El trastorno articular y el TTM son un grupo de alrededor de 30 enfermedades humanas que afectan el músculo articular y el tejido circundante, el dolor es la razón principal por la que los pacientes con TTM van al hospital hasta ahora. No existe un tratamiento eficaz para el dolor del TTM debido a la escasa comprensión del mecanismo del dolor. Para investigar el mecanismo del dolor, hemos desarrollado un modelo de ratón de TTM doloroso seguido de un análisis del comportamiento del dolor.
La evaluación del dolor en la investigación del dolor artificial es todo un desafío debido a la variabilidad intrínseca del análisis del comportamiento. Además, el uso diferente del laboratorio, el diferente protocolo para evaluar el dolor, hacen que sea un desafío la referencia cruzada entre diferentes estudios. En este artículo de JOE describimos una versión visualizada de un ensayo de llama, filamento y fuerza de retroceso para el dolor artificial mayor.
Estos protocolos proporcionan un método detallado para la implementación directa y se combinan con enfoques para evaluar de manera integral el dolor de la ATM. Se pueden aplicar para evaluar el comportamiento del dolor en diversas condiciones de dolor oral, como el dolor autógeno, la pluma de ATM, la pluma muscular y la pluma neurópata. Para comenzar, coloque el ratón anestesiado en la plataforma quirúrgica, prepare una jeringa de insulina estéril o una aguja de calibre 31 para inyectar CFA en la articulación temporomandibular.
Cubra la aguja con una funda hecha de tubo de polietileno, dejando solo dos milímetros de la punta de la aguja sobresaliendo para evitar una inserción profunda. A continuación, palpa el arco cigomático para localizar la articulación temporomandibular o el lugar de la inyección de la ATM. A continuación, inserte la aguja en el lugar de la inyección, que se encuentra debajo del extremo posterior del arco cigomático.
Inyecte lentamente 10 microlitros de CFA en la cápsula de ATM y espere al menos cinco segundos antes de retirar gradualmente la aguja. Para empezar, establecer un modelo de ratón de dolor inflamatorio de la ATM mediante inyección intraarticular de CFA. Una vez que el ratón se haya recuperado por completo, coloque el tubo de sujeción en la jaula del ratón durante al menos una hora en la sala de comportamiento antes de realizar la prueba para aclimatar al ratón al entorno de prueba.
A continuación, encienda el software compatible para medir por fuerza y abra el programa N-B-I-T-R-S-D-V 2.6 0.3. Ahora seleccione las opciones de comunicación adecuadas. Elija el modo asistido UDP, luego seleccione la IP local correcta y busque la IP del dispositivo y el puerto haciendo clic en buscar.
Una vez que aparezcan la IP de destino y el puerto de destino, haga clic en abrir. Establezca el eje Y haciendo clic en 10 en el rango Y.Luego haga clic en establecer. Por último, haga clic en adquisición.
A continuación, seleccione solo el canal uno para el gráfico azul y apague otros canales que no estén conectados al dispositivo. Haga clic en reproducir para comenzar a grabar la fuerza de mordida. Ahora coloque el ratón en un tubo de plástico de 50 mililitros modificado para sujetar sin apretar al ratón y mover la placa de mordida hacia la boca del ratón.
Registre la mordida voluntaria durante dos minutos por sesión. Luego haga clic en pausa para detener la grabación y haga clic en guardar. Ahora clasifique los datos en la segunda columna del archivo de Excel de máximo a mínimo, seleccione los cinco valores principales de la amplitud de la fuerza de mordida para un análisis más detallado.
Registre el valor del canal uno del programa y réstelo o súmelo a los cinco valores superiores de la amplitud de la fuerza de mordida. Para obtener los valores relativos de la fuerza de mordida de este ensayo, tome el promedio de estos cinco valores para determinar la fuerza de mordida relativa promedio de un ratón. Los ratones tratados con CFA mostraron una reducción significativa en la fuerza relativa de la mordida el primer día después de la inyección en comparación con el grupo de PBS con una recuperación gradual a lo largo del tiempo, el porcentaje de cambio de la fuerza de mordida disminuyó significativamente en los ratones tratados con CFA el primer día con una tendencia hacia la recuperación en el día 12.
Para comenzar, coloque una jaula de malla de alambre en la jaula del ratón y habitúe a los ratones en la sala de comportamiento durante al menos una hora antes de los procedimientos de prueba. A continuación, encienda la máquina de prueba electrónica von Fray. Para medir el umbral de extracción de cabeza, presione máximo y ajuste la unidad a 500 gramos, que es una unidad arbitraria establecida por la máquina.
Establezca el valor en cero para comenzar a grabar ahora. Coloca a los ratones en la jaula de malla de alambre. Aplique el filamento von fray perpendicularmente a la zona de la articulación temporomandibular.
Registre el valor de la fuerza aplicada desde el filamento o la intensidad del estímulo en gramos que desencadena la reacción como primera prueba. A continuación, establezca el valor de la fuerza en la pantalla en cero y espere 10 segundos mientras el ratón permanece dentro de la jaula. Comience a aplicar el filamento nuevamente y registre el valor El umbral de extracción de la cabeza fue significativamente más bajo en los ratones tratados con CFA el primer día en comparación con la línea de base, seguido de una recuperación parcial.
Con el tiempo, el cambio porcentual en el umbral de retirada de la cabeza disminuyó notablemente en los ratones tratados con CFA el primer día y se observó una mejora hasta el día 12.
