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<em>In ovo</em> Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

Dopaminergic neurons located in the ventral midbrain control movement, emotional behavior, and reward mechanisms1-3. The dysfunction of ventral midbrain ...

Children's Hospital of Chicago Research Center

Northwestern University Feinberg School of Medicine

&#x6807;&#x9898;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; &#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x3001; &#x56DB;&#x6C34; mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4&#39;:2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N&#39;;2kappa(2)N,N&#39;-dicopper(II) [Cu2(C4H3O5)(NO3) (C12H8N2) 3] (NO3).4H2O&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x53CC;&#x6838;&#x94DC;&#x4E0E;&#x94DC; (&#x82AC;&#x51CF;&#x80A5;&#x836F;&#x6765;&#xFF09; 2 &#x548C; Cu(phen)(NO3) &#x4E2D;&#x95F4;&#x76F8;&#x9694; &#xFF08;&#x82AC;&#x51CF;&#x80A5;&#x836F;&#x6765;&#x662F; 1&#xFF0C;10-&#x83F2;&#x7F57;&#x5549;&#xFF09; &#x7531;&#x82F9;&#x679C;&#x9178; (2 hydroxybutanedioate) &#x914D;&#x4F53;&#x6865;&#x8054;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53CC;&#x5F25;&#x5408;&#x548C;&#x4F4D;&#x7EDC;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x53CC;&#x5F25;&#x5408;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5411;&#x4E24;&#x4E2A;&#x94DC;&#x539F;&#x5B50;&#xFF0C;&#x94DC;&#x82F9;&#x679C;&#x9178;&#x4E00;&#x7FA7;&#x9178;&#x76D0;&#x96C6;&#x56E2;&#x7684; O &#x539F;&#x5B50;&#x76F4;&#x63A5;&#x534F;&#x8C03;......&#x94DC;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x662F;&#x53EA;&#x6709; 4.199 (1) &#x57C3;&#x548C;&#x82AC;&#x51CF;&#x80A5;&#x836F;&#x6765;&#x4E24;&#x67B6;&#x98DE;&#x673A;&#x90FD;&#x662F;&#x5927;&#x81F4;&#x5E73;&#x884C; [interplanar &#x7684;&#x6700;&#x77ED;&#x8DDD;&#x79BB;&#x662F; 3.28 (1) &#x57C3;]&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5185; pi pi &#x5806;&#x53E0;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;

[{}] Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)(NO3).4H2O&#xFF1A; &#x82F9;&#x679C;&#x9178;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x53CC;&#x6838;&#x94DC;&#x914D;&#x4F4D;&#x7EDC;&#x5408;&#x7269;&#x548C; dibridging &#x7684;&#x4F53;&#x3002;

The crystal structure of the title compound, mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4':2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N';2kappa(2)N,N'-dicopper(II) nitrate tetrahydrate, [Cu2(C4H3O5)(NO3)(C12H8N2)3](NO3).4H2O, contains an unsymmetrical dinuclear copper complex with Cu(phen)2 and Cu(phen)(NO3) moieties (phen is 1,10-phenanthroline) bridged by a malate (2-hydroxybutanedioate) ligand, which acts as a double-bridging and tetradentate ligand. As a result of this double-bridging action, especially the direct coordination of the O atom of one carboxylate group of malate to the two Cu atoms, the Cu...Cu distance is only 4.199 (1) Angstrom and the two phen planes are roughly parallel [the shortest interplanar distance is 3.28 (1) Angstrom], exhibiting an obvious intramolecular pi-pi stacking interaction.

[{Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)}](NO3).4H2O: malate acting as a tetradentate and dibridging ligand in a dinuclear copper complex.

La structure cristalline du compos&eacute; mentionn&eacute; dans le titre, mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4&#39;:2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N&#39;;2kappa(2)N,N&#39;-dicopper(II) nitrate t&eacute;trahydrat&eacute;, [Cu2(C4H3O5)(NO3) (C12H8N2) 3] (NO3) .4H2O, contient un dinucl&eacute;aires asym&eacute;trique cuivre complexes avec Cu (phen) 2 et les fractions Cu(phen)(NO3) (phen est 1, 10-ph&eacute;nanthroline) combl&eacute;es par un ligand de malate (2-hydroxybutanedioate), qui agit comme un ligand d&#39;un double-pont et t&eacute;tradentate. Suite &agrave; cette action double-pont, en particulier la coordination directe de l&#39;atome d&#39;oxyg&egrave;ne d&#39;un groupement carboxylate de malate aux deux atomes de Cu, Cu...Distance Cu est seulement 4.199 (1) Angstrom et les deux plans de phen sont &agrave; peu pr&egrave;s parall&egrave;les [la plus courte distance interplanaires est 3.28 (1) Angstrom], montrant une interaction d&#39;empilement intramol&eacute;culaires &eacute;vidente de pi-pi.

[{Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)}](NO3) .4H2O : malate agissant comme un ligand t&eacute;tradentate et dibridging dans un complexe du cuivre dinucl&eacute;aires.

Die Kristallstruktur des Titels zusammengesetzte, mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4&#39;:2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N&#39;;2kappa(2)N,N&#39;-dicopper(II) Nitrat Tetrahydrat, [Cu2(C4H3O5)(NO3) (C12H8N2) 3] (NO3) .4H2O, enth&auml;lt eine unsymmetrische Dinuclear Kupfer Komplex mit Cu (Phen) 2 und Cu(phen)(NO3) Adsorptionseigenschaften (Phen ist 1,10-Phenanthrolin) &uuml;berbr&uuml;ckt durch ein Ligand Malat (2-Hydroxybutanedioate), die als ein Doppel-bridging und vierz&auml;hniger Ligand fungiert. Infolge dieser Doppel-&Uuml;berbr&uuml;ckung Aktion, vor allem die direkte Koordination des O-Atoms eine carboxylat-Gruppe von Malat zu zwei Cu Atome, die Cu...Cu Entfernung betr&auml;gt nur 4.199 (1) Angstrom und den beiden Phen-Ebenen sind etwa parallel [die k&uuml;rzeste interplanar Entfernung ist 3,28 (1) Angstrom], pr&auml;sentiert eine offensichtliche intramolekulare Pi-Pi-Stapeln-Interaktion.

[{Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)}](NO3) .4H2O: Malat als vierz&auml;hniger und Dibridging Ligand in ein Dinuclear Kupferkomplex.

La struttura di cristallo del titolo composto, mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4&#39;:2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N&#39;;2kappa(2)N,N&#39;-dicopper(II) nitrato tetraidrato, [Cu2(C4H3O5)(NO3) (C12H8N2) 3] (NO3) .4H2O, contiene un asimmetrico diciclici complesso con Cu (phen) 2 e Cu(phen)(NO3) moiety (phen &egrave; 1,10-fenantrolina) colmato da un ligando di Milia (2-hydroxybutanedioate), che agisce come un ligando double-bridging e tetradentate rame. Come risultato di questa azione doppia-bridging, soprattutto il diretto coordinamento dell&#39;atomo O di uno dei gruppi carbossilato del malato a due atomi di Cu, il Cu...Distanza cu &egrave; solo 4.199 (1) Angstrom e i due piani phen sono all&#39;incirca paralleli [la distanza pi&ugrave; breve interplanar &egrave; 3,28 (1) Angstrom], esibendo un&#39;interazione impilamento intramolecolari ovvio pi-pi.

[{Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)}](NO3) .4H2O: Milia che agisce come un ligando tetradentate e dibridging in un rame diciclici complesso.

&#x8868;&#x984C;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3001;mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4&#39;:2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N&#39;;2kappa(2)N,N&#39;-dicopper(II) &#x785D;&#x9178;&#x56DB;&#x6C34;&#x548C;&#x7269;&#x3001;[Cu2(C4H3O5)(NO3) (C12H8N2) 3] &#xFF08;NO3&#xFF09; .4H2O&#x3001;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x8907;&#x6838;&#x8907;&#x5408; Cu (phen) 2 &#x3068;&#x67B6;&#x6A4B;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B4;&#x9178; &#xFF08;2-hydroxybutanedioate) &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; (phen &#x306F; 1, 10-&#x30D5;&#x30A7;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;) Cu(phen)(NO3) &#x9396;&#x306F;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB; &#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8;&#x3068; tetradentate &#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9285;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB; &#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8; &#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E; Cu &#x539F;&#x5B50; Cu &#x30DE;&#x30E9;&#x30C6;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30F3;&#x9178;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E; O &#x539F;&#x5B50;&#x306E;.Cu &#x8DDD;&#x96E2;&#x3067;&#x3059; 4.199 &#x306E;&#x307F; (1) &#x30AA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x5E73;&#x9762;&#x307B;&#x307C;&#x5E73;&#x884C;&#x3067;&#x3042;&#x308B; [&#x6700;&#x77ED;&#x8DDD;&#x96E2; 3.28 (1) &#x306F;&#x30AA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;]&#x3001;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x5185; &pi;-&pi; &#x30B9;&#x30BF;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x51FA;&#x5C55;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[{Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)}]&#xFF08;NO3&#xFF09; .4H2O: &#x30DE;&#x30E9;&#x30C6;&#x3067;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x4E8C;&#x6838;&#x9285; tetradentate &#x3068; dibridging &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC81C;&#xBAA9; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;, mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4&#39;:2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N&#39;;2kappa(2)N,N&#39;-dicopper(II) &#xC9C8;&#xC0B0;&#xC5FC; tetrahydrate [Cu2(C4H3O5)(NO3) (C12H8N2) 3] (NO3).4H2O, &#xB2E8;&#xC0C1; dinuclear &#xAD6C;&#xB9AC; Cu (&#xC911;&#xB3C5;) 2&#xC640; Cu(phen)(NO3) moieties (&#xC911;&#xB3C5;&#xC740; 1,10-phenanthroline) malate (hydroxybutanedioate 2) &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xB97C; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB354;&#xBE14; &#xBE0C;&#xB9AC;&#xC9D5; &#xBC0F; tetradentate ligand&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC774;&#xC911;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xB97C; &#xB193;&#xB294; &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C;, &#xD2B9;&#xD788; &#xB450; Cu &#xC6D0;&#xC790;&#xB294; Cu malate&#xC758; &#xCE74;&#xBCF5;&#xC2E4;&#xC0B0; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; O &#xC6D0;&#xC790;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC870;&#xC815;...Cu &#xAC70;&#xB9AC;&#xAC00; 4.199 (1) Angstrom&#xC640; &#xB450; phen &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xB294; &#xB300;&#xB7B5; &#xBCD1;&#xB82C; [&#xC9E7;&#xC740; interplanar &#xAC70;&#xB9AC;&#xB294; (1) 3.28 Angstrom], &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; intramolecular pi-&#xD30C;&#xC774; &#xC2A4;&#xD0DC;&#xD0B9; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;.

[{Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)}](NO3).4H2O: malate &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; dinuclear &#xAD6C;&#xB9AC;&#xC5D0; tetradentate &#xBC0F; dibridging &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xB85C; &#xC5F0;&#xAE30;.

La estructura cristalina del t&iacute;tulo compuesto, mu-2-hydroxybutanedioato-1kappa2O4,O4&#39;:2kappa3O1,O2,O4-nitrato-2kappaO-tris(1,10-phenanthroline)-1kappa(4)N,N&#39;;2kappa(2)N,N&#39;-dicopper(II) nitrato tetrahidrato, [Cu2(C4H3O5)(NO3) (C12H8N2) 3] (NO3) .4H2O, contiene un dinucleares asim&eacute;trica cobre complejo Cu (phen) 2 y partes de Cu(phen)(NO3) (phen es 1, 10-fenantrolina) por un ligando de malato (2-hydroxybutanedioate), que act&uacute;a como un ligando de doble puente y tetradentate. Como resultado de esta acci&oacute;n doble puente, especialmente la coordinaci&oacute;n directa del &aacute;tomo O de un grupo carboxilato de malato a los dos &aacute;tomos de Cu, el Cu...Distancia cu es s&oacute;lo 4.199 (1) Angstrom y los dos planos de la FEN son aproximadamente paralelos [la distancia interplanar m&aacute;s corta es 3.28 (1) Angstrom], exhibiendo una interacci&oacute;n de apilamiento obvio intramolecular pi-pi.

[{Cu(phen)2}(mu-malato){Cu(phen)(NO3)}](NO3) .4H2O: act&uacute;a como un ligando tetradentate y dibridging en un complejo de cobre dinucleares de malato.

&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x54EA;&#x4E9B; proneural &#x57FA;&#x672C;&#x87BA;&#x65CB;-&#x73AF;-&#x87BA;&#x65CB; (bHLH) &#x56E0;&#x7D20;&#x63A7;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x77E5;&#x9053;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5982;&#x4F55;&#x6307;&#x5B9A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5728;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; bHLH &#x56E0;&#x5B50;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7D20; 2 (Ngn2)&#x3001; S231 &#x548C; S234&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x5728;&#x6572;&#x95E8;&#x5230; alanines &#x88AB;&#x7A81;&#x53D8; S231 &#x548C; S234 Ngn2 &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x5927;&#x8111;&#x6B63;&#x5E38;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x89C4;&#x8303;&#x662F;&#x53D7;&#x635F;&#x3002;S231 &#x548C; S234 Ngn2 &#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4FC3;&#x8FDB; LIM homeodomain &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x6307;&#x5B9A;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x4E0E; Ngn2 &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Ngn2 &#x548C; homeodomain &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4F9D;&#x4ECE;&#x53EF;&#x80FD;&#x5176;&#x4E2D; bHLH &#x548C; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x65F6;&#x95F4;&#x4E0A;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0A;&#x96C6;&#x6210;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#xFF0C;&#x5C55;&#x73B0;&#x4E86;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x8C03;&#x8282;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x795E;&#x7ECF; 2 &#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#x3002;

The mechanisms by which proneural basic helix-loop-helix (bHLH) factors control neurogenesis have been characterized, but it is not known how they specify neuronal cell-type identity. Here, we provide evidence that two conserved serine residues on the bHLH factor neurogenin 2 (Ngn2), S231 and S234, are phosphorylated during motor neuron differentiation. In knockin mice in which S231 and S234 of Ngn2 were mutated to alanines, neurogenesis occurs normally, but motor neuron specification is impaired. The phosphorylation of Ngn2 at S231 and S234 facilitates the interaction of Ngn2 with LIM homeodomain transcription factors to specify motor neuron identity. The phosphorylation-dependent cooperativity between Ngn2 and homeodomain transcription factors may be a general mechanism by which the activities of bHLH and homeodomain proteins are temporally and spatially integrated to generate the wide diversity of cell types that are a hallmark of the nervous system.

Regulation of motor neuron specification by phosphorylation of neurogenin 2.

Les m&eacute;canismes par lequel Control facteurs fondamentaux h&eacute;lice-boucle-h&eacute;lice (bHLH) contr&ocirc;lent la neurogen&egrave;se ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s, mais on ne sait pas comment ils pr&eacute;cisent l&#39;identit&eacute; de type cellulaire neuronale. Ici, nous montrons que deux r&eacute;sidus s&eacute;rine conserv&eacute;e sur la neurogenin de facteur bHLH 2 (Ngn2), S231 et S234, sont phosphoryl&eacute;s durant la diff&eacute;renciation des motoneurones. Dans knockin souris dans lequel S231 et S234 de Ngn2 ont &eacute;t&eacute; mut&eacute;s &agrave; biog&eacute;n&eacute;tiquement, neurogen&egrave;se se produit normalement, mais sp&eacute;cification des motoneurones est alt&eacute;r&eacute;e. La phosphorylation de Ngn2 &agrave; S231 et S234 facilite l&#39;interaction entre Ngn2 et facteurs de transcription hom&eacute;odomaine LIM pour sp&eacute;cifier l&#39;identit&eacute; de motoneurones. La coop&eacute;rativit&eacute; phosphorylation d&eacute;pendante entre Ngn2 et hom&eacute;odomaine des facteurs de transcription peut &ecirc;tre un m&eacute;canisme g&eacute;n&eacute;ral par lequel les activit&eacute;s des prot&eacute;ines bHLH et hom&eacute;odomaine sont temporellement et spatialement int&eacute;gr&eacute;es pour g&eacute;n&eacute;rer la grande diversit&eacute; des types de cellules qui sont une caract&eacute;ristique du syst&egrave;me nerveux.

R&egrave;glement de sp&eacute;cification des motoneurones par la phosphorylation de neurogenin 2.

Die Mechanismen, durch welche, die proneural grundlegende Helix-Schleife-Helix (bHLH) Faktoren Neurogenese steuern, haben gekennzeichnet worden, aber es ist nicht bekannt, wie sie neuronaler Zelltyp Identit&auml;t angeben. Hier belegen wir, dass zwei konservierten Serin-R&uuml;ckst&auml;nde auf dem bHLH Faktor Neurogenin 2 (Ngn2), S231 und S234, w&auml;hrend Motoneuron Differenzierung phosphoryliert werden. Knockin &#39; M&auml;use in denen S231 und S234 von Ngn2 zu Alanines mutiert wurden, Neurogenese tritt in der Regel, aber Motoneuron-Spezifikation wird beeintr&auml;chtigt. Die Phosphorylierung von Ngn2 bei S231 und S234 erleichtert die Interaktion von Ngn2 mit LIM Hom&ouml;odom&auml;ne Transkriptionsfaktoren Motoneuron Identit&auml;t angeben. Die Phosphorylierung-abh&auml;ngige Kooperativit&auml;t zwischen Ngn2 und Hom&ouml;odom&auml;ne Transkriptionsfaktoren m&ouml;glicherweise ein allgemeiner Mechanismus, mit dem die Aktivit&auml;ten des bHLH und Hom&ouml;odom&auml;ne Proteine zeitlich und r&auml;umlich um die gro&szlig;e Vielfalt der Zelltypen zu generieren, die ein Markenzeichen des Nervensystems sind integriert sind.

Verordnung von Motoneuron-Spezifikation durch Phosphorylierung von Neurogenin 2.

I meccanismi da cui proneural fattori base helix-loop-helix (bHLH) controllano la neurogenesi sono stati caratterizzati, ma non &egrave; noto come essi specificare tipo di cellule neuronali identit&agrave;. Qui, forniamo prove che due residui di serina conservata sulla neurogenina fattore bHLH 2 (Ngn2), S231 e S234, sono fosforilati durante la differenziazione del neurone del motore. In knockin topi in cui sono stati mutati S231 e S234 di Ngn2 a alanines, neurogenesi si verifica normalmente, ma specifica del motoneurone &egrave; compromessa. La fosforilazione di Ngn2 S231 e S234 facilita l&#39;interazione di Ngn2 con LIM homeodomain transcription factors per specificare l&#39;identit&agrave; del neurone del motore. La cooperativit&agrave; di fosforilazione-dipendente tra Ngn2 e homeodomain transcription factors pu&ograve; essere un meccanismo generale con cui l&#39;attivit&agrave; delle proteine bHLH e homeodomain sono temporalmente e spazialmente integrati per generare la grande variet&agrave; di tipi di cellule che sono un segno distintivo del sistema nervoso.

Regolamento del motoneurone specifica di fosforilazione di neurogenina 2.

&#x3069;&#x306E; proneural &#x3067;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30FB; &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; &#x30FB; &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#xFF08;bHLH) &#x8981;&#x56E0;&#x795E;&#x7D4C;&#x65B0;&#x751F;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x304C;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B; id &#x306E;&#x6307;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; bHLH &#x56E0;&#x5B50;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30F3; 2 (Ngn2), S231 &#x3068; S234&#x3001;&#x4E0A;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S231 &#x3068; Ngn2 S234 &#x304C;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x3057;&#x305F;&#x3044;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30CE;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x65B0;&#x751F;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x4ED5;&#x69D8;&#x304C;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S231 &#x3068; S234 &#x3067; Ngn2 &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E; id &#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;LIM &#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068; Ngn2 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ngn2 &#x3068;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x4F9D;&#x5B58;&#x5354;&#x540C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; bHLH &#x3068;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x3001;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x578B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D71;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30F3; 2 &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3002;

&#xAE30;&#xBCF8; &#xD5EC;&#xB9AD;&#xC2A4;-&#xB8E8;&#xD504;-&#xD5EC;&#xB9AD;&#xC2A4; (bHLH) &#xC694;&#xC18C;&#xB294; proneural&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xC2DD; id&#xB97C; &#xC9C0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; bHLH &#xC694;&#xC18C; neurogenin 2 (Ngn2) S231 S234&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; phosphorylated&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. S231 &#xBC0F; S234 Ngn2 alanines&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB41C; &#xC950;&#xB97C; &#xCAD3; &#xACE0;, &#xC131;&#xCCB4;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0AC;&#xC591; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. S231 s234&#xC5D0;&#xC11C; ngn2&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; id&#xB97C; &#xC9C0;&#xC815; &#xC784; homeodomain &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; ngn2&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ngn2&#xC640; homeodomain &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC885;&#xC18D; cooperativity&#xB294; Bhlh&#xC640; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xD1B5;&#xD569; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neurogenin 2&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0AC;&#xC591;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;.

Los mecanismos que proneurales factores b&aacute;sicos h&eacute;lice-bucle-h&eacute;lice (bHLH) controlan la neurog&eacute;nesis se han caracterizado, pero no se sabe c&oacute;mo especifican identidad tipo c&eacute;lula neuronal. Aqu&iacute; proporcionamos evidencia que dos residuos de serina conservado en el bHLH factor neurogenin 2 (Ngn2), S231 y S234, son fosforilados durante la diferenciaci&oacute;n de la motoneurona. En knockin ratones en que S231 y S234 de Ngn2 fueron transformados a alanines, la neurog&eacute;nesis se produce normalmente, pero la especificaci&oacute;n de la neurona motora se deteriora. La fosforilaci&oacute;n de Ngn2 S231 y S234 facilita la interacci&oacute;n de Ngn2 con factores de transcripci&oacute;n homeodomain LIM para especificar la identidad de la motoneurona. La fosforilaci&oacute;n dependiente cooperatividad entre los factores de transcripci&oacute;n Ngn2 y homeodomain puede ser un mecanismo general por el que las actividades de prote&iacute;nas bHLH y homeodomain temporal y espacial integran para generar la gran diversidad de tipos celulares que son un sello distintivo del sistema nervioso.

Yong-Chao Ma

Northwestern University Feinberg School of Medicine

Children's Hospital of Chicago Research Center

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development