蜂蜜蜂 (api 蜜蜂) 中下咽腺性腺泡大小的测定

该方法有助于回答蜜蜂营养领域有关营养不良与低脑腺生长发育之间联系的一些关键问题。这种技术的主要优点是，人们可以使用它轻松地染色，可视化和测量蜜蜂低脑膜腺。一般来说，新到这种方法的个体将挣扎，因为下分泌腺体可能难以定位和解剖没有视觉指导。

在开始手术之前，将融化的冷却设置蜡倒入玻璃培养皿中。将 20 微升新鲜准备好的 Giemsa 污渍加入一个井中，将 50 到 100 微升盐水加入一个显微镜幻灯片的相邻井中，每个护士工人蜜蜂要加工。蜡设置后，使用10毫米微弹簧剪刀将头部从第一蜜蜂中取下，并使用钳子、解剖显微镜和蜡雕笔将头部正面嵌入蜡解剖板中。

在眼睛和嘴上插入针脚，将头部固定在板上，并使用固定在针脚上的锋利、易碎剃刀刀片，在面板两侧的眼睛和下部物体之间进行两到三毫米的切口。轻轻运行面板下的微型剪刀，切断天线和大脑之间的天线神经。使用细钳，抓住嘴边的面板，用细点钳和针将组织面朝下固定到蜡上。

接下来，将 20 微升 PBS 移液器移液到头部的开面上。下分泌腺体看起来像一串珍珠，如果完好无损，位于大脑顶部。使用超细点钳，轻轻收获一个腺体，立即浸入显微镜幻灯片上的Giemsa污渍中。

经过五分钟的孵育，将腺体转移到同一张幻灯片上的盐水池中，必要时用微型剪刀将腺体切割成显微镜下的小块。要测量腺体，请打开光学显微镜的测量程序，然后选择 10 倍的放大倍率。将幻灯片放在显微镜舞台上，并通过眼片手动定位腺体。

将放大倍率提高至 60 到 80 倍，并在新的放大倍率下手动调整腺体的焦点。进一步调整监视器上实时图像上的腺体焦点，并在图像名称框中输入图像名称和示例描述。单击"获取图像"可获取腺体图像，在"分析"选项卡下，选择"区域"工具，并在"显示"选项卡下取消"值"。

单位也将取消选择。将所有其他设置设置为默认值。要测量阿西尼，请连续单击或按住鼠标左键，同时尽可能小心地跟踪一个青霉素周长。

测量单个图像中的所有 acini 后，选择"创建报告"，确认已选择相应的选项，然后单击"导出"。然后以适当的格式保存报告，并酌情清理工作区和材料。在未沾污的组织中，很难找到适当的对比度和定义的边缘。

在染色的肾上腺中，由于染色组织和白色背景之间的对比度改善，阿西尼的边缘非常锋利。与单独喂蜂蜜的蜜蜂相比，在与花粉混合的蜜蜂中，低分腺会随着时间而生长。低脑腺的大小对提供的花粉类型也敏感。

例如，蜜蜂喂养沙漠或杏仁花粉显示大小相当的腺体，而蜜蜂喂养东南花粉饮食显示腺体比蜂蜜单独喂养蜜蜂大，但比蜜蜂喂养杏仁或沙漠花粉的腺体小。在尝试这个程序时，重要的是要记住仔细解剖腺体，不要过度或污渍。不要忘记，使用Giemsa污渍可能是危险的，预防措施，如保持污渍远离火焰，使用适当的处置，以及戴手套和眼睛保护应始终采取执行此程序。