脊髓损伤后压力溃疡的小鼠模型

本研究的总体目标是研究脊髓损伤对动物模型压力溃疡发育和愈合动力学的影响。这种技术的主要优点是，它不损害动物的运动，是非常可重复的。该模型为研究伤口愈合动力学和测试SCI患者的各种治疗策略提供了一个平台。

在开始手术之前，由于对尾部捏紧缺乏反应，确保适当的麻醉。用电剪子把头发剃在多夫苏姆上。然后涂抹脱毛霜，离开三分钟，取出剩余的头发。

三分钟后，用湿磨砂去除脱毛霜，并同样清洗多苏姆。然后把动物还到笼子里第二天，对动物进行麻醉，并在角膜上涂抹眼科软膏，以保护眼睛在外科手术期间不干燥。

然后，用贝塔丁磨砂和70%乙醇擦洗动物皮肤三次。切口前，使用25量针注射器在切口部位周围注射100微升0.125%的百吉瓦卡因作为镇痛。从对应于 T13 的浮动肋骨中倒数，以识别 T8 到 T12。

在创建一到1.5厘米的切口后，沿着中线，在背面，在T8至T12椎骨的水平清除皮下脂肪组织，以访问半脊髓肌肉。然后慢慢解剖它们，以暴露两侧的旋转过程和层压。非常关键的是，要非常小心地做这个程序，以避免过度出血和脊髓的任何损伤。

对T9至T10椎骨进行拉明切除术，使用微解剖钳轻轻剥去脊髓，露出脊髓。使用钳子固定和抬起 T8 的脊柱，以夸大脊柱曲率。然后，使用细剪刀将T9和T10椎骨之间的脊髓一直截断到椎道的地板，以确保完全转液。

在手术显微镜下观察完全转液后，在手术位点关闭前在拉明切除术位上涂抹一片皮下脂肪，为脊髓提供额外的保护。最后，关闭伤口，缝合副椎肌肉和表面筋膜。然后使用缝合夹关闭皮肤。

SCI 手术后，立即用贝塔丁和 70% 酒精擦洗动物的背部。对于脊髓损伤位点以下的压力性溃疡，使用 25 量表针在背皮的椭圆中注射 10 微升 0.125%bupivacaine 溶液，距离囊体点 0.5 到 1 厘米。轻轻抬起鼠标背面的皮肤褶皱，将其夹在两个磁盘之间。

磁铁应用后，立即将动物返回到放置在加热垫上的单个笼子，直到完全恢复知觉。经过12小时的磁铁应用轻轻麻醉动物与异氟烃和去除磁铁。拍摄伤口点的照片，记录压力性溃疡在零时间点的初始外观。

用透明敷料覆盖伤口，避免干燥或污染。单屋动物按照程序。手术后立即给动物注射0.9%盐水的毫升水化剂和丁丙诺啡SR注射镇痛剂。

每天进行两次手动膀胱排空。脊髓损伤手术后七天取出手术夹。在脊髓损伤和皮肤压力溃疡诱导后，在所需的时间点从安乐死小鼠身上收集受伤的皮肤样本。

在 10% 正式中修复 24 小时。24小时后转移到70%乙醇，储存在4摄氏度，直到分段。这张图片描绘了在磁体去除后第三天控制动物的表皮消失。

箭头指示上皮衬里变薄的表皮伤口边缘。在对照动物中，表皮在第七天再次出现。对于在SCI水平以下创建的伤口，在SCI小鼠中，迁移速度明显较慢。

在这里，该图描绘了与对照小鼠相比，SCI小鼠伤口愈合和闭合速度较慢。Ki67的免疫着色是红箭头指示的增殖细胞的标记，它揭示了SCI组中的增殖较少。CD31的染色，红色箭头指示的血管标记，揭示了SCI组的血管密度较低。

最后，对α平滑肌肉作用素的免疫抑制揭示了SCI小鼠皮肤伤口中这种蛋白质的较低水平。在尝试此过程时，重要的是要记住正确放置磁铁，以形成两个圆形伤口，由完整的皮肤分开。这将减少伤口发育和愈合的变异性。

脊髓损伤患者的皮肤压力溃疡给美国医疗系统带来了巨大的成本。这种动物模型提供了一个平台，用于测试各种治疗策略，以帮助脊髓损伤患者的压力溃疡愈合。