تشتت الضوء الديناميكي ، أو DLS ، هو طريقة أساسية لتقييم حجم الجسيمات السليمة وتوزيعها. ومع ذلك ، فإن تحليل الجسيمات النانوية لكربوهيدرات الحديد يطرح بعض التحديات. تشمل ميزة DLS الأجهزة المتاحة على نطاق واسع ، وسهولة إجراء التحليل ، ووضع بروتوكولات لتحليل المواد النانوية.
أحد أهداف DLS هو تقييم ملف تشتت متعدد الجسيمات النانوية ، والتي قد تؤثر في النهاية على التفاعل مع الوسط البيولوجي. لعرض الإجراء ، ستكون سينتيا باتيستا ماركيز ، مرشحة دكتوراه من جامعة جنيف. بعد بدء تشغيل الجهاز في برنامج الجهاز ، حدد موقع التخزين في النافذة المفتوحة ، وقم بتسمية ملف القياس ، وقم بتأكيد التفاصيل بالنقر فوق حفظ.
حدد إجراء التشغيل القياسي المطلوب من القائمة المنسدلة في واجهة الجهاز. إذا كانت هناك حاجة إلى إجراء تشغيلي موحد أقدم، فحدد تصفح للوصول إلى الإجراء التشغيلي الموحد من القائمة وأكد الاختيار بالنقر على السهم الأخضر. لبدء عملية القياس ، انقر فوق زر البدء الأخضر أسفل شاشة واجهة الجهاز.
بعد ذلك ، املأ ملليلترا واحدا من معيار الجسيمات غير المخفف في كوفيت البوليسترين وأغلقه بالغطاء. بمجرد ملئها ، تأكد من عدم وجود فقاعات هواء. في حالة وجود أي فقاعات هواء ، قم بإزالتها عن طريق النقر برفق على الكوفيت.
ضع الكوفيت في حامل الخلية الخاص بالجهاز مع توجيه علامة السهم للأمام وأغلق غطاء غرفة القياس. قم بتحميل معلمة الوحدة SOP وأدخل اسم العينة SST 20 نانومتر معيار الجسيمات في نافذة البداية. بالإضافة إلى ذلك، أضف ملاحظة تتضمن رقم معرف وتاريخ انتهاء صلاحية المعيار.
لقياس محلول السكروز الحديدي ، ماصة 0.5 ملليلتر من محلول السكروز الحديدي مع 2٪ كتلة من حيث الحجم محتوى الحديد في دورق حجمي 25 ملليلتر وملء العلامة بالماء منخفض الجسيمات ، مما ينتج عنه محلول يحتوي على 0.4 ملليغرام من الحديد لكل ملليلتر. الآن ضع الكوفيت البلاستيكي الذي يحتوي على محلول القياس في الجهاز مع توجيه علامة السهم للأمام وأغلق الغطاء. حمل الإجراء التشغيلي الموحد للمعلمة مرة أخرى وأدخل رقم دفعة اسم العينة في نافذة البدء.
ابدأ القياس وعندما ينتهي ، يشار إليه بإشارة صوتية ، أغلق نافذة القياس. احسب القيمة المتوسطة لستة قياسات فردية. ضع علامة على القياسات الفردية في عرض السجلات لملف القياس وانقر بزر الماوس الأيمن على إنشاء متوسط النتيجة.
أضف اسم القيمة المتوسطة ضمن اسم العينة. ثم قم بالتأكيد بالنقر فوق موافق. انتظر حتى يقوم البرنامج بإنشاء سجل جديد في نهاية القائمة وابحث عن اسم تم إدخاله بالإضافة إلى متوسط النتيجة في هذا السجل.
يتم عرض مخططات توزيع الحجم حسب الكثافة والحجم والرقم. يتم توفير توزيع الحجم حسب الكثافة المتأثرة بالذروة الثانية كمثال على النتيجة السيئة. أظهرت البيانات ذات الجودة الرديئة إشارة إضافية عند 5،000 نانومتر.
اختلف توزيع الحجم حسب العدد بما يصل إلى عاملين عن متوسط Z المقترح على أساس الكثافة. تم حساب القيم الأقل قليلا فقط من خلال توزيع الحجم حسب الحجم. عند استخدام DLS لتوصيف الجسيمات النانوية لكربوهيدرات الحديد ، من المهم ضمان إجراء التشغيل المعياري الصحيح ، وتخفيف العينة ، وكذلك ملء الكوفيت.
يمكن إجراء تجزئة تدفق مجال التدفق غير المتماثل وكروماتوغرافيا استبعاد الحجم وتشتت الأشعة السينية بزاوية صغيرة كطرق فيزيائية كيميائية متعامدة إضافية. تعمل البروتوكولات التي تم التحقق من صحتها ل DLS على تحسين متانة التوصيف الأولي والمقارن لجسيمات الكربوهيدرات النانوية الحديدية. ومع ذلك ، يجب النظر في تحضير العينة وتحيز التقنية نحو أحجام الجسيمات الكبيرة في سياق المنهجيات المتعامدة.
