ونحن ممتنون للدعم المالي للصناديق العلوم الطبيعية الوطنية الصينية (31770968) وبرنامج بحوث تيانجين لمؤسسة التطبيق والتكنولوجيا المتقدمة (17JCZDJC33400).

1-تلفيق أدرجت الهيبارين نانوكواتينج ستاربيج
<ol><li>
التوليف من الهيبارين سوكسينيميديل succinate (الهيبارين--دائرة الصحة الوطنية)
	<ol>
<li>تزن بها ز 0.69 الهيبارين وتذوب في 2.0 مل الماء المثلج منزوع.</li>
		<li>تزن بها ز 0.23 لدائرة الصحة الوطنية وتذوب في 0.5 مل الماء المثلج منزوع في قارورة مستديرة القاع.</li>
		<li>تزن بها ز 0.77 لتنمية الصادرات وتذوب في 0.5 مل الماء المثلج منزوع في قارورة مستديرة القاع.</li>
		<li>مزيج من الحلول قارورة القاع المستديرة دائرة الصحة الوطنية، وتنمية الصادرات. اترك الحل المختلط على مقاعد البدلاء في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.</li>
		<li>الطرد المركزي خليط "الصادرات دائرة الصحة الوطنية" في 5,031 س ز لمدة 10 دقيقة لإزالة الزائدة تنمية الصادرات ودائرة الصحة الوطنية.</li>
		<li>إضافة 30 مل إيثانول البارد إلى خليط الحل وأجهزة الطرد المركزي في 5,031 س ز لمدة 10 دقائق.<ol>
<li>كرر مرتين.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
إعداد نانوكواتينج ستاربيج-الهيبارين
	<ol>
<li>إضافة مل 1.0 من 10% (w/v) ستاربيج-(NH2)8 قارورة مستديرة القاع.</li>
		<li>إضافة مل 0.67 من 10% (w/v) الهيبارين--دائرة الصحة الوطنية إلى قارورة أسفل الجولة نفسها.</li>
		<li>وضع مختلط حل ستاربيج-(NH2)8 والهيبارين--دائرة الصحة الوطنية في حاضنة عند 25 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة للحصول على حل واضح مع اللزوجة. ملاحظة: للتجارب التي كان الهيبارين المسمى فلوريسسينتلي (الاتحاد الماليزي-الهيبارين) المطلوبة، اختﻻق الإجراء هو نفسه إلا بعد أن تم حله (NH2)-شماعة-ستار8 في المياه. وتستكمل مع 5(6)- كاربوكسيفلوريسسين ن-سوكسينيميديل إستر 0.1% (نسبة المولى) ستاربيج-(NH2)8. )</li>
	</ol>
</li>
	<li>
وصف نانوكواتينج شماعة الهيبارين قبل "فورييه تحويل الأشعة تحت الحمراء الطيفي" (FT الأشعة تحت الحمراء)
	<ol>
<li>قبل البدء، شطف الجهاز هاون ومدقة والتكوير عقيق (أقراص صغيرة بقطر 13 مم) مع الأسيتون والمياه. الجاف للأواني في فرن قبل الاستخدام.</li>
		<li>ميكس حوالي 0.1 – 1% عينة شماعة الهيبارين مع 200-250 ملغ مسحوق ناعم شركة KBr.</li>
		<li>وضع شماعة الهيبارين وخليط KBr في الهاون عقيق وناعما يطحنون في الكريات الصغيرة مع أقطار 2 ميكرومتر.</li>
		<li>تحويل المزيج إلى جهاز بيليتينج. تطبيق قوة ضغط عالية (8 ر/سم2) في فراغ لمدة 1 – 2 دقيقة لتشكيل الكريات شفافة.</li>
		<li>اجذب الكريات عينة بعيداً عن الجهاز بيليتينج. احرص على عدم الانسحاب من الصعب جداً أن لا تحمل الشقوق.</li>
		<li>نقل الكريات العينة بعناية فائقة "المطياف فورييه الأشعة تحت الحمراء تحويل" لتحديد التركيب الكيميائي عينة.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
دراسة هياكل المسامية الداخلية نانوكواتينج شماعة الهيبارين التي تم مسحها ضوئياً المجهر الإلكتروني (SEM)
	<ol>
<li>للإجراءات التالية، وإعداد لوحة الثقافة القياسية 48-بئر الخليوي والماصات.</li>
		<li>"الماصة؛" الحل كوبوليمر شماعة الهيبارين في آبار لوحة الثقافة 48-جيدا.</li>
		<li>تجميد اللوحة في-80 درجة مئوية ح 24.</li>
		<li>ليبوفيليزي العينات في-50 درجة مئوية في بيئة فراغ (0.1 السلطة الفلسطينية) ح 24.</li>
		<li>تنتشر عينات عبر السطح لزجة كعب الألومنيوم.</li>
		<li>معطف العينات مع الذهب ومراقبة تحت المجهر الإلكتروني الممسوحة ضوئياً لمراقبة الهياكل المسامية الداخلية.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
فحص السطح نانوكواتينج شماعة الهيبارين مجهر القوة الذرية (AFM)
	<ol>
<li>تنظيف الشرائح الزجاجية السليكا مع الحل البيرانا (70 ٪ ح2هكذا4، 30 ٪ ح2س2) عند 80 درجة مئوية لمدة 40 دقيقة.</li>
		<li>Sonicate الشرائح في الميثانول لمدة 10 دقائق ثم في التولوين لمدة 10 دقائق.</li>
		<li>الجاف للشرائح بالتجفيف الفراغ.</li>
		<li>يغسل الشرائح مع الكثير الحل 3-أمينوبروبيل-تريثوكسيسيلاني (2% في التولوين)، هزة بلطف.</li>
		<li>Sonicate الشرائح في الميثانول لمدة 10 دقائق ثم في التولوين لمدة 10 دقائق.</li>
		<li>المكان 100 ميليلتر من 3% الهيبارين-شماعة الحل عبر سطح الشرائح باستخدام ماصة قياسية.</li>
		<li>دراسة سطح الوتد الهيبارين تحت مجهر قوة ذرية (تردد مدوية من 50 – 80 كيلو هرتز، قوة ثابتة 0.350 ن م 21، نصيحة دائرة قطرها 600 nm).</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. الماوس جزيرة هندسة السطح مع الهيبارين-شماعة نانوكواتينج
<ol><li>
جزيرة ليلى الماوس طلاء السطح مع الهيبارين-شماعة نانوكواتينج
	<ol>
<li>استخراج الجزيرات الماوس كولاجيناز الهضم وهيستوباك التدرج وتنقية كما سبق ذكره في جوف19.</li>
		<li>Handpick الجزيرات 200 تحت مجهر تشريح لأنبوب 1.5 مل.</li>
		<li>إضافة 500 ميليلتر من برنامج تلفزيوني للجزر الصغيرة وأجهزة الطرد المركزي في x 503 ز لمدة 1 دقيقة.</li>
		<li>الإقلاع المادة طافية وإضافة 250 ميليلتر من الحل الهيبارين-شماعة وإبقاء الخليط على الجليد لأدنى 10 ماصة صعودا وهبوطاً للسماح للجزر الصغيرة مزيج جيد مع الحل الهيبارين-الوتد.</li>
		<li>أجهزة الطرد المركزي في x 503 ز لمدة 1 دقيقة.</li>
		<li>إزالة المادة طافية وإضافة 500 ميليلتر من برنامج تلفزيوني. "الماصة؛" صعودا ونزولاً مزيج جيد.</li>
		<li>الطرد المركزي في x 503 ز لمدة 1 دقيقة وإزالة المادة طافية والاحتفاظ الجزر الصغيرة لاستخدامها مرة أخرى. لفحص جزيرات الماوس المغلفة مع الهيبارين-شماعة، استخدمت الاتحاد الماليزي-الهيبارين-شماعة لطلاء جزيرة اتباع الخطوات التالية.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
فحص جزيرات الماوس المغلفة مع نانوكواتينج الاتحاد الماليزي-الهيبارين-شماعة
	<ol>
<li>1 – 2 مل من 1640 RPMI تستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين للجزر الصغيرة المغلفة إضافة وتحويل هذه الجزر إلى طبق ثقافة بكتيرية عقيمة غير مشحونة.</li>
		<li>نلاحظ إشارات الاتحاد الماليزي-الهيبارين-شماعة المغلفة نانوكواتينج الجزر الصغيرة تحت مجهر مقلوب الأسفار التشكل والأسفار.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3-وظيفة الهيبارين-شماعة المغلفة الجزيرات الماوس مقارنة بالجزر الصغيرة غير المغلفة
<ol><li>
جدوى جزيرات الهيبارين-شماعة مغلفة الماوس
	<ol>
<li>Handpick 20 الجزيرات الماوس الهيبارين-شماعة المغلفة ووضعها في بئر واحدة للوحة الثقافة خلية 96-جيدا.</li>
		<li>تعبئة ما مجموعة 10 آبار مع الهيبارين-شماعة مغلفة الماوس الجزيرات 20 لكل بئر.</li>
		<li>Handpick 20 جزيرات التحكم نونكواتيد ووضعها في بئر واحدة لوحة الثقافة نفس خلية 96-جيدا.</li>
		<li>تعبئة ما مجموعة 10 آبار مع 20 من الجزيرات التحكم نونكواتيد لكل بئر.</li>
		<li>وضع 200 ميليلتر من 1640 RPMI تستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين في كل بئر من لوحة 96-جيدا يحتوي على الجزر الصغيرة، والحفاظ على الثقافة لمدة 14 يوما.</li>
		<li>استبدال وسائط الثقافة جزيرة ليلى كل يومين.</li>
		<li>علاج الجزر الصغيرة مع العيش/ميت تلطيخ كيت في نهاية مدة 14 يوما في الثقافة ولاحظ تحت مجهر مقلوب الأسفار.</li>
		<li>عد الخلايا بي+ (أحمر) داخل كل جزيرة تحت مجهر مقلوب fluorescence.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
عودة التوعي من الهيبارين-شماعة مغلفة بالماوس جزيرات في المختبر
	<ol>
<li>قبل تبرد جميع اللدائن التجريبية بما في ذلك لوحة الثقافة وماصة نصائح على الأقل 12 ح قبل الاستخدام.</li>
		<li>ضع مكاناً جيدا 24 على لوح تبريد. إضافة 250 ميليلتر من الجليد الباردة ماتريجيل انخفض عامل النمو في كل من لوحة الثقافة خلية 24-جيدا جيدا. ضع لوحة 24-جيدا المغلفة عند 4 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة على الأقل.</li>
		<li>حين يتم وضع مصفوفة الحل في الثلاجة، تريبسينيزي جزيرة البنكرياس الماوس غشائي الخلايا ميل سفين 1 (MS1).<ol>
<li>إزالة كافة وسائط الثقافة من قارورة زراعة الأنسجة. شطف قارورة مع 5 مل من برنامج تلفزيوني.</li>
			<li>إزالة برنامج تلفزيوني وأضف 3 مل يدتا التربسين. احتضان في 37 درجة مئوية لمدة 3 دقيقة في حاضنة قياسية.</li>
			<li>طفيفة اضغط على أسفل قارورة فصل الخلايا، وإضافة 5 مل من المصل تستكمل وسائل الإعلام.</li>
		</ol>
</li>
		<li>جمع الخلايا إلى 15 مل أنبوبة الطرد المركزي وأجهزة الطرد المركزي في 1,000 س ز لمدة 5 دقائق.</li>
		<li>خلع المادة طافية وإضافة 5 مل من برنامج تلفزيوني. "الماصة؛" صعودا ونزولاً مزيج جيد.</li>
		<li>الطرد المركزي في 1,000 س ز لمدة 5 دقائق وتقلع المادة طافية.</li>
		<li>إضافة وسائط دميم تستكمل المصل في الأنبوب والبذور 50,000 الخلايا في كل من لوحة 24-جيدا الحل المغلفة مصفوفة جيدا.</li>
		<li>إضافة 5 الجزيرات الهيبارين-شماعة المغلفة أو التحكم نونكواتيد الجزر الصغيرة في كل بئر.</li>
		<li>إضافة وسائط دميم تستكمل المصل في كل بئر بما مجموعة 500 ميليلتر كل بئر.</li>
		<li>الاحتفال بتشكيل أنبوب بعد الحضانة ح 4 و 24 ساعة تحت مجهر خفيفة.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
إفراز الأنسولين الجلوكوز-وحفز من الجزيرات الهيبارين-شماعة المغلفة ملاحظة: لتقييم ما إذا كان نانوكواتينج سوف تؤثر على وظيفة الماوس الجزر الصغيرة، تم تقييم إفراز الأنسولين الجلوكوز-وحفز الهيبارين-شماعة المغلفة والجزر نونكواتيد.<ol>
<li>Handpick 30 الجزيرات الهيبارين-شماعة المغلفة أو الجزر نونكواتيد التحكم في أنبوب 1.5 مل واحد. تعد كل من إجمالي 10 أنابيب للجزر الصغيرة المغلفة والجزر نونكواتيد.</li>
		<li>أضف 1 مل حل الملح الفسيولوجية وتستكمل مع 2 ملمول/لتر جلوكوز20 واحتضان في 37 درجة مئوية ح 2. ملاحظة: لوصفه الحل الملح الفسيولوجي، يرجى الرجوع إلى الجدول 1. الحفاظ على الحد أقصى أنابيب فضفاضة أثناء الاحتضان في الحاضنة.</li>
		<li>إزالة الحل قدر الإمكان.</li>
		<li>حفز الجزيرات بإضافة 600 ميليلتر من الحل الملح الفيزيولوجي وتستكمل مع 20 ملمول/لتر الجلوكوز في 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.</li>
		<li>جمع 200 ميليلتر من المادة طافية من كل أنبوبة للأنسولين طقم أليسا الكمي استخدام الأنسولين تجارية أليسا.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Ke, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Netrin-1+ameliorates+myocardial+infarction-induced+myocardial+injury:+mechanisms+of+action+in+rats+and+diabetic+mice.">Netrin-1 ameliorates myocardial infarction-induced myocardial injury: mechanisms of action in rats and diabetic mice.</a> Hum Gene Ther. 25 (9), 787-797 (2014).</li><li>Ke, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-transplantation+of+skin-derived+precursors+and+collagen+sponge+facilitates+diabetic+wound+healing+by+promoting+local+vascular+regeneration.">Co-transplantation of skin-derived precursors and collagen sponge facilitates diabetic wound healing by promoting local vascular regeneration.</a> Cell Physiol Biochem. 37 (5), 1725-1737 (2015).</li><li>Saxon, E., Bertozzi, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+surface+engineering+by+a+modified+Staudinger+reaction.">Cell surface engineering by a modified Staudinger reaction.</a> Science. 287 (5460), 2007-2010 (2000).</li><li>Sarkar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+cell+homing.">Engineered cell homing.</a> Blood. 118 (25), 184-191 (2011).</li><li>Kato, M., Mrksich, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rewiring+cell+adhesion.">Rewiring cell adhesion.</a> J Am Chem Soc. 126 (21), 6504-6505 (2004).</li><li>Cheng, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+membrane+engineering+for+cell+rolling+using+peptide+conjugation+and+tuning+of+cell-selectin+interaction+kinetics.">Stem cell membrane engineering for cell rolling using peptide conjugation and tuning of cell-selectin interaction kinetics.</a> Biomaterials. 33 (20), 5004-5012 (2012).</li><li>Merzaban, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+surface+glycan+engineering+of+neural+stem+cells+augments+neurotropism+and+improves+recovery+in+a+murine+model+of+multiple+sclerosis.">Cell surface glycan engineering of neural stem cells augments neurotropism and improves recovery in a murine model of multiple sclerosis.</a> Glycobiology. 25 (12), 1392-1409 (2015).</li><li>Silvescu, C. I., Sackstein, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=G-CSF+induces+membrane+expression+of+a+myeloperoxidase+glycvariant+that+operates+as+an+E-selectin+ligand+on+human+myeloid+cells.">G-CSF induces membrane expression of a myeloperoxidase glycvariant that operates as an E-selectin ligand on human myeloid cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (29), 10696-10701 (2014).</li><li>Zhi, Z. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assembly+of+bioactive+multilayered+nanocoatings+on+pancreatic+islet+cells:+incorporation+of+alpha1-antitrypsin+into+the+coatings.">Assembly of bioactive multilayered nanocoatings on pancreatic islet cells: incorporation of alpha1-antitrypsin into the coatings.</a> Chem Commun (Camb). 51 (53), 10652-10655 (2015).</li><li>Lou, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+islet+surface+bioengineering+with+a+heparin-incorporated+starPEG+nanofilm.">Pancreatic islet surface bioengineering with a heparin-incorporated starPEG nanofilm.</a> Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 78, 24-31 (2017).</li><li>Orlando, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+replacement+strategies+aimed+at+reconstitution+of+the+beta-cell+compartment+in+type+1+diabetes.">Cell replacement strategies aimed at reconstitution of the beta-cell compartment in type 1 diabetes.</a> Diabetes. 63 (5), 1433-1444 (2014).</li><li>Kollmer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+function+of+alginate-encapsulated+islets.">Long-term function of alginate-encapsulated islets.</a> Tissue Eng Part B Rev. 22 (1), 34-36 (2015).</li><li>Yang, H. K., Yoon, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+status+of+encapsulated+islet+transplantation.">Current status of encapsulated islet transplantation.</a> J Diabetes Complications. 29 (5), 737-743 (2015).</li><li>Kizilel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Encapsulation+of+pancreatic+islets+with+nano-thin+functional+polyethylene+glycol+coatings+for+enhanced+insulin+secretion.">Encapsulation of pancreatic islets with nano-thin functional polyethylene glycol coatings for enhanced insulin secretion.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 2217-2228 (2010).</li><li>Zhi, Z. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nano-scale+encapsulation+enhances+allograft+survival+and+function+of+islets+transplanted+in+a+mouse+model+of+diabetes.">Nano-scale encapsulation enhances allograft survival and function of islets transplanted in a mouse model of diabetes.</a> Diabetologia. 55, 1081-1090 (2012).</li><li>Gattas-Asfura, K. M., Stabler, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Layer-by-layer+deposition+of+antifouling+coatings+on+stainless+steel+via+catechol-amine+reaction.">Layer-by-layer deposition of antifouling coatings on stainless steel via catechol-amine reaction.</a> ACS Appl. Mater. Interfaces. 5, 9964-9974 (2013).</li><li>Kollmer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+function+of+alginate-encapsulated+islets.">Long-term function of alginate-encapsulated islets.</a> Tissue Eng. Part B Rev. 22 (1), 34-46 (2015).</li><li>Yang, H. K., Yoon, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+status+of+encapsulated+islet+transplantation.">Current status of encapsulated islet transplantation.</a> J. Diabetes Complicat. 29, 737-747 (2015).</li><li>Zmuda, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+murine+islet+isolation+and+subcapsular+kidney+transplantation.">A method for murine islet isolation and subcapsular kidney transplantation.</a> J. Vis. Exp. (50), e2096 (2011).</li><li>Gey, G. O., Gey, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+maintenance+of+human+normal+cells+and+tumor+cells+in+continuous+culture.+I.+Preliminary+report:+Cultivation+of+mesoblastic+tumors+and+normal+tissue+and+notes+on+methods+of+cultivation.">The maintenance of human normal cells and tumor cells in continuous culture. I. Preliminary report: Cultivation of mesoblastic tumors and normal tissue and notes on methods of cultivation.</a> Am. J. Cancer. 27, 45-76 (1936).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Site-selective+azide+incorporation+into+endogenous+RNase+A+via+a+"chemistry"+approach.">Site-selective azide incorporation into endogenous RNase A via a "chemistry" approach.</a> Org. Biomol. Chem. 11, 353-361 (2013).</li><li>Cabric, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anchoring+of+vascular+endothelial+growth+factor+to+surface-immobilized+heparin+on+pancreatic+islets:+implications+for+stimulating+islet+angiogenesis.">Anchoring of vascular endothelial growth factor to surface-immobilized heparin on pancreatic islets: implications for stimulating islet angiogenesis.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 961-970 (2010).</li><li>Cabric, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+surface+heparinization+prevents+the+instant+blood-mediated+inflammatory+reaction+in+islet+transplantation.">Islet surface heparinization prevents the instant blood-mediated inflammatory reaction in islet transplantation.</a> Diabetes. 56, 2008-2015 (2007).</li><li>Asif, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heparinization+of+cell+surfaces+with+short+peptide-conjugated+PEG-lipid+regulates+thromboinflammation+in+transplantation+of+human+MSCs+and+hepatocytes.">Heparinization of cell surfaces with short peptide-conjugated PEG-lipid regulates thromboinflammation in transplantation of human MSCs and hepatocytes.</a> Acta Biomater. 35, 194-205 (2016).</li><li>Teramura, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microencapsulation+of+cells,+including+islets,+within+stable+ultra-thin+membrane+of+maleimide-conjugated+PEG-lipid+with+multifunctional+crosslinkers.">Microencapsulation of cells, including islets, within stable ultra-thin membrane of maleimide-conjugated PEG-lipid with multifunctional crosslinkers.</a> Biomaterials. 34 (11), 2683-2893 (2013).</li><li>Zhi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilayer+nanoencapsulation:+A+nanomedicine+technology+for+diabetes+research+and+management.">Multilayer nanoencapsulation: A nanomedicine technology for diabetes research and management.</a> Diabetes Res. Clin. Pract. 100, 162-169 (2013).</li></ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

في هذه المقالة، نظهر "سهلة--إلى--اعتماد" نهج للمعيشة سطح الخلية الهندسية نانوكواتينج ستاربيج أدرجت الهيبارين عن طريق الكيمياء بيورثوجونال الزائفة بين مجموعات نانوكواتينج-هيدروكسيسوكسينيميدي ن أمين جماعات من جزيرة ليلى البنكرياس الغشاء السطحي. والواقع أن المجموعات الأمينية داخل أغشية الخلية بشدة رد الفعل، ونتيجة لذلك أبلغت دراسات سابقة عن التفاعلات بين المجموعات الأمينية الأساسية مع N-هيدروكسيسوكسينيميديل (NHS) إستر المنشط تحت الظروف الفسيولوجية14 ،،من1621. وعلاوة على ذلك، أفادت بحوث مستفيضة أن إدماج الهيبارين، جليكوسامينوجليكان نسبة عالية وعنصرا هاما من عناصر المصفوفة خارج الخلية، أثناء تغليف جزيرة صغيرة، يمكن أن يؤدي إلى زرع بعد تعزيز عودة التوعي وانخفاض22،إيبمير23. نظراً لتوافق مع الحياة الوتد وخصائص متعددي الهيبارين، استخدمنا شماعة المسلحة 8 القصوى الهيبارين تحميل خلال تلفيق نانوكواتينج. تعديل الهيبارين مع--دائرة الصحة الوطنية، التي سترد فيما بعد مع المجموعات2 -NH على غشاء الخلية جزيرة ليلى. بتمكين تكوين رابطة تساهمية بين-NH2 (من غشاء الخلية) ودائرة الصحة الوطنية--Hep-شماعة، الجزر الصغيرة سوف تكون سهولة "مغلفة" الوتد أدرجت الهيبارين، وبالتالي تشكيل طبقة رقيقة نانو (نانوكواتينج) على السطح الخارجي للبنكرياس الجزر الصغيرة.
أن النهج الحالي يختلف عن أساليب سبق نشرها أيضا تحديده شماعة البوليمر الرئيسية لجزيرة ليلى الكبسلة المصغرة في أن كيمياء بيورثوجونال الزائفة بين دائرة الصحة الوطنية--(من نانوكواتينج) و-NH2 الخلية جزيرة ليلى وقد استخدم الغشاء. ونظرا لأن استقرار جزيرة ليلى/خلية الطلاء، لا سيما في بيئة معقدة مثل البلازما، أمر حاسم لزرع ما بعد عودة التوعي والبقاء على قيد الحياة، وتشكيل بين دائرة الصحة الوطنية--NH2 سيكون أكثر استقرارا بالمقارنة مع مسعور التفاعل بين الوتد وغشاء الخلية24، التفاعلات الالكتروستاتيكي9،15،24،،من2526 أو الصلة البيولوجية بين البيوتين ستريبتافيدين14.
وبالإضافة إلى ذلك، على النقيض من جزيرة ليلى طلاء نهج يعتمد على نهج LBL مع الفترة التعامل مع جزيرة ممتدة لترسيب طبقة متعددة14،16،25، هذا الأسلوب أيضا يتطلب الحد الأدنى فترة طلاء التجهيز وقصيرة جداً من الجزر المعزولة. كل هذه العوامل ضرورية للبقاء على قيد الحياة بعد زرع جزيرة ليلى نظراً لبقاء الجزر الصغيرة غالباً ما سبق عزلة جزيرة التالية الشبهة بسبب تلف ECM أثناء الهضم الأنزيمي. ومع ذلك، هو القيد واحد من النهج الحالي، خلافا LBL، عبر التي يمكن التحكم في سمك الطلاء الخارجي بزيادة أو خفض عدد ترسيب طبقة، لا تتناسب مع سمك نانوكواتينج Hep-شماعة في الوقت الحاضر.
وعلاوة على ذلك، سبب حالة خفيفة حيث قابلاً للتفاعل الكيميائي بين دائرة الصحة الوطنية--ويجري فيه2 -NH، النهج الحالي للخلية الحية سطح الهندسة لا تقتصر على جزيرات البنكرياس، ولكن معظم الخلايا العلاج. بالإضافة إلى ذلك، وبالنظر إلى أن الهيبارين هو معروف للتفاعل مع مجموعة من السيتوكينات وجزيئات نشطة بيولوجيا، نانوكواتينج Hep-شماعة يعرض أيضا منصة مفتوحة له إمكانية إدراج الوسطاء البيولوجية غير محدود، وكذلك واجهات للهندسة سطح الخلية أكثر تعقيداً.

محدود الفعالية العلاجية للعلاجات المستندة إلى الخلية باستبقاء خلية منخفضة وبقاء الفقراء1،2. من أجل تحسين نتائج العلاج خلية، والخلية الهندسة السطحية عن طريق التلاعب الانزيمية، تم تصريف الببتيد والكيمياء بيورثوجونال وتغليف المادية مع الحيوية المستغلة3،4، 5،6،،من78،،من910. البروتوكول الحالي يهدف إلى تحقيق الهندسة السطحية للخلايا الحية باستخدام أسلوب "سهلة--إلى--اعتماد" بتطبيق نانوكواتينج سامسونج ستاربيج أدرجت الهيبارين (الهيبارين-شماعة) سطح الخلية. هندسة السطح من جزيرات البنكرياس وعرضت هنا كمثال نظراً للطبيعة غير المتجانسة لجزر لانجرهانز وتحط نتائج زرع جزيرة السريرية الحالية.
وفي الواقع، زرع جزيرة السريرية تتم حاليا عن طريق الحقن المباشر للجزر الصغيرة المعزولة في الوريد البابي الكبدي وهذا الإجراء متوفر فقط للمرضى انتقائية بسبب ندرة المواد المانحة وانخفاض الفعالية العلاجية 11-تقليديا، كانت الجينات مادة بيولوجية الأكثر استخداماً لتغليف جزيرة ليلى وتعديل السطح، على الرغم من أنها أقل من مثالية بسبب عدم الاستقرار الكيميائي للجينات والمتصلة بالتهابات التليف12، 13. وعلاوة على ذلك، بالمقارنة مع الحجم الطبيعي للجزر الصغيرة التي تتراوح ما بين 100 إلى 200 ميكرون، كبسولات رقيقة الجينات-جزيرة صغيرة جداً أكبر، تتراوح ما بين 400 و 800 ميكرون، التي تتجاوز المسافة نشرها الفسيولوجية للأوكسجين. تغليف جزيرة الامتثالي، أي.، تغليف الجزر دون تغيير كبير في حجم جزيرة ليلى، ووضعت بعد ذلك. وهكذا، ترسب نانوميمبرانيس تتألف من الوتد، تترافلورو، غشاء السيليكون أو نانوكواتينج متعدد الطبقات (يعرف أيضا باسم تقنية "طبقة بطبقة" [LBL]) أبلغ، الأمر الذي أدى إلى تحسن في المختبر بقاء جزيرة14 ،،من1516،،من1718، على الرغم من أن نهج LBL كثير من الأحيان يتطلب الجزيرات واسعة تسليم الفترة لترسب طبقات متعددة، مما قد يعرض للخطر بقاء جزيرة ليلى . وعلاوة على ذلك، تثير عدم استقرار نانوميمبرانيس التي تعتمد على التفاعلات الالكتروستاتيكي أو التساهمية بين طبقات بيوميمبراني أو التفاعلات مسعور بين نانوميمبرانيس وسطح جزيرة ليلى أيضا شواغل9،14 , 15 , 16 , 22 , 23 , 24 , 25 , 26.
عامل آخر يحد أن يرهن العلاجية نتيجة زرع جزيرة إينترابورتال هو لحظة الدم بوساطة التحريضية رد فعل (إيبمير) الناجمة عن الاتصال المباشر من الجزيرات مزروع بالدم، أسفر عن تراكم الصفائح الدموية، تخثر الدم ويضر المناعي أو التنشيط الخلوية غير مرغوب فيها9. لمعالجة هذه المشاكل، أعد نانوكواتينج رقيقة جداً تتكون من البولي إيثيلين على شكل نجمة غليكول (ستاربيج) للمنشأة توافق مع الحياة وبراعة كجزيرة الإسكان المواد. الهيبارين، جليكوسامينوجليكان نسبة عالية، وأدرج أيضا في نانوكواتينج ستاربيج لخصائصه المضادة للالتهابات، والمضادة تخثر والقدرة على تيسير الأوعية الدموية بتجنيد برو-الأوعية عوامل النمو22، 23.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:531px;" width="531">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col span="2" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">Reagent</td>
			<td style="width:160px;"></td>
			<td style="width:120px;"></td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">PBS</td>
			<td style="width:160px;">Hyclone</td>
			<td style="width:120px;">AAJ207798</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">Streptozototin</td>
			<td style="width:160px;">Sigma</td>
			<td style="width:120px;">S0130</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">Histopaque</td>
			<td style="width:160px;">Sigma</td>
			<td style="width:120px;">10831</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:131px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:160px;">GIBCO, by Life Technologies</td>
			<td style="width:120px;">31800022</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:131px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:160px;">GIBCO, by Life Technologies</td>
			<td style="width:120px;">16000-044</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">Penicillin Streptomycin</td>
			<td style="width:160px;">GIBCO, by Life Technologies</td>
			<td style="width:120px;">15140</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:131px;">Cell Dissociation Solution</td>
			<td style="width:160px;">GIBCO, by Life Technologies</td>
			<td style="width:120px;">13150-016</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:131px;">DMEM</td>
			<td style="width:160px;">GIBCO, by Life Technologies</td>
			<td style="width:120px;">12800017</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">D-(+)-Glucose solution</td>
			<td style="width:160px;">Sigma</td>
			<td style="width:120px;">G8644</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">488 phalloidin</td>
			<td style="width:160px;">Sigma</td>
			<td style="width:120px;">A12379</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">CFSE</td>
			<td style="width:160px;">Sigma</td>
			<td style="width:120px;">21888-25mg-F</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:131px;">Annexin V/PI apoptosis kit</td>
			<td style="width:160px;">Dojindo</td>
			<td style="width:120px;">AD10</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">DAPI Fluoromount-G</td>
			<td style="width:160px;">SouthernBiotech</td>
			<td style="width:120px;">0100-20</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">Collagenase from Clostridium, Type XI</td>
			<td style="width:160px;">Sigma</td>
			<td style="width:120px;">C7657</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">Heparin</td>
			<td style="width:160px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:120px;">H3149</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">NHS</td>
			<td style="width:160px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:120px;">56480</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">EDC</td>
			<td style="width:160px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:120px;">3449</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">8-armed PEG</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">1685176</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">FAM</td>
			<td style="width:160px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:120px;">M041100</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:131px;">5(6)-carboxyfluorescein N-succinimidyl ester</td>
			<td style="width:160px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:120px;">21888</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">KBr</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">32036</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">3-aminopropyl-triethoxysilane&#160;</td>
			<td style="width:160px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:120px;">A3648</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">toluene</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">S-15497-20X</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:131px;">Live/dead staining kit</td>
			<td style="width:160px;">Biovision, US</td>
			<td style="width:120px;">K501</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="79">
			<td height="79" style="height:79px;width:131px;">BD MatrigelTM, basement membrane matrix, growth factor reduced</td>
			<td style="width:160px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:120px;">354230</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">Sodium chloride, 99.5%</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">105864</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">Potassium chloride, 99%, extra pure</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">991468</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">Sodium bicarbonate, 99.7%, ACS reagent</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">988639</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:131px;">Magnesium chloride hexahydrate, 99%, ACS reagent</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">182158</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="76">
			<td height="76" style="height:76px;width:131px;">Potassium dihydrogen phosphate, 99%, extra pure</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">128839</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:131px;">Magnesium sulfate heptahydrate, 99%, for analysis</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">119370</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:131px;">Calcium chloride solution volumetric, 1.0 M CaCl2</td>
			<td style="width:160px;">J&#38;K Scientific Ltd</td>
			<td style="width:120px;">21114</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:160px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:120px;">V900933</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:131px;">Rat/Mouse Insulin ELISA kit</td>
			<td style="width:160px;">Millipore-linco</td>
			<td style="width:120px;">EZRMI-13K</td>
			<td style="width:120px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surface engineering of pancreatic islets with a heparinized starpeg nanocoating

يمكن حماية الخلية السطحية هندسة الخلايا مزروع من المضيف محصنة ضد الهجوم. فإنه يمكن أيضا إعادة تشكيل المناظر الطبيعية الخلوية لتحسين وظيفة الاختلاس والبقاء على قيد الحياة بعد زرع الأعضاء. هذا البروتوكول يهدف إلى تحقيق الهندسة السطحية من جزيرات البنكرياس نانوكواتينج سامسونج ستاربيج أدرجت الهيبارين (Hep-شماعة) استخدام. لتوليد نانوكواتينج Hep-شماعة للهندسة السطحية جزيرة البنكرياس، تم تصنيعه الهيبارين سوكسينيميديل succinate (الهيبارين--دائرة الصحة الوطنية) أولاً قبل التعديل أفرقتها كاربوكسيلات استخدام N-(3-dimethylamino propyl)-ن '-إيثيل كاربودييميدي هيدروكلوريد (تنمية الصادرات) و N-هيدروكسيسوكسينيميدي (NHS). ثم شكلت الخليط شماعة Hep crosslinking الأمينية فونكتيوناليزيد نهاية ثمانية مسلحين ستاربيج (ستاربيج-(NH2)8) والهيبارين--دائرة الصحة الوطنية. لطلاء السطح جزيرة ليلى، عزلت الجزيرات الماوس عبر كولاجيناز الهضم وتنقية التدرج باستخدام هيستوباك. ثم يعاملون الجزر المنعزلة مع الحل شماعة Hep الباردة الجليد لمدة 10 دقيقة للسماح الربط التساهمي بين دائرة الصحة الوطنية والمجموعات أمين من غشاء الخلية جزيرة ليلى. نانوكواتينج مع Hep-شماعة تتحمل تعديل الحد الأدنى لحجم جزيرة ليلى ووحدة التخزين وهيبارينيزيشن من الجزر مع شماعة Hep قد يقلل أيضا من لحظة رد فعل التهابات الدم بوساطة أثناء زرع جزيرة ليلى. هذا النهج "سهلة--إلى--اعتماد" معتدل ما يكفي للهندسة السطحية للخلايا الحية دون المساس بسلامة الخلية. وبالنظر إلى أن الهيبارين قد أظهرت تقارب ملزمة السيتوكينات متعددة، نانوكواتينج Hep-شماعة كما يوفر منصة مفتوحة تتيح إدماج الوسطاء البيولوجية الوظيفية غير محدود وأسطح متعددة الطبقات للمعيشة سطح الخلية الهندسة الحيوية.

نانوكواتينج شماعة الهيبارين تم تصنيعه بتصريف ستاربيج-(NH2)8 والهيبارين استخدام دائرة الصحة الوطنية وتنمية الصادرات كاقتران وكلاء (الشكل 1). فحص التركيب الكيميائي نانوكواتينج الهيبارين-شماعة متر، الأشعة تحت الحمراء وكما هو مبين في الشكل 2، يمكن ملاحظة قمم مميزة الهيبارين في سم 3,300-3,600-1، المطابق لمجموعات الهيدروكسيل الهيبارين (الشكل 2 أحمر). الانخفاض في السعة الذروة في سم 3,300 – 3,600– 1 (الشكل 2 الأزرق) يمثل الاقتران بين ستاربيج-(NH2)8 مجموعات أميد ومجموعة الكربونيل الهيبارين. السعة من ذروة سم 1,650-1 يناظر أميد الكربونيل تمتد الاهتزاز انخفض أيضا، مما يشير إلى رد فعل كاف بين مجموعات كاربوكسيلات الهيبارين مع سوكسيناتي سوكسينيميديل وأمين ستاربيج-(NH2) 8-فحص الهيكل السطحي من نانوكواتينج شماعة الهيبارين مجهر القوة الذرية وهو مبين من لو et al.، نانوكواتينج كان ما يقرب من 30 نانومتر في الطول و 2 ميكرومتر في العرض مع ميزات المسامية الصغيرة (البقع الداكنة) تتراوح بين بين 100 إلى 200 نانو متر في القطر10. كما تؤكد البيانات المستقاة من الفحص المجهري الإلكتروني الممسوحة ضوئياً بنية مسامية عالية المترابطة الهيبارين-شماعة (الشكل 3)، يوحي بأنها يمكن أن تكون مناسبة لبقاء الخلية أثناء الولادة الحية.
فحص طلاء السطح من الجزر المعزولة الماوس والنحو المبين في الشكل 4، طبقة رقيقة من نانوكواتينج، سيظهر بالأسفار الأخضر أودع بالتساوي عبر سطح الجزر الصغيرة المغلفة دون أحداث تغييرات واضحة على جزيرة ليلى/حجم وحدة التخزين. أثناء الطلاء، من المستحسن أن تبقى الجزر على الجليد للمحافظة على بقائها. وبالمثل، فترة طلاء، 10 دقيقة في هذه الحالة، كان أيضا الأمثل للسماح للحفاظ على بقاء الجزر الصغيرة. تجدر الإشارة إلى أن لمراقبة أفضل نانوكواتينج، الميكروسكوب الإلكتروني أن يفحص المقاطع العرضية للجزر الصغيرة المغلفة كما ذكر سابقا9،16 سيكون من الأنسب، على الرغم من أن يتم إنشاء البيانات من الجزر الصغيرة الثابتة والمضمنة بدلاً من الجزيرات المعيشة في الثقافة.
وكان فيما يتعلق البقاء على قيد الحياة والدالة المغلفة الجزر الصغيرة وجزيرة ليلى عودة التوعي ومهامها في المقررة في المختبر. النظر في الخصائص المفيدة الهيبارين، الروغان الهيبارين على سطح جزيرة يمكن أن تسهل عودة التوعي جزيرة ليلى في الثقافة، ومن ثم قدرته على البقاء. وقد لاحظنا أن الجزر الماوس الهيبارين-شماعة مغلفة معارضها بقاء جزيرة قوية في الثقافة (الشكل 5). إلى حد كبير أكثر تقدما بتشكيل الأوعية الدموية كان واضح أيضا من جزيرة ليلى خلايا بطانية (MS1) التي كانت مثقف يشترك مع الهيبارين-شماعة مغلفة بالجزر الصغيرة، أشارت إلى هياكل تشبه ميكروفيسيل ممدود وهياكل تشبه شبكة الأوعية الدموية (الرقم 6 ).
عملية نانوكواتينج التي تكبدتها لا تأثير الأنسولين الجلوكوز-وحفز قدرة الافرازية من الجزيرات الهيبارين-شماعة المغلفة. لوحظ انخفاض مستوى إفراز الأنسولين في كل معاملة الفئات عندما كانت perfused الجزر الصغيرة مع الحل الملح الفسيولوجية وتستكمل مع سوبستيمولاتوري مستوى الجلوكوز (2 ملمول/لتر؛ الشكل 7). عندما كانت تحفز الجزر الصغيرة على مستوى أعلاه فسيولوجية من الجلوكوز (20 ملمول/لتر جلوكوز)، لوحظت زيادة في إفراز الأنسولين في كل معاملة الجماعات.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56879/56879fig1v2.jpg"> رقم 1: التركيب الكيميائي لشماعة Hep نانوكواتينج للهندسة السطحية جزيرة البنكرياس. طلاء الجزيرة حققت crosslinking التساهمية بين الهيبارين--دائرة الصحة الوطنية والامينات الأولية داخل غشاء الخلية ونجمة-شماعة-(NH2)8. وتمتلك كل جزيء الهيبارين عدة مجموعات الكربوكسيل، الذي تم تعديله لجماعة دائرة الصحة الوطنية كل. مجموعات الكربوكسيل تنشيط المستشفيات سوف تتفاعل مع الأمينات الأولية للبروتين للروابط أميد النموذج، عبر التي استقرت نانوكواتينج شماعة Hep والجزر الصغيرة. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56879/56879fig1v2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56879/56879fig2v2.jpg"> الشكل 2 : المجففة طيف الأشعة تحت الحمراء نجمة-شماعة-(NH2)8، الهيبارين وشماعة Hep نانوكواتينج في الدولة. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56879/56879fig2v2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56879/56879fig3.jpg"> الشكل 3: الممسوحة ضوئياً صور المجهر الإلكتروني لشماعة Hep في الدولة المجففة. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56879/56879fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56879/56879fig4.jpg"> 4 الرقم: الصور التمثيلية من الهيبارين-شماعة مغلفة بالجزر الصغيرة تحت المجهر fluorescence. وكان الهيبارين المسمى مسبقاً مع الاتحاد الماليزي (يظهر باللون الأخضر). الصور هي الممثل للجزر 100. شريط المقياس = 100 ميكرومتر. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56879/56879fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56879/56879fig5.jpg"> 5 الرقم: الجزيرات الهيبارين-شماعة المغلفة أظهرت جدوى جزيرة قوية. (أ) البيانات المعروضة كالخطأ القياسي mean± من وسائل، n = 50 الجزيرات كل مجموعة. (ب) عرضت الخلايا الحية في الخلايا الخضراء والميت باللون الأحمر. شريط المقياس = 100 ميكرومتر. الصور هي الممثل للجزر الصغيرة 50. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56879/56879fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56879/56879fig6.jpg"> رقم 6: ييسر نانوكواتينج شماعة الهيبارين داخل جزيرة ريفاسكولاريسيشن- ماتريجيل أنبوب تشكيل خلايا MS1 مثقف يشترك مع الهيبارين-شماعة مغلفة الجزر الصغيرة والجزر الصغيرة التحكم نونكواتيد. أخذت الصور في 4 و 24 h. مقياس بار = 100 ميكرومتر. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56879/56879fig6large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56879/56879fig7.jpg"> 7 الرقم: نانوكواتينج الهيبارين-شماعة تتحمل أي تغيير في وظيفة إفراز الأنسولين ايميا. الهيبارين-شماعة الجزر الصغيرة المغلفة والجزيرات التحكم نونكواتيد (30 كل) تعرضوا ل 2 mmol/لتر (شريط بيضاء) أو 20 الجلوكوز mmol/لتر (شريط أسود) عن 30 دقيقة إفراز الأنسولين استجابة ل 20 ملمول/لتر جلوكوز كانت قابلة للمقارنة بين المغلفة والتحكم في الجزر الصغيرة. تظهر البيانات ك ± يعني الخطأ القياسي للوسائل، n = 10. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56879/56879fig7large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

Watch this Scientific Journal Video about Surface Engineering of Pancreatic Islets with a Heparinized StarPEG Nanocoating at JoVE.com

Surface Engineering of Pancreatic Islets with a Heparinized StarPEG Nanocoating

هندسة السطح من جزيرات البنكرياس مع نانوكواتينج ستاربيج هيبارينيزيد

يهدف هذا البروتوكول إلى تحقيق الهندسة السطحية من جزيرات البنكرياس باستخدام نانوكواتينج ستاربيج أدرجت الهيبارين عن طريق الكيمياء بيورثوجونال الزائفة بين مجموعات نانوكواتينج-هيدروكسيسوكسينيميدي نومجموعات أمين من جزيرة ليلى غشاء الخلية.

Cell surface engineering can protect implanted cells from host immune attack. It can also reshape cellular landscape to improve graft function and ...

surface-engineering-pancreatic-islets-with-heparinized-starpeg

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Bioengineering

7.3K Views.  Chinese Academy of Medical Science & Peking Union Medical College. يهدف هذا البروتوكول إلى تحقيق الهندسة السطحية من جزيرات البنكرياس باستخدام نانوكواتينج ستاربيج أدرجت الهيبارين عن طريق الكيمياء بيورثوجونال الزائفة بين مجموعات نانوكواتينج-هيدروكسيسوكسينيميدي نومجموعات أمين من جزيرة ليلى غشاء الخلية.

Video: Surface Engineering of Pancreatic Islets with a Heparinized StarPEG Nanocoating

Procedure for Lung Engineering

Lung tissue, including lung cancer and chronic lung diseases such as chronic obstructive pulmonary disease, cumulatively account for some 280,000 deaths annually; chronic obstructive pulmonary disease is currently the fourth leading cause of death in the United States1. Contributing to this mortality is the fact that lungs do not generally repair or regenerate beyond the microscopic, cellular level. Therefore, lung tissue that is damaged by degeneration or infection, or lung tissue that is surgically resected is not functionally replaced in vivo. To explore whether lung tissue can be generated in vitro, we treated lungs from adult rats using a procedure that removes cellular components to produce an acellular lung extracellular matrix scaffold. This scaffold retains the hierarchical branching structures of airways and vasculature, as well as a largely intact basement membrane, which comprises collagen IV, laminin, and fibronectin. The scaffold is mounted in a bioreactor designed to mimic critical aspects of lung physiology, such as negative pressure ventilation and pulsatile vascular perfusion. By culturing pulmonary epithelium and vascular endothelium within the bioreactor-mounted scaffold, we are able to generate lung tissue that is phenotypically comparable to native lung tissue and that is able to participate in gas exchange for short time intervals (45-120 minutes). These results are encouraging, and suggest that repopulation of lung matrix is a viable strategy for lung regeneration. This possibility presents an opportunity not only to work toward increasing the supply of lung tissue for transplantation, but also to study respiratory cell and molecular biology in vitro for longer time periods and in a more accurate microenvironment than has previously been possible.

We have developed a decellularized lung extracellular matrix and novel biomimetic bioreactor that can be used to generate functional lung tissue. By seeding cells into the matrix and culturing in the bioreactor, we generate tissue that demonstrates effective gas exchange when transplanted in vivo for short periods of time.

الداخلي للهندسة الرئة

Lung tissue, including lung cancer and chronic lung diseases such as chronic obstructive pulmonary disease, cumulatively account for some 280,000 deaths ...

Self-reporting Scaffolds for 3-Dimensional Cell Culture

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting 3D cellular construct can often be more relevant to studying the molecular events and cell-cell interactions than similar experiments studied in 2D. To create effective 3D cultures with high cell viability throughout the scaffold the culture conditions such as oxygen and pH need to be carefully controlled as gradients in analyte concentration can exist throughout the 3D construct. Here we describe the methods of preparing biocompatible pH responsive sol-gel nanosensors and their incorporation into poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) electrospun scaffolds along with their subsequent preparation for the culture of mammalian cells. The pH responsive scaffolds can be used as tools to determine microenvironmental pH within a 3D cellular construct. Furthermore, we detail the delivery of pH responsive nanosensors to the intracellular environment of mammalian cells whose growth was supported by electrospun PLGA scaffolds. The cytoplasmic location of the pH responsive nanosensors can be utilized to monitor intracellular pH (pHi) during ongoing experimentation.

Biocompatible pH responsive sol-gel nanosensors can be incorporated into poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) electrospun scaffolds. The produced self-reporting scaffolds can be used for in&#160;situ monitoring of microenvironmental conditions whilst culturing cells upon the scaffold. This is beneficial as the 3D cellular construct can be monitored in real-time without disturbing the experiment.

سقالات الإبلاغ الذاتي للخلية ثقافة 3 الأبعاد

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting ...

Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and invasion. Rat tail type I collagen and/or matrix derived from Engelbreth-Holm-Swarm mouse sarcoma cells have been traditionally employed as the substrates to model the matrix or stromal microenvironment into which mesenchymal cells (usually fibroblasts) are populated. Although experiments using such matrices are very informative, it can be argued that due to an overriding presence of a single protein (such as in type I Collagen) or a high content of basement membrane components and growth factors (such as in matrix derived from mouse sarcoma cells), these substrates do not best reflect the contribution to matrix composition made by the stromal cells themselves. To study native matrices produced by primary dermal fibroblasts isolated from patients with a tumor prone, genetic blistering disorder (recessive dystrophic epidermolysis bullosa), we have adapted an existing native matrix protocol to study tumor cell invasion. Fibroblasts are induced to produce their own matrix over a prolonged period in culture. This native matrix is then detached from the culture dish and epithelial cells are seeded onto it before the entire coculture is raised to the air-liquid interface. Cellular differentiation and/or invasion can then be assessed over time. This technique provides the ability to assess epithelial-mesenchymal cell interactions in a 3D setting without the need for a synthetic or foreign matrix with the only disadvantage being the prolonged period of time required to produce the native matrix. Here we describe the application of this technique to assess the ability of a single molecule expressed by fibroblasts, type VII collagen, to inhibit tumor cell invasion.

Tissue engineered fibroblast-derived native matrix is an emerging tool to generate a stromal substrate which supports epithelial cell proliferation and differentiation. Here a protocol applying this methodology to assess the impact of different stromal cell types on tumor cell biology is presented.

هندسة الأنسجة اللحمية من الورم المكروية مع التطبيق على غزو الخلية السرطانية

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and ...

Synthesis of Keratin-based Nanofiber for Biomedical Engineering

Electrospinning, due to its versatility and potential for applications in various fields, is being frequently used to fabricate nanofibers. Production of these porous nanofibers is of great interest due to their unique physiochemical properties. Here we elaborate on the fabrication of keratin containing poly (&#949;-caprolactone) (PCL) nanofibers (i.e., PCL/keratin composite fiber). Water soluble keratin was first extracted from human hair and mixed with PCL in different ratios. The blended solution of PCL/keratin was transformed into nanofibrous membranes using a laboratory designed electrospinning set up. Fiber morphology and mechanical properties of the obtained nanofiber were observed and measured using scanning electron microscopy and tensile tester. Furthermore, degradability and chemical properties of the nanofiber were studied by FTIR. SEM images showed uniform surface morphology for PCL/keratin fibers of different compositions. These PCL/keratin fibers also showed excellent mechanical properties such as Young&#39;s modulus and failure point. Fibroblast cells were able to attach and proliferate thus proving good cell viability. Based on the characteristics discussed above, we can strongly argue that the blended nanofibers of natural and synthetic polymers can represent an excellent development of composite materials that can be used for different biomedical applications.

Electrospun nanofibers have a high surface area to weight ratio, excellent mechanical integrity, and support cell growth and proliferation. These nanofibers have a wide range of biomedical applications. Here we fabricate keratin/ PCL nanofibers, using the electrospinning technique, and characterize the fibers for possible applications in tissue engineering.

التوليف من ألياف نانوية أساس كيراتين للهندسة الطبية الحيوية

Electrospinning, due to its versatility and potential for applications in various fields, is being frequently used to fabricate nanofibers. Production of ...

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and trade one defect for another. Tissue engineering holds the promise to address this increasing demand. However, most tissue engineering strategies fail to generate stable and functional tissue substitutes because of poor vascularization. This paper focuses on an in vivo tissue engineering chamber model of intrinsic vascularization where a perfused artery and a vein either as an arteriovenous loop or a flow-through pedicle configuration is directed inside a protected hollow chamber. In this chamber-based system angiogenic sprouting occurs from the arteriovenous vessels and this system attracts ischemic and inflammatory driven endogenous cell migration which gradually fills the chamber space with fibro-vascular tissue. Exogenous cell/matrix implantation at the time of chamber construction enhances cell survival and determines specificity of the engineered tissues which develop. Our studies have shown that this chamber model can successfully generate different tissues such as fat, cardiac muscle, liver and others. However, modifications and refinements are required to ensure target tissue formation is consistent and reproducible. This article describes a standardized protocol for the fabrication of two different vascularized tissue engineering chamber models in vivo.

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

This is a guideline for constructing in vivo vascularized tissue using a microsurgical arteriovenous loop or a flow-through pedicle configuration inside a tissue engineering chamber. The vascularized tissues generated can be employed for organ regeneration and replacement of tissue defects, as well as for drug testing and disease modeling.

هندسة الأنسجة عن طريق الجوهرية الأوعية الدموية في<em&gt; في فيفو</em&gt; غرفة هندسة الأنسجة

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and ...

Automated Robotic Dispensing Technique for Surface Guidance and Bioprinting of Cells

This manuscript describes the introduction of cell guidance features followed by the direct delivery of cells to these features in a hydrogel bioink using an automated robotic dispensing system. The particular bioink was selected as it allows cells to sediment towards and sense the features. The dispensing system bioprints viable cells in hydrogel bioinks using a backpressure assisted print head. However, by replacing the print head with a sharpened stylus or scalpel, the dispensing system can also be employed to create topographical cues through surface etching. The stylus movement can be programmed in steps of 10 &#181;m in the X, Y and Z directions. The patterned grooves were able to orientate mesenchymal stem cells, influencing them to adopt an elongated morphology in alignment with the grooves&#39; direction. The patterning could be designed using plotting software in straight lines, concentric circles, and sinusoidal waves. In a subsequent procedure, fibroblasts and mesenchymal stem cells were suspended in a 2% gelatin bioink, for bioprinting in a backpressure driven extrusion printhead. The cell bearing bioink was then printed using the same programmed coordinates used for the etching. The bioprinted cells were able to sense and react to the etched features as demonstrated by their elongated orientation along the direction of the etched grooves.

This protocol describes a bioprinting methodology using an automated robotic depositing system that incorporates etched topographical guidance cues with the precision deposition of a cell bearing hydrogel bioink. The printed cells are directly delivered to the etched features and are able to sense and orientate with them.

الآلية الروبوتية الاستغناء عن تقنية لتوجيه السطحية وBioprinting من الخلايا

This manuscript describes the introduction of cell guidance features followed by the direct delivery of cells to these features in a hydrogel bioink using ...

Sustained Administration of &#946;-cell Mitogens to Intact Mouse Islets Ex Vivo Using Biodegradable Poly(lactic-co-glycolic acid) Microspheres

The development of biomaterials has significantly increased the potential for targeted drug delivery to a variety of cell and tissue types, including the pancreatic &#946;-cells. In addition, biomaterial particles, hydrogels, and scaffolds also provide a unique opportunity to administer sustained, controllable drug delivery to &#946;-cells in culture and in transplanted tissue models. These technologies allow the study of candidate &#946;-cell proliferation factors using intact islets and a translationally relevant system. Moreover, determining the effectiveness and feasibility of candidate factors for stimulating &#946;-cell proliferation in a culture system is critical before moving forward to in vivo models. Herein, we describe a method to co-culture intact mouse islets with biodegradable compound of interest (COI)-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) microspheres for the purpose of assessing the effects of sustained in situ release of mitogenic factors on &#946;-cell proliferation. This technique describes in detail how to generate PLGA microspheres containing a desired cargo using commercially available reagents. While the described technique uses recombinant human Connective tissue growth factor (rhCTGF) as an example, a wide variety of COI could readily be used. Additionally, this method utilizes 96-well plates to minimize the amount of reagents necessary to assess &#946;-cell proliferation. This protocol can be readily adapted to use alternative biomaterials and other endocrine cell characteristics such as cell survival and differentiation status.

Here, we present methodology to generate and administer compound of interest-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) microspheres to intact mouse islets in culture with subsequent immunofluorescence analysis of &#946;-cell proliferation. This method is suitable for determining the efficacy of candidate &#946;-cell mitogens.

إدارة مستدامة للMitogens β-خلية لالفشوت ماوس سليمة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; عن طريق تحلل بولي (حامض اللبنيك في-ك-الجليكوليك) الجزئي

The development of biomaterials has significantly increased the potential for targeted drug delivery to a variety of cell and tissue types, including the ...

Scaffold-supported Transplantation of Islets in the Epididymal Fat Pad of Diabetic Mice

Islet transplantation has been clinically proven to be effective at treating type 1 diabetes. However, the current intrahepatic transplantation strategy may incur acute whole blood reactions and result in poor islet engraftment. Here, we report a robust protocol for the transplantation of islets at the extrahepatic transplantation site-the epididymal fat pad (EFP)-in a diabetic mouse model. A protocol to isolate and purify islets at high yields from C57BL/6J mice is described, as well as a transplantation method performed by seeding islets onto a decellularized scaffold (DCS) and implanting them at the EFP site in syngeneic C57BL/6J mice rendered diabetic by streptozotocin. The DCS graft containing 500 islets reversed the hyperglycemic condition within 10 days, while the free islets without DCS required at least 30 days. The normoglycemia was maintained for up to 3 months until the graft was explanted. In conclusion, DCS enhanced the engraftment of islets into the extrahepatic site of the EFP, which could easily be retrieved and might provide a reproducible and useful platform for investigating the scaffold materials, as well as other transplantation parameters required for a successful islet engraftment.

This protocol demonstrates murine islet isolation and seeding onto a decellularized scaffold. Scaffold-supported islets were transplanted into the epididymal fat pad of streptozotocin (STZ)-induced diabetic mice. Islets survived at the transplantation site and reversed the hyperglycemic condition.

تدعمه سقالة زرع الجزر في سادة الدهون البربخ من الفئران السكري

Islet transplantation has been clinically proven to be effective at treating type 1 diabetes. However, the current intrahepatic transplantation strategy ...

Treatment of Ligament Constructs with Exercise-conditioned Serum: A Translational Tissue Engineering Model

In vitro experiments are essential to understand biological mechanisms; however, the gap between monolayer tissue culture and human physiology is large, and translation of findings is often poor. Thus, there is ample opportunity for alternative experimental approaches. Here we present an approach in which human cells are isolated from human anterior cruciate ligament tissue remnants, expanded in culture, and used to form engineered ligaments. Exercise alters the biochemical milieu in the blood such that the function of many tissues, organs and bodily processes are improved. In this experiment, ligament construct culture media was supplemented with experimental human serum that has been &#39;conditioned&#39; by exercise. Thus the intervention is more biologically relevant since an experimental tissue is exposed to the full endogenous biochemical milieu, including binding proteins and adjunct compounds that may be altered in tandem with the activity of an unknown agent of interest. After treatment, engineered ligaments can be analyzed for mechanical function, collagen content, morphology, and cellular biochemistry. Overall, there are four major advantages versus traditional monolayer culture and animal models, of the physiological model of ligament tissue that is presented here. First, ligament constructs are three-dimensional, allowing for mechanical properties (i.e., function) such as ultimate tensile stress, maximal tensile load, and modulus, to be quantified. Second, the enthesis, the interface between boney and sinew elements, can be examined in detail and within functional context. Third, preparing media with post-exercise serum allows for the effects of the exercise-induced biochemical milieu, which is responsible for the wide range of health benefits of exercise, to be investigated in an unbiased manner. Finally, this experimental model advances scientific research in a humane and ethical manner by replacing the use of animals, a core mandate of the National Institutes of Health, the Center for Disease Control, and the Food and Drug Administration.

We present a model of ligament tissue in which three-dimensional constructs are treated with the human exercise-conditioned serum and analyzed for collagen content, function, and cellular biochemistry.

علاج الرباط ينشأ مع مصل مكيفة مكيفة: نموذج هندسة الأنسجة الانتقالية

In vitro experiments are essential to understand biological mechanisms; however, the gap between monolayer tissue culture and human physiology is large, ...

Pancreatic Tissue-Derived Extracellular Matrix Bioink for Printing 3D Cell-Laden Pancreatic Tissue Constructs

The transplantation of pancreatic islets is a promising treatment for patients who suffer from type 1 diabetes accompanied by hypoglycemia and secondary complications. However, islet transplantation still has several limitations such as the low viability of transplanted islets due to poor islet engraftment and hostile environments. In addition, the insulin-producing cells differentiated from human pluripotent stem cells have limited ability to secrete sufficient hormones that can regulate the blood glucose level; therefore, improving the maturation by culturing cells with proper microenvironmental cues is strongly required. In this article, we elucidate protocols for preparing a pancreatic tissue-derived decellularized extracellular matrix (pdECM) bioink to provide a beneficial microenvironment that can increase glucose sensitivity of pancreatic islets, followed by describing the processes for generating 3D pancreatic tissue constructs using a microextrusion-based bioprinting technique.

Decellularized extracellular matrix (dECM) can provide suitable microenvironmental cues to recapitulate the inherent functions of target tissues in an engineered construct. This article elucidates the protocols for the decellularization of pancreatic tissue, evaluation of pancreatic tissue-derived dECM bioink, and generation of 3D pancreatic tissue constructs using a bioprinting technique.

البنكرياس المشتقة الانسجه المستمدة مصفوفة بيونك للطباعة 3D خلايا البنكرياس لادن الانسجه يبني

The transplantation of pancreatic islets is a promising treatment for patients who suffer from type 1 diabetes accompanied by hypoglycemia and secondary ...