تطبيق نظام RatWalker لتحليل المشي في نموذج الفئران الجيني لمرض باركنسون

هذه الطريقة تجعل من الممكن تكرار الاختلافات في معلمات المشي. يمكن تقييم معلمات المشي في القوارض التي تمشي بحرية ، ولا تعتمد التقنية على الخطوات الغازية مثل غمس القدمين بالحبر. إظهار الإجراء سيكون بن لامبرتي.

ابدأ بوضع قفص منزلي في نهاية الممشى قبل بدء كل جولة ، ليكون بمثابة إشارة إيجابية للفأر لاجتياز الممشى. أطفئ أضواء الغرفة. قم بتشغيل الكاميرا وابدأ التسجيل قبل عدة ثوان من وضع الجرذ على المنصة.

مع تثبيت العلبة ، ضع الجرذ في نهاية الممشى ، مقابل قفص المنزل ، واتركه يمشي عبر الممشى بطريقة غير قسرية. توقف عن التسجيل بمجرد وصول الحيوان إلى نهاية الممشى. نظف الممشى باستخدام 70٪ إيثانول ومنشفة غير كاشطة بين الجري وبعد تبول الحيوان أو تغوطه.

ثم اترك الإيثانول يتبخر قبل إدخال آخر. قم بتشغيل الفئران عبر الممشى ما مجموعه سبع مرات خلال كل فترة مراقبة ، مع أخذ الأشواط الثلاثة الأولى التي تسجل على أنها عابرة للتحليل. سجل الجري على أنه يمر إذا قام الحيوان بأربع خطوات متتالية أو أكثر في اتجاه قفص المنزل دون انقطاع بسبب الاستمالة أو التوقف المؤقت أو الحركات الضالة.

تم إجراء تحليل المشي على ذكور الفئران البرية و Parkin DKO في عمر شهرين لتحديد ما إذا كان استخدام تحليل المشي الحركي يمكن أن يكشف عن إعاقات حركية دقيقة قبل ظهور مشاكل حركية جسيمة. على الرغم من زيادة وزن فئران DKO ، إلا أن ضغط القدم المطبق على سطح المشي لم يتغير. عند تقييم العديد من معلمات المشي كدالة لسرعة المشي ، وجد أن سرعة المشي وأطوال الخطوات متشابهة بين الفئران البرية و DKO.

أصبح الاختلاف بين الفئران البرية و DKO واضحا في مرحلة الوقوف ومدة التأرجح بسرعات مشي أبطأ. كان جزء دورة الخطوة حيث تكون الساق في مرحلة الوقوف هو عامل الواجب. تم قضاء المزيد من الوقت في مرحلة التأرجح مقارنة بمرحلة الموقف مع انخفاض عامل الواجب.

علاوة على ذلك ، بينما زادت سرعات التأرجح مع زيادة السرعة في الحيوانات البرية ، تم إضعاف الارتباط في فئران DKO. كما تم استخدام تحليل المشي FTIR لإنشاء مخططات لآثار مرحلة الوقوف لكل ساق بالنسبة للجسم في الفئران التي تمشي بحرية. عند مقارنة وضع المخلب ، لوحظت تغييرات كبيرة في AEP و PEP.

تم تغيير العديد من المعلمات الإضافية بشكل كبير في فئران DKO مقارنة بالنوع البري. تمت زيادة سرعة التأرجح لكل من الأطراف الخلفية اليسرى واليمنى في فئران DKO ، بينما انخفضت مدة التأرجح لكل من الأطراف الخلفية اليسرى واليمنى. يعد الإعداد المتسق للمعدات ، بما في ذلك موضع الكاميرا فيما يتعلق ب RatWalker ، أمرا مهما للتنفيذ الناجح لهذا البروتوكول.

بعد تنفيذ هذا البروتوكول ، تتوفر الحيوانات لأي سلوك إضافي أو نقاط نهاية تجريبية ضرورية. على سبيل المثال ، يمكن ربط تغييرات المشي بالتغيرات النسيجية. يمكن استخدام هذه التقنية لتقييم المشية في نماذج القوارض الأخرى غير PD ، مثل نماذج القلق والاكتئاب.