监测成人 果蝇 肠道的肠道酸化

这是监测果蝇肠道酸化的最快和最正确的方案，具有强大而真实的结果。这种方法将有助于确定肠道酸化在多种生物体中的作用。而这种现象就是这种技术的简单性是主要优点。

因此，它可以用于非模式生物。该方法可以监测许多系统的酸释放，包括细胞系和活培养物上的3D。这种技术很简单，而且用最少的力气。

含有溴酚蓝的食物应新鲜烹制。此外，虽然解剖肠道不应拉伸。开始安排肠道酸化监测测定，用pH传感溴酚蓝或BPB染料制备苍蝇食物。

为此，将苍蝇食物放入微波炉中融化，让它冷却直至温热。将一毫升4%BPB加入一毫升温热食品中，搅拌均匀。使用移液器，将含有BPB的苍蝇食物添加到培养皿中心的约200微升的单点中。

接下来，收集0至2天大的非处女雌性果蝇黑色素蝇，并让苍蝇在标准玉米粉食物中恢复。在实验之前，在室温下将苍蝇饿死在装有约两毫升去离子水的实验室擦拭组织的小瓶中24小时。将饥饿的苍蝇转移到含有新鲜制备的苍蝇食物的单点的培养皿中，补充2%BPB，让苍蝇在室温下觅食四小时，同时暴露在光线下。

四小时后收集苍蝇，然后在体视显微镜下用镊子在1X PBS中手术分离麻醉苍蝇的内脏。计算显示强大的BPB站在肠道中的苍蝇的数量，并使用等式计算百分比。解剖后，将PBS中的样品安装到载玻片上，并将准备好的载玻片放在显微镜下。

然后使用 IPS 调整焦点。完成后，关闭IPS以打开相机的快门。在肠道解剖后，发现一些果蝇黑色素食蝇雌性苍蝇产生酸，如肠道CCR中的黄色所示。

而一些苍蝇的肠子是蓝色的，这表明苍蝇未能酸化它们的肠道。在30分钟内，大约20%的苍蝇使肠道酸化。一小时后，40%的肠道内脏显示酸化，而在喂食两到三个小时后，酸化内脏的百分比增加到60%至70%当苍蝇喂食四小时时，几乎90%至95%的内脏被酸化。

在两种不同的温度条件下，没有观察到肠道酸化的差异。在各种果蝇物种中评估了肠道酸化方案的效率。所有测试物种都显示出强烈的肠道酸化，这表明该协议可以应用于其他生物体。

要记住的最重要的事情是将星蝇放入带有酵母和溴酚蓝的培养皿中四个小时。该技术将有助于了解参与肠道酸化的基本生物学和细胞途径。它还应该有助于确定药物靶点，以产生与肠道酸化相关的疾病。