大鼠视网膜下注射和视网膜脱离的术中可视化

我正在探索视网膜脱离中细胞死亡的机制，我的目标是确保体外数据对体内实验的可追溯性。在我们的团队中，我们证明了不同细胞死亡机制在感光器变性过程中的参与。已经描述了许多方法可以诱导啮齿动物的视网膜脱离。

该方案旨在应对两个挑战，即可重复性和安全性。在视网膜脱离中提供可重复且安全的方案将确保此类研究的效率。首先，将粘合在 25 微升注射器上的非斜面 10 毫米 30 号套管金属尖端安装到微型注射器上。

为了诱导长期视网膜脱离，使用 2% 羟丙基甲基纤维素或 1% 至 5% 透明质酸钠。将准备好的溶液装入注射器中。接下来，将一滴 0.5% 托吡卡胺滴在麻醉大鼠的一只眼睛上以获得瞳孔散大。

将一滴奥布卡因滴在要手术的眼睛中。使用连接到脚踏开关的眼科显微镜进行手术。为了暴露巩膜，将两根眼睑拉缝线固定在上下眼睑睑缘的外侧四分之一。

拉动缝合线以实现眼睛的轻柔凸出。用 30 号针头，在距离角膜缘约 1 至 2 毫米处通过颞球结膜创建一个巩膜通道。在整个手术过程中使用泪液凝胶作为晶状体眼接口。

要使视网膜板可视化，请将直径为 8 毫米的平面隐形眼镜放在眼睛表面。使用显微镜的脚踏开关聚焦在视网膜平面上。现在，将套管垂直插入预先形成的巩膜通道。

慢慢接近视网膜并轻轻按压，直到观察到视网膜变白。通过注射液流形成的视网膜切开术注射时保持尖端稳定性注射后，从视网膜切开术中取出尖端。然后，轻轻地将整个套管从玻璃体腔中取出，确保不接触晶状体。

确保视网膜脱离改变了瞳孔红反射，而不观察玻璃体腔内的血流。取下眼睑缝合线，然后小心擦拭出血。手动简要评估眼压。

对于术后护理，将氯霉素视黄醇眼膏涂抹在手术眼上。然后，腹膜内注射 1 毫升 5% 葡萄糖一水合物。皮下注射每公斤阿替美唑 0.9 毫克。

最后，将动物转移到温控室并对其进行监测，直到它醒来。通过光学相干断层扫描中透明视网膜下液和眼底照相中无视网膜下出血验证了视网膜下注射成功。并且在两种模式下都观察到明显的视网膜脱离。

偶尔观察到轻微的玻璃体内出血，主要在注射部位附近，但未扩散到视网膜下间隙。