لوح منافسة مقايسة كتقييم أولى سريع لقمع المرض

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية المتعلقة بالتحكم البيولوجي في مسببات الأمراض النباتية التي تنقلها التربة. المعيار الذهبي لاختبار المواد مثل السماد هو أن يكون لها bioassay النباتية لاختبار ما إذا كان السامة للنباتات. ومع ذلك، يستغرق ذلك ثلاثة أسابيع.

يمكن القيام بهذه الطريقة في حوالي يومين إلى ثلاثة أيام. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها بسيطة، وبأسعار معقولة، وفعالة. هذا الفحص هو فحص سريع للسماد محددة لقمع نمو السولاني Rhizoctonia.

ومع ذلك، يمكن استخدام هذا المقايسة ضد مسببات الأمراض النباتية الأخرى المنقولة بالتربة، مثل فوساريوم، وبيثيوم، وفيتوفتورا. إن العرض المرئي لهذه الطريقة أمر بالغ الأهمية لأنه يهتم بعزل والحفاظ على ثقافة نقية للفطر مع تجنب التلوث. إثبات إجراء العزل سيكون تايلور Readyhough، وهو طالب دراسات عليا من مختبري.

إيما رايت، طالبة جامعية من مختبري، ستبرهن على فحص المنافسة. للبدء ، زرع بذور الفجل الأحمر في التربة المعروفة أن لها تاريخ من المرض الناجم عن R.solani. بعد ثلاثة إلى أربعة أسابيع، قم بإزالة الشتلات من التربة، وشطفها بمياه الصنبور.

باستخدام شفرة حلاقة، وقطع شرائح سنتيمتر واحد من hypocotyl والجذر التي لها لون بني. ثم، استخدام ملقط معقمة اللهب لتراجع شرائح في حل 10٪ التبييض لمدة دقيقة واحدة. بعد ذلك، شطف شرائح في الماء المعقم.

بعد ذلك، استخدم ملقط معقمة للهب لنقل القطع إلى منشفة ورقية. بات شرائح الجافة، ونقلها إلى طبق بيتري مع أجار الماء. ضع طبق بيتري داخل حاوية مع غطاء، واحتضان الأجزاء في درجة حرارة الغرفة.

لإنشاء ثقافة الابنة، نقل واحدة من هذه الأجزاء إلى مركز لوحة طازجة من البطاطا dextrose أجار. بعد ذلك، الأوتوكلاف أنابيب اختبار 25 ملليلتر تحتوي على 10 ملليلتر من الماء. أضف عينتين 0.5 غرام من كل عينة اختبار إلى زوج من أنابيب الاختبار ذات التكفاد التلقائي مع 10 ملليلترات من الماء المعقم، وهز أنابيب الاختبار بين عشية وضحاها.

بعد 24 ساعة، إضافة 1.5 غرام من أجار عادي و 90 ملليلتر من الماء المقطر إلى زوج من القارورة المخروطية. بعد الزجاج التلقائي، ضعها في حمام مائي درجة مئوية 45 لمدة 30 دقيقة. بعد ذلك، صب العينة المرجعية autoclaved وعينة المعيشة في أجار المنصهر.

صب المخاليط من كل قارورة في خمسة أطباق بيتري. لحماية الميكروبات الأصلية، من المهم عدم إضافة السماد بينما هو حار جداً. لذلك، السماح لأجار لتبرد إلى 45 درجة مئوية قبل إضافة السماد.

باستخدام تقنية معقمة، نقل قطعة من R.solani إلى كل زوج من لوحات العينة. ثم، احتضان لوحات في درجة حرارة الغرفة لمدة يوم إلى يومين. وأخيراً، استخدم مسطرة مسطحة واضحة ومجهر ستيريو لقياس نصف قطر الميسيليوم في كل لوحة إلى أقرب ملليمتر.

في هذا البروتوكول، مقتطفات من السماد الحي قمعت النمو R.solani بشكل ملحوظ أكثر من عينات autoclaved، مما يدل على أن التأثير كان الميكروبية وليس القائم على المغذيات. يقاس الكبت على أنه انخفاض في النمو مقارنة بالسيطرة التلقائية. ولم يتأثر النمو بمدة نضوج السماد العضوي أو علاجه.

تأثر النمو بشكل كبير بطريقة السماد ومكونات الوصفة ، على وجه التحديد مع vermicompost وعمليات windrow ووصفات مع لحاء الخشب الصلب. بعد تطويره، قد تكون هذه التقنية مرشحة للحصول على شهادة تجارية من السماد العضوي لخصائص قمع الأمراض.