بروتوكول فعال لتحليل CUT&RUN لخلايا الأقمار الصناعية للفأر المعزولة FACS

منذ أكثر من 20 عاما ، يهتم مختبرنا بالدور الفيزيولوجي المرضي للمستقبلات النووية. لفك رموز وظيفتها في الجسم الحي ، قمنا بتصميم نموذج الماوس الذي يسمح بالتحكم المكاني والزماني في تعبيرها. في موازاة ذلك ، قمنا بتطوير تقنيات متطورة للتحقيق في وظيفتها الجزيئية في أنسجة الفئران.

قادنا اهتمامنا العلمي مؤخرا إلى تحديد إشارات مستقبلات السيسترويد والستيرويد في الأنسجة المختلفة ، بما في ذلك العضلات الهيكلية. لقد أثبتنا مؤخرا أن مستقبلات الأندروجين في الألياف العضلية التي تميز خلايا العضلات الهيكلية مفيدة في وظائفها الانقباضية والتمثيل الغذائي. تقدم النتائج التي توصلنا إليها مؤخرا فهما أعمق للديناميكيات الفيزيولوجية المرضية للعضلات الهيكلية وهو أمر بالغ الأهمية لتطوير علاجات فعالة للاضطرابات المرتبطة بالعضلات.

قمنا بتطوير هذا البروتوكول لنكون قادرين على إجراء تحليل السيستروم على الخلايا الجذعية العضلية في الجسم الحي. جميع البروتوكولات السابقة المستخدمة في النماذج المختبرية ، والتي تفصل تماما التحقيق عن سياق الكائن الحي بأكمله. بالإضافة إلى كونه منخفض التكلفة وفعال من حيث الوقت ، يوفر هذا البروتوكول بيئة تجريبية فعالة لدراسة توظيف عامل النسخ ومشهد الكروماتين في الخلايا السلفية للعضلات الهيكلية.

قدم الكروماتين الذي أعده هذا البروتوكول أول تحليل على مستوى الجينوم لسيستروم AR في الخلايا الساتلية ، وسيسهل الدراسات المستقبلية حول تنظيم الجينات. من بين الكثيرين ، سيكون هدفنا المستقبلي هو توسيع هذه التحقيقات لتشمل مستقبلات الأوكسوستيرويد الأخرى واستكشاف منظماتها المشتركة المحددة في أنواع الخلايا المختلفة المشاركة في عملية التجديد في العضلات الهيكلية.