تصور أحادي الجزيء في الوقت الحقيقي لفك الحمض النووي بواسطة CMG Helicase

في مختبرنا ، ندرس الآليات الجزيئية لتكرار الحمض النووي حقيقيات النواة. نريد أن نفهم ديناميكيات ازدواجية الجينوم على مستوى الجزيء الفردي. نتصور تكرار الحمض النووي باستخدام أنظمة متعددة ، بما في ذلك البروتينات المنقاة والمستخلصات المشتقة من بيض Xenopus.

جاء الكثير مما نعرفه عن تكرار الحمض النووي من التجارب الجماعية وتصوير الخلايا والبيولوجيا الهيكلية. هذه الأساليب قوية حقا ، لكنها غالبا ما تكون محدودة فيما يمكن أن تخبرنا به عن الديناميكيات أو السلوكيات العابرة للبروتينات الفردية. هذا هو ما تناسبه تقنيات الجزيء الفردي للدراسة ، ولهذا السبب يتزايد استخدامها في هذا المجال.

يحدد بروتوكولنا للتصور المباشر لفك الحمض النووي منصة يمكن البناء عليها وتعديلها للتحقيق في جوانب مختلفة من تكرار الحمض النووي. يمكن أن يوفر فهما أفضل للآلية الجزيئية لنشاط CMG في وجود مكونات الريبوسوم المختارة والإجهاد التكاثري. لفهم الأنظمة المعقدة التي تلعب أثناء تكرار الحمض النووي ، نقوم بعزل البروتينات الرئيسية وتصور سلوكها في الوقت الفعلي في المختبر.

تساهم الأفكار التي نكتسبها في الحصول على صورة أكثر اكتمالا لتكرار الحمض النووي.