De nombreux détails du processus de modélisation des plaies du diabète de type 1 sont sujets à erreur. C’est un défi difficile pour les chercheurs expérimentés. Par conséquent, il est nécessaire d’utiliser ce protocole.
De la manière la plus simple possible, cette technique peut reproduire efficacement certaines caractéristiques des plaies diabétiques chroniques telles que l’absence de cicatrisation, la réépithélialisation retardée et la réduction de l’angiogenèse. La solution de streptozotocine doit être utilisée immédiatement après la préparation. Lors de la création de la plaie, veillez à ce que la taille et l’emplacement de la plaie soient régulés.
Commencez par dissoudre la poudre de streptozotocine dans une quantité appropriée de 0,1 moles par litre de tampon de citrate de sodium pour atteindre une concentration de 1% et agitez-la pendant 30 secondes à l’aide d’un oscillateur de médicament avant de la placer dans une belle boîte. Pour l’injection intrapéritonéale de solution de streptozotocine à 1%, saisir le rat et exposer la peau abdominale au site d’injection. Désinfectez le site d’injection deux fois à l’aide d’une boule de coton imbibée d’alcool à 75% et placez la tête du rat sous l’abdomen.
Insérez l’aiguille parallèlement à la ligne médiane abdominale à 45 degrés. Réduisez ensuite l’angle de l’aiguille à 30 degrés et insérez-en deux à trois millimètres. Tirez doucement le bouchon de l’aiguille, injectez la solution de streptozotocine et retirez l’aiguille avant d’appliquer un coton-tige.
Pour mesurer la glycémie causale à 9h00 le jour 3 et le jour 7, trouvez l’emplacement de la veine caudale. Désinfectez la queue du rat deux fois en utilisant de l’alcool à 75% avant de ponctionner la veine caudale pour provoquer un saignement et mesurer la glycémie à l’aide d’un glucomètre. Une fois cela fait, arrêtez le saignement avec un coton-tige.
Rasez la zone de 5 centimètres sur 5 du côté dorsum du rat avec un rasoir électrique un jour avant la modélisation de la plaie. Essuyez la zone rasée avec une boule de coton salée normale et chaude, et laissez-la sécher pour appliquer de la crème dépilatoire pendant cinq minutes. Nettoyez la zone avec de la gaze et lavez toute crème dépilatoire résiduelle avec une solution saline chaude normale.
Ensuite, désinfectez la peau dorsale deux fois en utilisant des boules de coton imbibées d’iode, et 75% d’alcool dans les rondes alternatives. Après séchage, coupez la peau avec un poinçon de biopsie circulaire de 20 millimètres de diamètre. Soignez la peau avec une pince, puis utilisez des ciseaux chirurgicaux pour enlever toute l’épaisseur de la peau le long des marques de coupure de poinçon.
Une fois cela fait, arrêtez le saignement avec une boule de coton saline normale. Couvrir la plaie avec de la gaze de vaseline. Le diabète a été induit chez tous les rats après trois jours d’injection de streptozotocine, avec une glycémie supérieure à 16,7 millimoles par litre.
Le taux de glucose a été stabilisé cinq semaines après l’induction. Le poids du groupe diabétique a augmenté progressivement après l’injection de streptozotocine. Le poids a diminué au cours de la semaine 3 et a lentement augmenté à partir de la semaine 4.
En revanche, le poids du rat du groupe normal a augmenté régulièrement. Leur poids moyen après les trois jours d’induction du diabète était supérieur à celui du groupe diabétique. L’analyse macroscopique effectuée les jours 7 et 14 après la blessure a révélé que la réépithélialisation était plus prononcée chez les rats du groupe normal que dans le groupe diabétique.
Les résultats quantitatifs des jours 7 et 14 ont révélé que le taux de cicatrisation des plaies était significativement plus faible dans le groupe diabétique que dans le groupe normal. Cependant, au 14e jour, le taux de cicatrisation des plaies était supérieur à 90% dans le groupe diabétique. Les plaies diabétiques ont montré une perte partielle des follicules pileux et des glandes sébacées avec moins de capillaires visibles.
Dans l’angiogenèse des plaies analysée par immunomarquage CD31, la densité optique moyenne de l’expression de CD31 a montré que l’angiogenèse au site de la plaie était significativement plus élevée dans le groupe normal que dans le groupe diabétique. Lors de la modélisation de la plaie, assurez-vous que la peau de l’épaisseur antérieure est enlevée, y compris l’épiderme, le derme et le tissu sous-cutané.
