吸收性微活检取样和 rna 提取用于微创同时进行血液和皮肤分析

该方法可促进皮肤病生物标记的建立，降低临床研究参与者的风险。这种技术的主要优点是，它不需要强化训练，它不会留下任何疤痕。微生物发生前五分钟，将一个空的两毫升离心管放在干冰上五分钟。

戴上一次性手套，用70%乙醇喷洒手和工具，然后用酒精擦拭消毒应用现场。从灭菌伽马辐射包中去除微活检，无需接触微键并拉动柱塞，直到听到咔嗒声，柱塞锁定到位。将加载的设备对向要取样的皮肤的大致垂直角度，注意采样区域处于固定位置，并在至少一公斤力范围内将设备涂抹在皮肤上。

然后按下触发器，将设备保持到位至少 10 秒钟。如果设备在十秒钟前释放，血液吸收和随后的分析变异的可能性更高。当样品被吸收后，轻轻地从外壳上拉出柱塞和吸水微需要，并使用无菌钳子拉上微孔的两个孔，将其从柱塞上拆下。

在干冰的管子上加入50微升的萃取缓冲液，并将完整的微针放在干冰针一侧的管子中。在拆卸过程中，注意不要让微针尖接触任何东西。旋转管3至5秒，从微针尖收集一些样品材料，并在热块或水浴中孵育管，在42摄氏度下孵育30分钟。

在孵育结束时，使用无菌钳子将微眼水平的背面与微管的上边缘放置，并合上管盖，使微眼的顶部在盖和管之间固定到位。离心管从设备的吸收层收集取样的材料，并使用钳子小心地去除微针，而不将尖端浸入缓冲液中。再次将样品离心，小心地将上一液转移到新的微型离心管中。

接下来，在纯化柱滤膜上加入250微升调节缓冲液，在室温下孵育5分钟，通过离心稀释缓冲液。将 50 微升 70% 乙醇加入提取的 RNA 样品中，轻轻混合，将混合物转移到预置纯化柱中。立即离心管两次通过，然后洗涤在一百微升的洗涤缓冲器一。

对于DNA消化，将40微升新鲜准备好的DNA孵育混合物直接加入纯化柱膜，在室温下孵育15分钟，然后用40微升洗涤缓冲液清洗。在离心结束时，用 100 微升洗涤缓冲液 2 清洗柱，并检查净化柱中是否有残留的洗涤缓冲液。将纯化柱转移到RNA提取试剂盒中提供的0.5毫升微离心管中，并将移液器的尖端直接放在纯化柱的膜上，向该柱中加入11微升RNA sPRE水。

在室温下孵育两分钟后，将柱离心一次，将RNA sPRE水分布到整个柱中，并一次将RNA分给。然后，如果cDNA合成不立即执行，将总RNA样本储存在零下80摄氏度。吸水性微生物微需要由两层钢板组成，其中有一个吸水层，用于同时对皮肤和血液进行采样。

使用吸水性微生物化只诱发轻微的红斑，48小时后不明显。穿刺后，在微针尖附近捕获几小块皮肤，血液被吸收到滤纸中。当吸水微针在穿刺后立即被移除时，样品体积和随后的提取mRNA量明显低于穿刺后持有十秒钟后获得的样品体积和随后的量。

通过使用吸收性微生物群病及其前身皮肤微生物群菌后，通过定量 PCR 分析检测到类似的皮肤标记表达水平。但是，在吸收性微生物样本采样后检测到的白细胞生物标记表达水平显著提高，这表明吸水性微生物群杀菌在血液采集方面表现更好，同时保持与皮肤微生物群细胞捕捉相同的皮肤样本捕获能力。因此，在应用该技术时，必须记住，根据我们建议应用设备对于获得可靠的结果至关重要。

因此，按照这个程序，其他方法，如实时PCR，可以遵循相对基因表达分析。虽然我们还在开发该设备，但我们相信，该技术已经为进行采样、皮肤科美容或儿科应用的临床研究铺平了道路，因为它非常简单，而且具有微创性。