Die Autoren möchten, um die ursprüngliche Beschreibung des CCI-Modell von Bennett und Xie (1988) zu bestätigen. Diese Arbeit wurde teilweise durch Zuschüsse aus dem National Health and Medical Research Council of Australia (ID # 568637) und dem NSW Amt für Wissenschaft und medizinische Forschung zu GMT unterstützt.

1. Ischiasnerv chronische Verengung Aseptische Techniken sollten für den chirurgischen Eingriff verwendet werden. Desinfizieren Sie die chirurgische Arbeitsfläche mit 70% Ethanol und bereiten im Voraus sterilen Instrumenten (z. B. feine Scheren, Pinzetten und Haken), Gaze, Klammern und Abstrichen durch Autoklavieren. Bei mehreren Operationen, zu reinigen und erneut sterilisieren Instrumente mit 70% Ethanol oder einem trockenen Kügelchen Sterilisator zwischen Ratten. Eine chirurgische Maske, Haar Motorhaube und sterile Handschuhe getragen werden sollten. Für Einengung des Nervs, bereiten Sie die Chromsäure Darmnaht indem es in kleine Stücke von etwa 3 cm Länge in steriler Kochsalzlösung eingetaucht, um Austrocknen zu verhindern. Zum Verschließen der Wunde, verwenden Sie handelsübliche sterile Seidenfäden. <ol><li> Betäuben die Ratte in einem Induktionsofen Kammer mit 5% Isofluran in O 2, dann liefern 2% Isofluran in O 2 über eine maßgeschneiderte Gesichtsmaske, und überwachen die anästhesierten Tier während des Verfahrens. Gemeinsame alternative Anästhetika werden inhaliert Halothan oder intraperitoneale Natrium-Pentobarbital. Ketamin, als N-Methyl-D-Aspartat (NMDA)-Rezeptor-Antagonisten, zu vermeiden, da diese Rezeptoren bei der Entwicklung von neuropathischem Schmerz sind wichtig ist. </li><li> Rasieren Sie das linke Hinterbein der Ratte. Dann legen Sie das Tier auf einem thermo-regulierten Heizmatte bei 37 ° C und gelten Schmier-Augensalbe auf die Augen. </li><li> Sterilisieren Sie den rasierten Bereich mit drei alternativen Anwendungen von 70% Isopropylalkohol und Jod-Lösung. </li><li> Mit der Ratte, die auf seiner Brust / Thorax-, erheben linken Hinterbein und in Position halten mit dem femor bei 90 ° an der Wirbelsäule mit Kreppband auf dem Fuß. </li><li> Einen Einschnitt in der Haut parallel, aber 3-4 mm unterhalb des femor und kostenlos die Haut vor der Muskel um die Inzision durch Durchtrennen des Bindegewebes. </li><li> Mit einem stumpfen Schere, durch das Bindegewebe zwischen den gluteus superficialis und der Bizeps geschnittenfemoris. </li><li> Benutzen Sie einen Haken, um die Lücke zwischen den beiden Muskeln erweitern, so dass klare Visualisierung des Ischias-Nervs. </li><li> Mit gebogenen stumpfen Pinzette und Mikro-Schere, sanft frei ca. 10 mm des Ischias-Nervs (proximal des Ischias-Trifurkation) aus dem umgebenden Bindegewebe. </li><li> Unter dem Mikroskop und eine gute Lichtquelle, binden vier Ligaturen (Chromsäure Gut 4.0, Ethicon, USA) mit einem doppelten Knoten, 1 mm voneinander entfernt, proximal der Trifurkation des Ischias-Nervs. Für jede Blattschraube, mit einem einzelnen losen Schleife starten, dann greifen die beiden Enden nahe an der Schlaufe und ziehen, bis die Schleife wird gerade noch gemütlich und die Ligatur nicht entlang der Nerven gleiten. Um die Schleife in der richtigen Position zu halten, legen Sie eine zweite Schleife auf der Oberseite des ersten, den Knoten zu vervollständigen. Schließlich schnitt die losen Enden der Ligatur auf rund 1mm. Einengung des Nervs sollte minimal sein, und sofort gestoppt, wenn ein kurzes Zucken beobachtet wird, um zu verhindern, Verhaftung von the epineurale Blutfluss. Über dem Anziehen der Ligaturen führt zu Axotomie und Autotomie (Selbstverstümmelung), beide unerwünschte Nebenwirkungen, die bei erfolgreicher Erprobung Schmerzen Überempfindlichkeit auszuschließen. </li><li> Verwendung Nähte (Mersilk 5.0, Ethicon), um die Muskelschicht und Klammern (Autoclip, 9 mm) zu schließen, um die Haut zu befestigen. Weiter verwenden Jodlösung (Riodine), um die Wunde zu sterilisieren. </li><li> Beachten Sie die Ratte eng während der Narkose Erholungsphase, und lassen Sie ihn in einem separaten Käfig mit flachem Papier Betten (nicht der Standard der Tierhaltung Betten) zu erholen, um die unbewussten Tier Ersticken zu verhindern. Vor Angabe von postoperativen Analgesie Ermittler sollte die Tatsache berücksichtigen, kann dies mit Schmerzen Überempfindlichkeit Tests stören. In der Tat gibt es Hinweise, dass die lokale Anwendung von Anästhetika, Lidocain, zum Zeitpunkt der Schädigung kann die Entwicklung von neuropathischen Schmerzen zu verändern, und verringern den Grad der Hyperalgesie in den letzten Wochen 7. Für weitere Diskussion zu diesem matter siehe Beitrag von Bennett et al 8. </li></ol> 2. Measurements of Pain Verhaltensweisen <ol><li> Täglichen Umgang mit Ratten für mehrere Tage vor dem Start des Experiments wird empfohlen, um die Ratten zu ihren Handler zu gewöhnen, Stress reduzieren und das Risiko zu beißen. </li><li> Vor der Verhaltenstests, müssen Ratten auf das Testverfahren und die Tiergehege gewöhnt werden. Die Testumgebung muss ruhig gehalten werden und gut kontrolliert, mit konstanter Temperatur und Luftfeuchtigkeit, und führte zu einem ähnlichen Tageszeit jedes Test-Session. </li><li> Schmerz Überempfindlichkeit Test sollte mehrmals vor CCI (Baseline) und zu verschiedenen Zeitpunkten nach der IHK durchgeführt werden, wie gewünscht. </li></ol> 3. Mechanische Rücknahmeschwelle <ol><li> Am Tag der Prüfung, statt Ratten in den gehobenen Mesh geschossiges Tests Käfig 15-30 Minuten vor der Messung Rücknahmeschwellen, so dass Exploration und Käfig GrooMing-Aktivitäten einzustellen und Ratten zu werden entspannt und stationär. </li><li> Mit Hilfe eines dynamischen plantaren von Frey Aesthesiometer (Ugo Basile, Italien), positionieren Sie den Touch-Stimulator-Einheit mit dem Filament direkt unterhalb der Mitte der Fußsohle der Hinterpfote, die Vermeidung der Metallgitter, und drücken Sie die Starttaste. Dies hebt das Filament mechanisch stimuliert die Fußsohle der Hinterpfote mit zunehmender Kraft. </li></ol> Handbuch von Frey Haare sind eine Reihe von zunehmenden Durchmesser Fäden, die so kalibriert, dass eine bestimmte Kraft zu induzieren, wenn auf die Haut aufgetragen werden. Sie können als Alternative zu einer elektronischen dynamischen plantaren von Frey Aesthesiometer zur Messung der Zurückziehen der Pfote Schwellenwert, wie zuvor 4 verwendet werden. Es gibt auch mehrere alternative Hersteller von elektronischen von Frey aesthesiometers (zB IITC, USA und Somedic, Schweden). <ol start="3"><li> Notieren Sie sich die mechanischen Rücknahmeschwelle von beiden verletzten und unverletzten hindpaws, in einem ausbalancierten Ordnung. Dieses Gerät wirkt auf die Pfote und bei Entzug Reaktion das System automatisch und zeigt die maximale Kraft (in Gramm). Wenn eine zweideutige Antwort auftritt (dh im Falle der Gehfähigkeit oder Grooming), wiederholen Sie den Reiz und notieren Sie die Schwelle wieder. Lecken oder Schütteln der Hinterpfote nach Stimulation ist ein Zeichen von Verhalten mit Schmerzen verbunden. </li><li> Wiederholen Sie die mechanische Stimulation 3 mal im Abstand von ca. 5 min zwischen Reizen, notieren Sie die Schwellenwerte, und dann berechnet den Mittelwert der Pfote Rücknahmeschwellen. </li></ol> 4. Thermische Wegziehlatenz Die Infrarot (IR) Wärme Intensität der Plantar-Prüfgerät sollte vor dem Start des Experiments angepasst werden. In unserem Labor stellen wir die IR-Intensität, um eine durchschnittliche Pfotenrückzugslatenz von etwa 10 Sekunden bei unbehandelten Ratten zu geben, und wir stellen Sie die Cut-off-Latenz bei 20 Sekunden, um Gewebe zu vermeiden DammAlter im Falle des Scheiterns, eine Pfote zu entfernen. <ol><li> Am Tag der Prüfung, um Platz Ratten in das Glas geschossiges Tests Käfig 15-30 Minuten vor der Messung Latenz, wodurch Käfig Explorations-und Grooming-Aktivitäten einzustellen und Ratten werden entspannt und stationär. </li><li> Mit Hilfe eines thermischen plantare Analgesie Instrument (Ugo Basile, Italien), positionieren Sie den Infrarot-Quelle direkt unter der Mitte der Fußsohle der Hinterpfote, und drücken Sie die Starttaste. Dadurch ist die Fußsohle der Hinterpfote mit einem Strahl Strahlungswärme durch eine transparente Glasoberfläche. Es gibt auch alternative Hersteller von thermischen plantare Analgesie Instrumente (zB IITC, USA und Stölting, USA). </li><li> Notieren Sie sich den Rückzug Latenz von beiden verletzten und unverletzten Hinterpfoten, in einem ausbalancierten Ordnung. Dieses Gerät zeichnet automatisch die Zeit genommen (in Sekunden) vom Beginn der thermischen Reiz auf die Rücknahme der Pfote von der Wärmequelle. Wenn eine zweideutige Antwort auftritt (dh im Falle der ambulantention oder Pflege), wiederholen Sie den Reiz und die Latenz wieder aufnehmen. Lecken oder Schütteln der Hinterpfote nach Stimulation ist ein Zeichen von Verhalten mit Schmerzen verbunden. </li><li> Wiederholen Sie die Hitze Stimulation mindestens 3 mal im Abstand von ca. 5 min zwischen Reizen, notieren Sie die Latenzen, und dann berechnet den Mittelwert der Pfote Rückzug Latenzen. </li></ol> 4. Repräsentative Ergebnisse Ein Beispiel für mechanische und thermische Rücknahmeschwelle Wegziehlatenz in der ipsilateralen (verletzt) ​​und kontralateralen (unverletzten) Pfoten von Wistar-Ratten gezeigt wird, bevor (Baseline) und 2-12 Tage nach der CCI in 3A und 3B. Aus diesen Figuren ist ersichtlich, dass CCI eine signifikante Reduktion der beiden mechanischen und thermischen Rücknahmeschwellen Rücknahme Latenzen des ipsilateralen Hinterpfote bewirkt, was das Vorhandensein von mechanischen und thermischen Schmerzen Überempfindlichkeit, werden beide der chronischen neuropathischen Schmerzen<html> . <img alt="1" src="/files/ftp_upload/3393/3393fig1.jpg" /> 1. Eine schematische Darstellung der Anordnung der Ligaturen in der CCI-Modell. Dieses Tiermodell von neuropathischen Schmerzen handelt Platzierung von vier lose Ligaturen Chromsäure-gut auf den Ischiasnerv, der Mitte des Oberschenkels Ebene. Es führt zu verletzen nur einen Teil der Afferenzen gehen an den Fuß und anschließende Schmerzen Überempfindlichkeit der Hinterpfote. <img alt="2" src="/files/ftp_upload/3393/3393fig2.jpg" /> Abbildung 2. Schematische Darstellung der Hinterpfote Bereich für Schmerzen Tests verwendet. Die Mitte der Fußsohle direkt hinter der Straßenräuber, wie von der rot gestrichelten Kreis angedeutet, wird für Schmerzen Tests verwendet. Dieser Bereich wird meist durch Endäste des N. ischiadicus innerviert. Die Ferse und Fußballen sollten aufgrund der unterschiedlichen Empfindlichkeit der Haut vermieden werden. 3.jpg &quot;/&gt; Abbildung 3. Schmerz Überempfindlichkeit nach chronischer Verengung der Ischiasnerv bei Ratten. Nach CCI, gibt es eine signifikante Reduktion der Pfote Rücknahmeschwelle auf mechanische Reize (A) und Pfotenrückzugslatenz auf thermische Reize (B) im verletzten (ipsilateral) Hinterpfote im Vergleich zur unverletzten (kontralateral) Hinterpfote (P &lt;0,01 wiederholten Messungen 2 ANOVA). Die Daten zeigen Mittelwert ± SEM, n = 7 Wistar-Ratten.

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	<li>Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+chronic+pain+with+neuropathic+characteristics+in+the+general+population.">Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population.</a> Pain. 136, 380-387 (2008).</li><li>Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+prevalence+and+impact+of+chronic+pain+with+neuropathic+pain+symptoms+in+the+general+population.">The prevalence and impact of chronic pain with neuropathic pain symptoms in the general population.</a> Pain Med. 10, 918-929 (2009).</li><li>Bennett, G. J., Xie, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+peripheral+mononeuropathy+in+rat+that+produces+disorders+of+pain+sensation+like+those+seen+in+man.">A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man.</a> Pain. 33, 87-107 (1988).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> J. Neurosci. Methods. 53, 55-63 (1994).</li><li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia.">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32, 77-88 (1988).</li><li>Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+foot+withdrawal+response+to+noxious+radiant+heat+in+the+rat.">Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat.</a> Pain. 59, 85-94 (1994).</li><li>Dougherty, P. M., Garrison, C. J., Carlton, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+influence+of+local+anesthetic+upon+two+models+of+experimentally+induced+peripheral+mononeuropathy+in+the+rat.">Differential influence of local anesthetic upon two models of experimentally induced peripheral mononeuropathy in the rat.</a> Brain Research. 570, 109-115 (1992).</li><li>Bennett, G. J., Chung, J. M., Honore, M., Seltzer, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+neuropathic+pain+in+the+rat.">Models of neuropathic pain in the rat.</a> Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9, (2003).</li><li>Attal, N., Jazat, F., Kayser, V., Guilbaud, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Further+evidence+for+&#39;pain-related&#39;+behaviours+in+a+model+of+unilateral+peripheral+mononeuropathy.">Further evidence for &#39;pain-related&#39; behaviours in a model of unilateral peripheral mononeuropathy.</a> Pain. 41, 235-251 (1990).</li><li>Hu, B., Doods, H., Treede, R. -. D., Ceci, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression-like+behaviour+in+rats+with+mononeuropathy+is+reduced+by+the+CB2-selective+agonist+GW405833.">Depression-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the CB2-selective agonist GW405833.</a> Pain. 143, 206-212 (2009).</li><li>Jesse, C., Wilhelm, E., Nogueira, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression-like+behavior+and+mechanical+allodynia+are+reduced+by+bis+selenide+treatment+in+mice+with+chronic+constriction+injury:+a+comparison+with+fluoxetine,+amitriptyline,+and+bupropion.">Depression-like behavior and mechanical allodynia are reduced by bis selenide treatment in mice with chronic constriction injury: a comparison with fluoxetine, amitriptyline, and bupropion.</a> Psychopharmacology. 212, 513-522 (2010).</li><li>Monassi, C. R., Bandler, R., Keay, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subpopulation+of+rats+show+social+and+sleep-waking+changes+typical+of+chronic+neuropathic+pain+following+peripheral+nerve+injury.">A subpopulation of rats show social and sleep-waking changes typical of chronic neuropathic pain following peripheral nerve injury.</a> Eur. J. Neurosci. 17, 1907-1920 (2003).</li><li>Roeska, K., Doods, H., Arndt, K., Treede, R. D., Ceci, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anxiety-like+behaviour+in+rats+with+mononeuropathy+is+reduced+by+the+analgesic+drugs+morphine+and+gabapentin.">Anxiety-like behaviour in rats with mononeuropathy is reduced by the analgesic drugs morphine and gabapentin.</a> Pain. 139, 349-357 (2008).</li><li>Kontinen, V. K., Kauppila, T., Paananen, S., Pertovaara, A., Kalso, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+measures+of+depression+and+anxiety+in+rats+with+spinal+nerve+ligation-induced+neuropathy.">Behavioural measures of depression and anxiety in rats with spinal nerve ligation-induced neuropathy.</a> Pain. 80, 341-346 (1999).</li><li>Urban, R., Scherrer, G., Goulding, E. H., Tecott, L. H., Basbaum, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+indices+of+ongoing+pain+are+largely+unchanged+in+male+mice+with+tissue+or+nerve+injury-induced+mechanical+hypersensitivity.">Behavioral indices of ongoing pain are largely unchanged in male mice with tissue or nerve injury-induced mechanical hypersensitivity.</a> Pain. 152, 990-1000 (2011).</li><li>Myers, R. R., Yamamoto, T., Yaksh, T. L., Powell, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+focal+nerve+ischemia+and+Wallerian+degeneration+in+peripheral+nerve+injury+producing+hyperesthesia.">The role of focal nerve ischemia and Wallerian degeneration in peripheral nerve injury producing hyperesthesia.</a> Anesthesiology. 78, 308-316 (1993).</li><li>Grace, P. M., Hutchinson, M. R., Manavis, J., Somogyi, A. A., Rolan, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+animal+model+of+graded+neuropathic+pain:+utility+to+investigate+mechanisms+of+population+heterogeneity.">A novel animal model of graded neuropathic pain: utility to investigate mechanisms of population heterogeneity.</a> J. Neurosci. Methods. 193, 47-53 (2010).</li><li>Kajander, K. C., Pollock, C. H., Berg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+hindpaw+position+in+rats+during+chronic+constriction+injury+&#40;CCI&#41;+produced+with+different+suture+materials.">Evaluation of hindpaw position in rats during chronic constriction injury &#40;CCI&#41; produced with different suture materials.</a> Somatosens Mot. Res. 13, 95-101 (1996).</li><li>Xu, J., Pollock, C. H., Kajander, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromic+gut+suture+reduces+calcitonin-gene-related+peptide+and+substance+P+levels+in+the+spinal+cord+following+chronic+constriction+injury+in+the+rat.">Chromic gut suture reduces calcitonin-gene-related peptide and substance P levels in the spinal cord following chronic constriction injury in the rat.</a> Pain. 64, 503-509 (1996).</li><li>Sommer, C., Schafers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Painful+mononeuropathy+in+C57BL/Wld+mice+with+delayed+wallerian+degeneration:+differential+effects+of+cytokine+production+and+nerve+regeneration+on+thermal+and+mechanical+hypersensitivity.">Painful mononeuropathy in C57BL/Wld mice with delayed wallerian degeneration: differential effects of cytokine production and nerve regeneration on thermal and mechanical hypersensitivity.</a> Brain. Res. 784, 154-162 (1998).</li><li>Walczak, J. S., Beaulieu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+three+models+of+neuropathic+pain+in+mice+using+a+new+method+to+assess+cold+allodynia:+the+double+plate+technique.">Comparison of three models of neuropathic pain in mice using a new method to assess cold allodynia: the double plate technique.</a> Neurosci. Lett. 399, 240-244 (2006).</li><li>Maves, T. J., Pechman, P. S., Gebhart, G. F., Meller, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Possible+chemical+contribution+from+chromic+gut+sutures+produces+disorders+of+pain+sensation+like+those+seen+in+man.">Possible chemical contribution from chromic gut sutures produces disorders of pain sensation like those seen in man.</a> Pain. 54, 57-69 (1993).</li><li>Tall, J. M., Stuesse, S. L., Cruce, W. L., Crisp, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gender+and+the+behavioral+manifestations+of+neuropathic+pain.">Gender and the behavioral manifestations of neuropathic pain.</a> Pharmacol Biochem. Behav. 68, 99-104 (2001).</li><li>Chung, J. M., Choi, Y., Yoon, Y. W., Na, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+age+on+behavioral+signs+of+neuropathic+pain+in+an+experimental+rat+model.">Effects of age on behavioral signs of neuropathic pain in an experimental rat model.</a> Neurosci. Lett. 183, 54-57 (1995).</li><li>Tanck, E. N., Kroin, J. S., McCarthy, R. J., Penn, R. D., Ivankovich, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+age+and+size+on+development+of+allodynia+in+a+chronic+pain+model+produced+by+sciatic+nerve+ligation+in+rats.">Effects of age and size on development of allodynia in a chronic pain model produced by sciatic nerve ligation in rats.</a> Pain. 51, 313-316 (1992).</li><li>Shir, Y., Sheth, R., Campbell, J. N., Raja, S. N., Seltzer, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soy-containing+diet+suppresses+chronic+neuropathic+sensory+disorders+in+rats.">Soy-containing diet suppresses chronic neuropathic sensory disorders in rats.</a> Anesth. Analg. 92, 1029-1034 (2001).</li><li>Yoon, Y. W., Lee, D. H., Lee, B. H., Chung, K., Chung, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+strains+and+substrains+of+rats+show+different+levels+of+neuropathic+pain+behaviors.">Different strains and substrains of rats show different levels of neuropathic pain behaviors.</a> Experimental Brain Research. 129, 167-171 (1999).</li><li>Mogil, J. S., Davis, K. D., Derbyshire, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+necessity+of+animal+models+in+pain+research.">The necessity of animal models in pain research.</a> Pain. 151, 12-17 (2010).</li><li>Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pain:+progress+and+challenges.">Animal models of pain: progress and challenges.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 283-294 (2009).</li><li>Langford, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse.">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nat. Methods. 7, 447-449 (2010).</li><li>Austin, P. J., Moalem-Taylor, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuro-immune+balance+in+neuropathic+pain:+involvement+of+inflammatory+immune+cells,+immune-like+glial+cells+and+cytokines.">The neuro-immune balance in neuropathic pain: involvement of inflammatory immune cells, immune-like glial cells and cytokines.</a> J. Neuroimmunol. 229, 26-50 (2010).</li></ol>

Tierversuche wurden von der Animal Care und Ethikkommission der Universität von New South Wales, Australien genehmigt und Richtlinien der Internationalen Gesellschaft zum Studium des Schmerzes ausgestellt.

CCI ist ein weit verbreitetes peripheren Nervenverletzungen Modell der chronischen neuropathischen Schmerzen. Es ist relativ einfach durchzuführen, und produziert robuste und stabile Schmerzen Überempfindlichkeit für mindestens einen Monat nach der Verletzung. Nach CCI, Ratten zeigen abnorme Haltung des verletzten Hinterpfote (Zehen zusammen und hielt plantar-flektierten und Pfote umgestülpt), sowie mehrmaliges Schütteln, Bewachung und Lecken der verletzten Hinterpfote auf das Vorliegen von spontanen Schmerz 9. Neben der sensorischen Dysfunktion, mehrere Forscher haben gezeigt, dass CCI Verhaltensstörungen Behinderungen, wie gestört sozialen Interaktionen, Schlafstörungen, depressiven und Angst-like-like Verhaltensweisen 10-13 beschwört, dies ist jedoch im Gegensatz zu dem Versäumnis, diese Verhaltens-Behinderungen finden von anderen 14,15. CCI wird daher häufig verwendet, um sowohl die Pathophysiologie und potentielle therapeutische Mittel zur Behandlung von neuropathischen Schmerzen zu untersuchen. Wir descrIbe einseitige Verengung der linken Ischiasnerv, jedoch ist anzumerken, dass viele Experimentatoren haben CCI auf der rechten Ischiasnerv durchgeführt, mit ähnlichen Schmerzen und Verhaltenskonsequenzen werden. Einige Forscher finden es vielleicht leichter eine Operation auf einer bestimmten Seite durch Händigkeit führen, während andere Seiten innerhalb Experimente eingeschaltet, um auszuschließen Bias. Bemerkenswert ist, dass verschiedene Varianten der ursprünglichen Verfahren einschließlich der Verwendung von nur 2 Ligaturen um den Nerv 16,17 und mit Nahtmaterial ausgenommen Chromsäure Darms wie blanker Darm und Polyglactin (Vicryl) 18,19 bei Ratten berichtet worden. Darüber hinaus hat die CCI-Modell auch für den Einsatz in Mäusen modifiziert worden ist, in dem das Verfahren ist identisch, mit Ausnahme der Verwendung von 2-3 Ligaturen mit verschiedenen Nahtmaterial einschließlich Chrom Darm, Nylon und Prolene 15,20,21. Eine Einschränkung dieses Modells ist der Grad der Variation zwischen den Ratten, die einer CCI aufgrund variability in der Dichtheit der Einschnürungen durch das Binden von Knoten mit den Nähten produziert. Dies kann teilweise durch einen erfahrenen Forscher die Durchführung der Operation in einer konsistenten Art und Weise überwunden werden. Weiterhin kann die Art von Nahtmaterial für die Ligation des Nervus verwendet auch Variabilität beitragen, und es wird angenommen, dass Chemikalien aus dem Darm Chromsäure einige der Verhaltens-und neurochemischen Wirkungen in diesem Modell 19,22 beobachtet vermitteln. Besondere Beachtung sollte die Wahl der Ratte Geschlecht (Männer gegen Frauen) 23, Alter (jung gegen alt) 24,25, 26 und Diät-Stamm 27, der wesentlich beeinflussen können, die Entwicklung von Schmerzen Überempfindlichkeit nach CCI gegeben werden. Schmerz Überempfindlichkeit Tests, mit Hilfe eines elektronischen von Frey Aesthesiometer oder manuell von Frey Haaren für mechanische Rücknahmeschwelle und einem plantaren Analgesie (Hargreaves) Zähler für thermische Wegziehlatenz, sind gut etabliert und neuhaftet quantitative Messungen der Schmerz Überempfindlichkeit bei Kleintieren. Ihre Verwendung in Kombination mit Modellen des neuropathischen Schmerzes, sind weit verbreitet und ermöglichen direkte Vergleiche der Pfote Empfindlichkeit gegen mechanische und thermische Reize über verschiedene Behandlungsmöglichkeiten, und zwischen den verschiedenen Stämmen von Ratten. Es sei darauf hingewiesen, dass andere Verhaltens-Assays, wie der Pin-Prick-Test und Kälte-Allodynie, auch zum Testen CCI-induzierten Schmerzen Überempfindlichkeit 8 verwendet werden. Während die Verwendung von reflexiven Rückzug aus mechanischen oder thermischen Reizen ist die wichtigste Maßnahme des neuropathischen Schmerzes in diesem Modell und anderen hat es vor kurzem für seine geringe Korrelation mit menschlichen Symptome und die Einbeziehung der erheblichen Experimentator Bias 28 kritisiert worden. Daher würde die Verwendung von zusätzlichen Paradigmen wie operante das Ausmass der Schmerzen 29 und spontan emittierten Verhaltensweisen 30 vorteilhaft sein. Trotzdem desPite diese Einschränkungen sind das CCI-Modell und die Pfote Rückzug Tests zur Messung von Schmerzen Überempfindlichkeit Schlüsselrolle für das Verständnis der Mechanismen des neuropathischen Schmerzes und der Ermittlung neuer Ziele Analgetikum. In unserem Labor haben wir routinemäßig CCI und messen mechanische Pfote Rücknahmeschwellen und thermische Zurückziehen der Pfote Latenzen, um zu verstehen, wie neuro-immunologische Interaktionen zu neuropathischen Schmerzen 31 beizutragen und das Potenzial der Modulation des Immunsystems Überempfindlichkeit, Schmerzen zu reduzieren.

<table border="1"><tbody><tr><td> Name des Reagenz / Ausrüstung </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Kommentare </td></tr><tr><td> Chromic Darm </td><td> Ethicon </td><td> G-211 </td><td> 4-0 Dicke </td></tr><tr><td> Isofluran </td><td> Delvet Pty Ltd, Seven Hills, NSW </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> Mersilk </td><td> Ethicon </td><td> W-580 </td><td> 5-0 Dicke </td></tr><tr><td> Autoclip </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427631 </td><td> 9 mm Edelstahl </td></tr><tr><td> Riodine </td><td> Orion </td><td> R1000802F </td><td> 1% w / v Iod </td></tr><tr><td> Thermische plantare Analgesie Instrument </td><td> Ugo Basile </td><td> 37370 </td><td></td></tr><tr><td> Dynamische plantare Aesthesiometer </td><td> Ugo Basile </td><td> 37400 </td><td></td></tr></tbody></table>

chronic constriction of the sciatic nerve and pain hypersensitivity testing in rats

Chronischen neuropathischen Schmerzen, die sich aus Schäden des zentralen oder peripheren Nervensystems, ist eine weit verbreitete und schwächenden Krankheit, die 18.7% der Bevölkerung 1,2. Die Symptome umfassen spontane (Kribbeln, Brennen, Elektroschock-wie-) Schmerzen, Gefühlsstörungen, Parästhesien, Allodynie (Schmerzen infolge von normalerweise nicht-schmerzhafte Reize) und Hyperalgesie (erhöhte Reaktion auf schmerzhafte Reize). Die sensorischen Symptome sind komorbiden Verhaltensstörungen mit Behinderungen, wie Schlaflosigkeit und Depressionen. Um chronischen neuropathischen Schmerzen untersuchen mehreren Tiermodellen imitiert peripheren Nervenverletzungen entwickelt worden sind, ist eine der am weitesten verbreitete Bennett und Xie (1988) einseitige Ischiasnerv chronischen Verengung Verletzungen (CCI) 3 (Abbildung 1). Hier präsentieren wir ein Verfahren zur Durchführung und Prüfung CCI Schmerzen Überempfindlichkeit. CCI wird unter Narkose durchgeführt, mit dem Ischiasnerv auf der einen Seite, indem sie als ausgesetztkin Einschnitt, und Durchtrennen des Bindegewebes zwischen den gluteus superficialis und M. biceps femoris. Vier Chromsäure Darm Ligaturen sind locker um den Ischiasnerv bei 1 mm Abständen gebunden, um nur verschließen, aber nicht verhaften epineurale Blutfluss. Die Wunde wird mit Nähten in der Muskel-und Heftklammern in der Haut geschlossen. Das Tier wird dann erlaubt, sich von der Operation für 24 Stunden erholen, bevor Schmerzen Überempfindlichkeit Test beginnt. Für Verhaltenstests werden Ratten in das Gerät gestellt und Tests dürfen, um das Testverfahren zu gewöhnen. Das Gebiet getestet ist die Mitte der Fußsohle der Hinterpfote (Abbildung 2), die innerhalb der Ischiasnerv Verteilung fällt. Mechanische Rücknahmeschwelle wird durch mechanisch stimuliert beide verletzten und unverletzten Hinterpfoten mit Hilfe eines elektronischen dynamische plantare von Frey Aesthesiometer oder manuell von Frey Haaren 4 bewertet. Die mechanische Rücknahmeschwelle ist der maximale Druck ausgeübt(In Gramm) löst das Zurückziehen der Pfote. Für die Messung der thermischen Wegziehlatenz, zuerst von Hargreaves et al (1988) beschrieben, wird die Hinterpfote zu einem Strahl von Strahlungswärme durch eine transparente Glasoberfläche unter Verwendung einer plantaren Analgesie m 5,6 ausgesetzt. Der Rückzug auf die Latenz Hitzereiz wird als die Zeit für Zurückziehen der Pfote in beiden verletzten und unverletzten Hinterpfoten aufgezeichnet. Nach CCI, mechanische Rücknahmeschwelle, sowie thermische Wegziehlatenz im verletzten Pfote sind beide deutlich reduziert, im Vergleich zum Baseline-Messungen und der unverletzten Pfote (Abbildung 3). Die CCI-Modell von peripheren Nervenverletzungen mit Schmerzen Überempfindlichkeit Tests kombiniert wird, liefert ein Modellsystem, um die Wirksamkeit potenzieller Therapeutika untersuchen zu chronischen neuropathischen Schmerzen zu modifizieren. In unserem Labor setzen wir neben CCI thermische und mechanische Empfindlichkeit der Hinterpfoten, die Rolle der neuro-immunologische Interaktionen in der Pathogenese zu untersuchenund Behandlung von neuropathischen Schmerzen.

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Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Aufgrund der Einfachheit des chirurgischen Eingriffs und der robusten Verhaltensauffälligkeiten, ist eine chronische Verengung der Ischiasnerv eines der herausragenden Tiermodellen des neuropathischen Schmerzes. Innerhalb von 24 Stunden nach der Operation wird Schmerzen Überempfindlichkeit gegründet und kann quantitativ gemessen werden mit Hilfe eines von Frey Aesthesiometer (mechanische Prüfung) und plantar Analgesie Meter (Thermal-Test).

Chronische Verengung des Ischiasnerv und Schmerzen Überempfindlichkeit Testing in Ratten

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of ...

chronic-constriction-sciatic-nerve-pain-hypersensitivity-testing

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

58.6K Aufrufe.  University of New South Wales. Aufgrund der Einfachheit des chirurgischen Eingriffs und der robusten Verhaltensauffälligkeiten, ist eine chronische Verengung der Ischiasnerv eines der herausragenden Tiermodellen des neuropathischen Schmerzes. Innerhalb von 24 Stunden nach der Operation wird Schmerzen Überempfindlichkeit gegründet und kann quantitativ gemessen werden mit Hilfe eines von Frey Aesthesiometer (mechanische Prüfung) und plantar Analgesie Meter (Thermal-Test).

Serie: Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

Akute und chronische taktile Sensorische Testung nach Verletzungen des Rückenmarks bei der Ratte

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Forschung

Medizin

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart failure. Here, we describe a detailed surgical procedure for creating pressure overload and cardiac hypertrophy in rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. After anesthesia, the trachea is intubated by inserting a cannula through a half way incision made between two cartilage rings of trachea. Then a skin incision is made at the level of the second intercostal space on the left chest wall and muscle layers are cleared to locate the ascending portion of aorta. The ascending aorta is constricted to 50&#8211;60% of its original diameter by application of a small sized titanium clip. Following aortic constriction, the second and third ribs are approximated with prolene sutures. The tracheal cannula is removed once spontaneous breathing was re-established. The animal is allowed to recover on the heating pad by gradually lowering anesthesia. The intensity of pressure overload created by constriction of the ascending aorta is determined by recording the pressure gradient using trans-thoracic two dimensional Doppler-echocardiography. Overall this protocol is useful to study the remodeling events and contractile properties of the heart during the gradual onset and progression from compensated cardiac hypertrophy to heart failure stage.

We describe a stepwise procedure for creating pressure overload and left ventricular hypertrophy in Wistar rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. This model is extensively used for studying remodeling changes during cardiac hypertrophy and for identifying and evaluating strategies for regression of such changes.

Aufsteigend Aortakonstriktion bei Ratten zur Erstellung von Drucküberlast Herzhypertrophie Modell

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized by increased urgency and frequency of urination, as well as nocturia and general pelvic pain, especially upon bladder filling or voiding. Despite years of research, the cause of IC/BPS remains elusive and treatment strategies are unable to provide complete relief to patients. In order to study nervous system contributions to the condition, many animal models have been developed to mimic the pain and symptoms associated with IC/BPS. One such murine model is urinary bladder distension (UBD). In this model, compressed air of a specific pressure is delivered to the bladder of a lightly anesthetized animal over a set period of time. Throughout the procedure, wires in the superior oblique abdominal muscles record electrical activity from the muscle. This activity is known as the visceromotor response (VMR) and is a reliable and reproducible measure of nociception. Here, we describe the steps necessary to perform this technique in mice including surgical manipulations, physiological recording, and data analysis. With the use of this model, the coordination between primary sensory neurons, spinal cord secondary afferents, and higher central nervous system areas involved in bladder pain can be unraveled. This basic science knowledge can then be clinically translated to treat patients suffering from IC/BPS.

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized in part by pelvic pain. In order to study nervous system contributions to the condition, a physiological model of urinary bladder pain is used in mice and rats.

Harnblase Aufdehnung evozierte viszeromotorische Antworten als Modell für Bladder Pain in Mäuse

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in injured sensory neurons and along the entire nociceptive pathway within the central nervous system. It is usually chronic and challenging to treat. In order to study neuropathic pain and its treatments, different models have been developed in rodents. These models derive from known etiologies, thus reproducing peripheral nerve injuries, central injuries, and metabolic-, infectious- or chemotherapy-related neuropathies. Murine models of peripheral nerve injury often target the sciatic nerve which is easy to access and allows nociceptive tests on the hind paw. These models rely on a compression and/or a section. Here, the detailed surgery procedure for the &#34;cuff model&#34; of neuropathic pain in mice is described. In this model, a cuff of PE-20 polyethylene tubing of standardized length (2 mm) is unilaterally implanted around the main branch of the sciatic nerve. It induces a long-lasting mechanical allodynia, i.e., a nociceptive response to a normally non-nociceptive stimulus that can be evaluated by using von Frey filaments. Besides the detailed surgery and testing procedures, the interest of this model for the study of neuropathic pain mechanism, for the study of neuropathic pain sensory and anxiodepressive aspects, and for the study of neuropathic pain treatments are also discussed.

Neuropathic pain is a consequence of a lesion or disease affecting the somatosensory system. The &#8220;cuff model&#8221; of neuropathic pain in mice consists of the implantation of a polyethylene cuff around the main branch of the sciatic nerve. Mechanical allodynia is tested using von Frey filaments.

Der Ischiasnerv cuffing Modell von neuropathischen Schmerzen bei Mäusen

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in ...

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve (IoN-CCI) to Study Trigeminal Neuropathic Pain

Animal models are important tools to study the pathophysiology and pharmacology of neuropathic pain. This manuscript describes the surgical and behavioral procedures to study trigeminal neuropathic pain in rats. To meet the specificity of trigeminal neuropathic pain syndromes, the infraorbital nerve (IoN) is subjected to a chronic constriction injury (CCI) by loosely ligating the nerve. An intra-orbital approach is presented here to expose and ligate the IoN in the orbital cavity. After IoN ligation, rats exhibit changes in spontaneous behavior and in response to von Frey hair stimulation that are indicative of persistent pain and mechanical allodynia. Two phases can be defined in the development of the behavioral changes. During the first week following IoN-CCI (phase 1), rats show an increased and asymmetric face grooming activity, i.e., with face wash strokes primarily directed to the nerve-injured IoN territory. A distinction is made between face grooming behavior that is part of a more general body grooming behavior, which remains largely unaffected by IoN-CCI, and face grooming that is neither preceded nor followed by body grooming, which is significantly increased after IoN-CCI. During this period, responsiveness to mechanical stimulation of the IoN territory is reduced. This hyporesponsiveness is abruptly replaced by an extreme hyperresponsiveness whereby even very weak stimulus intensities provoke nocifensive behavior (phase 2). The phenomenological similarities between these behavioral alterations and reported signs of facial pain (i.e., responses to noxious stimulation of the face) suggest the presence of dysesthesia/paresthesia and mechanical allodynia in the ligated IoN territory.

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat&#8217;s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.

Chronische Verengung Verletzung des Ratten N. infraorbitalis (Ionen CCI) zu Trigeminal Neuropathischer Schmerz Studieren

Animal models are important tools to study the pathophysiology and pharmacology of neuropathic pain. This manuscript describes the surgical and behavioral ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and fluid retention. Changes in myocardial structure, electrical conduction, and energy metabolism develop with heart failure, leading to contractile dysfunction, increased risk of arrhythmias, and sudden death. Hypertensive heart disease is one of the key contributing factors of cardiac remodeling associated with heart failure. The most commonly-used animal model mimicking hypertensive heart disease is created via surgical interventions, such as by narrowing the aorta. Abdominal aortic constriction is a useful experimental technique to induce a pressure overload, which leads to heart failure. The surgery can be easily performed, without the need for chest opening or mechanical ventilation. Abdominal aortic constriction-induced cardiac pathology progresses gradually, making this model relevant to clinical hypertensive heart failure. Cardiac injury and remodeling can be observed 10 weeks after the surgery. The method described here provides a simple and effective approach to produce a hypertensive heart disease animal model that is suitable for studying disease mechanisms and for testing novel therapeutics.

A rat model of abdominal aortic constriction that induces cardiac hypertrophy and remodeling is described. An efficient, highly-reproducible, and minimally-invasive method is used to provide a simple yet useful platform for research in myocardial hypertrophy and dysfunction.

Ein Modell der kardialen Remodeling Durch Zusammenziehen der Bauchaorta bei Ratten

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Histological Quantification of Chronic Myocardial Infarct in Rats

Myocardial infarction is defined as cardiomyocyte death due to prolonged ischemia; an inflammatory response and scar formation (fibrosis) follow the ischemic injury. Following the initial acute phase, chronic remodeling of the left ventricle (LV) modifies the structure and function of the heart. Permanent coronary ligation in small animals has been widely used as a reference model for a chronic model of MI. Thinning of the infarcted wall progressively develops to transmural fibrosis. Histological assessment of infarct size is commonly performed; nevertheless, a standardization of the methods for quantification is missing. Indeed, important methodological aspects, such as the number of sections analyzed and the sampling and quantification methods, are usually not described and therefore preclude comparison across investigations. Too often, quantification is performed on a single section obtained at the level of the papillary muscles. Because novel strategies aimed at reducing infarct expansion and remodeling are under investigation, there is an important need for the standardization of accurate heart sampling protocols. We describe an accurate method to quantify the infarct size using a systematic sampling of harvested rat heart and image analyses of trichromatic stained histological sections obtained from base to apex. We also provide evidence that calculating the expansion index (EI) allowed for infarct size assessment, taking into account changes of the left ventricle throughout the remodeling.

The post-mortem assessment of myocardial infarction (MI) in rodents is based on quantification of the infarct on stained heart sections. We describe an accurate method to quantify the infarct size using systematic sampling of harvested rat hearts from base to apex and image analyses of trichrome-stained histological sections.

Die histologische Quantifizierung der chronischen Myokardinfarktes bei Ratten

Myocardial infarction is defined as cardiomyocyte death due to prolonged ischemia; an inflammatory response and scar formation (fibrosis) follow the ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard open-chest transverse aortic constriction (TAC). Although transverse aortic constriction is a highly functional method for the induction of high pressure in the left ventricle, it is a more difficult and lengthy procedure due to its use of artificial ventilation with tracheal intubation. TAC is oftentimes also less survivable, as the newer method, MTAC, neither requires the cutting of the ribs and intercostal muscles nor tracheal intubation with a ventilation setup. In MTAC, as opposed to a thoracotomy to access to the chest cavity, the aortic arch is reached through a midline incision in the anterior neck. The thyroid is pulled back to reveal the sternal notch. The sternum is subsequently cut down to the second rib level, and the aortic arch is reached simply by separating the connective tissues and thymus. From there, a suture can be wrapped around the arch and tied with a spacer, and then the sternal cut and skin can be closed. MTAC is a much faster and less invasive way to induce left ventricular hypertension and enables the possibility for high-throughput studies. The success of the constriction can be verified using high-frequency trans-thoracic echocardiography, particularly color Doppler and pulsed-wave Doppler, to determine the flow velocities of the aortic arch and left and right carotid arteries, the dimension of the blood vessels, and the left ventricular function and morphology. A successful constriction will also trigger significant histopathological changes, such as cardiac muscle cell hypertrophy with interstitial and perivascular fibrosis. Here, the procedure of MTAC is described, demonstrating how the resulting flow changes in the carotid arteries can be examined with echocardiography, gross morphology, and histopathological changes in the heart.

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) conserves the essentials of regular transverse aortic constriction (TAC) while eliminating the use of a ventilator with tracheal intubation. It proves to be a highly desirable method for high-throughput studies on left ventricular overload, particularly in translational studies.

Minimal Invasive Quer Aortakonstriktion bei Mäusen

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

Subcutaneous Trigeminal Nerve Field Stimulation for Refractory Facial Pain

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. Neuromodulation techniques for chronic facial pain include deep brain stimulation and motor cortex stimulation, which are complex to perform. Subcutaneous nerve field stimulation is certified for chronic back pain and is the least invasive form of neuromodulation. We applied this technique to treat chronic and neuropathic trigeminal pain as an individual therapy concept. First, trial stimulation is performed. Subcutaneous leads are placed in the painful trigeminal dermatome under local anesthesia. The leads are connected to an external neurostimulator that applies constant stimulation. Patients undergo a 12 day outpatient trial to assess the effect of the stimulation. Electrodes are removed after the trial. If the patient reports pain reduction of at least 50% in intensity and/or attack frequency, a reduction in medication or increase in quality of life, permanent implantation is scheduled. New electrodes are implanted under general anesthesia and are subcutaneously tunneled to an infraclavicular internal pulse generator. Patients are able to turn stimulation on and off and to increase or decrease the stimulation amplitude as needed.
This technique represents a minimal invasive alternative to other more invasive means of neuromodulation for trigeminal pain such as motor cortex stimulation or deep brain stimulation.

Treating chronic or neuropathic facial pain can be challenging when medical or standard treatment fails. Subcutaneous nerve field stimulation is the least invasive form of neuromodulation and is used for chronic back pain. We applied this technology to treat chronic and neuropathic trigeminal facial pain.

Subkutane Trigeminus-Nerven-Feld-Stimulation für refraktäre Gesichtsschmerzen

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. ...

Development of Recombinant Proteins to Treat Chronic Pain

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates for treating debilitating pain conditions due to their capacity to regulate aberrant neuro-immune interactions. However, physiologically they work in a network of various cytokines, and therefore their therapeutic effect may not be optimal when used as stand-alone drugs. To overcome this limitation, we developed a fusion protein of the anti-inflammatory cytokines IL4 and IL10. Here, we describe the methods for production and quality control of IL4-10 recombinant fusion protein and we test the effectiveness of the IL4-10 fusion protein to resolve pain in a mouse model of persistent inflammatory pain.

In this paper we provide details for the methods of production and quality control of an IL4-10 recombinant fusion protein. We also show how to test the effectiveness of this protein to resolve pain in a mouse model of inflammatory pain.

Entwicklung von rekombinanten Proteinen zur Behandlung von chronischen Schmerzen

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates ...