ضعف اللامركزية يؤدي إلى فيروس من اضطرابات بطانة الرحم كما هو الحال في الوفيات ، والإجهاض المتكرر. توفر هذه الطريقة نموذجا حيوانيا جيدا وموثوقا لدراسة لامركزية بطانة الرحم. يمكن لنموذج اللامركزية الاصطناعي هذا مع استئصال المبيض تجنب تأثير أنجلينا على الهرمونات التي يمكن أن تؤدي في كثير من الأحيان إلى نتائج قابلة للتكرار بشكل كبير مع اختلافات طفيفة داخل المجموعة.
البدء بتعقيم الأدوات الجراحية بجهاز تعقيم بدرجة حرارة عالية وضغط مرتفع قبل العملية بيوم واحد. ضع مرهم العين الواقي على مقل العيون لمنع الجفاف أثناء التخدير. ابدأ العملية عندما يتم تخدير الفئران تماما.
ضع الفئران في وضعية الانبطاح على سطح التشغيل وحلق الشعر على الظهر بعد ترطيبها بالماء والصابون. تطهير الجلد مع 70 ٪ من الإيثانول. ابحث عن موقع شق العملية على بعد 0.5 سم على الحافة العلوية لجذر الفخذ لكلا الطرفين الخلفيين الموازيين للعمود الفقري.
خذ موقع الشق كمركز وقم بتطهير منطقة الشق باستخدام اليودوفور ثلاث مرات. قم بعمل شق طولي من حوالي 0.5 إلى سنتيمتر واحد باستخدام المقص. قطع اللفافة وفصل العضلات بشكل سلبي مع ملاقط.
ابحث عن قطعة من وسادة الدهون البيضاء في حقل الشق بالقرب من القطب السفلي للكلية من خلال طبقة العضلات الرقيقة. قم بتثبيت كتلة الدهون بمقاطع مرقئ واسحب المبيض الملفوف بواسطة وسادة الدهون من الشق. قم بتثبيت تقاطع قناتي المبيض وفالوب بملاقط منحنية وإزالة المبيض على طول عنيق المبيض بالمقص.
توقف عن النزيف باستخدام قلم التخثير الكهربائي أو إبرة من حقنة ملليلتر واحدة يتم تسخينها على مصباح الكحول. شطف الشق الجراحي بمحلول ملحي طبيعي لمنع التصاق الأنسجة. استخدم خياطة 4-0 لزرع العضلات والجلد على التوالي وتطهير الشق الجراحي باستخدام اليودوفور مرة أخرى.
ضع الفئران في وضعية الانبطاح في القفص وأنعشها في حاضنة 25 درجة مئوية. مجهزة بمصدر ضوء ونظام تهوية لمدة ساعتين تقريبا. انتبه للفئران بعد العملية.
ضعهم مرة أخرى في مكان التغذية الأصلي بمفردهم حتى يتعافوا تماما ويعطيهم ما يكفي من الماء والطعام. حقن تحت الجلد 100 نانوغرام من هرمون الاستروجين في 50 ميكرولتر من زيت السمسم في كل فأر لمدة ثلاثة أيام تليها يومين من الراحة. حقن ملليغرام واحد من هرمون البروجسترون و 10 نانوغرام من هرمون الاستروجين في 50 ميكرولتر من زيت السمسم في كل فأر لمدة ثلاثة أيام أخرى.
تشغيل الفئران للحث على نموذج البقايا الاصطناعية بعد ست ساعات من الحقن الثالث لهرمون الاستروجين البروجسترون مجتمعة. ابحث عن قرن الرحم في الطرف السفلي من قناة فالوب وحقن 20 ميكرولترا من زيت السمسم ببطء على طول قرن الرحم. ادفع الأنسجة للخلف ، وخيط الشق واسمح للفأر بالتعافي.
ثبت ثلاثة إلى خمسة ملليلتر من أنسجة الرحم مع 10٪ فورمالين مضمن في البارافين وقسمها. تلطيخ المقاطع مع الهيماتوكسيلين ويوزين لمراقبة التغيرات المورفولوجية. قم بتضمين ثلاثة إلى خمسة ملليمترات أخرى من أنسجة الرحم في درجة حرارة القطع المثلى تجميد مركب في النيتروجين السائل وتخزينها في الثلاجة ناقص 80 درجة مئوية.
قسم المجمدة الأنسجة في 10 ميكرومتر والكشف عن نشاط الفوسفاتيز القلوية في أنسجة الرحم عن طريق طريقة اقتران آزو. التشكل العام للرحم اللامركزي الاصطناعي للفئران الناجم عن الزيت أقرب إلى الرحم أثناء الحمل. يصبح جسم الرحم سميكا ويصبح تجويف الرحم أصغر من الجانب غير المستحث.
حجم ووزن قرن الرحم المستحث أعلى بكثير من الجانب غير المستحث. أظهر تلطيخ الهيماتوكسيلين ويوزين لأنسجة الرحم أن الغدد تختفي وأن خلايا انسجة بطانة الرحم النهائية على الممزقة المستحثة متمايزة إلى خلايا سيتوبلازمية كبيرة مستديرة وخلايا نفضية متعددة النوى مع حدود خلايا غير واضحة. تظهر المقاطع الجانبية غير المستحثة مورفولوجيا أنسجة بطانة الرحم في حالة فسيولوجية طبيعية.
أظهرت نتيجة طريقة اقتران Azo أن محتوى الفوسفاتيز القلوي للجانب المستحث بالزيت كان أعلى بكثير من الجانب غير المستحث. أظهرت نتائج QPCR أن تعبير mRNA ل PRL-8-A-2 و ALPL و IGFBP-1 في القرن المستحث كان أعلى بكثير من التعبير في القرن غير المستحث ، مما يشير إلى أن الزيت يمكن أن يحفز اللامركزية الاصطناعية في الفئران. مكملات هومو هي عملية طويلة تتطلب اهتماما خاصا التلوث بين هوموس وهو مفتاح النجاح.
على أساس هذا النموذج يمكن إجراء حقن قرن الرحم من الفيروس الغدي الذي يمكن دراسة الآلية ذات الصلة لجزيئات محددة تنظم التبقية.
