Mit CRISPR/Cas9 gen untersuchen die Onkogene Aktivität des mutierten Calreticulin in Cytokine abhängigen hämatopoetischen Zellen bearbeiten

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10:21 min

•

January 5th, 2018

DOI :

10.3791/56726-v

January 5th, 2018

•

Nouran S. Abdelfattah¹, Ann Mullally¹^,²^,³

¹Division of Hematology, Department of Medicine, Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School, ²Broad Institute, ³Dana-Farber Cancer Institute, Harvard Medical School

Zusammenfassung

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Kapitel in diesem Video

0:05

Title

0:44

Cloning sgRNA Oligos

1:08

Digestion of LentiGuide-puroVector

2:04

Ligation of Annealed Oligos into Digested Backbone

3:02

Generation of Cell Lines Stably Expressing spCas9

5:40

Reporter Assay for Cas9 Activity

6:10

Spinfection of sgRNAs into Cas9 Expressing Cells

6:31

Ba/F3 Cellular Transformation and Positive Selection using m-IL3 Withdrawal

7:23

Results: Use of CRISPR/Cas9 Tool and Ba/F3 Cellular Transformation to Study Oncogenic Potential of Mutated Calreticulin

9:02

Conclusion

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