה, אז תן החיות לבצע בחירה אשר נתיב לקחת תלוי במספר פרמטרים (קרי, את ההעדפה הטבעית של החיה, ההבדל בערכים של התגמולים, ומה העלויות ישולמו). עיצוב מבוססות ערך, הפעילות, זה מורכב יותר על ידי בעל מאפייני סרגל במשקל. בדרך זו, חיה מקבל תגמולים אחרת מוערכת על-ידי בחירה בין שתי אפשרויות, כמו גם בין העלויות של הפעולות [קרי, מידת מחכה (מבוסס על עיכוב) או מידת המאמץ (מבוסס על מאמץ) הדרושים כדי לקבל פרסים], כל התורמים להחלטה כי הוא עשה5,6.
ב מסורתי המבוסס על עיכוב T-maze קבלת החלטות, חיות מאומנים כדי לבחור את הזרוע גמול גבוה (HRA) ולהימנע ההפך תגמול נמוך הזרוע (איירה). הצדדים של האגודה הערבית לזכויות האדם, אתה בטוח נותרים ללא שינוי לאורך כל הניסוי. למרות הפעילות המתוארת לעיל תועדה היטב בספרות, הוא סובל מספר חסרונות פרוצדורלי. ראשית, על ידי בעל זרוע המטרה קבועה, החיות יודעות אשר יד לבחור מתחילת בכל ניסוי. בתרחיש זה, בעלי חיים ניתן לבחור את הזרוע מטרה המבוססת על זיכרון שלהם ולא על קבלת החלטות. לפיכך, ב המבוסס על עיכוב קבלת ההחלטות פרדיגמה, חיה החושף את הפרס נמוך בגלל ההתערבות המחקר, לא יהיה ברור אם זה בגלל הפסד של זיכרון או כדי ההתערבות המחקר. קבוצת ביקורת זיכרון הפרדת הפעולה שנצפו על הבעיה בזיכרון עשוי להיחשב, אבל זה מוטלת חוקרים ובעלי חיים כאחד בגלל עבודה נוספת7. חשש נוסף הוא הרגע של קבלת ההחלטות על ידי החיה: ברגע חיות להגיע לאזור ההחלטה (הצומת בין כל שלוש זרועות), הם נראים בדרך כלל לשמאל, לימין, לשקול את העלויות והתועלת לגבי כל זרוע ולאחר מכן בצע את ההחלטה שלהם. עם זאת, לאחר מספר נסיונות, הם לבצע כזה חישוב לפני שהגיע לאזור ההחלטה, פשוט להריץ ישירות אל הזרוע גמול. כתוצאה מכך, אלה שני חסרונות – דעה קדומה קדם זרוע אחת, למצוא את הרגע של קבלת החלטות – שניהם מאוד להפריע את הפרשנות של אלקטרופיזיולוגיות ונתונים דימות מוחי.
בשיטה שלו הסביר בעיתון הזה, הזרוע. מועדף (HRA) הוא מרמז על ידי הסימן השמיעה והם עשויים להשתנות משפט למשפט. חיות ליזום מחקרים על ידי הזנת אזור הבדיקה (איור 1) מפעילה את המקל השמיעה על ידי "תוקע את האף" דרך שער אינפרא-אדום שמוקם בצומת של שלושת הזרועות. אות שמע (20 dB, בין 500 ו- 1000 ms) הוא שיחק של רמקול בקצה הזרוע המטרה.
כל ההליכים הסביר כאן היו אישור, מתבצעת על פי המדריך על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה, אושרו על ידי ועדת האתיקה Florey חיה המכון או המרכז לחקר מדעי המוח.
1. דיור, טיפול, הגבלת מזון
2. הגדרת ניסיוני
3. habituation למבוך
4. אפליה הכשרה
5. עיכוב הכשרה
6. electrophysiology (אלקטרודה פבריקציה)
7. הרדמה
8. ניתוח
9. שלאחר הליך ההכשרה
הנתונים המובאים כאן הם LFP מוקלטות של קליפת orbitofrontal השמאלי (OFC) ואת cingulate cortex הקדמי (ACC) של שישה חולדות Wistar זכר באמצעות אלקטרודות דו קוטבי (של פלדת אל-חלד מצופה PFA). טבלה 1 מציגה את האורך רכישה התנהגותית עבור כל שלב ההכשרה. נקודות הציון עבור המיקומים היעד היו נחושים מעכברוש המוח אטלס9 , הם כדלקמן: עבור AAC, 1.2 מ מ והשתרשה עמוק בלבה bregma, 0.8 מ מ לרוחב קו האמצע ו- 2 מ מ הגחון לגולגולת; עבור אוקיאניה, 3.5 מ מ והשתרשה עמוק בלבה bregma, 2.3 מ מ לרוחב האמצע, וכן הגחון בגולגולת 5.4 מ"מ.
ההקלטות היו bandpass-מסוננים (0.01 - 250 הרץ) כדי לחלץ את LFPs, ואז לטעום-1,000 הרץ. ניתוח ספקטרלי בוצעה LFPs שימוש רב להתחדד10. חמש Slepian מתחדד מוצר רוחב פס זמן של שלושה שימשו כדי להיכנס לריכוז של האופטימלית ספקטרלי. זמן-תדר spectrograms הוערך באמצעות הזזה-חלון של 300 ms היה להעביר את הנתונים על צעדים 5 אלפיות השנייה. לקבלת אבחנה טובה יותר של אפנון תלויי-פעילות הסמכויות ספקטרלי וכדי להחליש את 1/f כוח שינוי גודל של הבעיה, כל spectrograms היו בסיסית מנורמל, המרה דציבל באמצעות dBtf = 10log10 (Stf/mSf), איפה Stf הקשת-זמן t ו בתדר f ו- mSf הוא רשע הספקטרום של כל הזמן נקודות הבסיס בתוך הלהקה תדר11. הכוחות ספקטרלי חושבו עבור בסיסית (300 ms לפני תוקע את האף), גירוי (100 ms), טרום קאמרית (300 ms לפני הכניסה לחדר), חלונות זמן תאיים (600 ms). ניתוח סטטיסטי התבצע בעזרת ללא פרמטרי מבוסס-תמורה t-מבחן.
כפי שמוצג בשורה העליונה של איור 2A, חלה ירידה הנמוכה (4-12 Hz) והן הגבוה (45-85 Hz) תדירות הכוחות ב- ACC שמראש עד הסוף של הגירוי. השוואה בין הזמן המושקע מחוץ לחדר עם הזמן בבית הבליעה, ניתוח ספקטרלי הראו ללא שינויים בפעילויות מתנדנדות (כפי שניתן לראות בשורה העליונה של איור 2B) מר
תנודות בתדר נמוך ב אוקיאניה הראה גם ירידות המעצמות ספקטרלי בעוד בעלי החיים אל השער אינפרא-אדום; עם זאת, זה הופיע מוקדם יותר (ms-80) והוא נמשך יותר לעומת תנודות בתדר נמוך ב- ACC (50-420ms). פעילות הלהקה אמצע/בתדירות גבוהה (23-100 Hz) אוקיאניה גדל בעקבות תחילת גירוי (איור 2 א, שורה תחתונה). ללא שינויים משמעותיים נצפו בחלונות זמן קאמרית קדם והרכבים כשהם היו בהשוואה ביחד (איור 2B, שורה תחתונה). תוצאות אלה עולים בקנה אחד עם ממצאים קודמים נניח כי קונפדרציית הכדורגל של אוקיאניה ACC הן מעורב קבלת החלטות מבוססות ערך2,12,13.
איור 1: סכימטי של בחירה המשפט מבוסס על עיכוב פעילות קבלת ההחלטות. המבוך מודד 60 ס"מ x 10 ס"מ x 40 ס מ. התיבה התחל מחובר בזרוע התחלה דרך דלת לשליפה. שתי דלתות לשליפה אחרים (דלת-A והדלת-B) ממוקמים כל זרוע המטרה, יחד הם גורמים תא לדחות גישה החיה תגמולים. הדלת-מה זה מניחים 12.5 ס מ נקודת הכניסה אל כל זרוע, הדלת-B ממוקמת רק לפני האוכל טוב, 5 ס מ מהקצה של הזרוע. העלה מתכת אוכל טוב, 3 ס מ קוטר, ממוקם בקצה של כל זרוע המטרה, 2 ס מ מעל הרצפה מבוך.
החיה מושם בתיבה התחלה, מותר לגשת ואת האף-לתקוע השער אינפרא-אדום (IRB-1) כדי לעורר את הגירוי השמיעתי זה רמזים האגודה הערבית לזכויות האדם (בחלונית זו, הזרוע הימנית). חותמת הזמן IRB - 2L ו- IRB-2R הבחירה של בעל החיים. אם החיה פונה ימינה, הדלת-A נפתח כדי לאפשר את החיה להזין את הזרוע (תא) והוא סגור מיד לאחר החיה מזין. לאחר 15 s, פתיחת הדלת-B כדי להעניק גישה חיה את הפרס. אם החיה בוחר לפנות שמאלה, (דלת-A נפתח בצד שמאל), נפתחת הדלת-B מיד אחרי זה נכנס לחדר השמאלי. IRB - 3L ו- IRB-3R חותמת הזמן של החיה כניסה לחדר.
איור 2: הדינמיקה הטמפורלי, ספקטרלי של פעילות עצבית ACC ו OFC. (א) לוח זה מראה חלקות זמן-תדר של ACC (שורה עליונה) ופעילויות אוקיאניה (שורה תחתונה) העצבית במהלך אפליה תגמול גבוה מוצלחת. הכוחות ספקטרלי הם מנורמל בסיסית על-ידי חיסור חלון הזמן שלאחר מציץ מהחלון זמן בסיסית. הערך 0 abscissa מציין את תחילתה של הגירוי השמיעתי. (B) לוח זה מציג זמן-תדר חלקות ACC (שורה עליונה) ו אוקיאניה (שורה תחתונה) פעילות עצבית כאשר החיה נכנס לתא. חלון הזמן קאמרית מנורמל ליד החלון קאמרית לפני הזמן. הערך 0 abscissa מציין הזמן של פתיחת הדלת-א התיקים צבע מתארים את היקף השינויים ספקטרלי לוגריתמית. המלבנים שחור להדגים לחריגות משמעותית רמת הסיכון (0.05 <p על ידי שניים-מבחן תמורה צדדית). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
Habituation | הכשרת אפליה | עיכוב הדרכה (5s) | עיכוב הדרכה (עשיריות) | עיכוב הדרכה (15) | סה | |
עכבר 1 | 3 ימים | 15 ימים | 8 ימים | 6 ימים | 5 ימים | 37 ימים |
עכברוש 2 | 3 ימים | 18 ימים | 9 ימים | 6 ימים | 5 ימים | 41 ימים |
עכברוש 3 | 3 ימים | 13 ימים | 7 ימים | 5 ימים | 6 ימים | 34 ימים |
עכברוש 4 | 3 ימים | 15 ימים | 9 ימים | 6 ימים | 6 ימים | 39 ימים |
עכברוש 5 | 3 ימים | 17 ימים | 8 ימים | 7 ימים | 5 ימים | 40 ימים |
חולדה 6 | 3 ימים | 16 ימים | 7 ימים | 6 ימים | 6 ימים | שלושים ושמונה ימים |
טבלה 1: השתנות התנהגותית, מסלול הזמן של למידה על חולדות 6.
מכרסמים זמן רב השתמשו במחקרים neuroscientific להתמודד עם נושאים שונים, החל יכולות קוגניטיביות כגון למידה ו זיכרון2,14 -התנהגות מחוזק7,15,16 אל הפקד המרכזי של איברים17,18 ו neuropharmacology19,20. הפרוטוקול המוצע הסביר משימה התנהגותית מורכבת מתאים ניסויים מעורב עם אלקטרופיזיולוגיה דימות מוחי. שתיארנו המבוסס על עיכוב מחוזק מודרכים הפעילות על חולדות, אבל זה יכול להיות מותאם עכברים מאז חולדות, עכברים לבצע באופן דומה על היבשה משימות.
השתמשנו מחטט באף כמו הגירוי לעורר גירוי של שמע. עם זאת, לחיצה על ידית באופנים גירוי כגון גירויים חזותיים או חוש הריח ניתן גם בשימוש, בנפרד או במקביל. הפעילות המוצעת operant יש מספר יתרונות על פני שיטות operant שאינן קיימות ויתרונות. רוב משכנעת היא הוספת חותמת אוטומטית זמן מדויק הקורס של ההחלטות של בעלי החיים אשר, אחרת, קשה מאוד. השיטה מתאים במיוחד ללימודים אלקטרופיזיולוגיה, דימות מוחי. יתרון נוסף הוא הסרת הרכיבים המרחבי של הפעילות אשר דורשים זכרון מרחבי קבוצות שליטה. כמו משימה תובענית מאוד, סביר בהחלט כי לא כל העכברושים לבצע גם על הפרדיגמה. החלף את החיה, אם זה נשאר פעיל בזרוע התחלה, עיכובים הזנת האזור ההחלטה עבור יותר מ 5 דקות או מייצרת שגיאה גבוה יותר המחירים להשוות בעלי חיים אחרים בקבוצה.
בכל רגע ההחלטה, העלויות ואת הערכים של ברירה היא כי ניתן להעריך בו זמנית. לכן, בחירת HRA או איירה במשימה זו יכול להיות התוצאות של שינויים בקידוד של. של העלויות, בקידוד של היתרונות, או חישוב עלות-תועלת. קודם של השיטה המוצעת היא חוסר אפשרות להפלות בין תהליכי הקידוד.
ישנם מספר צעדים שניתן לנקוט כדי למקסם את ההצלחה לאמן את החיות ואת הקלטת אותות אלקטרופיזיולוגיות שלהם. ראשית, טיפול החיות לפני האימון היא קריטית. ההפעלות הקלטה מתחילים עם מקשרת את החוטים הקלטה של החיה הראש-הבמה, מנסים להתאקלם אותם כך שהם מאפשרים לך להחזיק את הראש שלהם. זה חשוב מאוד, לעתים רחוקות אילפתי בעלי חיים מתחיל להילחץ במהלך הליך זה, עלול לגרום נזק הראש-הבמה או הכבל הקלטה. בדרך כלל, בעלי מהימנות הן פחות לחוץ, יותר קל לעבוד עם, נוטים לייצר נתוני משתנים פחות.
שנית, מכרסמים להשאיר מגוון של רמזים odorant במבוך (קרי, המכילות פרומון שתן וצואה, מפרישות פרומונים מאזור משערה שלהם, ובשנת הנוזלים שלהם רפידות רגל). לכן, המבוך צריך להימחק לאחר כל שימוש בודדים, בתום ניסוי כדי למזער את ההשפעה של מולקולות אלה odorant שיורית על תוצאות הבדיקה. אתנול (70%) הוא חומר מחטא נפוצות לניקוי ציוד בדיקות. עם זאת, כמו חיטוי רבים, אלכוהול עצמו יש ריח יכול להשפיע על התנהגות מכרסמים. לכן, ודא כי זה התאדו לגמרי לפני הצבת חיה במבוך.
שלישית, למרות LFPs רגישות פחות רעש קוצים, באמצעות כבל מאובטחת היטב ומחברי מוצק מקטין את רמת רעש התנועה. בקלילות התזת מים על הרצפה מבוך עשויה להקטין חשמל סטטי שנוצר על ידי החיכוך בין הפרווה של החיה על פני הרצפה.
לסיכום, הפרוטוקול המתואר במאמר זה עשויה לסייע עיצוב מבוסס על עיכוב ניסויים קבלת ההחלטות מחוזק ולהקליט אותות אלקטרופיזיולוגיות בעוד החיה היא ביצוע המשימה.
המחברים אין לחשוף.
מחקר זה נתמך על ידי קרן מדעי המוח RMH, אוסטרליה; קרן המוח האוסטרלי; RACP Thyne ריד. האחווה, אוסטרליה; על ידי פרויקט מענק של טכנולוגיות המועצה, איראן Haghparast עבאס מדעים קוגניטיביים.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
T-maze | Self made | ||
Dustless Precision Sugar Pellets | TSE Systems Intl. Group | F0023 | 45 mg, Sucrose |
Ketamine Hydrochloride Injection, USP | Sigma-Aldrich | 6740-87-0 | |
Xylazine | Sigma-Aldrich | 7361-61-7 | |
stereotaxic device | Stoelting | ||
Isofluran | Santa Cruz Biotechnology | sc-363629Rx | |
PFA-coated stainless-steel wires | A-M systems | ||
acrylic cement | Vertex, MA, USA | ||
(wooden or PVC (polyvinyl chloride)-made) | local suppliers | ||
Mini-Fit Power Connector | Molex | 15243048 | |
ethannol 70% | Local suppliers | ||
buprenorphine | diamondback drugs | ||
Arduino UNO | Arduino | https://www.arduino.cc/ | |
Infrared emitting diode | Sharp | GL480E00000F | http://www.sharp-world.com/ |
Chronux Toolbox | Chronux.org | ||
Arduino codes | https://github.com/dechuans/arduino-maze |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved