source : Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR ; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Université de Notre Dame, IN
nombreuses expérimentations animales dépendent de données finales collection moments qui sont recueillies à partir de la récolte et les essais d’organes et de tissus. L’utilisation de méthodes appropriées pour la collecte d’organes et de tissus peut influer sur la qualité des échantillons et l’analyse des données qui sont acquise pour les essais des tissus. La méthode d’euthanasie de l’animal peut également concerner la qualité des échantillons. Ce manuscrit donnera un aperçu de techniques d’autopsie appropriée pour les rats.
la méthode d’euthanasie plus couramment utilisés pour les souris et les rats est une surdose de dioxyde de carbone (CO 2). Selon l’American Veterinary Medical Association (AVMA), l’utilisation de CO 2 est acceptable avec des conditions qui réduisent au minimum l’aversion et la détresse. 1 les animaux restent dans leur cage maison, qui est placé dans une chambre. CO 2 est progressivement introduit dans la chambre à une vitesse de déplacement de 10 % à 30 % du volume chambre/min, ce qui provoque les animaux perdu conscience avant la perception de la douleur associée à activation des nocicepteurs par l’acide carbonique. Le flux est ensuite maintenu dans la chambre une fois un arrêt respiratoire a eu lieu pour s’assurer que l’animal est mort. Une surdose d’un inhalant anesthésie est également acceptable, en particulier pour les projets qui nécessitent l’utilisation du tissu pulmonaire, comme le CO 2 endommage le tissu pulmonaire. Exsanguination de l’animal peut également être nécessaire pour certaines expériences afin de réduire le volume de sang dans les tissus.
un enregistrement précis de toutes les conclusions est essentiel pendant une autopsie. Un formulaire doit être instauré qui enregistre un historique complet de l’animal, y compris l’identification des animaux, sexe, conditions de logement, date de naissance, date de décès, numéro de numéro/protocole d’étude et le nom de l’enquêteur de principe. Un examen interne brut est effectué comme les cavités du corps sont exposées pour révéler les organes internes. A noter une anomalie évidente. 2
autopsie et tissus de récolte doit être lancé immédiatement après l’euthanasie de l’animal, comme une fuite bactérienne du tractus intestinal peut confondre certains tests. Les organes internes doivent être observées à partir de la cavité abdominale et de passer à la cavité thoracique. Avant d’enlever les échantillons de tissus, il est important d’observer les organes in situ. 2 récolte organes et de tissus pour examen histologique exigent que les tissus sont bien préparés. Des échantillons de tissus pour histologie doivent être de 0,5 à 1 cm d’épaisseur pour permettre une pénétration suffisante de la solution de fixation. Fixation préserve les tissus biologiques, prévenir la carie, autolyse et putréfaction. Aussi, il s’arrête de réactions biochimiques en cours et peut-être augmenter la résistance mécanique ou la stabilité des tissus traités. L’objectif général de la fixation du tissu est de préserver les cellules et tissus des composants pour permettre la préparation des fines, coupes colorées. Sauf indication contraire, le fixateur le plus couramment utilisé est de 10 % de formol tamponné neutre. Prêt-à-utiliser 10 % formol tamponné neutre est commercialisé auprès des principaux fournisseurs. 3
figure 1. Organes abdominaux et thoraciques d’un rat femelle.
figure 2. Organes abdominaux et thoraciques d’un rat mâle.
1. examen extérieur
un brut examen externe du corps, qui comprend une inspection visuelle de l’organe de lésions et de masses, doit être exécuté dans l’étape initiale à une autopsie. Le pelage doit être examiné pour les zones de perte de cheveux. Les dents et les ongles sont évalués pour une croissance excessive ou d’usure. Convient de noter une coloration de la fourrure dans le bouche, les narines, les yeux, anal et ouvertures génitales. Tests de bande, grattage de la peau et fourrure examens devraient être effectuées pour détecter les parasites externes (voir procédure ci-dessous).
2. Examen brut intérieur de la cavité abdominale
3. Organes abdominaux
4. Cavité thoracique
poumons5. Tête
yeuxl’étape finale dans de nombreux projets de recherche est l’autopsie des animaux expérimentaux. Une observation détaillée des structures externes et internes, suivie de la collection de tissus pour analyse complémentaire fournit une grande quantité de données de recherche. Les techniques appropriées pour l’élimination de tissu et préservation avec les solutions de fixateur appropriées sont essentiels pour la bonne interprétation des résultats.
Passer à...
Vidéos de cette collection:
Now Playing
Lab Animal Research
57.8K Vues
Lab Animal Research
173.2K Vues
Lab Animal Research
27.6K Vues
Lab Animal Research
35.5K Vues
Lab Animal Research
54.4K Vues
Lab Animal Research
25.5K Vues
Lab Animal Research
99.9K Vues
Lab Animal Research
34.6K Vues
Lab Animal Research
31.2K Vues
Lab Animal Research
51.2K Vues
Lab Animal Research
170.7K Vues
Lab Animal Research
72.7K Vues
Lab Animal Research
50.0K Vues
Lab Animal Research
22.3K Vues
Lab Animal Research
34.7K Vues