Diese Forschung wurde von Grant 105AS-13.2.3-BQ-B1 aus dem Bureau of Tier- und Pflanzengesundheit Inspektion und Quarantäne, der Rat für Landwirtschaft, Exekutiv-Yuan und Grant 103-2313-B-197-002-MY3 vom Ministerium unterstützt für Wissenschaft und Technologie (MOST).

1. Vorbereitungen <ol><li> Machen 1 L 50% Zuckersirup. Man löst 1 kg Saccharose in 1 l ddH 2 O. </li><li> Bereiten Pyriproxyfen (PPN) -Lösung in BLD. Make 1,1 L von 10.000 ppm PPN - Stammlösung und verdünnte 100 ml PPN - Lösung in 1 l sterilisierten ddH 2 O. Lagerung bei 4 ° C. </li><li> Verdünne die PPN-Stammlösung auf Endkonzentrationen von 0,1, 1, 10 und 100 mg / kg (ppm) in dem BLD für das folgende Experiment. </li><li> Machen PPN-Sirup (für die Kolonie-Ebene). Verdünne die PPN Lager auf Endkonzentrationen von 10 und 100 ppm in 50% Zuckersirup für das folgende Experiment. </li><li> Honigbienenhaltung. Hinweis: Hier ist die experimentelle Lage ist die National Ilan University (NIU) Imkerei, Yi-Lan City, Taiwan; (GPS - Koordinaten: N24.747278, E121.746200). <ol><li> Überprüfen Honigbiene (Apis mellifera L.) für die Lebensmittelmenge wöchentlich Kolonien und Futtermittel mit 1 Liter 50% Zuckersirup , falls erforderlich (der Honig - Speicherbereich ist leer). Definieren Sie eine gesundeKolonie als 9 Bilder von Bienenwaben in jeder Kolonie mit einem Queen-Eier normalerweise legen. </li></ol></li><li> Bereiten Sie 100 ml Grund Larvaldiät (BLD). Man löst 6% D-glucose, 6% Fructose und 1% Hefeextrakt in sterilisiertem destilliertem deionisiertem Wasser (ddH 2 O) und ergänzt mit 50% Gelee royale. Lagerung bei 4 ° C, jedoch nicht länger als 3 Tage. Hinweis: Pre-warm bis 35 ° C vor dem Experiment und innerhalb von 3 Tagen haben. </li></ol> 2. In - vivo - Fütterungsmethode Hinweis: In - vivo - Fütterungsmethode wurde von Hanley et al modifiziert. 20 <ol><li> Honigbienenlarven Auswahl und Kennzeichnung. <ol><li> Legen Sie eine Königin excluder 9 Rahmen einer gesunden Kolonie in 4 Rahmen und 5 Rahmen zu unterteilen, während die Königin zu dem Rahmenprofil 4 zu begrenzen. Verlassen mindestens einen leeren Rahmen in dem Rahmenteil 4 zur Eiablage. </li><li> Nachdem die Königin Eier für 1 Tag VerlegungÜberprüfen, den Rahmen für das Auftreten von Eiern und halten Sie die Eier in den Bienenstöcken für 72 h (4. Tag) bis zum 1. Tag alten Larven schlüpfen. Nehmen Sie einen der Rahmen, die 1-Tage alten Arbeiterinnenlarven (innerhalb von 24 h schraffiert) aus dem Testbienenstock von Hand und entfernen Sie die Honigbiene Arbeiter aus dem Rahmen mit einer Biene Pinsel. </li><li> Bedecken den Rahmen mit einer transparenten Rutsche (Size = Länge x Breite x Dicke = 29,7 mm x 21 mm x 0,1 mm) und Nagel die transparente Folie auf dem Rande des Rahmen mit thumbtacks (1A). </li><li> Für jede Behandlung wählen zufällig 50 1 Tag alten Larven (4. Tag) und jede Brutzelle unter Verwendung von Permanentmarker Stifte auf dem transparenten Schieber (1A und 1B) markieren. Hinweis: Schreiben Sie die Informationen jeder Behandlung auf dem Rahmen und transparente Folie als auch durch Permanentmarker Stifte mit der Verwirrung zwischen den verschiedenen Behandlungen zu vermeiden. Entfernen Sie die markierten Folien und halten für die in vivo &lt;/ Em&gt; Fütterung und Beobachtung. </li></ol></li><li> In - vivo - Zuführung. <ol><li> Fügen unterschiedliche Konzentrationen von PPN-BLD (0,1, 1, 10 und 100 ppm) zu jeder markierten Brutzelle durch Pipettieren am Tag 1, 2 und 3 mit 10 ul, 10 ul und 20 ul, das jeweils entsprechend den Ansaugmenge der Larven Alter. Fügen Sie die gleiche Menge an BLD (kein PPN) zu einer Kontrollgruppe. Dadurch reichert sich die Gesamtdosis von PPN-BLD in jeder markierten Brutzelle bis 4, 40, 400 und 4000 pg. HINWEIS: Erkennen Sie die markierten Brutzellen durch die markierten transparenten Folien und entfernen Sie die markierten transparenten Folien nach der Fütterung. Verwenden Sie frische BLD zum Zuführen der Reinigung der Brutzellen von den Arbeiterinnen zu verhindern. </li><li> Bringen Sie die PPN-behandelten Rahmen auf die ursprünglichen Kolonien für weitere Beobachtungen. HINWEIS: Jede Behandlung hat vier biologische Wiederholungen in vier Kolonien. </li></ol></li><li> Die Beobachtung der behandelten Larven am Tag 7. <ol><li> Zu beobachten the PPN-behandelten Larven, kehren die markierten transparenten Folien an den Rahmen die Sterblichkeit und Verschließmaschinen Raten in den markierten Brutzellen zu erfassen. </li></ol></li><li> Die Beobachtung der behandelten Puppen und Schlüpfen Raten am Tag 13. <ol><li> Entfernen Sie das Bienenwachs gedeckelter Brutzellen. </li><li> Setzen Sie die weiche kippte Pinzette in Brutzelle und klemmen die Puppen sehr leicht dann Puppen nehmen vorsichtig aus. </li><li> Übertragen der Puppen in 24-Well-Gewebekulturplatten mit einer Doppelschicht von Laborgewebe unterhalb jeder Vertiefung. Notieren Sie sich den Schaden und Mortalität während pupal Übertragung. </li><li> Halten Sie die 24-Well - Gewebekulturplatten in einem Inkubator bei 34 ° C und 70% relative Luftfeuchtigkeit , bis Auftauchen (ca. 8 Tage). </li><li> Bitte beachten und die Puppen und tauchte Honigbienen aufzunehmen. </li></ol></li><li> Statistiken <ol><li> Berechnen Sie die aufgezeichneten Daten und Gegenwart als Mittelwert ± SD </li><li> Analysieren der Daten unter Verwendung der Varianzanalyse (ANOVA) durch SAS und verwenden den niedrigstwertige Unterschied (LSD) -Test die Unterschiede zwischen zwei mittels verschiedener Behandlungen zu analysieren. Definieren statistisch signifikant als P - Wert &lt;0,05. Verschiedene Buchstaben in der gleichen Spalte der Tabelle zeigten einen signifikanten Effekt, der durch die statistische Analyse. </li></ol></li></ol> 3. Toxizität von PPN bei Colony Ebene in Beehive <ol><li> Stellen Sie die Honigbiene Gruppen auf. <ol><li> Senkrecht eine Königin excluder 9 Frames eines gesunden Kolonie in 4 Rahmen (Teil A) und 5-Rahmen (Teil B) zu unterteilen, während die Königin zu dem Rahmenprofil 4 zu begrenzen. Verläßt mindestens einen leeren Rahmen in dem 4-Rahmenprofil für die Eiablage. Hinweis: Legen Sie eine andere Königin EXCLUDER die auf der Oberseite der Königin Teil der Königin zu verhindern, zwischen den Teilen bewegt. </li><li> Nachdem die Königin Eier für 1 Tag legt, überprüfen Sie den Rahmen für das Auftreten von Eiern. Nehmen Sie die entsprechenden Rahmen Eier aus Teil A von Hand enthält, und entfernen Sie die Honigbiene Arbeitervon dem Rahmen mit einer Biene Bürste. </li><li> Bedecken den Rahmen mit transparenter Rutsche und Nagel die transparente Folie in der Kante des Rahmens mit Reißzwecken. </li><li> wählen zufall 100 Brutzellen Eier und markieren jede Brutzelle unter Verwendung von Permanent-Marker auf der transparenten Folie enthalten. Ordnen diese 100 Brutzellen als Gruppe 1, die Information von jeder Behandlung auf dem Rahmen und transparente Objektträger unter Verwendung von Permanent-Marker schreiben die Verwirrung zwischen den verschiedenen Behandlungen zu vermeiden. </li><li> Bringen Sie den markierten Rahmen zu Teil A für 3 Tage und dann übertragen die Königin zu Teil B, Eier zu legen. </li><li> Nach 1 Tag, überprüfen die Rahmen von Teil B, einen geeigneten Rahmen wählen und 100 Brutzellen enthaltende Eier Etikett als in Schritt 3.1.4 beschrieben. Ordnet diese 100 Brutzellen als Gruppe 2. </li><li> Bringen Sie den markierten Rahmen zu Teil B für 3 Tage und dann die Königin übertragen, um ein Teil Eier zu legen. </li><li> Wiederholen Sie die Königin Austausch zwischen Teil A und Teil B 6 weitere Male, und weisen Gruppen numerisch,jeweils (Abbildung 2). Es sollte von 9 Gruppen insgesamt sein. </li></ol></li><li> T reat Honigbienenvolk mit PPN Zuckersirup am Tag 13 (Abbildung 2). <ol><li> 1 L 50% PPN Zuckersirup, der 10 oder 100 ppm in einem Kunststoffbienenbeschickungskasten (W x L x H = 20 cm x 30 cm x 3,5 cm) und setzen den Kasten oben auf den Rahmen in den experimentellen Kolonien. Hinweis: Gruppe 1 nicht die PPN erhält an 13 Tagen, da die Brutzellen versiegelt wurden. </li><li> Futtermittel die Kontrollgruppe mit 1 L 50% Zuckersirup (kein PPN), wie in Schritt 2.2 beschrieben. </li></ol></li><li> Anzahl 1 Tage alte Larven und Aufzeichnung als die Bruteies Rate von 100 markierten Brutzellen für jede Gruppe am Tag 5 (Abbildung 2). Honigbiene Eier nehmen normalerweise 3 Tage in 0 Tagen Larven zu schlüpfen; Deshalb überprüfen und 5 für jede Gruppe am Tag 100 Eier haltigen Brutzellen am Tag 1 und zählen die Anzahl von 1 Tag alter Larven bezeichnen den Prozentsatz der Schlupfrate zu erhalten. </li><li> Count die verkappten Brutzellen und Aufzeichnung als die Larven- Capping Rate von 100 markierten Brutzellen für jede Gruppe an Tag 11 (Abbildung 2). 6 bis 7 Tage alten Larvenbrutzellen werden mit Bienenwachs von Honigbienenlarven Arbeiter für Verpuppung begrenzt. </li><li> Beobachten Puppen Reifung und notieren Sie die eclosion Rate von 100 markierten Brutzellen für jede Gruppe an Tag 17 (Abbildung 2). <ol><li> Entfernen Sie das Bienenwachs gedeckelter Brutzellen und nehmen Puppen aus mit weichen Spitzen versehenen Pinzette vorsichtig. Übertragen der Puppen in einer 24-Well-Gewebekulturplatten mit einer Doppelschicht von Laborgewebe unterhalb jeder Vertiefung. </li><li> Halten Sie die 24-Well-Gewebekulturplatten in einem Inkubator bei 34 ° C und 70% RH bis zum Auftauchen. </li><li> Bitte beachten und notieren Sie die Puppen und tauchte Honigbienen für jede Gruppe bis Gruppe 9 (49 Versuchstagen). Hinweis: Jede Behandlung hat vier biologische wiederholt. </li></ol></li><li> Statistiken <ol><li> Berechnen Sie die aufgezeichneten Daten und Gegenwart als Mittelwert± SD. </li><li> Analysiert die signifikanten Unterschiede zwischen Paaren von Behandlungen (zB 0 ppm / 10 ppm, 10 ppm / 100 ppm und 0 ppm / 100 ppm) in jeder Gruppe durch den Zwei-tailed t - Test nach Student verwendet. Definieren Sie als statistisch signifikant , wenn P - Wert &lt;0,05. </li></ol></li></ol>

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Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen haben.

Die Königin begrenzte Eiablage Methode und Queen-Austauschverfahren sind wichtige Schritte zur Einstellung innerhalb dieses Protokolls Honigbiene Gruppen für den Feldtest auf. Die Königin begrenzte Eiablage Verfahren ermöglicht die Synchronisation des Lebenszyklus von Honigbienen. Folglich können die Forscher wählen Sie 1 Tage alte Larven der gleichen Altersgruppe für die Behandlung mit verschiedenen Dosen des Pestizids. Für die Königin-Austauschverfahren wurde die Königin zwischen Teil A (4 Rahmen) und B (5 Frames) zu erhalten verschiedene Entwicklungsstadien der Honigbiene für Feldversuche ausgetauscht die Auswirkungen des Pestizid und Pestizidrückstände zu bewerten. Darüber hinaus wird eine große Anzahl von ausgewählten Brutzellen wurden im Feldtest unter Verwendung von transparenten Folien zur Beschriftung aufgezeichnet. gelegentlich zu einer unzureichenden Brutzellen für die Königin jedoch Ei über legenden Eiablage. Daher wird die Herstellung von leeren Rahmen für die Königin-Austauschverfahren erforderlich. Alternativ könnte die Königin begrenzte Eiablage Verfahren auch verwendet werden,bereite verschiedene Honigbiene Gruppen für die Prüfung im Bienenstock. Die Trennung des Rahmen in Rahmen 2 in Teil A und 7-Frames in Teil B und die Platzierung der Königin in Teil A (2 Rahmen) können die Eier von der Königin in dem Rahmen 2 fest begrenzen. Für die in vivo - Fütterungsmethode wurde PPN-BLD zu jeder Brutzelle hinzugefügt. Die Honigbienen höhere Akzeptanz von BLD als 16 Sirup ausgestellt, 20. Honigbienenlarven können auf einer künstlichen Diät überleben und wachsen , bestehend aus Gelée Royale, Zucker, Hefeextrakt, und destilliertes Wasser 22, 23. Die Glukose und Fruktose Zusammensetzung des BLD hatte keinen Einfluss auf die Überlebensraten der Larven in vitro 21, und daher würde BLD stabiler sein für Honigbiene Wachstum in den Bienenstock. Bemerkenswert ist, könnte die Verwendung von frischen BLD für die Fütterung auch die Arbeitsbienen Larven Ausgrenzung verhindern währenddas Larvenfütterungsexperiment. Darüber hinaus während der Fütterungsverfahren wird behutsame Zuführung zunächst erforderlich, um den Tod von 1 Tag alten Larven zu vermeiden. Während Feldtests kontaminierten BLD chemisch in den Bienenstock gelegentlich verursacht Larven Ausschluss aufgrund der hohen Geruchsempfindlichkeit von Pflegebienen. Die Zuckerzusammensetzung beeinflusst signifikant die durchschnittliche Überlebenszeit der Larven, pre-pupal Larvengewichte, Erwachsenen- Gewichte und Ovariole Zahlen 21. Wenn Sirup verwendet transgene Pollen oder eine positive Kontrolle Pestizid Diazinon auf Honigbienenlarven zu liefern, entfernt die Arbeiter wenige Larven aus den 21 Lebensmitteln zugesetzt oder kontaminiert enthält Brutzellen. Somit sollte die Zuckerzusammensetzung festgestellt werden. Eine Erhöhung der Anzahl von 1 Tag alten Larven oder die getesteten einzelnen Brutzellenstandorte Dispergieren kann auch die Probleme verbessern. Tatsächlich basiert auf der Beobachtung der PPN-BLD Behandlungsverfahren und die dramatischen dosisabhängigen Auswirkungen vonPPN-BLD auf der Entwicklung von Honigbienen, gingen wir davon aus, dass die Krankenschwestern den künstlich hinzugefügt BLD zu den Brutzellen nicht entfernt haben. Niedrige Konzentrationen von PPN Ursache melanization von Puppen, möglicherweise aufgrund der erhöhten Phenoloxidase Aktivität, die 24 melanization und Verpuppung regelt, 25, 26. Basierend auf der Verwendung einer künstlichen Fütterungsmethode für jede Brutzelle, die dramatischen Auswirkungen des PPN-BLD auf der Entwicklung von Honigbienen können ab dem ersten Tag zu direktem Kontakt mit PPN fällig von dem Schlüpfen. Die chemischen Dosierungen in den Fütterungsversuchen verwendet wird, könnten auf Basis von Umfragedaten für Pestizidrückstände in frischen Pollenproben aus Honig Bienenstöcken gesammelt entworfen werden. Es gibt eine Vielzahl von Routen von Pestizidbelastung von Kolonien in der natürlichen Umwelt. Chemische Verunreinigungen auf die Bienenvölker zurückgebracht und durch die Fütterung mot durch Larven aufgenommen werden könntenIon Arbeiter Honigbienen, beeinflussen schließlich die Entwicklung der Larven. Um die Auswirkungen der PPN in der Kolonie Ebene in den Bienenstock zu bewerten, wurde Sirup in dieser Studie statt Pollen verwendet für die Zufuhr als die schnellste und direkteste Weg, um sicherzustellen, dass die Honigbienen die Chemikalie verbraucht. Darüber hinaus kann der Zustand des Sirups definiert werden, während der Inhalt des Pollens schwer zu kontrollieren ist (zB Pathogene oder Pestizidkontamination). Unter Feldbedingungen verschiedene Entwicklungsstadien (Eier, Larven, Puppen und adulten Bienen) von Honigbienen in einem Bienenvolk leidet den gleiche Umgebung Faktor. In unserem Versuchsaufbau wurden die natürlichen Bedingungen simuliert die Auswirkungen der Chemikalie auf den Entwicklungsstadien von Honigbienen in einem dynamischen Umfeld zu bewerten. Deshalb wird nach PPN Behandlung (13 Tage), könnten wir den unbeeinflussten Begrenzungssatz in der Gruppe 1 beobachten, die beeinflusste Begrenzungssatz in den anderen acht Gruppen und die beeinflusste Larvenstadiums in den Gruppen 2 und 3 usw. Unter diesen Bedingungen die wahren Auswirkungen innerhalb der Kolonie und der Weg der Ausbreitung der Chemikalie auf die ganze Kolonie sind klar. Die Bienenvölker mit PPN Sirup behandelt zeigte Verzerrung von verkappten Zellen und Entfernung von Puppen aus der Kolonie. Darüber hinaus umfangreiche melanization der Puppen wurde in der 100 ppm PPN Behandlung beobachtet. Somit erlaubt die PPN-Sirup Fütterungsmethode der dynamischen Auswirkungen von Chemikalien auf den gesamten Lebenszyklus von Honigbienen im Bienenstock zu beobachten. In dieser Studie wird die Sirup durch die Arbeiter und Pflege Bienen aufgenommen wurde vermutlich an die Königin und Larven gefüttert. Zur Bestätigung, verwenden unsere zukünftigen Studien chemische Markern (wie ein essbaren Farbstoff) in dem chemischen haltigen Sirup, um die Untersuchung der Dynamik von chemisch verunreinigten beehives zu erleichtern. Die Nahrungsquelle der Krankenschwester Bienen sollten aus foragers kommen oder in Bienenstock und Larven gefüttert Unterkiefers und hypopharyngEAL Drüse von Ammen hergestellt Sekrete 21, 25, 26, 27, 28. Wenn Larven von Ammen zugeführt werden, durch die hypopharyngeal Drüse im Unterkiefer erzeugen Sekrete können den PPN-Sirup verdünnen. Diese biologische Verwässerungseffekt ähnelt mehr den natürlichen Bedingungen , sondern erläutert die unterschiedlichen Ergebnisse der in - vivo - Fütterungsmethode. Verschiedene Materialien, einschließlich anderer Pestizide, Schwermetall und Honigbienenkrankheitserreger könnten zur Bewertung und Bewältigung der Rollen in Honigbienenpopulationen auf diese Fütterungsmethode angewendet werden.

Das Vorhandensein von Pestiziden in der Umwelt ist eines der gravierendsten Probleme , die Auswirkungen auf das Leben einer Honigbiene 1, 2, 3. Mehrere Studien haben die gemeinsame Präsenz von Pestizidrückständen in Bienenvölkern und Bienenprodukten unter Beweis gestellt. In Taiwan war die durchschnittliche Anwendung von Pestiziden 11-12 kg / ha pro Jahr (2005-2013). Die Menge an Pestiziden in Taiwan verwendet wird , ist höher als die der EU - Länder und die lateinamerikanischen Länder 4, 5. Mit anderen Worten, leidet die Bienenzucht Umwelt ernst Pestizid Stress, vor allem in Taiwan und möglicherweise in anderen Ländern. Die Honigbiene Apis mellifera ist eine der wichtigsten Bestäuber in landwirtschaftlichen Systemen 6 und produziert auch wertvolle Produkte wie Honig. Expos jedoch Honigbienen sinded auf verschiedene Pestizide und diese Pestizide können nach Nahrungssuche auf Blumen zu beehives zurückgebracht werden , die mit Pestiziden besprüht wurden , wenn 7 Nektar und Pollen zu sammeln, 8. Sie können auch durch die Imker Pestizide ausgesetzt werden , sich Schädlingsprobleme zu steuern das Ziel, innerhalb der Nesselsucht 9, 10, 11. Da Honigbienenlarven von Ammenbienen gefüttert werden für ihre Entwicklung, Larven, Drohnen und sogar die Königin kann 12 dieser Pestizid-kontaminierten Nektare und Pollen ausgesetzt werden. Die Toxizität von verschiedenen Pestiziden Honigbienen muss 13 angesprochen werden. Viele Anstrengungen wurden unternommen, um die Probleme der Umweltpestizidrückstände zu bewerten. Yang et al. den Einfluss des neurotoxischen Insektizid Imidacloprid auf der Entwicklung von Honigbienenlarven getestet in derBienenstock und berichtet , dass eine subletale Dosis von Imidacloprid in olfaktorischen assoziativen Verhalten der erwachsenen Bienen ergab 14. Auch Urlacher et al. die subletale Wirkungen eines Organophosphat - Pestizid geprüft, Chlorpyrifos, auf einer Lernleistung der Honigbiene Arbeiter unter Laborbedingungen 15. In unserer früheren Studie haben wir die Auswirkungen eines Insektenwachstumsregulator (IGR), Pyriproxyfen (PPN), auf Larvenhonigbienen 16. In diesem Beitrag stellen wir Methoden für die chemischen Auswirkungen auf die Entwicklung von Honigbienen zu bewerten. Honigbiene Fütterungsmethoden wurden beschrieben und angewandt, um entweder einzelne Honigbienen oder zu einer Kolonie. Zunächst testeten wir verschiedene Konzentrationen von Pestiziden kontaminierte Grundlarvenfutter (BLD) auf Larven in den Kolonien , die Auswirkungen des Pestizids auf einzelne Honigbienen in vivo zu bewerten. Wir gingen dann die natürliche condit zu simulierenIonen des Pestizids durch pestizid kontaminierten Sirup des beehives verwenden. Bei diesem Verfahren wird PPN, die weit gegen Schadinsekten verwendet wird , 17 und sind schädlich für die Entwicklung von Honigbienenlarven und Puppen 16, 18, 19, wird ein Indikator sein , um die negative Wirkung des Pestizids auf dem Gebiet darstellen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="887">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:193px;">Honey bee box</td>
			<td style="width:243px;">SAN-YI Honey Factory</td>
			<td style="width:155px;">W1266</td>
			<td style="width:297px;">Honeybees rearing</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:193px;">Queen excluder (between frames)</td>
			<td style="width:243px;">SAN-YI Honey Factory</td>
			<td style="width:155px;">I1575</td>
			<td style="width:297px;">Queen limitation&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:193px;">Queen excluder (on top )</td>
			<td style="width:243px;">SAN-YI Honey Factory</td>
			<td style="width:155px;">I1566</td>
			<td style="width:297px;">Queen limitation on top&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:193px;">Bee brush</td>
			<td style="width:243px;">SAN-YI Honey Factory, Taiwan</td>
			<td>W1414</td>
			<td style="width:297px;">clean the bees on frame gently</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:193px;">Bee feeder</td>
			<td style="width:243px;">SAN-YI Honey Factory, Taiwan</td>
			<td>P0219</td>
			<td style="width:297px;">feed sugar syrup to colony</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Transparent slide</td>
			<td style="width:243px;">Wan-Shih-Chei, Taiwan (http://www.mbsc.com.tw/a01goods.asp?s_id=40)</td>
			<td>1139</td>
			<td style="width:297px;">Mark the larval area on the frames (Material: Polyethylene Terephthalate, PET) (Size= Length*Width*thick= 29.7mm*21mm*0.1mm)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:193px;">24 well tissu culture plate</td>
			<td style="width:243px;">Guangzhou Jet Bio-Filtration Co., Ltd</td>
			<td style="width:155px;">TCP011024</td>
			<td style="width:297px;">Rearing pupae from extraction</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:193px;">Autoclave</td>
			<td style="width:243px;">Tomin medical equipmenco., LTD.</td>
			<td style="width:155px;">TM-321</td>
			<td style="width:297px;">Make sterilized distilled deionized water (ddH2O)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:193px;">P20 pipetman</td>
			<td style="width:243px;">Gilson</td>
			<td style="width:155px;">F123600</td>
			<td style="width:297px;">Add PPN into bee larval food pool</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:193px;">Incubator&#160;</td>
			<td style="width:243px;">Yihder Co., Ltd.</td>
			<td style="width:155px;">LE-550RD</td>
			<td style="width:297px;">Rearing pupae from extraction</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:193px;">Kimwipes</td>
			<td style="width:243px;">COW LUNG INSTRUMENT CO., LTD</td>
			<td style="width:155px;">KCS34155</td>
			<td style="width:297px;">Rearing pupae from extraction</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:193px;">Royal jelly</td>
			<td style="width:243px;">National Ilan University (NIU)</td>
			<td style="width:155px;">NIU</td>
			<td style="width:297px;">Make basic larval diet (BLD)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:193px;">D-(+)-Glucose</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:155px;">G8270</td>
			<td style="width:297px;">Make basic larval diet (BLD)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:193px;">D-(-)-Fructose</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:155px;">F0127</td>
			<td style="width:297px;">Make basic larval diet (BLD)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:193px;">Yeast extract</td>
			<td style="width:243px;">CONDA, pronadisa</td>
			<td style="width:155px;">1702</td>
			<td style="width:297px;">Make basic larval diet (BLD)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:193px;">Sucrose</td>
			<td style="width:243px;">Taiwan sugar coporation</td>
			<td style="width:155px;">E01071010</td>
			<td style="width:297px;">Make sugar syrup for bee food</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:193px;">Pyriproxyfen (11%)</td>
			<td style="width:243px;">LIH-NUNG CHEMICAL CO.. LTD.</td>
			<td style="width:155px;">Registration No. 1937</td>
			<td style="width:297px;">Insect growth regulator (IGR) used in the experiment</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluating the effect of environmental chemicals on honey bee development from the individual to colony level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Für die Honigbiene Feldtest wurde eine Königin auf den für Eiablage 4-Rahmenabschnitt begrenzt. Dieser Schritt könnte die Brutdichte in einem Rahmen erhöhen und nachfolgende Beobachtungen erleichtern. Jede Behandlung wurde markiert, und die Entwicklung in den Honigbienen wurde eindeutig durch ein transparentes Dia beobachtet. In - vivo - Zufuhr von PPN-BLD auf Honigbienenlarven in dem Bienenstock wurde durchgeführt , um genau den Einfluss von PPN auf der Entwicklung von Honigbienen in der Kolonie zu bewerten. Unter Verwendung des in vivo - Fütterungsmethode erleichtert die Beobachtung der Auswirkungen der chemischen Behandlungen auf dem Bienenstock. Für jede Dosis von PPN-BLD, wurden insgesamt fünfzig Brutzellen markiert und behandelt. Nach der Zugabe von PPN-BLD wurden die behandelten Rahmen auf die ursprünglichen Kolonien für die Beobachtung unter natürlichen Bedingungen zurückgeführt. Die negativen Auswirkungen des PPN-BLD auf Larvenstadium Honigbienen waren leicht Observed. Eine dosisabhängige Wirkung beobachtet. Tabelle 1 stellen die Anzahl von Honigbienen , die im Larvenstadium auf die beiden höheren Dosen von 10 und 100 ppm starben. Wie in Tabelle 1, bei den beiden Dosen gezeigt (0,1 und 1 ppm) wurden die Capping Raten Tage Entstehung und eclosion Raten nicht signifikant verschieden von 0 (BLD Lebensmitteln zugesetzt) oder der unfed Steuerung, mit nur einem deutlich höheren Prozentsatz an Bienen mit deformierten Flügeln bei 1 ppm. Melanization der Puppen wurde bei niedrigeren Konzentrationen von PPN beobachtet. Ferner zeigte der Anteil der erwachsenen Honigbienen mit deformierten Flügeln mit höheren Dosen von PPN erhöht (Tabelle 1). Um Bienenvölker leiden Umwelt PPN Rückstand, Fütterung von PPN Sirup auf das gesamte Bienenvolk zu simulieren durchgeführt wurde. Vor der Behandlung wurde jede Kolonie in 9 verschiedene zeitliche Gruppen aufgeteilt in 3 - tägigen Intervallen von zwei Queen Excluders (FiAbbildung 2). Daher wurden die Effekte von PPN auf den Raten des Schraffur, Capping und Schlüpfen gleichzeitig ähnlich in der natürlichen Umgebung zu der unter Bedingungen beobachtet. Die Kolonien wurden Sirup mit 10 oder 100 ppm PPN am Tag gefüttert 13 (durch die gepunkteten roten in Figur 2 angedeutet). Theoretisch 1, Gruppe war eine PPN-freie Kontrolle, da die PPN-Sirups am Tag zugeführt wurden, 13 und die Honigbienen in Gruppe 1 wurden in der Verpuppung und verschlossen; begannen die honeybees im Larvenstadium in den Gruppen 2 und 3 beeinflussten werden, und die Eier werden in Gruppen 4-9 durch die längere Belichtungszeit in dem PPN-kontaminierten beehives (Abbildung 2) beeinflusst werden. In dieser Studie gefüttert wir Bienenvölker mit PPN Sirup und Entwicklung beobachtet werden, wenn die erwachsenen Bienen den Sirup verbraucht und fütterte vermutlich die Königin und Larven. Diese Annahme wurde durch die hatc bestätigtHängt, Capping und Schlüpfen Rate und verformte geflügelte Bienen wurden nach den PPN - Behandlungen beobachtet, wie in den 3A - 3D. Alle Parameter unterschieden sich signifikant bei der höheren Dosierung (100 ppm) , beginnend mit der Gruppe 3, mit Ausnahme der Schlupfrate (3A - 3D). Darüber hinaus wird nach den PPN-Sirup Behandlungen starben viele Puppen mit schwarzer Nagelhaut oder durch aufzutauchen scheitern. In der 100 ppm PPN - Behandlung wurden die Zellen mit einer Kappe bedeckt zerstört und die verletzten Puppen wurden aus der Kolonie (Figur 3E) entfernt. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/55296/55296fig1.jpg" /> Abbildung 1: Schema der Brutzellen Kennzeichnung. (A) 1 Tag alte Arbeiterinnenlarven durch transparentes Dia Papiere abgedeckt und wurden durch permanenten Marker markiert. (B) 1 Tag alte Arbeiter Larvenbrutzellen markiert; der weiße Pfeil zeigt ein 1<html> Tage alter Arbeiter Larve im Innern. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55296/55296fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55296/55296fig1large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/55296/55296fig2.jpg" /> Abbildung 2: Zeitleiste für , wenn PPN wird relativ zu den 9 Versuchsgruppen gestartet. Verschiedene Konzentrationen von PPN wurden am Tag 13 (rot gestrichelte Linie) zugeführt. Die behandelte Kolonie wurde aufgeteilt in dem Teil A und Teil B. Die Königin Austausch von Teil A zu Teil B , und umgekehrt für die Eiablage wird gezeigt. Dies wurde mit Genehmigung von Elsevier 16 wiedergegeben. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55296/55296fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55296/55296fig2large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> 6 / 55296fig3.jpg“/&gt; Abbildung 3: Entwicklung der Honigbienenlarven vor und nach 1 kg PPN Sirup in getestet Bienenvölker ernähren. Insgesamt neun Gruppen wurden in diesem Experiment untersucht: (A) Schlupfrate; (B) Capping Rate; (C) eclosion Rate; und (D) malformed wing Rate. Mittelwert ± SD vorgestellt; Rote Pfeile zeigen die Zeit, während der PPN beginnen kann auf Bienen wirken. Schwarz Sternchen zeigen statistische Signifikanz im Vergleich zur Kontrolle (0 ppm). Rote Sternchen zeigen statistische Signifikanz zwischen 10 und 100 ppm; (E) 100 ppm PPN Sirup behandelt Bienenkolonie zeigten uncapped Zellen, vermutlich verformt Puppen und schwarz und verformt Puppen. Dies wurde mit Genehmigung von Elsevier 16 wiedergegeben. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55296/55296fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55296/55296fig3large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> </a&gt; <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td rowspan="2"> PPN-BLD (ppm) </td><td rowspan="2"> Larvae No. </td><td colspan="3"> Larvalentwicklung </td></tr><tr><td> Capped Rate (%) </td><td> Eclosion Rate (%) </td><td> Malformed Flügel (%) </td></tr><tr><td> 100 </td><td> 140 </td><td> 0b </td><td> 0b </td><td> - </td></tr><tr><td> 10 </td><td> 139 </td><td> 22,2 ± 33.2b </td><td> 0b </td><td> - </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 140 </td><td> 72,3 ± 17.9a </td><td> 67,7 ± 17.6a </td><td> 7,7 ± 5.7a </td></tr><tr><td> 0,1 </td><td> 136 </td><td> 78,3 ± 17,5A </td><td> 75,4 ± 22.8a </td><td> 1,4 ± 2.8b </td></tr><tr><td> 0 </td><td> 138 </td><td> 78,9 ± 5.4a </td><td> 78,9 ± 5.4a </td><td> 0b </td></tr><tr><td> Nichtfütterung </td><td> 122 </td><td> 87,8 ± 9.1a </td><td> 86,1 ± 7.2a </td><td> 0,8 ± 1.5b </td></tr></tbody></table> Tabelle 1: Auswirkungen der fort 3 Tage Fütterung von PPN am 1. Tag alten Larven. Zu jeder Zelle larvalen, 10, 10 und 20 ul BLD wurden von den Tagen 1 bis 3, die jeweils hinzugefügt. Jeder Test enthielt 25-38 Larven in einer Kolonie und 4 Kolonien wurden getestet. Mittelwert ± SD dargestellt. Unterschiedliche Buchstaben in der gleichen Spalte sind signifikant verschieden von dem kleinsten Quadraten Differenz-Test (P &lt;0,05) nach der ANOVA einen signifikanten Einfluss zeigte. Dies wurde mit Genehmigung von Elsevier 16 wiedergegeben.

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Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

Hier präsentieren wir ein Verfahren Pestizid kontaminierte Lebensmittel sowohl mit einer einzelnen Honigbiene und einer Bienenkolonie zu ernähren. Das Verfahren bewertet die Pestizid Auswirkungen auf die einzelnen Honigbienen durch in - vivo - Zufuhr von basischen Larven Ernährung und auch auf den natürlichen Zustand der Bienenkolonie.

Die Bewertung der Wirkung von Umweltchemikalien auf Honig-Bienen-Entwicklung von der Person zu Colony Ebene

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

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Nanyang Technological University

Research

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Environment

9.0K Aufrufe.  National Ilan University.  Hier präsentieren wir ein Verfahren Pestizid kontaminierte Lebensmittel sowohl mit einer einzelnen Honigbiene und einer Bienenkolonie zu ernähren. Das Verfahren bewertet die Pestizid Auswirkungen auf die einzelnen Honigbienen durch in - vivo - Zufuhr von basischen Larven Ernährung und auch auf den natürlichen Zustand der Bienenkolonie. 

Serie: Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

Automated Gel Size Selection to Improve the Quality of Next-generation Sequencing Libraries Prepared from Environmental Water Samples

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In this study, we describe a high-throughput approach to prepare high quality DNA libraries from freshwater samples that can be applied also to other environmental samples. We used an indirect approach to concentrate bacterial cells from environmental freshwater samples; DNA was extracted using a commercially available DNA extraction kit, and DNA libraries were prepared using a commercial transposon-based protocol. DNA fragments of 500 to 800 bp were gel size selected using Ranger Technology, an automated electrophoresis workstation. Sequencing of the size-selected DNA libraries demonstrated significant improvements to read length and quality of the sequencing reads.

This manuscript describes an automated gel size selection approach for purifying DNA fragments for next-generation sequencing. The Ranger Technology provides complete automation of the entire process of agarose gel loading, electrophoretic analysis, and recovery of targeted DNA fragments allowing for high-throughput and high quality next-generation sequencing libraries.

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Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment during manufacturing and transport. Because of their environmental persistence, they are widely distributed in the oceans and on beaches all over the world. They can act as a vector of potentially toxic organic compounds (e.g., polychlorinated biphenyls) and might consequently negatively affect marine organisms. Their possible impacts along the food chain are not yet well understood. In order to assess the hazards associated with the occurrence of plastic pellets in the marine environment, it is necessary to develop methodologies that allow for rapid determination of associated organic contaminant levels. The present protocol describes the different steps required for sampling resin pellets, analyzing adsorbed organochlorine pesticides (OCPs) and identifying the plastic type. The focus is on the extraction of OCPs from plastic pellets by means of a pressurized fluid extractor (PFE) and on the polymer chemical analysis applying Fourier Transform-InfraRed (FT-IR) spectroscopy. The developed methodology focuses on 11 OCPs and related compounds, including dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) and its two main metabolites, lindane and two production isomers, as well as the two biologically active isomers of technical endosulfan. This protocol constitutes a simple and rapid alternative to existing methodology for evaluating the concentration of organic contaminants adsorbed on plastic pieces.

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Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment ...

Preparation of DMMTAV and DMDTAV Using DMAV for Environmental Applications: Synthesis, Purification, and Confirmation

Dimethylated thioarsenicals such as dimethylmonothioarsinic acid (DMMTAV) and dimethyldithioarsinic acid (DMDTAV), which are produced by the metabolic pathway of dimethylarsinic acid (DMAV) thiolation, have been recently found in the environment as well as human organs. DMMTAV and DMDTAV can be quantified to determine the ecological effects of dimethylated thioarsenicals and their stability in environmental media. The synthesis method for these compounds is unstandardized, making replicating previous studies challenging. Furthermore, there is a lack of information about storage techniques, including storage of compounds without species transformation. Moreover, because only limited information about synthesis methods is available, there may be experimental difficulties in synthesizing standard chemicals and performing quantitative analysis. The protocol presented herein provides a practically modified synthesis method for the dimethylated thioarsenicals, DMMTAV and DMDTAV, and will help in the quantification of species separation analysis using high performance liquid chromatography in conjunction with inductively coupled plasma mass spectrometry (HPLC-ICP-MS). The experimental steps of this procedure were modified by focusing on the preparation of chemical reagents, filtration methods, and storage.

Preparation of DMMTAV and DMDTAV Using DMAV for Environmental Applications: Synthesis, Purification, and Confirmation

This article presents modified experimental protocols for dimethylmonothioarsinic acid (DMMTAV) and dimethyldithioarsinic acid (DMDTAV) synthesis, inducing dimethylarsinic acid (DMAV) thiolation through mixing of DMAV, Na2S, and H2SO4. The modified protocol provides an experimental guideline, thereby overcoming limitations of the synthesis steps that could have caused experimental failures in quantitative analysis.

Vorbereitung des DMMTAV und DMDTAV mit DMAV für Umweltanwendungen: Synthese, Reinigung und Bestätigung

Dimethylated thioarsenicals such as dimethylmonothioarsinic acid (DMMTAV) and dimethyldithioarsinic acid (DMDTAV), which are produced by the metabolic ...

The Effect of the Application of Thyme Essential Oil on Microbial Load During Meat Drying

Meat is a high protein meal that is used in the preparation of jerky, a popular food snack, where preservation and safety are important. To assure food safety and to extend the shelf life of meat and meat products, the use of either synthetic or natural preservatives have been applied to control and eliminate foodborne bacteria. A growing interest in the application of natural food additives for meat has increased. Microorganisms, such as Escherichia coli, contaminate meat and meat products, causing foodborne illnesses. Therefore, it is necessary to improve the meat conservation process. However, the use of essential oils when the meat is being dried has not been deeply studied. In this regard, there is an opportunity to increase the value of dried meat and reduce the risk of foodborne illnesses by applying essential oils during the drying process. In this protocol, we present a novel method of applying thyme essential oil (TEO) during meat drying, specifically in vapor form directly in a drying chamber. For evaluation, we use Minimal Inhibitory Concentration (MIC) to detect the number of harmful bacteria in the treated samples compared to raw samples. The preliminary results show that this method is a viable and alternative option to synthetic preservatives and that it significantly reduces microbial load in dried meat.

Microorganisms such as Escherichia coli that contaminate meat products cause foodborne illnesses. The use of essential oils in the meat drying process has not been deeply studied. Here, we present a novel method of applying thyme essential oil to meat during drying to reduce the microbial load in dried meat.

Die Wirkung der Anwendung von Thymian ätherisches Öl auf mikrobielle Belastung während der Trocknung von Fleisch

Meat is a high protein meal that is used in the preparation of jerky, a popular food snack, where preservation and safety are important. To assure food ...

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity testing has been demonstrated. Overall, the sensitivity of the species to toxic compounds is in the range with, or higher than, that of other model species.
This work describes protocols for acute, chronic, and multigenerational bioassays of single and combined stressor effects on N. furzeri. Due to its short maturation time and life-cycle, this vertebrate model allows the study of endpoints such as maturation time and fecundity within four months. Transgenerational full life-cycle exposure trials can be performed in as little as 8 months. Since this species produces eggs that are drought-resistant and remain viable for years, the on-site culture of the species is not needed but individuals can be recruited when required. The protocols are designed to measure life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

Protocol for Acute and Chronic Ecotoxicity Testing of the Turquoise Killifish Nothobranchius furzeri

In this work, we describe an acute, chronic and multigenerational bioassay to study the effects of single and combined stressors on the Turquoise killifish Nothobranchius furzeri. This protocol is designed to study life-history traits (mortality, growth, fecundity, weight) and critical thermal maximum.

Protokoll für akute und chronische Ökotoxizität Prüfung von Türkis Killifische Nothobranchius furzeri

The killifish Nothobranchius furzeri is an emerging model organism in the field of ecotoxicology and its applicability in acute and chronic ecotoxicity ...

Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee (Apis mellifera) Workers

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired glands that are located in the head of the bee are highly sensitive to the quantity and quality of pollen and pollen substitutes that the nurse bee consumes. The glands get smaller when nurses are fed deficient diets and are large when they are fed complete diets. Because nurse hypopharyngeal gland size is a robust indicator of nurse nutrition, it is essential that those studying honey bee nutrition know how to measure these glands. Here, we provide detailed methods for dissecting, staining, imaging, and measuring nurse bee hypopharyngeal glands. We present comparisons of unstained and stained tissue and data that were used to study the impact of pollen on gland size. This method has been used to test how diet impacts hypopharyngeal gland size but has further use for understanding the role of these glands in hive health.

Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee Apis mellifera Workers

Hypopharyngeal gland acinus size is a robust measure of nurse honey bee nutrition. Here, we provide a detailed protocol for dissecting, staining, imaging, and measuring nurse bee hypopharyngeal gland acini.

Messung der Schlunddrüsen Drüse Acinus Größe in Honigbiene (Apis Mellifera) Arbeitnehmer

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired ...

Composition and Distribution Analysis of Bioaerosols Under Different Environmental Conditions

Variable microorganisms in particulate matter (PM) under different environmental conditions may have significant impacts on human health. In this study, we described a protocol for multiple analyses of the biological compositions in environmental PM. Five experiments are presented: (1) PM number monitoring by using a laser particle counter; (2) PM collection by using a cyclonic aerosol sampler; (3) PM collection by using a high-volume air sampler with filters; (4) culturable microbes collection by the Andersen six-stage sampler; and (5) detection of biological composition of environmental PM by bacterial 16SrDNA and fungal ITS region sequencing. We selected hazy days and a livestock farm as two typical examples of the application in this protocol. In this study, these two sampling methods, cyclonic aerosol sampler and filter sampler, showed different sampling efficiency. The cyclonic aerosol sampler performed much better in terms of collecting bacteria, while these two methods showed the same efficiency in collecting fungi. Filter samplers can work under low temperature conditions while cyclonic aerosol samplers have a sampling limitation for temperature. A solid impacting sampler, such as an Andersen six-stage sampler, can be used to sample bioaerosols directly into the culture medium, which increases the survival rate of culturable microorganisms. However, this method mainly relies on culture while more than 99% of microbes cannot be cultured. DNA extracted from the culturable bacteria collected by the Andersen six-stage sampler and samples collected by cyclonic aerosol sampler and filter sampler were detected by bacterial 16S rDNA and fungal ITS region sequencing.All the methods above may have wide application in many fields of study, such as environmental monitoring and airborne pathogen detection. From these results, we can conclude that these methods can be used under different conditions and may help other researchers further explore the health impacts of environmental bioaerosols.

Understanding the biological composition of environmental particulate matter is important for the study of its significant impacts on human health and disease spread. Here, we used three types of bioaerosol sampling methods and a biological analysis of airborne microbes to better explore airborne microbial communities under different environmental conditions.

Zusammensetzung und Verteilungsanalyse Bioaerosole unter verschiedenen Umweltbedingungen

Variable microorganisms in particulate matter (PM) under different environmental conditions may have significant impacts on human health. In this study, ...