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Immunology and Infection

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Polarización de células y análisis de células y análisis derivados de monocitos humanos M1 y M2 con citometría de flujo sobre la infección por mycobacterium tuberculosis

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•

10:43 min

•

September 18th, 2020

DOI :

10.3791/61807-v

September 18th, 2020

•

Akhirunnesa Mily¹^,², Sadaf Kalsum¹, Marco Giulio Loreti¹, Rokeya Sultana Rekha³, Jagadeeswara Rao Muvva¹, Magda Lourda¹^,⁴, Susanna Brighenti¹

¹Center for Infectious Medicine (CIM), Department of Medicine Huddinge, ANA Futura, Karolinska Institutet, ²Infectious Diseases Division, International Centre for Diarrhoeal Disease Research, Bangladesh, ³Clinical Microbiology, Department of Laboratory Medicine (Labmed), ANA Futura, Karolinska Institutet, ⁴Childhood Cancer Research Unit, Department of Women's and Children's Health, Karolinska Institutet

Resumen

Este protocolo proporciona un método para estudiar la infección por Mycobacterium tuberculosis en macrófagos polarizados M1 o M2 humanos basados en la diferenciación de monocitos de sangre periférica a células similares al macrófago que están infectadas con la cepa virulenta H37Rv etiquetada por GFP, y analizada con citometría de flujo utilizando un panel de 10 colores que incluye la expresión de marcadores M1/M2 seleccionados.

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Mycobacterium tuberculosis

respuesta inmune

citometr a de flujo

Capítulos en este video

0:04

Introduction

0:44

Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation

1:40

Monocyte-Derived Cell Differentiation and Polarization

3:25

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) Culture

5:00

Monocyte-Derived Cell Mtb Infection

6:03

Flow Cytometry Staining and Analysis

7:40

Results: Representative Phenotypic M1 and M2 Cell Characterization Before and After Mtb Infection

9:47

Conclusion

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