Wir sind dankbar, Jochen Zeil, Paul Cooper und Birgit Greiner für ihre Wissensaustausch im Insekt Anatomie und zur Demonstration verschiedener Techniken, die wir hier beschrieben haben. Wir sind dankbar, die talentierte und unterstützenden Mitarbeiter im Zentrum für Advanced Microscopy bei ANU und der Mikroskopie am MQU. Diese Arbeit wurde durch ein graduate Stipendium für FRE und Zuschüsse von der Australian Research Council (DE120100019, FT140100221, DP150101172) unterstützt.

<ol>
	<li>Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+homing:+an+insect+perspective.">Visual homing: an insect perspective.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 22, 285-293 (2012).</li><li>Wehner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Desert+ant+navigation:+how+miniature+brains+solve+complex+tasks.">Desert ant navigation: how miniature brains solve complex tasks.</a> J. Comp. Physiol. A. 189, 579-588 (2003).</li><li>Fent, K., Wehner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocelli:+a+celestial+compass+in+the+desert+ant+Cataglyphis.">Ocelli: a celestial compass in the desert ant Cataglyphis.</a> Science. 228, 192-194 (1985).</li><li>Warrant, E. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptations+for+nocturnal+and+diurnal+vision+in+the+hawkmoth+lamina.">Adaptations for nocturnal and diurnal vision in the hawkmoth lamina.</a> J. Comp. Neurol. 524, 160-175 (2016).</li><li>Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+dimorphism+in+the+visual+system+of+flies:+the+compound+eyes+and+neural+superposition+in+Bibionidae+(Diptera).">Sexual dimorphism in the visual system of flies: the compound eyes and neural superposition in Bibionidae (Diptera).</a> J. Comp. Physiol. A. 150, 379-393 (1983).</li><li>Dacke, M., Nordstr&#246;m, P., Scholtz, C. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colour+receptors+in+the+eye+of+the+digger+wasp,+Sphex+cognatus+Smith:+evaluation+by+selective+adaptation.">Colour receptors in the eye of the digger wasp, Sphex cognatus Smith: evaluation by selective adaptation.</a> Cell Tiss. Res. 195, 471-483 (1978).</li><li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructure+and+migration+of+screening+pigments+in+the+retina+of+Pieris+rapae+L.+(Lepidoptera,+Pieridae).">Ultrastructure and migration of screening pigments in the retina of Pieris rapae L. (Lepidoptera, Pieridae).</a> Cell Tiss. Res. 191, 57-73 (1978).</li><li>Lau, T., Gross, E., Meyer-Rochow, V. 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Insect Sci. 18, 60-68 (2016).</li><li>Streinzer, M., Brockmann, A., Nagaraja, N., Spaethe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+and+caste-specific+variation+in+compound+eye+morphology+of+five+honeybee+species.">Sex and caste-specific variation in compound eye morphology of five honeybee species.</a> PLoS ONE. 8, e57702 (2013).</li><li>Somanathan, H., Warrant, E. J., Borges, R. M., Wall&#233;n, R., Kelber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolution+and+sensitivity+of+the+eyes+of+the+Asian+honeybees+Apis+florea,+Apis+cerana+and+Apis+dorsata.">Resolution and sensitivity of the eyes of the Asian honeybees Apis florea, Apis cerana and Apis dorsata.</a> J. Exp. Biol. 212, 2448-2453 (2009).</li></ol>

Die Autoren erklären keinen Interessenkonflikt.

Die Suite der oben beschriebenen Methoden ermöglichen eine effektive Untersuchung über das optische System von Ameisen und anderen Insekten. Diese Techniken informieren Sie unser Verständnis von Abtastauflösung, optische Empfindlichkeit und potenzielle Polarisation Empfindlichkeit des Auges untersucht. Dieses Wissen ist ein wichtiges Fundament für die physiologischen und verhaltensbezogenen Untersuchung ihre visuellen Fähigkeiten. Darüber, während die hier beschriebenen Methoden auf Ant visuelle Systeme konzentriert haben, können diese Techniken auf andere Insekten, wenn auch mit leichten Modifikationen in das Protokoll (z. B.zunehmender Dauer der Fixierung und Infiltration in dickeren Geweben) verwendet werden . Leicht modifizierte Protokolle wurden verwendet, um die visuelle Systeme für eine Vielzahl von Insekten wie Zikaden22, fliegen14, Bienen23, Wespen24, Schmetterlinge25und Motten26zu charakterisieren. Obwohl die meisten Techniken beschrieben hier einige Zeit in Gebrauch gewesen, dieses Artikels nutzt die Gelegenheit im Rahmen des Studiums die Ameise optisches System zusammenführen und vergleichen alternative Techniken und häufige Probleme zu beschreiben.
Es gibt viele bildgebende Verfahren derzeit, die überlappende Anwendungen und es kann schwierig sein zu beurteilen, welche Technik für die Aufgabe geeignet ist. Ein einschlägiges Beispiel hier ist eine Technik zur Übersicht Bildbearbeitung wählen. Die äußere Morphologie des Kopfes und des Auges und relative Positionierung des optischen Systems auf den Kopf kann erfolgen über SEM oder Mikrofotografie. Die Stärken und Schwächen dieser Techniken wurden überprüft27, allerdings gibt es einige besonderen Überlegungen beim Augen abbilden. Wenn die relative Positionierung und Größe der Augen imaging, haben beide Techniken ihre vor- und Nachteile. REM-Bilder fehlen Farbinformationen und daher wo Pigmentierung relevanten Mikrofotografie ist besser. REM-Bilder können jedoch feine Strukturen wie Inter ommatidial Haare und Facette Grenzen näher zu veranschaulichen und sogar offenbaren Flächenelemente unter Mikrofotografie Techniken (z.B., ocellar Linsen, Bildhauerei der Oberfläche nicht sichtbar Facettenauge Linsen). SEM ist eine vielseitige Technik, wenn es darum geht, explorative imaging und identifizieren von Features von Interesse, weil es eine große Auswahl an Probe Größen ausführen kann und gleichzeitig sehr hohen Auflösung in diesem Bereich. Aber es ist nicht so leicht zugänglich als Dissektion Mikroskop und erfordert ein höheres Maß an Know-how. Oft gibt es keinen einzigen Weg der Beschaffung der Informationen, die man benötigt. In einem solchen Fall ist es sinnvoll zu prüfen, was zur Verfügung steht und wo es am wichtigsten, Ressourcen zu investieren ist.
Nagellack Repliken der Hornhaut erwiesen sich als sehr nützlich bei der Beschaffung der genauesten Messung der Facette Zahlen und Facette Durchmesser sein. Dies wurde jetzt in einer Vielzahl von Insekten11,22,28,29eingesetzt. Während die Qualität der Bilder, die gewonnenen ein SEM weit überlegen ist, verhindert die Krümmung des Auges genaue Messungen des ganzen Facette Arrays. Zuordnen der Facette Größe und Verteilung der Facette sollte auch von Scans von Mikro-Computertomographie5übernommenen durchführbar.
In der LM und TEM Techniken ist es oft schwierig zu wissen, ob die Probe vorbereitet und gut, bis die letzte Stufe der Bildgebung verarbeitet wurden. Um Komplikationen zu vermeiden, ist es wichtig, gute Praktiken wie das Verwalten von sauber arbeiten, Räume und Werkzeuge, bereitet frische Lösungen regelmäßig und gründlich Filter Wasser herzustellen. Verunreinigungen, die für das bloße Auge unsichtbar sind, können EM-Proben ruinieren. Aus diesem Grund kann es zu Oberflächen und Instrumente mit einem Lösungsmittel wie Ethanol oder Aceton und ein nicht-Lint Herstellung von Tuch wischen nützlich sein. Dies ist besonders wichtig, wenn Färbung EM Abschnitte schneiden, und SEM Proben vorbereiten. Ebenso destilliertes Wasserquellen können Probleme und Verunreinigungen einzuführen, so ist es immer am besten Filter überprüfen, ändern Sie sie regelmäßig und immer frisch gefiltertes Wasser verwenden (nicht gespeichert). Die meisten Fixiermittel, Flecken und Einbetten von Materialien nicht auf unbestimmte Zeit gespeichert werden und es ist wichtig, alle Lösungen mit dem Datum der Erstellung zu kennzeichnen. Es ist wichtig, einen systematischen Ansatz zu nehmen und beiseite stellen genügend Zeit und Protokolle ohne Unterbrechungen durchzuführen.
Anpassung der Techniken, die verschiedenen Arten ist immer eine Frage von Versuch und Irrtum. Wenn Sie innerhalb von Ameisen arbeiten, liegen die Hauptunterschiede in der Größe des Tieres und die Muskelmasse innerhalb des Kopfes. Ameisen mit mehr Muskulatur in ihrem Kopf dauert in der Regel länger zu beheben. Mit sehr großen Ameisen empfiehlt es sich, mandibuläre Muskeln, Luftröhre und Unterkiefers Drüsen entfernen und gleichzeitig minimalem Eingriff in das Nervengewebe. Bei kleinen Ameisen und solchen mit wenigen mandibulares Muskeln ist es möglich, eine angemessene Fixierung zu erreichen, nur durch Entfernen der Mandibeln und Freilegung der clypeal Region. In diesen Fällen können kleine Löcher mit Hilfe der Minutien Pins auf dem Kopf erfolgen, Fixierung zu verbessern.
Es ist wichtig zu beachten, dass die Umweltbedingungen auch Präparate beeinflussen können. Heißen und feuchte Umgebungen (vor allem Feldstationen in den Tropen) können sich als eine Herausforderung bei der Infiltration. Warmen Bedingungen können Harze teilweise polymerisieren vorzeitig in den ungenutzten Harz immer zunehmend zähflüssiger resultierenden führen. In diesem Fall ist die beste Option um das Harz in kleine, einzelne Nutzung, Behälter in den Kühlschrank oder Gefrierschrank zu speichern. Fixiermittel Kühlung kann helfen Zähler schneller Gewebe Verfall bei warmen Temperaturen. Gekühlte Lösungen werden jedoch langsamer zerstreuen, d.h. Behandlungszeiten ausgeweitet werden sollte, um richtige eindringen zu gewährleisten.
Mit diesen Vorsichtsmaßnahmen beachten kann Untersuchung über das optische System von Ameisen und anderen Insekten sehr lohnend erweisen. Studium des visuellen Systems ermöglicht es uns, die Größe des Gesichtsfeldes, interommatidial Winkel, optische Empfindlichkeit und Probenahme Resolutionen zu schätzen. Verständnis der Anatomie des Auges, informiert unser Verständnis und die Interpretation des tierischen Verhaltens. Z. B. Anatomie lässt sich Vorhersagen über die visuelle Fähigkeiten der Tiere wie z. B. ob sie tagaktiv oder nachtaktiv sind, kann nicht vorher dokumentiert wurden. Da das aktuelle Wissen über das visuelle System Handvoll Ameisen, hoffen wir, dass unsere Methoden begeistern Biologen und Myrmecologists, das Facettenauge und Ozellen bei Ameisen zu untersuchen, um unser Verständnis zu fördern.

Vision ist eine wichtige sensorische Modalität für die meisten Tiere. Vision ist besonders wichtig im Zusammenhang mit der Navigation für festlegend Ziele, Schaffung und Einhaltung von Routen und Erlangung Kompass Informationen1,2. Insekten erkennen visuellen Informationen mit ein paar Facettenaugen und in einigen Fällen ein bis drei dorsal platziert einfachere Augen genannt Ozellen3,4,5.
Die Augen von Ameisen sind von besonderem Interesse, weil, während Ameisen wunderbar vielfältig sind, sie einige Schlüsselmerkmale über Artgrenzen sparen. Trotz der dramatischen Veränderung in Anatomie, Größe und Ökologie die überwiegende Mehrheit der Arten sind eusozialen und Leben in Kolonien; Infolgedessen, Herausforderungen verschiedene Arten ähnliche visuelle in Bezug auf einen zentralen Platz und Ressourcen hin und her navigieren. Über Ameisen kann die gleichen grundlegenden Auge Bauplan bei Tieren von 0,5-26 mm Körperlänge, aus ausschließlich tagaktiv, streng nachtaktive Arten und langsam zu Fuß unterirdisch zu springen visuelle Raubtiere6,7beobachtet werden, 8,9,10. All diese erstaunlichen Unterschiede in der Ökologie und Verhalten ergeben sich unzählige Variationen der gleichen grundlegenden Augenstrukturen entsprechend unterschiedlichen Umgebungen, Lebensstile und Körpergrößen11,12. Infolgedessen bietet das Studium der visuellen Ökologie der Ameisen eine wahre Fundgrube an Möglichkeiten, die entschlossen Prüfer.
Das visuelle System der Insekten zu verstehen ist wichtig einen Einblick in ihre Verhaltensstörungen Fähigkeiten zu erlangen. Dies ergibt sich aus integrative Studien, die Anatomie mit Ökologie und Verhalten zu einem großen Erfolg in wenige Insektengruppen (z.B.Referenzen13,14,15,16, schön zu kombinieren 17). Obwohl Bereich Ameise Navigation und Ameise Verhalten im Allgemeinen recht erfolgreich war, wurde sehr wenig Wert auf Ant Vision außerhalb von ein paar ausgewählten Arten gelegt. Hier erarbeiten wir auf die Techniken bei der Untersuchung Auge Design von Ameisen beteiligt. Während wir auf Ameisen Fokus, können diese Techniken werden, mit geringfügigen Änderungen zu anderen Insekten auch angewendet.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ant</td>
			<td>Myrmecia midas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica M205 FA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sputter coater</td>
			<td>Pro Sci Tech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>ProSciTech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>Leica MZ6</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insect Pin</td>
			<td>ProSciTech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Colourless nail polish</td>
			<td>Non branded: from any cosmetic store</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slide</td>
			<td>ProSciTech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blade</td>
			<td>ProSciTech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foreceps</td>
			<td>ProSciTech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip</td>
			<td>ProSciTech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compound microscope</td>
			<td>Leica DM5000 B</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformalydehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride (KCl)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>di-Sodium Hydrogen phosphate (Na2HPO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium di-Hydrogen Phosphate (KH2PO4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride (NaCl)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmium tetroxide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Araldite Epoxy Resin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipette</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toluidie Blue</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hotplate</td>
			<td>Riechert HK120</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

techniques for investigating the anatomy of the ant visual system

Dieser Artikel beschreibt eine Reihe von Techniken in der Lichtmikroskopie (LM) und Elektronenmikroskopie (EM), die verwendet werden können, um die internen und externen Auge Anatomie von Insekten zu studieren. Dazu gehören traditionelle histologische Techniken für die Arbeit an Ant Augen optimiert und angepasst, um im Konzert mit anderen Techniken wie Transmissions-Elektronenmikroskopie (TEM) und Rasterelektronenmikroskopie (SEM) arbeiten. Diese Techniken können zwar enorm nützlich, schwierig für den unerfahrenen Mikroskopierer sein groß geschrieben in diesem Artikel auf Problembehandlung und Optimierung für verschiedene Exemplare. Wir informieren über bildgebende Verfahren für die gesamte Probe (Foto-Mikroskopie und SEM) und ihre vor- und Nachteile zu diskutieren. Wir markieren die Technik zur Ermittlung Objektiv Durchmesser für das gesamte Auge und diskutieren neue Techniken zur Verbesserung. Schließlich diskutieren wir Techniken beteiligt Probenvorbereitung für LM und TEM, schneiden, färben und imaging-diese Proben. Wir diskutieren die Hürden, die man erwarten würde, wenn vorbereiten Proben und wie Sie am besten zu ihnen navigieren.

Die hier beschriebenen Methoden ermöglichen detaillierte Untersuchung des einfachen und Facettenaugen der Ameisen. Bildgebung der dorsalen Ansicht des Kopfes mit Z-Stapel Mikrofotografie Techniken erlaubt es, eine Übersicht über das Layout des visuellen Systems (Abbildung 1). Dies ist eine gute Vorbereitung für Sezierungen und strukturierendes Winkel zu bestimmen. Diese Technik eignet sich auch zum Maßnehmen wie Kopfbreite, Auge-Länge und ocellar Objektiv Durchmesser. SEM-Bildgebung gibt auch detaillierte Übersichtsbilder aber zusätzlich ermöglicht die Erfassung von hoher Vergrößerung und Bilder mit hoher Auflösung. Bestimmte Regionen von Interesse im Auge können im Detail untersucht und Variationen in Scheibenform können identifiziert (Abbildung 2). REM-Bilder eignen sich besonders für die Lösung von Ameisen mit kleinen Augen und Ozellen. Die Hornhaut-Repliken geben Auskunft über die Form, Größe und Anzahl der Linsen in jedes Auge (Abbildung 3). Semi-dünne Abschnitte abgebildet mit LM-Techniken erlauben Untersuchung der Brutto interne Anatomie des Auges (Abbildung 4 und Abbildung 5); Dazu gehören die Dicke der Linse, Durchmesser des Kegels kristalline, Vorhandensein von einer kristallinen Kegel-Darm-Trakt, Form, Breite und Länge des Rhabdom, zuordnen der dorsalen Rand Gebiet und Lage des primären und sekundären Pigmentzellen. Diese Technik kann schön ergänzt werden, von ultra-dünnen Abschnitten abgebildet mit TEM, wodurch für die Bestimmung der Ultrastruktur vor allem die microvillar Ausrichtung (Abbildung 4) und die Quantifizierung der kleineren Strukturen (z. B. Breite des die verengte kristalline Kegel-Darm-Trakt, Abbildung 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56339/56339fig1.jpg"> Abbildung 1: Z-Stapel Vergößerung der drei Kasten der australischen Zucker Ameise, Camponotus Consobrinus. Dies bietet einen Überblick über das Layout des visuellen Systems in alle drei Kasten. Adaptiert von Referenz-20. Maßstabsleiste = 1 mm. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56339/56339fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56339/56339fig2.jpg"> Abbildung 2: Scanning Electron Mikrographen des Sehsystems Ant demonstriert die imaging-Funktionen dieser Technik. Oberste Zeile zeigt verschiedene Auge Positionen und Auge Größen in: (A) Myrmecia Nigriceps; (B) Opisthopsis Pictus; und (C) Amblyopone Australis (man beachte die sehr kleinen Augen, weißer Pfeil). Bilder bei hoher Vergrößerung zeigt erworben: (D) die drei einfache Augen bei Arbeitern Myrmecia Nigriceps; verschiedene Größe Facettenauge in (E) Rhytidoponera Metallica (beachten Sie die verschiedenen Ommatidien in Form verschiedenen Regionen des Facettenauges in gelb), (F) Amblyopone Australis, (G) Myrmecia Pyriformis (H) Orectognathus Clarkiund (ich) Pheidole Arten. Skalieren von Balken = 1 mm (A-C), 100 µm (D-H), 10 µm (I). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56339/56339fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56339/56339fig3.jpg"> Abbildung 3: Hornhaut Repliken von Ameise Auge und Ozellen. (A) Replik des Facettenauges einer Arbeitskraft Myrmecia Nigriceps. Das konvexe Replikat wurde dem Erdboden gleichgemacht durch Einschnitte zu machen.  Der Inset zeigt Posterior (p), anterior (a) und dorsalen (d), Ventral (V) Achsen. (B) Nachbau der Ozellen Arbeitnehmers Myrmecia Tarsata. Skalieren von Balken = 0,5 mm (A), 10 µm (B). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56339/56339fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56339/56339fig4.jpg"> Abbildung 4: LM und EM Bilder Rhabdom Querschnitte. (A) Querschnitt des distalen Rhabdoms in Myrmecia Nigriceps in Toluidin blau gebeizt, Rhabdoms zu unterscheiden, die Runde oder rechteckige Form verwendet werden. Transmission Electron Mikrographen zeigen: (B) mehrere Ausrichtungen der Mikrovilli in der kreisförmigen Rhabdom und (C) Mikrovilli in zwei entgegengesetzte Richtungen in der rechteckig geformte Rhabdom orientiert. (D) Using Lichtmikroskopie, der langen Achse des rechteckigen Rhabdoms sind abgebildet, um zu zeigen, eine Organisation, die fächerförmig im dorsalen Bereich des Auges in eine Königin der Camponotus Consobrinus; Inset zeigt Posterior (p), anterior (a) und Lateral (l), Medial (m) Achsen. Panel D Referenz20angepasst. Skalieren von Balken = 10 µm (A), 1 µm (B-C), 100 µm (D). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56339/56339fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56339/56339fig5v2.jpg"> Abbildung 5: LM und EM Bilder von einem Ommatidium ins Auge des Myrmecia TarsataLicht angepasst. (A) Längsschnitt ein Ommatidium zeigt die Hornhaut (C), kristalline Kegel (CC), Kegel-Darm-Trakt (ct), Rhabdom (Rh) und primäre Pigmentzellen (PPC). (B) gestrichelt rechteckige box zentrale A von einem anderen Abschnitt betrachtet unter einem TEM, die schmale Breite des Kegels Trakt zu quantifizieren. Adaptiert von Referenz-21. Skalieren von Balken = 10 µm. <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56339/56339fig5large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56339/56339fig6.jpg"> Abbildung 6: häufige Probleme mit semi-dünn und ultra-dünne Abschnitte (Fixierung und Infiltration, schneiden und färben). (A) schlechte Fixierung des Gewebes aufgrund unzureichender Durchdringung (Pfeil) in einem semi-dünne Abschnitt Pheidole Arten; (B) Rippen beim Schneiden in Iridomyrmex Calvus (semi-dünn); (C) perfekte Färbung (links) und über Färbung (rechts) mit Toluidin blau in Myrmecia Croslandi; (D) Pigment (Kreis) und Gewebe, die Rippen beim Schneiden (Pfeile) durch schlechte Abstimmung von Harz und Gewebe Dichte (Harz zu weich). Faltung des Abschnitts (Sternchen), kann passieren, wenn Abschnitte vom Messer Boot zu sammeln; (E) Armen durch ungenügende Färbung (im Vergleich zu inset) dagegen Blei Citrat Kristalle (weisse Pfeile) vor der Exposition gegenüber CO2und vertikale Messer markieren (schwarze Pfeile); (F) Löcher im Gewebe (weisse Pfeile) verursacht durch schlechte Fixierung in einer Melophorus Hirsutus Facettenauge; (G) Harz zu weich, führt um zu chitter beim Schneiden als vertikale Wellen im Abschnitt; (H) Abschnitt zu dick (~ 100 nm) führte zu dunkles Bild mit geringem Kontrast, verunreinigtes destilliertes Wasser führen zu Bakterien und Partikel über den Abschnitt (weisse Pfeile) Pheidole Arten verteilt. Maßstabsleiste = 25 µm (A-B), 10 µm (C-H). <a href="//cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56339/56339fig6large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>

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Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

Dieser Artikel beschreibt eine Reihe von Techniken in der Licht- und Elektronenmikroskopie, die internen und externen Auge Anatomie von Insekten zu studieren. Dazu gehören mehrere traditionelle Techniken optimiert für Ameise Augen, detaillierte Fehlersuche und Vorschläge für die Optimierung für verschiedene Proben und Regionen von Interesse.

Techniken für die Untersuchung von der Anatomie des Sehsystems Ant

This article outlines a suite of techniques in light microscopy (LM) and electron microscopy (EM) which can be used to study the internal and external eye ...

techniques-for-investigating-the-anatomy-of-the-ant-visual-system

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Environment

13.1K Aufrufe.  Australian National University. Dieser Artikel beschreibt eine Reihe von Techniken in der Licht- und Elektronenmikroskopie, die internen und externen Auge Anatomie von Insekten zu studieren. Dazu gehören mehrere traditionelle Techniken optimiert für Ameise Augen, detaillierte Fehlersuche und Vorschläge für die Optimierung für verschiedene Proben und Regionen von Interesse.

Serie: Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

Setaria viridis is an emerging model system for C4 grasses. It is closely related to the bioenergy feed stock switchgrass and the grain crop foxtail millet. Recently, the 510 Mb genome of foxtail millet, S. italica, has been sequenced 1,2 and a 25x coverage genome sequence of the weedy relative S. viridis is in progress. S. viridis has a number of characteristics that make it a potentially excellent model genetic system including a rapid generation time, small stature, simple growth requirements, prolific seed production 3 and developed systems for both transient and stable transformation 4. However, the genetics of S. viridis is largely unexplored, in part, due to the lack of detailed methods for performing crosses. To date, no standard protocol has been adopted that will permit rapid production of seeds from controlled crosses.
The protocol presented here is optimized for performing genetic crosses in S. viridis, accession A10.1. We have employed a simple heat treatment with warm water for emasculation after pruning the panicle to retain 20-30 florets and labeling of flowers to eliminate seeds resulting from newly developed flowers after emasculation. After testing a series of heat treatments at permissive temperatures and varying the duration of dipping, we have established an optimum temperature and time range of 48 &deg;C for 3-6 min. By using this method, a minimum of 15 crosses can be performed by a single worker per day and an average of 3-5 outcross progeny per panicle can be recovered. Therefore, an average of 45-75 outcross progeny can be produced by one person in a single day. Broad implementation of this technique will facilitate the development of recombinant inbred line populations of S. viridis X S. viridis or S. viridis X S. italica, mapping mutations through bulk segregant analysis and creating higher order mutants for genetic analysis.

Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

We have developed a methodology for performing crosses in Setaria viridis (S. viridis). The method involves pruning the panicle prior to a hot water treatment to kill viable pollen. Crosses are performed following a well-controlled growth regime and typically result in the recovery of 1 to 7 cross-pollinated seed/s per panicle.

Verfahren für Kreuze in<em&gt; Setaria viridis</em&gt;, Ein New Model System für die Gräser

Setaria viridis is an emerging model system for C4 grasses. It is closely related to the bioenergy feed stock switchgrass and the grain crop foxtail ...

Forschung

Umwelt

Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy

Structural determination of proteins is rather challenging for proteins with molecular masses between 40 - 200 kDa. Considering that more than half of natural proteins have a molecular mass between 40 - 200 kDa1,2, a robust and high-throughput method with a nanometer resolution capability is needed. Negative staining (NS) electron microscopy (EM) is an easy, rapid, and qualitative approach which has frequently been used in research laboratories to examine protein structure and protein-protein interactions. Unfortunately, conventional NS protocols often generate structural artifacts on proteins, especially with lipoproteins that usually form presenting rouleaux artifacts. By using images of lipoproteins from cryo-electron microscopy (cryo-EM) as a standard, the key parameters in NS specimen preparation conditions were recently screened and reported as the optimized NS protocol (OpNS), a modified conventional NS protocol 3 . Artifacts like rouleaux can be greatly limited by OpNS, additionally providing high contrast along with reasonably high&#8208;resolution (near 1 nm) images of small and asymmetric proteins. These high-resolution and high contrast images are even favorable for an individual protein (a single object, no average) 3D reconstruction, such as a 160 kDa antibody, through the method of electron tomography4,5. Moreover, OpNS can be a high&#8208;throughput tool to examine hundreds of samples of small proteins. For example, the previously published mechanism of 53 kDa cholesteryl ester transfer protein (CETP) involved the screening and imaging of hundreds of samples 6. Considering cryo-EM rarely successfully images proteins less than 200 kDa has yet to publish any study involving screening over one hundred sample conditions, it is fair to call OpNS a high-throughput method for studying small proteins. Hopefully the OpNS protocol presented here can be a useful tool to push the boundaries of EM and accelerate EM studies into small protein structure, dynamics and mechanisms.

More than half of proteins are small proteins (molecular mass &#60;200 kDa) that are challenging for both electron microscope imaging and three-dimensional reconstructions. Optimized negative staining is a robust and high-throughput protocol to obtain high contrast and relatively high resolution (~1 nm) images of small asymmetric proteins or complexes under different physiological conditions.

Optimierte negative Färbung: ein Hochdurchsatz-Protokoll für die Prüfung kleiner und asymmetrische Proteinstruktur durch Elektronenmikroskopie

Structural determination of proteins is rather challenging for proteins with molecular masses between 40 - 200 kDa. Considering that more than half of ...

Empirical, Metagenomic, and Computational Techniques Illuminate the Mechanisms by which Fungicides Compromise Bee Health

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered &#34;bee-safe,&#34; there is mounting evidence that fungicide residues in pollen are associated with bee declines (for both honey and bumble bee species). While the mechanisms remain relatively unknown, researchers have speculated that bee-microbe symbioses are involved. Microbes play a pivotal role in the preservation and/or processing of pollen, which serves as nutrition for larval bees. By altering the microbial community, it is likely that fungicides disrupt these microbe-mediated services, and thereby compromise bee health. This manuscript describes the protocols used to investigate the indirect mechanism(s) by which fungicides may be causing colony decline. Cage experiments exposing bees to fungicide-treated flowers have already provided the first evidence that fungicides cause profound colony losses in a native bumble bee (Bombus impatiens). Using field-relevant doses of fungicides, a series of experiments have been developed to provide a finer description of microbial community dynamics of fungicide-exposed pollen. Shifts in the structural composition of fungal and bacterial assemblages within the pollen microbiome are investigated by next-generation sequencing and metagenomic analysis. Experiments developed herein have been designed to provide a mechanistic understanding of how fungicides affect the microbiome of pollen-provisions. Ultimately, these findings should shed light on the indirect pathway through which fungicides may be causing colony declines.

Microbial consortia within bumble bee hives enrich and preserve pollen for bee larvae. Using next generation sequencing, along with laboratory and field-based experiments, this manuscript describes protocols used to test the hypothesis that fungicide residues alter the pollen microbiome, and colony demographics, ultimately leading to colony loss.

Empirische, metagenomischen und Computertechniken beleuchten die Mechanismen, durch welche Fungizide Kompromiss Bienengesundheit

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered ...

Automated, High-resolution Mobile Collection System for the Nitrogen Isotopic Analysis of NOx

Nitrogen oxides (NOx = NO + NO2) are a family of atmospheric trace gases that have great impact on the environment. NOx concentrations directly influence the oxidizing capacity of the atmosphere through interactions with ozone and hydroxyl radicals. The main sink of NOx is the formation and deposition of nitric acid, a component of acid rain and a bioavailable nutrient. NOx is emitted from a mixture of natural and anthropogenic sources, which vary in space and time. The collocation of multiple sources and the short lifetime of NOx make it challenging to quantitatively constrain the influence of different emission sources and their impacts on the environment. Nitrogen isotopes of NOx have been suggested to vary amongst different sources, representing a potentially powerful tool to understand the sources and transport of NOx. However, previous methods of collecting atmospheric NOx integrate over long (week to month) time spans and are not validated for the efficient collection of NOx in relevant, diverse field conditions. We report on a new, highly efficient field-based system that collects atmospheric NOx for isotope analysis at a time resolution between 30 min and 2 hr. This method collects gaseous NOx in solution as nitrate with 100% efficiency under a variety of conditions. Protocols are presented for collecting air in urban settings under both stationary and mobile conditions. We detail the advantages and limitations of the method and demonstrate its application in the field. Data from several deployments are shown to 1) evaluate field-based collection efficiency by comparisons with in situ NOx concentration measurements, 2) test the stability of stored solutions before processing, 3) quantify in situ reproducibility in a variety of urban settings, and 4) demonstrate the range of N isotopes of NOx detected in ambient urban air and on heavily traveled roadways.

Automated, High-resolution Mobile Collection System for the Nitrogen Isotopic Analysis of NOx

Previous work suggests that the nitrogen isotopic composition of atmospheric nitrogen oxides might distinguish the influence of different sources in the environment. We report on an automated, mobile, field-based method for the high collection efficiency of atmospheric NOx for N isotopic analysis at an hourly time resolution.

Automatisierte, hochauflösende Mobilsammelsystem für die Stickstoffisotopenanalyse von NO<sub&gt; x</sub

Nitrogen oxides (NOx = NO + NO2) are a family of atmospheric trace gases that have great impact on the environment. NOx concentrations directly influence ...

Extraction of Organochlorine Pesticides from Plastic Pellets and Plastic Type Analysis

Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment during manufacturing and transport. Because of their environmental persistence, they are widely distributed in the oceans and on beaches all over the world. They can act as a vector of potentially toxic organic compounds (e.g., polychlorinated biphenyls) and might consequently negatively affect marine organisms. Their possible impacts along the food chain are not yet well understood. In order to assess the hazards associated with the occurrence of plastic pellets in the marine environment, it is necessary to develop methodologies that allow for rapid determination of associated organic contaminant levels. The present protocol describes the different steps required for sampling resin pellets, analyzing adsorbed organochlorine pesticides (OCPs) and identifying the plastic type. The focus is on the extraction of OCPs from plastic pellets by means of a pressurized fluid extractor (PFE) and on the polymer chemical analysis applying Fourier Transform-InfraRed (FT-IR) spectroscopy. The developed methodology focuses on 11 OCPs and related compounds, including dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) and its two main metabolites, lindane and two production isomers, as well as the two biologically active isomers of technical endosulfan. This protocol constitutes a simple and rapid alternative to existing methodology for evaluating the concentration of organic contaminants adsorbed on plastic pieces.

Microplastics act as vector of potentially toxic organic contaminants with unpredictable effects. This protocol describes an alternative methodology for assessing the levels of organochlorine pesticides adsorbed on plastic pellets and identifying the polymer chemical structure. The focus is on pressurized fluid extraction and attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectroscopy.

Extraktion von Organochlor-Pestiziden aus Kunststoff-Pellets und Kunststoff-Typ-Analyse

Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment ...

Methodology for Developing Life Tables for Sessile Insects in the Field Using the Whitefly, Bemisia tabaci, in Cotton As a Model System

Life tables provide a means of measuring the schedules of birth and death from populations over time. They also can be used to quantify the sources and rates of mortality in populations, which has a variety of applications in ecology, including agricultural ecosystems. Horizontal, or cohort-based, life tables provide for the most direct and accurate method of quantifying vital population rates because they follow a group of individuals in a population from birth to death. Here, protocols are presented for conducting and analyzing cohort-based life tables in the field that takes advantage of the sessile nature of the immature life stages of a global insect pest, Bemisia tabaci. Individual insects are located on the underside of cotton leaves and are marked by drawing a small circle around the insect with a non-toxic pen. This insect can then be observed repeatedly over time with the aid of hand lenses to measure development from one stage to the next and to identify stage-specific causes of death associated with natural and introduced mortality forces. Analyses explain how to correctly measure multiple mortality forces that act contemporaneously within each stage and how to use such data to provide meaningful population dynamic metrics. The method does not directly account for adult survival and reproduction, which limits inference to dynamics of immature stages. An example is presented that focused on measuring the impact of bottom-up (plant quality) and top-down (natural enemies) effects on the mortality dynamics of B. tabaci in the cotton system.

Methodology for Developing Life Tables for Sessile Insects in the Field Using the Whitefly, Bemisia tabaci, in Cotton As a Model System

Life tables allow quantification of the sources and rates of mortality in insect populations and contribute to understanding, predicting and manipulating population dynamics in agroecosystems. Methods for conducting and analyzing cohort-based life tables in the field for an insect with sessile immature life stages are presented.

Methodik zur Entwicklung von Sterbetafeln für festsitzende Insekten im Feld mit der Mottenschildläuse Tabak Tabaci, in Baumwolle als ein Modellsystem

Life tables provide a means of measuring the schedules of birth and death from populations over time. They also can be used to quantify the sources and ...

Procedures of Laboratory Fumigation for Pest Control with Nitric Oxide Gas

Nitric oxide (NO) is a newly discovered fumigant for postharvest pest control. This paper provides detailed protocols for conducting NO fumigation on fresh products and procedures for residue analysis and product quality evaluation. An airtight fumigation chamber containing fresh fruit and vegetables is first flushed with nitrogen (N2) to establish an ultralow oxygen (ULO) environment followed by injection of NO. The fumigation chamber is then kept at a low temperature of 2 - 5 &#176;C for a specified time period necessary to kill a target pest to complete a fumigation treatment. At the end of a fumigation treatment, the fumigation chamber is flushed with N2 to dilute NO prior to opening the chamber to ambient air to prevent the reaction between NO and O2, which produces NO2 and may damage delicate fresh products. At different times after NO fumigation, NO2 in headspace and nitrate and nitrite in liquid samples were measured as residues. Product quality was evaluated after 2 weeks of post-treatment cold storage to determine effects of NO fumigation on product quality. Keeping&#160;O2 from reacting with NO is critical to NO fumigation and is an important part of the protocols. Measuring NO levels is challenging and a practical solution is provided. Possible protocol modifications are also suggested for measuring NO levels in the fumigation chambers as well as residues. NO fumigation has the potential to be a practical alternative to methyl bromide fumigation for postharvest pest control on fresh and stored products. This publication is intended to assist other researchers in conducting NO fumigation research for postharvest pest control and accelerating the development of NO fumigation for practical applications.

This paper describes nitric oxide (NO) fumigation protocols for postharvest pest control. Fumigation chambers are flushed with nitrogen (N2) to establish ultralow oxygen conditions before NO is injected. At the end, chambers are flushed with N2 to dilute NO before exposing products to ambient air to prevent exposure to NO2.

Verfahren der Labor-Begasung für die Schädlingsbekämpfung mit Gas Stickstoffmonoxid

Nitric oxide (NO) is a newly discovered fumigant for postharvest pest control. This paper provides detailed protocols for conducting NO fumigation on ...

Development of New Methods for Quantifying Fish Density Using Underwater Stereo-video Tools

The use of video camera systems in ecological studies of fish continues to gain traction as a viable, non-extractive method of measuring fish lengths and estimating fish abundance. We developed and implemented a rotating stereo-video camera tool that covers a full 360 degrees of sampling, which maximizes sampling effort compared to stationary camera tools. A variety of studies have detailed the ability of static, stereo-camera systems to obtain highly accurate and precise measurements of fish; the focus here was on the development of methodological approaches to quantify fish density using rotating camera systems. The first approach was to develop a modification of the metric MaxN, which typically is a conservative count of the minimum number of fish observed on a given camera survey. We redefine MaxN to be the maximum number of fish observed in any given rotation of the camera system. When precautions are taken to avoid double counting, this method for MaxN may more accurately reflect true abundance than that obtained from a fixed camera. Secondly, because stereo-video allows fish to be mapped in three-dimensional space, precise estimates of the distance-from-camera can be obtained for each fish. By using the 95% percentile of the observed distance from camera to establish species-specific areas surveyed, we account for differences in detectability among species while avoiding diluting density estimates by using the maximum distance a species was observed. Accounting for this range of detectability is critical to accurately estimate fish abundances. This methodology will facilitate the integration of rotating stereo-video tools in both applied science and management contexts.

We describe a new method for counting fishes, and estimating relative abundance (MaxN) and fish density using rotating stereo-video camera systems. We also demonstrate how to use distance from camera (Z distance) to estimate species-specific detectability.

Entwicklung neuer Methoden zur Quantifizierung der Fisch-Dichte mit Unterwasser-Stereo-Video-Tools

The use of video camera systems in ecological studies of fish continues to gain traction as a viable, non-extractive method of measuring fish lengths and ...

Harvesting Venom Toxins from Assassin Bugs and Other Heteropteran Insects

Heteropteran insects such as assassin bugs (Reduviidae) and giant water bugs (Belostomatidae) descended from a common predaceous and venomous ancestor, and the majority of extant heteropterans retain this trophic strategy. Some heteropterans have transitioned to feeding on vertebrate blood (such as the kissing bugs, Triatominae; and bed bugs, Cimicidae) while others have reverted to feeding on plants (most Pentatomomorpha). However, with the exception of saliva used by kissing bugs to facilitate blood-feeding, little is known about heteropteran venoms compared to the venoms of spiders, scorpions and snakes.
One obstacle to the characterization of heteropteran venom toxins is the structure and function of the venom/labial glands, which are both morphologically complex and perform multiple biological roles (defense, prey capture, and extra-oral digestion). In this article, we describe three methods we have successfully used to collect heteropteran venoms. First, we present electrostimulation as a convenient way to collect venom that is often lethal when injected into prey animals, and which obviates contamination by glandular tissue. Second, we show that gentle harassment of animals is sufficient to produce venom extrusion from the proboscis and/or venom spitting in some groups of heteropterans. Third, we describe methods to harvest venom toxins by dissection of anaesthetized animals to obtain the venom glands. This method is complementary to other methods, as it may allow harvesting of toxins from taxa in which electrostimulation and harassment are ineffective. These protocols will enable researchers to harvest toxins from heteropteran insects for structure-function characterization and possible applications in medicine and agriculture.

Although many insects in the suborder Heteroptera (Insecta: Hemiptera) are venomous, their venom composition and the functions of their venom toxins are mostly unknown. This protocol describes methods to harvest heteropteran venoms for further characterization, using electrostimulation, harassment, and gland dissection.

Ernte Venom Giftstoffe aus Assassin Bugs und andere Heteropteran Insekten

Heteropteran insects such as assassin bugs (Reduviidae) and giant water bugs (Belostomatidae) descended from a common predaceous and venomous ancestor, ...

In Situ Hybridization Techniques for Paraffin-Embedded Adult Coral Samples

Corals are important ocean invertebrates that are critical for overall ocean health as well as human health. However, due to human impacts such as rising ocean temperatures and ocean acidification, corals are increasingly under threat. To tackle these challenges, advances in cell and molecular biology have proven to be crucial for diagnosing the health of corals. Modifying some of the techniques commonly used in human medicine could greatly improve researchers&#39; ability to treat and save corals. To address this, a protocol for in situ hybridization used primarily in human medicine and evolutionary developmental biology has been adapted for use in adult corals under stress.
The purpose of this method is to visualize the spatial expression of an RNA probe in adult coral tissue that has been embedded in paraffin and sectioned onto glass slides. This method focuses on removal of the paraffin and rehydration of the sample, pretreatment of the sample to ensure permeability of the sample, pre-hybridization incubation, hybridization of the RNA probe, and visualization of the RNA probe. This is a powerful method when using non-model organisms to discover where specific genes are expressed, and the protocol can be easily adapted for other non-model organisms. However, the method is limited in that it is primarily qualitative, because expression intensity can vary depending on the amount of time used during the visualization step and the concentration of the probe. Furthermore, patience is required, as this protocol can take up to 5 days (and in many cases, longer) depending on the probe being used. Finally, non-specific background staining is common, but this limitation can be overcome.

In Situ Hybridization Techniques for Paraffin-Embedded Adult Coral Samples

The goal of this protocol is to perform in situ hybridization on adult coral samples that have been embedded in paraffin and sectioned onto glass slides. This is a qualitative method used to visualize the spatial expression of an RNA anti-sense probe in paraffin-embedded tissues.

In Situ Hybridisierung Techniken für Paraffin-eingebetteten Erwachsenen Korallen Proben

Corals are important ocean invertebrates that are critical for overall ocean health as well as human health. However, due to human impacts such as rising ...