الأساليب التي أظهرت في هذا الفيديو تظهر طريقة مريحة لتوليف البوليزيلوكناس الأمينية منتهية والبوليسيلوكسين لينة القائمة على البولي يوريا التي هي مناسبة للتطبيق كما استيعاب عدسة داخل العين. والميزة الرئيسية لهذه التقنيات هي أن التوليف وتحليل البوليمرات يمكن أن يؤديها بسهولة وفقا للطرق القياسية دون أي إعداد تجريبية معقدة. الآثار المترتبة على هذه التكنولوجيا تمتد نحو علاج الساد لأن معظم المواد المتاحة تجاريا عدسة داخل العين تستند على البوليمرات الاكريليك التي هي قاسية جدا للسماح للإقامة كافية.
على الرغم من أن هذه الطريقة تم تحسينها لتوفير مواد ذات خصائص ناعمة للغاية ، ذات شفافية عالية جدًا ، يمكن بسهولة اعتماد الطريقة لتوفير مواد ذات خصائص أداء مختلفة تمامًا ، وهي مواد يمكن أن تكون قابلة للتطبيق أيضًا على سبيل المثال كطلاء. إن التوضيح المرئي للأساليب أمر بالغ الأهمية لأن بعض خطوات التوليف والتحليل يصعب وصفها لأنها تتضمن تفاصيل تجريبية مهمة للأداء الناجح. أولاً، أضف 19.5 جرام من D4 المنزوع الغاز و0.9 جرام من APTMDS إلى 100 ملليلتر ثلاث قارورة قاعية مستديرة للرقبة مجهزة بمحرك الطرد المركزي المغلفة بـ PTFE ومدخل النيتروجين والمنفذ.
إضافة ما يقرب من 26 ملليغرام من محفز أعدت سابقا ويحرك خليط التفاعل لمدة 30 دقيقة في 80 درجة مئوية تحت تدفق النيتروجين المستمر. باستخدام قمع إسقاط، إضافة 45.5 غرام من D4 قطرة الحكمة إلى خليط التفاعل في غضون ساعتين إلى ثلاث ساعات وتحريك مزيد في 80 درجة مئوية لمدة 24 ساعة تحت تدفق النيتروجين المستمر. بعد ذلك، تبادل stirrer الطرد المركزي مع شريط كبير التحريك المغناطيسي البيضاوي وختم قارورة أسفل الرقبة جولة ثلاثة مع سدادات الزجاج اثنين.
استخدام محول مع صمام وتسخين ببطء PDMS إلى 150 درجة مئوية تحت فراغ 0.1 ملليبار لتقطير قبالة المنتجات الجانبية دوري باستخدام خط Schlenk. بعد ذلك، أضف واحد ونصف إلى غرامين من البولي سيلوكسان إلى قارورة مخروطية 250 ملليلتر تحتوي على شريط مثير مغناطيسي وحل البوليسيلوكسين في 50 ملليلتر من THF تحت التحريك المستمر. تثليط المجموعات الأمينية مع 0.1 حمض الهيدروكلوريك المولر باستخدام بروموفينول الأزرق حتى يتم ملاحظة تغيير اللون من الأزرق إلى الأصفر.
كرر المعايرة مع ثلاث عينات لحساب متوسط عدد الوزن الجزيئي. أضف 2.939 جرام من H12 MDI إلى قارورة رد فعل دائرية من 250 ملليلتر من الرقبة للأسفل مزودة بمحرك طردي مركزي، قمع إسقاط، ومدخل النيتروجين والمنفذ. قم بحل H12 MDI في 40 إلى 50 ملليلتر من THF.
بعد ذلك ، قم بحل 45 جرامًا من PDMS المنزوعة الغاز في 100 ملليلتر من THF في منقار. أضف حل PDMS من الحكمة إلى حل H12 MDI عبر قمع إسقاط تحت التحريك المستمر وتدفق النيتروجين في درجة حرارة الغرفة. ثم شطف beaker وإسقاط القمع مع 50 ملليلتر من THF وإضافة هذا الحل إلى خلاط رد فعل.
إضافة أجزاء من المبلغ stoichiometric من سلسلة الموسع APTMDS إلى حل ما قبل البوليمر. أولاً، إضافة 80٪ من المبلغ الرصين المحسوب من سلسلة المذابة APTMDS إلى خليط التفاعل. إضافة الجزء الأخير من الموسع سلسلة لخليط التفاعل والتحقق من اختفاء الشريط امتصاص isocyanate في الطيف FTIR.
للحصول على غير السامة البولي سيلوزكان البولي يوريا القائم على الوهن مع الأوزان الجزيئية العالية، من المهم أن يتم وزن الجزء الأخير من موسع السلسلة بدقة وإضافتها إلى حل البوليمر بنسبة متوازنة من الثبات. صب الناتجة البوليسيلوكسيان القائم على اليوريا أو حل PSU في رقائق PTFE الزجاج المغطاة طبق بيتري وتبخير المذيب بين عشية وضحاها في غطاء الدخان. الجمع بين سبعة إلى ثمانية غرامات من قطع PSU الصغيرة و 200 إلى 250 ملليلتر من الكلوروفورم في قارورة مخروطية 250 إلى 300 ملليلتر.
يُضاف شريط حركية مغناطيسية ويُغلق القارورة بشكل فضفاض مع سدادة زجاجية ويُحرّك الخليط لمدة 24 ساعة على الأقل. في اليوم التالي، أضف الحل المتجانس إلى طبق بيتري زجاجي واغطيه بورق الألومنيوم المثقب. تأكد من أن طبق بيتري في منطقة جيدة التهوية للسماح للمذيبات بالتبخر.
بعد تجفيف الفيلم، قم بإزالته بعناية من السطح الزجاجي لطبق بيتري باستخدام ملعقة رقيقة صغيرة وتخزينها في ظرف شفاف للتوصيف الميكانيكي. لإعداد عينات على شكل عظام الكلب على شكل ثنائي من أفلام PSU ، ضع الفيلم تحت وحدة سكين اللكم. دفع رافعة إلى أسفل لكمة خارج عينة الاختبار وتخزينها لمدة 72 ساعة على الأقل في درجة الحرارة المحيطة.
بعد ذلك، اضغط على زر على السلطة على آلة اختبار الشد وانقر فوق الزر الانتقال إلى وضعية البداية في النافذة الرئيسية للبرنامج. بعد إزالة المغلف الشفاف، افحص عينة الاختبار تحت مستقطب عبر لاستبعاد أي إجهاد داخلي. قياس سمك وعرض عينة الاختبار باستخدام الفرجار.
ثم إدراج قيم سمك وعرض في الحقول المقابلة في الإطار الرئيسي للبرنامج. الآن إصلاح عينة الاختبار بين الفكين لقط العلوي من آلة الاختبار. انقر فوق زر قوة صفر في الإطار الرئيسي للبرنامج.
ثم قم بإصلاح نهاية الجزء السفلي من عينة الاختبار بين الفكين السفليين لقط آلة الاختبار. انقر فوق زر قياس البدء لبدء قياس السترسيسيس. لاختبار الشد، كرر الخطوات السابقة.
إضافة عينات معقمة سابقا من PSU و 0.7 غرام من بيليتان كمرجع لأنابيب أجهزة الطرد المركزي المخروطية 15 ملليلتر. استخراج العينات مع DMEM دون FBS لمدة 72 زائد أو ناقص ساعتين في 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون بنسبة استخراج 0.1 غرام لكل ملليلتر. إعداد العينات العمياء عن طريق إضافة DMEM دون FBS في أنابيب أجهزة الطرد المركزي المخروطية 50 ملليلتر وإجراء نفس الاستخراج.
بعد ذلك ، استخراج ماصة 200 ميكرولترات من كل PSU في ستة آبار من 96 بئر microplate تحتوي على خلايا HaCat. بعد ذلك، ماصة 200 ميكرولترات من العينة الأعمى في ستة آبار. للسيطرة السلبية، ماص 200 ميكرولترات من DMEM الطازجة تكمل مع 10٪ FBS في ستة آبار.
للسيطرة الإيجابية، الماصات 200 ميكرولتر من DMEM تكمل مع 10٪ FBS و 1٪ SDS في ستة آبار. بعد احتضان الخلايا لمدة 24 ساعة في 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون، وإزالة مقتطفات، والعينات العمياء، والضوابط. ثم ماصة 120 ميكروليترس من حل الأسهم MTS أعدت سابقا في كل بئر بما في ذلك الآبار الستة دون خلايا لتحديد الخلفية.
بعد احتضان الخلايا في حل MTS لمدة أربع ساعات ، وقياس امتصاص كل بئر في 492 نانومتر باستخدام قارئ microplate. سلسلة الحلبة التوازن من D4 وMylphenyl D4 مع APTMDS أسفرت عن أمينوبروبيل إنهاء polydimethylsiloxanes و polydimethyl methylphenlysiloxane copolymers على التوالي. تم تصنيع بوليديميثيلسيلكانيس أمينوبروبيل الذي تم إنهاؤه مع الأوزان الجزيئية بين 3، 000 و 33، 000.
نجح استخدام الـ(بُدْل) للسيليكسيك الحلقي مع مجموعات الفينيل القلادة ميثيل فينيل D4 مع زيادة مؤشر الانكسار من 1.401 إلى 1.4356. في خط FTIR الطيفي من ملستومرز PSU أكد رد فعل سريع للغاية من مجموعات isocyanate مع المجموعات الأمينية من PDMS وAPTMDS. أظهرت أفلام PSU elastomer الشفافة إرسالًا يزيد عن 90٪ حتى الوزن الجزيئي لـ MDS من 18,000.
في أعلى الأوزان الجزيئية PDMS، أصبحت أفلام PSU مبهمة على نحو متزايد. مع زيادة في الوزن الجزيئي PDMS، يمكن إعداد النعومة PSU الناعمة. وانخفض معامل يونغ من ملسومات PSU من 5.5 إلى 0.6 ميغاباسكال.
تم تقليل الثني الميكانيكية لـ PSU elastomers عندما تم إعدادها من PDMS ذات الوزن الجزيئي العالي. وكانت قيم الثنية الدورة الأولى في سلالة 100٪ انخفض من 54 إلى 6٪ الأسلوب الاصطناعية التطبيقية يسمح بإعداد مستخرجات PSU التي لا تطلق بقايا السامة للخلايا كما هو مبين في اختبارات جدوى الخلية التي أجريت مع مقتطفات من مستخرجات PSU على خلايا HaCat. أثناء إجراء توليف البوليسيلاكسانيس الأمينية المنهية، من المهم أن تزن بدقة في الكمية المحسوبة من السيلانية المستندة لأن هذا يحدد إلى حد كبير الوزن الجزيئي النهائي للبوليسيلoxدان.
بعد هذا الإجراء، قد تكون مستعدة البولي يوريا أو البوليزليكازات التي تحتوي على مجموعات قلادة مختلفة مثل السيلانيات. سيليكانس سيكون لها ميزة لإنتاج المواد عبر ربط. مثل هذه المواد عبر ربط ستفتح تطبيقات جديدة محتملة مثل الضمادات من المخدرات، والمواد ذات الوظائف الحيوية أو المواد الهلامية الناعمة.
لا تنس أن العمل مع ايزونسيات وتراجيميثيل هيدروكسيد الأمونيوم يمكن أن تكون خطرة وينبغي دائما اتخاذ الاحتياطات مثل نظارات السلامة وقفازات اليد أثناء تنفيذ هذا الإجراء.
