الجلوكوما هو السبب الرئيسي للعمى لا رجعة فيه، تتميز موت خلية العقدة الشبكية والتنكس العصبي البصري. ارتفاع ضغط العين، وتسمى أيضا ارتفاع ضغط الدم العيني، هو عامل الخطر الأكثر المعترف بها للزرق. نموذج بسيط ولكن فعال لارتفاع ضغط الدم في الحيوانات التجريبية مثل الفئران مهم للتحقيق في الجلوكومتر في التنكس العصبي واختبار العلاج للبروتكشن العصبي.
وهكذا، مع النتائج، ونحن تطوير نموذج ارتفاع ضغط الدم الماوس العيني الذي يحاكي عن كثب الزرق الثانوية لوحظ في المرضى الإنسان. هذا النموذج استنساخ بأمانة الزرق الثانوي الناجم عن السيليكون النفط الناجم عن حجب التلميذ. الإجراء بسيط ارتفاع IOP مستقرة، وإذا كان الانعكاس العصبي المرتبطة ارتفاع ضغط الدم العيني شديد في عيون الماوس، والأهم من ذلك، ارتفاع ضغط الدم العيني هو عكس لأنه يمكن إزالة زيت السيليكون بسهولة من عيون الماوس.
إثبات الإجراء سيكون الدكتور فانغ فانغ، زميل ما بعد العملية من مختبري. للبدء، وجعل ميكروبيبيت الزجاج لحقن زيت السيليكون داخل المجلس عن طريق سحب الشعيرات الدموية الزجاجية مع سحب ماصة. قطع فتحة في غيض من micropipette وشحذ تلميح باستخدام آلة مقطّع المطحنة الدقيقة لجعل شطبة 35 إلى 40 درجة.
تلميع حواف شطبة وغسلها بالماء لإزالة جميع الحطام. أوتوكلاف الميكريبيت قبل الاستخدام. لإعداد إبرة البارسنتسيس لدخول القرنية، قم بإرفاق إبرة قياس 32 بحقنة ذات خمسة ملليلتر على قفل إغراء والمزيد من تأمينها بشريط لاصق.
ثني إبرة شطبة رأس، الوجه المتابعة، في 30 درجة. لإعداد حاقن زيت السيليكون، إرفاق وتأمين إبرة قياس نهاية حادة 18 على حقنة 10 ملليلتر. ثم نعلق أنبوب من البلاستيك مع إبرة قياس 18 على نهاية واحدة وملء مع زيت السيليكون حسب الحاجة من خلال الطرف الآخر.
بعد تخدير 9 إلى 10 أسابيع من العمر C57 ماوس أسود 6J، تحقق من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم مع عدم وجود حركة شعيرات أو الذيل. ضع الماوس في وضعية شكلية على منصة الجراحة. تطبيق قطرة واحدة من هيدروكلوريد 5٪ بروباراكايين إلى القرنية قبل الحقن للحد من حساسيته أثناء الإجراء.
استخدام 32 قياس إبرة البارسنتسيس لإجراء شق دخول في الربع الصدغي السوبر حوالي 5 ملليمترات من limbus. نفق من خلال طبقات من القرنية لحوالي 3 ملليمترات قبل ثقب في الغرفة الأمامية، مع الحرص على عدم لمس العدسة أو قزحية. سحب الإبرة ببطء لاطلاق سراح حوالي واحد إلى اثنين microliters من الفكاهة مائي من الغرفة الأمامية من خلال النفق والانتظار لمدة ثماني دقائق لزيادة خفض ضغط العين.
قياس العين السيطرة على الاضلاع لتحديد الضغط. أدخل السطح الزجاجي الصغير المحمل مسبقًا بزيت السيليكون عبر نفق القرنية في الغرفة الأمامية مع شطبة ملوّقة متجهة إلى سطح القزحية. دفع المكبس حقنة ببطء لحقن زيت السيليكون في الغرفة الأمامية حتى قطرات النفط يغطي معظم سطح القزحية، ما يقرب من 2.3 إلى 2.4 ملليمتر في القطر.
ترك micropipette في الغرفة الأمامية لمدة 10 ثانية إضافية قبل سحبه ببطء. ادفع الجفن العلوي برفق لإغلاق شق القرنية لتقليل تسرب زيت السيليكون. ثم تطبيق مرهم المضادات الحيوية على سطح العين.
إبقاء الماوس على وسادة التدفئة حتى تعافى تماما من التخدير. لإزالة زيت السيليكون من الغرفة الأمامية، تخدير الماوس ومن ثم التحقق من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القار لتحديد قوة التخدير وعدم حركة شعيرات أو الذيل. ضع الماوس على منصة الجراحة وآمنه في الوضع الجانبي مع الشريط.
تطبيق قطرة واحدة من هيدروكلوريد 5٪ بروباراكايين إلى القرنية للحد من حساسيتها. باستخدام قبل صنع 32 قياس الإبرة paracentesis، وجعل اثنين من شقوق في الربع الزمني للقرنية بين حوالي الساعة 2 و 5 على حافة قطرات زيت السيليكون. أدخل إبرة ري قياس 33 متصلة بمحلول الري من خلال شق قرني واحد بالسرعة القصوى.
إدراج آخر 33 قياس إبرة الصرف تعلق على حقنة دون المكبس من خلال شق القرنية الأخرى للسماح لقططة زيت السيليكون للخروج من الغرفة الأمامية في حين ري مع محلول الري. سحب إبرة الصرف ثم إبرة الري. استخدام ميكروسيبيت الزجاج متصلة حقنة هاملتون لحقن فقاعة الهواء في الغرفة الأمامية للحفاظ على عمقها الطبيعي والصحافة لإغلاق شق القرنية.
تطبيق مرهم المضادات الحيوية على كلتا العينين والحفاظ على الماوس على وسادة الانتعاش التدفئة حتى تعافى تماما من التخدير. ضع الماوس في غرفة التعريفي. تخديرها كما هو موضح في المخطوطة والحفاظ على قرنيتها رطبة من خلال تطبيق الدموع الاصطناعية طوال العملية.
انتظر حوالي 15 دقيقة للسماح للتلميذ بالتمدد الكامل. قياس IOP من كلتا العينين باستخدام مقياس تونترمتر وفقا لتعليمات المنتج. جلب تونومتر بالقرب من العين الماوس، والحفاظ على المسافة من غيض من المسبار إلى القرنية الماوس في حوالي ثلاثة إلى أربعة ملليمترات.
اضغط على زر القياس ست مرات لتوليد قراءة واحدة والحصول على ثلاث قراءات تم إنشاؤها آليا من كل عين للحصول على متوسط IOP. إجراء الكيمياء المناعية من كامل جبل شبكية العين الشبكية ganglia الخلية عد أجزاء العصب البصري شبه رقيقة وتكميم من محاور عصبية على قيد الحياة على الحيوانات التضحية في غضون ثمانية أسابيع بعد حقن زيت السيليكون. تم قياس ضغط العين الداخلية من عيون الماوس مع قطرات زيت السيليكون أكبر من 1.6 ملليمتر مرة واحدة في الأسبوع لمدة ثمانية أسابيع، بعد حقنة زيت سيليكون واحدة.
بقي ضغط العين تلقي النفط عالية, في الغالب ضعف ضغط العين السيطرة على الاضلاعية مما يدل على منع التلميذ فعالة. وفي مجموعة أخرى من الفئران، تم مسح زيت السيليكون من الغرفة الأمامية بعد أسبوعين من الحقن. بعد الانتظار لمدة أسبوع للسماح للقرنية بالتعافي ، عاد ضغط العين إلى طبيعته ، وهو نفس العين المسيطرة.
لتحديد آثار انخفاض ضغط الدم العيني الناجم عن زيت السيليكون على خلايا العقدة الشبكية ، تم تحديد سوماتا الباقية في المناطق الطرفية من جبل الشبكية بالكامل بواسطة RBPMS التي تلطخ موت خلية العقدة الشبكية المثير بعد حقن زيت السيليكون. تم تحديد المحاور المتبقية في العصب البصري نصف رقيقة المقطع عرضية بواسطة ملطخة PBD ثمانية أسابيع بعد الحقن. كان هناك انحطاط كبير في محور عصبي في ارتفاع ضغط الدم العيني الناجم عن زيت السيليكون.
يمكن تصوير الحيوانات مع SLOOCT لتحديد التغيير في شبكية العين. يمكن تحليل الوظيفة البصرية للحيوانات بواسطة نمط ERG و OKR ، وكذلك. هذا النموذج ارتفاع ضغط الدم العيني سوف تسهل التحقيق في التنكس العصبي IOP عالية الناجمة.
ويمكن أيضا أن تستخدم لاختبار العلاجات العصبية واعدة قبليا.
