Cuantificación de las modificaciones postraduccionales globales de histonas mediante citometría de flujo intranuclear en microglía cerebral de ratón aislada

Nuestra investigación tiene como objetivo comprender los mecanismos reguladores fundamentales que controlan la expresión génica en el cerebro, y estamos particularmente interesados en comprender cómo la interrupción de estos mecanismos contribuye a las afecciones neuropsiquiátricas y del neurodesarrollo. Nos enfocamos en comprender cómo los factores de riesgo genéticos y ambientales se combinaron para alterar la función celular y producir alteraciones del comportamiento. Este protocolo incluye métodos para el cribado de alto rendimiento de las modificaciones de histonas en microglía aislada, lo que nos permite cribar docenas de modificaciones epigenéticas diferentes antes de comprometernos con la secuenciación de alto rendimiento y los estudios de seguimiento funcional.

Nuestro protocolo proporciona medidas de modificaciones globales de histo similares a la trama occidental. Sin embargo, nuestra técnica es más rápida, requiere menos celdas de entrada, es más cuantitativa y se puede multiplexar.