المؤلفون ممتنون للدكتور N. بانيك والدكتور D. ميتشل لتوجيهاتهم في تطوير هذا النموذج.

1. التحضير قبل اصابات الحبل الشوكي الأدوات الجراحية اللازمة لهذا الإجراء هي مشرط، بيك آب مع وبدون أسنان، المرقأة، الكامشات الاحتفاظ النفس، قراضة غيض غرامة، سائق إبرة، الغرز للامتصاص، والجلد مقطع تطبيقها. الإمدادات الجراحية الأخرى المطلوبة هي الستائر الجراحية، وصحائف عقيمة لحقل الجراحية، والإسفنج الشاش، القطن تطبيقها تلميح، واحباط المعدنية. الأوتوكلاف الأدوات والمعدات الجراحية قبل الجراحة. استخدام مجموعة من الأدوات الفردية والإمدادات اللازمة لحيوان واحد. تنظيف المنطقة الجراحية وجهاز (المسبار، مصدر الضوء، والإطار المجسم، والزجاج حبة التعقيم، ومنصات التدفئة) مع مناديل الكحول. فتح الستائر الجراحية واستخدام قفازات معقمة لثنى الجراحي الميداني تجنب بعناية التلوث. فتح الصكوك الفردية sterilely ووضع بعناية العاملين في الميدان الجراحية. تغطية المقابض ومقابض من المن المرجح حاجة جهاز البريد أثناء الإجراء مع رقائق معدنية معقمة. التحول في حبة تعقيم الزجاج لتكون جاهزة للاستخدام أثناء العملية. 2. إعداد الحيوانات جعل الفئران إلى المختبر منطقة القليلة ساعة قبل الإجراء الفعلي. إدارة الدواء الألم ساعة واحدة على الأقل قبل إجراء متوقع (عادة buprinorphine 1.5 مل من 0.006 ملغ / مل تحت الجلد). إدارة المضادات الحيوية قبل الجراحة (عادة Baytril 4 ملغ / كغ تحت الجلد). تخدير الفئران باستخدام 90 ملغم / كغم من الكيتامين وانتظر حتى لم يكن هناك استجابة قرصة أخمص القدمين. جس العملية الشائكة الأبرز في الفقرات الصدرية. هذا المستوى يتوافق عادة مع T10 العملية الشائكة. وضع علامة على موقع من مستوى المقصود فيما يتعلق T10. في مختبرنا نقوم اصابة T10. يصف السرد التالي من تقنية T10 اصابات النخاع الشوكي. حلاقة 3 سم × 6 سم المستطيل طوليا، وتركزت على مستوى T10. تنظيف البشرة ثلاث مرات وايال حل بتدين. تطبيق مواد التشحيم العيون على كل عين. نقل الفئران في وضع مريح إلى الميدان الجراحية تجنب بعناية التلوث. إدراج التحقيق في درجة الحرارة المستقيم لمراقبة درجة الحرارة الأساسية وضبط التدفئة وفقا لذلك للحفاظ على درجة حرارة الحيوان أقرب إلى وضعها الطبيعي (~ 37.5 ° C) ممكن. تغطية الفئران مع ثنى الجراحية مع نافذة فوق موقع الجراحية. 3. إجراء العمليات الجراحية بادئ ذي بدء تقريبي 4 سم شق باستخدام شفرة # 10 تركزت على علامة T10. الشروع في تشريح بصبر اللفافة وطبقات العضلات بعيدا عن العمليات الشائكة T9-T11 والصفائح. ضع الكامشات لسحب العضلات واللفافة بعيدا عن العظام. حين استقرار العملية الشائكة من T9 تقسيم حاد في الرباط بين السناسن بين T9 T10 وباستخدام مقص غرامة. وبالمثل استقرار العملية الشائكة T10 وتقسيم الرباط بين السناسن بين T10-T11. استخدام التكبير حلقة لمجمعات لالشركة المصرية للاتصالات تقسيم الأربطة على طول الطريق من خلال الرباط الأصفر (الشكل 1). الكيس قرابي غير بادية للعيان مرة يتم قطع الرباط الأصفر. استخدام رينجرز غيض غرامة لأداء بعناية الثقب المجزأ ثنائيا في T10. يتم أخذ أقصى درجات الحرص لتجنب الضغط الهبوطي على كيس قرابي والإصابات غير المتعمدة من النصائح قراضة. تتم إزالة الصفيحة والعملية الشائكة من T10 تماما. نقل الحيوانات الى الموقف على منصة الاستقرار. استخدام المشابك استقرار لشل حركة العمود الفقري من قبل لقط النواحي الجانبية من الجسم الفقري T11 تليها النواحي الجانبية من الجسم T9 الفقري. يجب الحرص على عدم ضغط الفئران في منصة مع المشابك استقرار لأن هذا من شأنه أن يقيد مساحة للحركات التنفس وإضافة الإجهاد غير المرغوب فيها الحيوان. بعد تأمين يتم فحص إعدادات العمود الفقري على المسبار الكمبيوتر التي تسيطر عليها. نحن عادة استخدام طرف المسبار من 3.0 ملم في SPالعيدين من 4 سم / ثانية على عمق 2 ملم ووقت يسكن من 0.3 ثانية. تمديد طرف المسبار وخفضه حتى يلمس فقط سطح الحبل. سحب طرف وخفض الجهاز 2 ملم نحو السطح الحبل الشوكي. مكبس إطلاق في 4 سم / ثانية تسبب كدمة إصابة الحبل الشوكي الشديدة. تحقيق الإرقاء باستخدام الضغط ما يكفي للحفاظ على قضيب من القطن ذات طرف في المكان، والحرص على عدم خلق أي ضغط لا لزوم لها على الحبل. خياطة العضلات وطبقات اللفافة مع شخصية-8 غرزة والحرص على عدم سحب ضيقة جدا باستخدام الخيوط الجراحية القابلة للامتصاص. إغلاق الجلد مع الحد الأدنى من 2 الدبابيس الصغيرة، ويمكن استخدام ما يصل إلى 4 أو 5 أجزاء من المواد الغذائية إذا شق تبقى مفتوحة بعد أول 2 أو 3 من السلع الاساسية. 3. العناية بعد العملية مكان الفئران في بيئة دافئة من حوالي 33-35 درجة مئوية لمدة 24 ساعة بعد الجراحة. وهذا يستتبع حاضنة (بينما هم اللاوعي) ومساحة القفص ساخنة مرة واحدة فإنها تبدأ في التحرك. مرة واحدة الفئران هي AW تماماأك، إدارة 5ML من المياه المالحة، 1.5 مل (0.006 ملغ / مل) من buprinorphine، و 0.1 مل من Baytril جميع تحت الجلد. تواصل مع buprinorphine تحت الجلد مرتين في اليوم لمدة ساعة الأولى 24-48 وBaytril مرة واحدة يوميا لمدة 7 أيام. وينبغي التعبير عن قربة يدويا ثلاث مرات يوميا حتى عودة وظيفة المثانة (&lt;2 مل من البول في التعبير الصباح الباكر لمدة 3 أيام متتالية). وينبغي أيضا أن يتم التحقق الحيوانات خلال هذا الوقت للعدوى (دم في البول، بيضاء اللون، أو رائحة كريهة)، انخفاض النشاط البدني أو مشاكل مع التئام الجروح. ولذا ينبغي التصدي جود عدوى مع جرعة زيادة (أو إعادة بدء) للمضادات الحيوية في التشاور مع الأطباء البيطريين المحليين. وزن الفئران التي تبدأ يوميا بعد يوم من عملية جراحية لتقييم تعافيهم.

<ol>
	<li>Blesch, A., Tuszynski, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury:+plasticity,+regeneration+and+the+challenge+of+translational+drug+development.">Spinal cord injury: plasticity, regeneration and the challenge of translational drug development.</a> Trends Neurosci. 32, 41-47 (2009).</li><li>Dobkin, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Curiosity+and+cure:+translational+research+strategies+for+neural+repair-mediated+rehabilitation.">Curiosity and cure: translational research strategies for neural repair-mediated rehabilitation.</a> Dev. Neurobiol. 67, 1133-1147 (2007).</li><li>Fehlings, M. G., Cadotte, D. W., Fehlings, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+systematic+reviews+on+the+treatment+of+acute+spinal+cord+injury:+a+foundation+for+best+medical+practice.">A series of systematic reviews on the treatment of acute spinal cord injury: a foundation for best medical practice.</a> J. Neurotrauma. 28, 1329-1333 (2011).</li><li>Iseda, T., Okuda, T., Kane-Goldsmith, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single,+high-dose+intraspinal+injection+of+chondroitinase+reduces+glycosaminoglycans+in+injured+spinal+cord+and+promotes+corticospinal+axonal+regrowth+after+hemisection+but+not+contusion.">Single, high-dose intraspinal injection of chondroitinase reduces glycosaminoglycans in injured spinal cord and promotes corticospinal axonal regrowth after hemisection but not contusion.</a> J. Neurotrauma. 25, 334-349 (2008).</li><li>Khan, T., Havey, R. M., Sayers, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+spinal+cord+contusion+injuries.">Animal models of spinal cord contusion injuries.</a> Laboratory Animal Science. 49, 161-172 (1999).</li><li>Kim, B. G., Kang, Y. M., Phi, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+polymer+scaffolds+seeded+with+neural+stem+cells+in+a+canine+spinal+cord+injury+model.">Implantation of polymer scaffolds seeded with neural stem cells in a canine spinal cord injury model.</a> Cytotherapy. 12, 841-845 (2010).</li><li>Kim, J. H., Tu, T. W., Bayly, P. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+speed+does+not+determine+severity+of+spinal+cord+injury+in+mice+with+fixed+impact+displacement.">Impact speed does not determine severity of spinal cord injury in mice with fixed impact displacement.</a> Journal of Neurotrauma. 26, 1395-1404 (2009).</li><li>Kwon, B. K., Hillyer, J., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research+in+spinal+cord+injury:+a+survey+of+opinion+from+the+SCI+community.">Translational research in spinal cord injury: a survey of opinion from the SCI community.</a> J. Neurotrauma. 27, 21-33 (2010).</li><li>Kwon, B. K., Okon, E. B., Tsai, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+grading+system+to+evaluate+objectively+the+strength+of+pre-clinical+data+of+acute+neuroprotective+therapies+for+clinical+translation+in+spinal+cord+injury.">A grading system to evaluate objectively the strength of pre-clinical data of acute neuroprotective therapies for clinical translation in spinal cord injury.</a> J. Neurotrauma. 28, 1525-1543 (2011).</li><li>Norenberg, M. D., Smith, J., Marcillo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathology+of+human+spinal+cord+injury:+defining+the+problems.">The pathology of human spinal cord injury: defining the problems.</a> J. Neurotrauma. 21, 429-440 (2004).</li><li>Siegenthaler, M. M., Tu, M. K., Keirstead, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+extent+of+myelin+pathology+differs+following+contusion+and+transection+spinal+cord+injury.">The extent of myelin pathology differs following contusion and transection spinal cord injury.</a> J. Neurotrauma. 24, 1631-1646 (2007).</li><li>Talac, R., Friedman, J. A., Moore, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+spinal+cord+injury+for+evaluation+of+tissue+engineering+treatment+strategies.">Animal models of spinal cord injury for evaluation of tissue engineering treatment strategies.</a> Biomaterials. 25, 1505-1510 (2004).</li><li>Tator, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+treatment+trials+in+human+spinal+cord+injury:+issues,+difficulties,+and+recommendations.">Review of treatment trials in human spinal cord injury: issues, difficulties, and recommendations.</a> Neurosurgery. 59, 957-982 (2006).</li></ol>

لا شيء الإفصاح المالي التمويل الكشف عن لا شيء.

وقد أظهرت العديد من العلاجات رواية مؤخرا الوعد في وقت مبكر في مجال البحوث اصابات النخاع الشوكي. 3 تقييم دقيق لهذه العلاجات هو أساسي في نموذج ذات الصلة سريريا من اصابات النخاع الشوكي لتحديد الاستراتيجيات مع أقصى قدر من إمكانات متعدية. وقد وضعت خطة للتصنيف مؤخرا لتقييم قوة من الدراسات قبل السريرية. 9 أكدت هذه الخطة على أهمية استخدام نموذج كدمة شديدة من اصابات النخاع الشوكي. نحن هنا وصف مثل هذا النموذج من كدمة شديدة اصابات النخاع الشوكي مع حجم الآفة بما يتفق ودرجات وظيفية تشبه تلك النماذج عانى من قطع. يمكن استخدام هذا النموذج باعتباره &#39;دليلا على مفهوم&#39; لإقامة فعالية العلاج سواء بالنسبة العصبية واستراتيجيات neuroregeneration. الجيل موحدة contusive اصابات النخاع الشوكي يظل تحديا. للاستنساخ، فمن الضروري أن يتم تنفيذ إصابة كما موحد قدر الإمكان. يجب تحديد المستوى المستهدف من الحبل الشوكي باستمرار الابام حيوان إلى حيوان. وينبغي أن يتم التخلص من العظام خلال الثقب بعناية لضمان يتم ترك أي شظايا العظام في القناة الشوكية، وهذه يمكن أن تسبب إصابات الضغط وإدخال التغيرات غير المرغوب فيها في آليات الإصابة وإمكانية الانتعاش. لقد اعتمدت عدة خطوات لضمان الاتساق بما في ذلك حجم المسبار، وتثبيت العمود الفقري جامدة على الإطار مع الأسلحة التي شنت استقرار، وذلك باستخدام سرعة تأثير موحد وعمق الانحشار. من المهم أن الفئران وضعه بشكل مريح عندما يتم فرضت ملقط الاستقرار إلى الهيئات الفقري. أي اختلافات في محاذاة العمود الفقري أو الإجهاد الزائد أثناء لقط قد يغير من تأثير الميكانيكا الحيوية. استخدمنا مم المسبار 2.5 لأن متوسط ​​حجم الفئران الحبل الشوكي في منطقتنا من الفائدة 2.5-3 ملم. وقت الاتصال أو يسكن تم تعيين موحد في 0.3 ثانية في تجاربنا. ولكن في ملاحظتنا والتقارير الواردة من مختبرات أخرى، لنموذج شديد من اصابات النخاع الشوكي عمق الأثر هو الأكثر أهميةالمعلمة. في التجارب المذكورة في هذه الورقة تم تسليمها للتأثير على عمق ثابت من 2 ملم. العوامل الأخرى التي تؤثر على التوحيد وتشمل تدريب الموظفين، والتصور الواضح للأنسجة، وطرف المسبار لضمان تأثير مباشر في أنسجة الحبل (وليس الهياكل العظمية). ينبغي التقيد الفئران باستمرار خلال إجراءات العلامات الحيوية اللازمة الأهم من درجة الحرارة الأساسية والتنفس. انخفاض حرارة الجسم هو السبب الرئيسي للوفيات أثناء ومباشرة بعد إدارة التخدير. ورصد درجة الحرارة الأساسية مع مسبار المستقيم ومنصات التدفئة المناسبة تجنب هذه المضاعفات. إذا يصبح التنفس غير منتظم أو يتوقف الحيوان على التنفس، يجب أن تتوقف فورا حتى إجراء التنفس يعود إلى خط الأساس. الألم المفرط وغير مقصود أو أكثر من جرعة من الألم والتخدير الدواء قد يؤدي أيضا إلى مشاكل في التنفس. الفئران ينبغي رصدها بعناية بعد الإجراء. ث بهميجب أن تقاس بدقة الثمانيات وفقدان&gt; 20٪ من الوزن الأساسي يجب ان يدفع التحقيق في الغذاء والماء المتناولة، والتهاب المسالك البولية، وانهيار الجلد، وبعد اصابات النخاع الشوكي العلوص، الخ التشاور المبكر مع الكوادر البيطرية للتقييم والعلاج أمر حاسم في مثل هذه الحالات. كما نوقش في وقت سابق، يجب أن تبدأ الفئران الذين لم يستعيدوا السيطرة على المثانة بواسطة 14 يوما يعود على المضادات الحيوية لتجنب قاتلة التهاب المسالك البولية. يمكن أن يتسبب إصابة الحبل الشوكي عن طريق إما طريقة الإزاحة أو أسلوب قوة ثابتة. 5،12 تقنية وصفها في هذه الورقة هو طريقة الإزاحة حيث يتم تسليم القوة إلى عمق ثابت داخل الأنسجة الحبل الشوكي. استخدام المسبار الكمبيوتر التي تسيطر عليها يسمح لمستوى التحكم الذي لا يمكن تحقيقه من خلال الطرق الشائعة الأخرى من التجريبية اصابات النخاع الشوكي. تقنية ضغط مقطع لا يسمح لغير حادة، قوة contusive مع الإفراج الفوري، في حين أن تأثير جامعة نيويوركأو يعتمد على الجاذبية لتحديد قوة من كدمة. هذه التقنيات على الرغم من استنساخه، لا تسمح المحاكاة لظروف واجهتها خلال حادث سيارة، والسبب الأكثر شيوعا لاصابات النخاع الشوكي الحاده في البشر. وقد أظهرت الدراسات السابقة أن شدة الإصابة هي مرتبطة مباشرة مع عمق تأثير من سرعة التأثير. 7 لذلك هذا النموذج يسمح لاصابات النخاع الشوكي الشديدة التي يتعين القيام بها بشكل روتيني مع احتمال لتعديل شدة من خلال مجموعة أكبر من مزيج من القوة والتشريد .

اختيار نموذج الإصابة المناسبة أمر بالغ الأهمية لتقييم ما قبل السريرية من العلاجات رواية لاصابات الحبل الشوكي (النخاع الشوكي). 1،2،13 في دراسة حديثة من الأطباء والعلماء في مجال رضح عصبي نموذج كدمة، في مقابل تنصيف أو نماذج عانى من قطع كامل ، والمقبولة عالميا لتكون وثيقة الصلة سريريا. ويستند هذا الرأي على 8 ملاحظة أن غالبية اصابات الحبل الشوكي في البشر هو contusive في الطبيعة. 10 بيولوجيا كدمة ويبدو أيضا أن يكون مختلفا عن تنصيف أو عانى من قطع النماذج. Iseda 11، وآخرون آل. مقارنة تأثير داخل النخاع chondroitinase ABC حقن على neuroregeneration بشكل منفصل في تنصيف ونماذج كدمة. 4 تجدد المحاور وحظ في الجسر العصبية في تنصيف ولكن ليس مجموعة اصابات النخاع الشوكي كدمة. وتنصيف أو نماذج عانى من قطع كامل أيضا تهيئة الظروف تعرف أنها موجودة في فقط مجموعة فرعية صغيرة جدا من CLالظروف inical. على سبيل المثال، قد استخدمت العديد من المحققين التدخلات القائمة على السقالة لزرع في تجويف آفة بعد تنصيف أو عانى من قطع كامل لتعزيز التجدد. 6 يصبح هذا النهج غير ذي صلة سريريا لخلق تجويف داخل الحبل الشوكي المصاب هو غير عملي وربما غير أخلاقية. تقلب في الانتعاش وظيفية لا يزال يشكل تحديا كبيرا للنماذج كدمة. 5،12 هذا التغير يمكن التقليل من استخدام المسبار الكمبيوتر التي تسيطر عليها وتثبيت العمود الفقري قبل تأثير لتسليم قوة موحدة عبر حجم الحبل الشوكي وخاصة مسارات للسيارات يقع البطني . وتجدر الإشارة إلى أن اللدونة ومساهمة ضمانات من المحاور قيد الحياة هي الآلية الغالبة من الانتعاش بعد إصابة الحبل الشوكي. 1 الاختلافات لذلك، ولو كانت بسيطة في تقنية كدمة قد تسفر عن نتائج مختلفة إلى حد كبير. تحقيقا لهذه الغاية وضعنانموذج من إصابة الحبل الشوكي الشديدة التي ينتج عنها حجم كدمة متسقة والانتعاش وظيفية قابلة للمقارنة مع نماذج عانى من قطع. يمكن استخدام هذا النموذج للتحقيق في كل من العصبية واستراتيجيات neuroregeneration كدليل على مفهوم للفعالية العلاج.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td>Instrument/Drugs</td>
 <td>Company</td>
 <td>Cat #</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Computer controlled impactor</td>
 <td>Leica or the Infinite Horizons (formerly OSU) impactor</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Surgical instruments </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Scissors</td>
 <td>Fine Science Tools Inc
 </td>
 <td>14094-11 or 14060-09</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Forceps</td>
 <td>Fine Science Tools Inc </td>
 <td>11006-12 and 11027-12 or 			11506-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Hemostats</td>
 <td>Fine Science Tools Inc </td>
 <td>13009-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Retractors</td>
 <td>Fine Science Tools Inc </td>
 <td>17011-10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rongeurs</td>
 <td>Fine Science Tools Inc </td>
 <td>16020-14</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Needle driver</td>
 <td>Fine Science Tools Inc </td>
 <td>12001-13</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Stereotactic frame</td>
 <td> Leica or RWD Life Science Co. or
 TSE systems</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Buprinorphine</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Baytril</td>
 <td>Bayer</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ketamine</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

a contusion model of severe spinal cord injury in rats

وينبغي التحقيق في احتمال متعدية من العلاجات رواية في إصابة الحبل الشوكي الشديدة (SCI) نماذج كدمة. ووصف منهجية مفصلة للحصول على نموذج ثابت من اصابات النخاع الشوكي الشديدة. استخدام إطار المجسم والمسبار الكمبيوتر التي تسيطر عليها يسمح لخلق الإصابة استنساخه. انخفاض حرارة الجسم والتهاب المسالك البولية تشكل تحديات كبيرة في الفترة اللاحقة للعمليات الجراحية. رصد دقيق للحيوانات مع صحيفة تسجيل الوزن والتعبير المثانة يسمح للكشف المبكر عن مضاعفات ما بعد الجراحة. النتائج الفنية لهذا النموذج كدمة تعادل نماذج عانى من قطع. ويمكن استخدام نموذج كدمة لتقييم فعالية من كلا النهجين اعصاب وneuroregenerative.

حجم الآفة لقد حصلنا على كميات كبيرة الآفة ومتسقة باتباع تقنية الموضحة أعلاه. باستخدام Luxol سريع الأزرق تلطيخ حجم الآفة متوسط ​​2.04 مم 3 (95٪ CI 1،9 حتي 2،18) (ن = 5 حيوانات) تم الحصول عليها. الشكل 2 يبين يعني حجم الآفة مع تلطيخ ممثل باستخدام الأزرق سريع Luxol من خلال مركز الزلزال الآفة. عشرات الوظيفية وسيتم عرض عشرات السلوكية مقاسا بريسناهان (BBB) ​​مقياس باسو، بيتي، في الشكل 3. في 12 أسبوعا حقق الفئران في المجموعة الضابطة ومتوسط ​​درجة BBB من 2.2 ± 1.1 (ن = 10 الحيوانات). غيرها من المعلمات استنادا إلى تجربتنا الأخيرة مع 32 عملية جراحية الحيوانية في معدل البقاء على قيد الحياة من هذه التقنية هو 93.4٪. وتتعلق جميع الوفيات إلى استمرار التهاب المسالك البولية (UTI)، يليه التضحية الحيوانية لتجنب<html> الألم المفرط والمعاناة. بعد الانتهاء من تناول المضادات الحيوية لمدة 7 أيام وضعت الحيوانات 16.7٪ UTI. وكان متوسط ​​عدد أيام للكشف عن التهاب المسالك البولية بعد العملية 14.6 ± 7.6 يوما. ومن المثير للاهتمام الحيوانات تحقيق السيطرة على المثانة في المتوسط ​​13 يوما بعد الإصابة (يعني 13.33 ± 3.6 يوما). الفئران الذين طوروا التهاب المسالك البولية استغرق وقتا أطول لتحقيق السيطرة على المثانة بالمقارنة مع الفئران دون التهاب المسالك البولية (السيطرة على المثانة في الفئران مع التهاب المسالك البولية - 16 ± 1 أيام مقابل 12.8 ± 3.7 يوما عن السيطرة على المثانة في الفئران دون UTI، P = 0.03). في الفوج أن يتحقق السيطرة على المثانة في غضون 14 يوما لم يتم اكتشاف أي التهاب المسالك البولية اللاحقة. كما هو مبين في الشكل (4)، كان هناك مكاسب أولية في الوزن بعد اصابات النخاع الشوكي المحتمل من احتباس السوائل. انخفض الوزن في وقت لاحق واستقرت إلى مستوى أدنى (أقل ما يقرب من 10-12٪ من خط الأساس) في حوالي 10 أيام. <html> / files/ftp_upload/50111/50111fig1highres.jpg &quot;/&gt; الشكل 1. تشريح العمود الفقري من الفئران من النهج الخلفي (يسار) مما يدل على العمليات الشائكة والصفائح. ويصور موقف الرباط الأصفر (LF) في الفضاء بين الصفائح. القسم منتصف saggital (يمين) تبين الوضع النسبي للflavum الرباط والرباط بين السناسن فيما يتعلق الحبل الشوكي. <img src="/files/ftp_upload/50111/50111fig2.jpg" alt="الشكل 2" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50111/50111fig2highres.jpg"/> الشكل 2. الرسم البياني شريط يظهر حجم الآفة (في مم 3، محور Y) في الحيوانات تلقي إصابة الحبل الشوكي شديد (إلى اليسار). A المقطع الطولي ممثل من خلال مركز الزلزال الاصابة بعد Luxol تلطيخ الأزرق سريع (يمين). g3highres.jpg &quot;/&gt; الشكل (3). يعني BBB (Y محور) نقاط من الفئران على مدى 3 أشهر للمتابعة (X المحور) مما يدل الحد الأدنى من الانتعاش نموذجية من اصابات النخاع الشوكي الشديدة. <img src="/files/ftp_upload/50111/50111fig4.jpg" alt="الشكل 4" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50111/50111fig4highres.jpg"/> الشكل 4. الرسم البياني خط يظهر التباين في الوزن يوميا (في ز، Y محور) من الفئران مدة أكثر من 2 أسابيع (X محور) بعد تحريض من إصابة الحبل الشوكي.

Watch this Scientific Journal Video about A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats at JoVE.com

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

يوصف نموذج كدمة من إصابة الحبل الشوكي الشديدة. يتم وصف خطوات تفصيلية قبل العملية، المنطوق وبعد العمليات الجراحية للحصول على نموذج ثابت.

نموذج كدمة شديدة اصابات الحبل الشوكي في الجرذان

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

a-contusion-model-of-severe-spinal-cord-injury-in-rats

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

30.3K Views.  Medical University of South Carolina. يوصف نموذج كدمة من إصابة الحبل الشوكي الشديدة. يتم وصف خطوات تفصيلية قبل العملية، المنطوق وبعد العمليات الجراحية للحصول على نموذج ثابت.

Video: A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

الحادة والمزمنة الاختبارات الحسية اللمس بعد إصابة الحبل الشوكي في الجرذان

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment (RMCA) in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

During breathing, activation of respiratory muscles is coordinated by integrated input from the brain, brainstem, and spinal cord. When this coordination is disrupted by spinal cord injury (SCI), control of respiratory muscles innervated below the injury level is compromised1,2 leading to respiratory muscle dysfunction and pulmonary complications. These conditions are among the leading causes of death in patients with SCI3. Standard pulmonary function tests that assess respiratory motor function include spirometrical and maximum airway pressure outcomes: Forced Vital Capacity (FVC), Forced Expiratory Volume in one second (FEV1), Maximal Inspiratory Pressure (PImax) and Maximal Expiratory Pressure (PEmax)4,5. These values provide indirect measurements of respiratory muscle performance6. In clinical practice and research, a surface electromyography (sEMG) recorded from respiratory muscles can be used to assess respiratory motor function and help to diagnose neuromuscular pathology. However, variability in the sEMG amplitude inhibits efforts to develop objective and direct measures of respiratory motor function6. Based on a multi-muscle sEMG approach to characterize motor control of limb muscles7, known as the voluntary response index (VRI)8, we developed an analytical tool to characterize respiratory motor control directly from sEMG data recorded from multiple respiratory muscles during the voluntary respiratory tasks. We have termed this the Respiratory Motor Control Assessment (RMCA)9. This vector analysis method quantifies the amount and distribution of activity across muscles and presents it in the form of an index that relates the degree to which sEMG output within a test-subject resembles that from a group of healthy (non-injured) controls. The resulting index value has been shown to have high face validity, sensitivity and specificity9-11. We showed previously9 that the RMCA outcomes significantly correlate with levels of SCI and pulmonary function measures. We are presenting here the method to quantitatively compare post-spinal cord injury respiratory multi-muscle activation patterns to those of healthy individuals.

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment RMCA in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

The purpose of this publication is to present our original work on a multi-muscle surface electromyographic approach to quantitatively characterize respiratory muscle activation patterns in individuals with chronic spinal cord injury using vector-based analysis.

تقييم تنشيط العضلات التنفسية عن طريق الجهاز التنفسي التحكم في المحركات تقييم (RMCA) في الأشخاص الذين يعانون المزمنة اصابات الحبل الشوكي

During breathing, activation of respiratory muscles is coordinated by integrated input from the brain, brainstem, and spinal cord. When this coordination ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

تسيطر الموديل أثر القشرية لإصابات الدماغ الرضية

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter connected to a radio transmitter into the femoral artery of rats that underwent a T4 spinal cord transection with or without grafting of embryonic brainstem-derived neural stem cells expressing green fluorescent protein. Compared to other methods such as cannula insertion or tail-cuff, telemetry is advantageous to continuously monitor blood pressure and heart rate in freely moving animals. It is also capable of long term multiple data acquisitions. In spinal cord injured rats, basal cardiovascular data under unrestrained condition and autonomic dysreflexia in response to colorectal distension were successfully recorded. In addition, cardiovascular parameters before and after SCI can be compared in the same rat if a transmitter is implanted before a spinal cord transection. One limitation of the described telemetry procedure is that implantation in the femoral artery may influence the blood supply to the ipsilateral hindlimb.

We present a protocol for using a radio-telemetric system to record cardiovascular parameters in T4 spinal cord transected rats eight weeks after embryonic brainstem neural stem cell grafting into the lesion site. Telemetry is an advanced technique to accurately evaluate cardiovascular function in conscious freely moving spinal cord injured rats.

ونظام القياس عن بعد راديو لمراقبة وظيفة القلب والأوعية الدموية في الحبل الشوكي مع الفئران Transection والعصبية الجذعية الجنينية الطعوم خلية

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can be used both to investigate the biological responses to injury and to test potential therapies. Contusion or compression injury delivered to the surgically exposed spinal cord are the most widely used models of the pathology. In this report the experimental contusion is performed by using the Infinite Horizon (IH) Impactor device, which allows the creation of a reproducible injury animal model through definition of specific injury parameters. Stem cell transplantation is commonly considered a potentially useful strategy for curing this debilitating condition. Numerous studies have evaluated the effects of transplanting a variety of stem cells. Here we demonstrate an adapted method for spinal cord injury followed by tail vein injection of cells in CD1 mice. In short, we provide procedures for: i) cell labeling with a vital tracer, ii) pre-operative care of mice, iii) execution of a contusive spinal cord injury, and iv) intravenous administration of post mortem neural precursors. This contusion model can be utilized to evaluate the efficacy and safety of stem cell transplantation in a regenerative medicine approach.

Spinal cord injury is a traumatic condition that causes severe morbidity and high mortality. In this work we describe in detail a contusion model of spinal cord injury in mice followed by a transplantation of neural stem cells.

العصبية زرع الخلايا الجذعية في التجريبية Contusive نموذج من إصابة الحبل الشوكي

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The calibrated forceps model of compression injury is a convenient, low cost, and very reproducible animal model for SCI. We used a pair of modified forceps in accordance with the method published by Plemel et al. (2008) to laterally compress the spinal cord to a distance of 0.35 mm. In this video, we will demonstrate a dorsal laminectomy to expose the spinal cord, followed by compression of the spinal cord with the modified forceps. In the video, we will also address issues related to the care of paraplegic laboratory animals. This injury model produces mice that exhibit impairment in sensation, as well as impaired hindlimb locomotor function. Furthermore, this method of injury produces consistent aberrations in the pathology of the SCI, as determined by immunohistochemical methods. After watching this video, viewers should be able to determine the necessary supplies and methods for producing SCI of various severities in the mouse for studies on SCI and/or treatments designed to mitigate impairment after injury.

Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.

معايرة الملقط نموذج من الحبل الشوكي ضغط الإصابات

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...

Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury

Reduced spinal cord blood flow (SCBF) (i.e., ischemia) plays a key role in traumatic spinal cord injury (SCI) pathophysiology and is accordingly an important target for neuroprotective therapies. Although several techniques have been described to assess SCBF, they all have significant limitations. To overcome the latter, we propose the use of real-time contrast enhanced ultrasound imaging (CEU). Here we describe the application of this technique in a rat contusion model of SCI. A jugular catheter is first implanted for the repeated injection of contrast agent, a sodium chloride solution of sulphur hexafluoride encapsulated microbubbles. The spine is then stabilized with a custom-made 3D-frame and the spinal cord dura mater is exposed by a laminectomy at ThIX-ThXII. The ultrasound probe is then positioned at the posterior aspect of the dura mater (coated with ultrasound gel). To assess baseline SCBF, a single intravenous injection (400 &#181;l) of contrast agent is applied to record its passage through the intact spinal cord microvasculature. A weight-drop device is subsequently used to generate a reproducible experimental contusion model of SCI. Contrast agent is re-injected 15 min following the injury to assess post-SCI SCBF changes. CEU allows for real time and in-vivo assessment of SCBF changes following SCI. In the uninjured animal, ultrasound imaging showed uneven blood flow along the intact spinal cord. Furthermore, 15 min post-SCI, there was critical ischemia at the level of the epicenter while SCBF remained preserved in the more remote intact areas. In the regions adjacent to the epicenter (both rostral and caudal), SCBF was significantly reduced. This corresponds to the previously described &#8220;ischemic penumbra zone&#8221;. This tool is of major interest for assessing the effects of therapies aimed at limiting ischemia and the resulting tissue necrosis subsequent to SCI.

Contrast Enhanced Ultrasound imaging is a reliable in-vivo tool for quantifying spinal cord blood flow in an experimental rat spinal cord injury model. This paper contains a comprehensive protocol for application of this technique in association with a contusion model of thoracic spinal cord injury.

على النقيض المحسن التصوير بالموجات فوق الصوتية لتقييم الحبل الشوكي تدفق الدم في التجريبية العمود الفقري اصابات الحبل

Reduced spinal cord blood flow (SCBF) (i.e., ischemia) plays a key role in traumatic spinal cord injury (SCI) pathophysiology and is accordingly an ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) below the site of injury. The secondary ischemia that develops following the initial mechanical insult is a serious complication of the SCI and severely impairs the function and viability of surviving neuronal and non-neuronal cells in the SC. In addition, ischemia is also responsible for the growth of lesion during chronic phase of injury and interferes with the cellular repair and healing processes. Thus there is a need to develop a spinal cord ischemia model for studying the mechanisms of ischemia-induced pathology. Focal ischemia induced by photothrombosis (PT) is a minimally invasive and very well established procedure used to investigate the pathology of ischemia-induced cell death in the brain. Here, we describe the use of PT to induce an ischemic lesion in the spinal cord of mice. Following retro-orbital sinus injection of Rose Bengal, the posterior spinal vein and other capillaries on the dorsal surface of SC were irradiated with a green light resulting in the formation of a thrombus and thus ischemia in the affected region. Results from histology and immunochemistry studies show that PT-induced ischemia caused spinal cord infarction, loss of neurons and reactive gliosis. Using this technique a highly reproducible and relatively easy model of SCI in mice can be achieved that would serve the purpose of scientific investigations into the mechanisms of ischemia induced cell death as well as the efficacy of neuroprotective drugs. This model will also allow exploration of the pathological changes that occur following SCI in live mice like axonal degeneration and regeneration, neuronal and astrocytic Ca2+ signaling using two-photon microscopy.

Photothrombosis is a minimally invasive and highly reproducible procedure to induce focal ischemia in the spinal cord and serves as a model of spinal cord injury in mice.

Photothrombosis الناجم عن نقص التروية التنسيق نموذجا من اصابات الحبل الشوكي في الفئران

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

وحديثي الولادة ماوس الحبل الشوكي ضغط إصابة نموذج

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

A Tissue Displacement-based Contusive Spinal Cord Injury Model in Mice

Producing a consistent and reproducible contusive spinal cord injury (SCI) is critical to minimizing behavioral and histological variabilities between experimental animals. Several contusive SCI models have been developed to produce injuries using different mechanisms. The severity of the SCI is based on the height that a given weight is dropped, the injury force, or the spinal cord displacement. In the current study, we introduce a novel mouse contusive SCI device, the Louisville Injury System Apparatus (LISA) impactor, which can create a displacement-based SCI with high injury velocity and accuracy. This system utilizes laser distance sensors combined with advanced software to produce graded and highly-reproducible injuries. We performed a contusive SCI at the 10th thoracic vertebral (T10) level in mice to demonstrate the step-by-step procedure. The model can also be applied to the cervical and lumbar spinal levels.

We introduce a tissue displacement-based contusive spinal cord injury model that can produce a consistent contusive spinal cord injury in adult mice.

A النزوح القائم على النزوح النخاع الشوكي نموذج إصابة في الفئران

Producing a consistent and reproducible contusive spinal cord injury (SCI) is critical to minimizing behavioral and histological variabilities between ...