该方法为研究右心室失效机理提供了一种有用的技术。该技术的主要优点是节省时间,提高手术成功率。这种技术可以帮助我们模仿右心肥大和失败在人类通过收缩肺动脉,以产生一个脉动压力过载。
该方法可应用于横向大体收缩技术,可对心脏移植后并发症和先天性心脏病研究提供见解。手术将由我实验室的技术人员黄晓霞演示。在开始手术之前,通过从一毫升注射器中拆卸的 25 量针通过一块 6-0 编织的丝缝。
使用止血钳将针头弯曲 90 度。然后弯曲 22 表针 120 度。在确认对脚趾捏没有反应后,将麻醉小鼠放在37摄氏度加热垫上的上角位置,用缝合固定切口。
用胶带固定四肢,并使用脱毛霜将头发从颈部去除至西腓过程。用连续碘和75%乙醇湿巾对裸露的皮肤进行消毒,并使用尖钳稍微提取舌头。用定制的铲子提升毛骨力,以暴露球状,并使用冷光源引导小心插入定制气管管通过球状。
调整迷你呼吸机参数,将呼吸速率设置为每分钟 150 次呼吸,潮汐量为 300 微升。然后连接管子和呼吸机,以确认在用胶带固定导管之前,管和呼吸机已正确插入。要打开胸部,请制作一个与第二根肋骨平行约 10 毫米的皮肤切口。
使用剪刀和肘钳将胸腔和第二个间空间上方的胸腔和小肌肉分开。从胸角数一数肋骨,以识别第二个成本间空间,并使用剪刀打开此空间。然后钝分开的胸腺和胸腺,直到肺干是可见的。
为了收缩肺动脉,使用肘钳钝分离肺干和上升主动脉。使用 90 度闩锁针通过肺干和上升主动脉之间的结缔组织通过缝合线。将 120 度填充针放在肺干干上。
使用 6-0 编织的丝线缝合将填充针装到肺干,在观察肺锥填充后立即取出填充针。切割缝合线两端,并继续观察肺锥的填充,以评估是否存在收缩。然后再次评估动物的踏板反射,以确保结扎的成功,并关闭胸部和皮肤与5-0尼龙缝合线。
手术后至少三天,在肺动脉收缩动物的胸部涂抹超声波凝胶。将 30 兆赫探头放在胸前,逆时针位置 30 度,相对于左侧副星线,同时将槽口定向到凹槽方向。在 B 模式下调节 Y 轴和 X 轴,直到斜阀、主主管和左心室清晰可见。
将探头在其 Y 轴上旋转 30 到 40 度,朝向胸部旋转。调节 Y 轴和 X 轴,直到肺锥清晰可见,并将光标放在肺瓣单的尖端,以测量峰值流速。选择颜色和 PW,将脉冲波虚线平行于血流方向。
调整垫的左侧,使其高于右侧,使探头沿右侧内部轴线向地平线方向保持 30 度,缺口指向凹槽方向。调节 X 轴和 Y 轴,直到右心室清晰可见。然后单击 M 模式两次以显示指标线。
手术八周后,如证明,插管小鼠,并通过隔膜在西腓体下做一个1.5厘米的双边切口,以打开胸腔。切开肋骨以暴露心脏,并使用23测量针穿透右心室自由壁。用棉签轻轻按压穿刺点以止血,并使用导管尖端刺穿伤口的心室。
当曲线稳定时,调节导管尖端向右心室流出。单击选择并分析右心室收缩压和舒张压、最大上升速率、指数时间常数放松和心率 10 分钟。然后将导管从心脏转移到盐水容器中。
与Sham组相比,在肺动脉收缩组手术后八周内,从准星长轴视图获得更高的峰值速度、更大的压力梯度和更大的右心室壁厚。此外,与手术后八周的Sham组相比,右心室的收缩功能在肺动脉收缩组显著降低。肺动脉收缩组在囊肿和胆囊中具有较高的右心室压力,与Sham组相比,收缩指数降低。
右心室Tau和最大上升速率在肺动脉收缩组也大于在沙姆组。证明右心室功能障碍在小鼠在肺动脉带状八周后诱发。右心室的侵入性血动力测试显示,在导管监测之前和之后,心率保持稳定。
与沙姆组相比,右心室尺寸明显增大,右心室重量较高。此外,组织学检查表明,心肌细胞覆盖区域的心脏纤维化在肺动脉收缩组比沙姆组更大。手术中最重要的部分是确保肺动脉正确和完全分离。
为了避免不正确的分离,分离点应靠近肺动脉的分支,其中动脉之间的结缔组织将松散。通过这种方法,我们提供了一种更方便、更高效的诱导右心室肥大的方法。一般来说,外科手术和评估方法是非常安全的。