البروتوكول هنا هو لبناء نموذج حيواني مركب من نقص تروية عضلة القلب. الجمع بين التصلب الأذيني والتعرض الحاد PM . هذا نموذج حيواني أكثر موثوقية للبحث في الأمراض ذات الصلة.
يمكن لهذا النموذج الحيواني محاكاة مثل هذه الأمراض بشكل أفضل في وضع حقيقي. إلى جانب هذه الطريقة لديها نسبة نجاح عالية ومن السهل القيام بها. يمكن استخدام النموذج للبحث المرضي وتطوير الأدوية للأمراض ذات العوامل المعقدة.
يمكن أن يوفر هذا النموذج منصة لأبحاث أمراض القلب والأوعية الدموية والسموم البيئية ، ويساهم بأفكار ومراجع للبحث في المرض متعدد العوامل. التنبيب Orotracheal ، وفتح متصدع للصدر ، ووضع الربط الصحيح هي مفاتيح نجاح هذا النموذج. من الضروري الحفاظ على إحاطة الماوس ومنع النزيف.
ابدأ باختيار اثنين إلى ثلاثة فئران عشوائيا وتحقق مما إذا كانت هناك لوحة في قوس الأبهر عن طريق التصوير بالموجات فوق الصوتية ، أو عن طريق الملاحظة التشريحية المباشرة. تخدير الماوس المحدد ووضعه في وضع ضعيف على لوحة الماوس. قم بربط القواطع العلوية بالشريط المطاطي.
ركز أضواء LED صغيرة مع أنبوب مرن على القصبة الهوائية ، والتي تقع حول نقطة منتصف الخط الإبطي. ضع قطعة قطن صغيرة معقمة في فم الفأر ثم لف المسحة لإخراج اللسان. امسك اللسان واسحبه برفق لجعل تجويف الفم والبلعوم والقصبة الهوائية في نفس الاتجاه الطولي.
يمكن اعتبار المزمار ، وهو مدخل القصبة الهوائية ، نقطة مضيئة تفتح وتغلق مع كل نفس. أدخل كانولا قياس 22 في القصبة الهوائية للفأر عن طريق التصويب على المزمار ، ثم اسحب قلب الإبرة. استخدم مسدس ماصة مع كمية صغيرة من المياه المالحة العادية لاختبار ما إذا كان الأنبوب موجودا بشكل صحيح في الصفير أم لا.
إذا كان الأنبوب في الموضع الصحيح ، فسوف يرتد العمود السائل في مسدس الماصة مع كل نفس. إسقاط 50 ميكرولتر من تعليق DPM في الأنبوب باستخدام مسدس ماصة. إزالة إبرة الحيوانات الأليفة التي تسكن بعد التعرض PM.
احتفظ بالماوس على وسادة التدفئة حتى يستعيد وعيه ثم ضع الماوس مرة أخرى في القفص المنزلي. ضع الماوس في وضع ضعيف على منصة التنبيب وقم بإصلاح الماوس. إزالة شعر الصدر الأيسر وجزء من الصدر الأيمن المجاور باستخدام كريم إزالة الشعر.
ثم قم بربط إبرة الحيوانات الأليفة الساكنة بجهاز تنفس صناعي للحيوانات. امسح الجلد باليودوفورم والكحول لتطهيره. قم بقص الجلد لمدة سنتيمتر واحد تقريبا بواسطة مقص العيون وقم بتجهيز العضلات لفضح الأضلاع.
مشبك الضلع مع ملاقط العيون مع الأسنان وجعل قطع صغيرة في الفضاء الوربي الثالث. اصنع نافذة تشغيل باستخدام أدوات فتح الصدر محلية الصنع ثم قم بتمزيق أغشية التامور. امسك خياطة الحرير الستة المعقمة بإبرة باستخدام ملقط مرقئ الأوعية الدموية الدقيقة.
مرر الحرير عبر عرض مليمترين من عضلة القلب في المنطقة التي يوجد بها الشريان التاجي. ضع قطعة قصيرة من الحرير المعقم خمسة صفر بين الرباط وأنسجة عضلة القلب لمنع كسر الأنسجة. اربط الشريان التاجي الأمامي الأيسر النازل والحزمة الصغيرة من عضلة القلب حوله بإحكام.
تعتبر المفوضية ناجحة عندما يصبح الجدار الأمامي للبطين الأيسر شاحبا. اضغط بلطف على الهواء من الصدر. ثم خياطة العضلات الوربية والجلد بالتتابع مع خمسة الحرير المعقمة صفر.
نظف كل بقعة الدم بعد الجراحة ثم ضع الماوس على وسادة تسخين في وضع الاستلقاء الجانبي. راقب باستمرار علامات الماوس لمدة خمس إلى 20 دقيقة تقريبا حتى يتعافى من التخدير. بمجرد استرداد منعكس التصحيح ، انقل الماوس إلى قفص استرداد نظيف على وسادة تسخين مع زجاجة الطعام والماء.
استمر في المراقبة لمدة 15 إلى 30 دقيقة لضمان بقاء الماوس. أخيرا ، حقن البنسلين الصوديوم في العضل وفقا للجرعة المطلوبة لمنع عدوى الجرح. تم فحص درجة نقص التروية عن طريق تلطيخ TTC.
تتحول الأنسجة الطبيعية إلى اللون الأحمر عندما يتفاعل TTC مع نازعة هيدروجيناز السكسينات. في حين أن الأنسجة الإقفارية لا تزال شاحبة بسبب انخفاض نشاط نازعة الهيدروجين. تظهر الصور التمثيلية أنسجة القلب التي لم تعاني من جراحة MI أو التعرض ل PM ، وعانت من جراحة MI ولكن لم تتعرض ل PM ، وعانت من جراحة MI والتعرض ل PM.
أدى التعرض لسرطان الدم إلى تفاقم نقص تروية عضلة القلب. يمكن ل Oil Red O تلوين الدهون المحايدة بدقة ، مثل الدهون الثلاثية في الأنسجة. تشير البقع الحمراء في الصورة إلى اللويحات.
تظهر هنا اللويحات الموجودة في الشريان الأورطي للفئران من النوع البري مع اتباع نظام غذائي منتظم ، والفئران الضربة القاضية APO E مع نظام غذائي عالي الدهون وعانت من التعرض ل PM من خلال تلطيخ O الأحمر الزيتي. أدت التغذية الغنية بالدهون إلى تصلب الشرايين في الفئران APO E بالضربة القاضية والتعرض ل PM تفاقم تصلب الشرايين. من المهم التأكد من إدخال أنبوب القصبة الهوائية بشكل صحيح أثناء بضع المصل.
يحتاج المشغل إلى إكمال عملية التنبيب بسرعة ودقة ، والانتباه دائما إلى حالة تنفس الحيوان أثناء العملية. تساعد طريقتنا الباحثين المهتمين بتقاطع تلوث الهواء وأمراض القلب والأوعية الدموية. هنا نقدم فكرة.
بالطبع ، يمكن للباحثين أيضا إجراء أبحاث مباشرة بناء على النموذج الحيواني الذي وصفناه.