مصادر التمويل: وهذا العمل كما هو معتمد من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح HL067177، HL096845، وP01AI084853 إلى DSW

1. المانحة الداخلي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تم تنفيذ جميع العمليات الجراحية باستخدام تقنية معقمة. لا يتم إعطاء المضادات الحيوية لكلا الجهات المانحة والمتلقية الفئران. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يبدأ التخدير من الفأرة المانحة مع 5٪ Isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ومدخل أنبوب orotracheally الماوس مع قسطرة 20-مقياس الوريد ثم وضعت على جهاز التنفس الصناعي القوارض، وذلك باستخدام 100٪ أكسجين بمعدل من 125 الأنفاس / دقيقة، وحوالي 0.5 مل حجم المد والجزر (2٪ من وزنه). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويحتفظ التخدير مع Isoflurane 1-2٪ استنشاقه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هيأهم يتم وضع الماوس المانحة في موقف ضعيف، مع الكحول 70٪. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تنفيذ Laparosternotomy بمثابة خط الوسط مجتمعة وشق عرضي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم حقن الهيبارين على 100 كجم / ش إلى الوريد الأجوف السفلي (IVC)، من أسفل الكبد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وقطع الحجاب الحاجز على طول تعلق ضلعي بطني نحو العمود الفقري، ويتعرض التجويف الصدري عن طريق خفض كلا الجانبين من الصدرجدار في الرقبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد عمل قطع في IVC على مستوى الحجاب الحاجز، ويتم قطع ذيل حق الأذيني ومسح الرئتين مع 2 مل من المبرد (4 درجة مئوية) Lactated رينغر حقن و 0.1 مل من الهيبارين عن طريق شق عرضي في جذر الشريان الرئوي ( السلطة الفلسطينية) الجذع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إلقاء القبض على تهوية في ثلثي نهاية المد والجزر التضخم، ورفعه كتلة القلب والرئة وتخزينها على الجليد (4 درجة مئوية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إعداد الرئة اليسرى المانحة للمتلقي من قبل المرفق من الأصفاد. يتم شق رباط رئوي حتى الوريد الرئوي (PV). يتم جلب نقير خارج عن طريق إزالة المريء والشريان الأورطي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعرف على السلطة الفلسطينية، التي تقع في الجانب الأكثر الجمجمة من نقير، فضلا عن قصبة المرفق الرئيسي (BR). بعناية تشريح للسلطة الفلسطينية من الشعب الهوائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتكون السلطة الفلسطينية صفعة من قسطرة 24 المقياس (الرابع) عن طريق الوريد، وخفض إلى 0.5 ملم في الطول مع ملحق من 0.7 مم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ومن ثم تسبب تآكل كامل سطح الكفة لتسهيل anastomosis. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مشتق صفعة للقصبة من قسطرة الرابع 20-قياس، وخفض في طول 1.0 مم مع ملحق من 0.7 مم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام نفس المواد، والكفة الكهروضوئية يختلف مع الوزن من الفأرة المانحة. على وجه التحديد، بالنسبة للفئران 24-27 غراما من حجم الكفة هو 22 عيار 0.7 ملم في الطول مع ملحق مم 0.7. بالنسبة للفئران وزنها 27-32 جرام، والاستفادة من الدراسات قسطرة 20-قياس هذا هو 0.7 ملم في الطول مع ملحق مم 0.7. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تندس في الأصفاد إلى نهايات البعيدة للالكهروضوئية، والسلطة الفلسطينية، والأخ، وتشتمل على خياطة 9-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم مسح الرئة من الجهات المانحة وغسلها بمحلول ملحي معقم مع الهيبارين معقم قبل التخزين. يتم تغليف ثم الرئة المانحة مع شاش معقم غارقة في المياه المالحة عقيمة على الجليد (4 درجة مئوية)، والتي تحافظ على رئة نظيفة جدا وعقيم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع المشبك microvessel على قصبة لمنع دخول Lactated قارع الأجراس في مجرى الهواء. </li></ol> 2. المتلقي الداخلي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريض anesthesia والتهوية الميكانيكية هي نفسها كما هو موضح لالمانحة أعلاه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وحلق جدار الصدر الأيسر وهيأهم مع الكحول 70٪ ورايات مجال الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إجراء شق بضع الصدر في الفضاء اليسار وربي الثالث، توسيع شق وثيق ظهريا في العمود الفقري، والمشبك microvessel المفروضة على السفن وقصبة الرئة اليسرى المحاذية للقلب. يمكنك ان ترى السلطة الفلسطينية في الجانب الجمجمة، الكهروضوئية في نهاية الذيلية من نقير والأخ بينهما. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام الجر لطيف على مرقئ إلى إحداث توتر معتدل على الأخ، والسلطة الفلسطينية، والكهروضوئية، يتم سحبها من الرئة اليسرى من التجويف الصدري في حين ترك هياكل نقيري المركزية فرضت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم عزل، والسلطة الفلسطينية الكهروضوئية والأخ من قبل تشريح حادة تليها وضع خياطة 9-0 وضعه فضفاضة حول الكهروضوئية والسلطة الفلسطينية وبرازيلي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تشريح السلطة الفلسطينية تماما من غمده براني، شق صغير عرضية من ما يقرب من ربع محيط السفينة هوتقدم الى الجدار الأمامي، وترك استمرار الجزء الظهري من الشريان سليمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضعه في الرئة المانحة، ملفوفة في و، Lactated الباردة الشاش القطن قارع الأجراس بالدماء، وأعدت على النحو الموصوف أعلاه، في التجويف الصدري، والأصفاد إدراجها في PV المتلقي والسلطة الفلسطينية والأخ وتأمينها مع خياطة 9-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إزالة المشبك عبر نقيري السماح لضخه والتهوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تحديد المواقع في الرئة المزروعة مرة أخرى في صدر المتلقي، يتم إغلاق شق بضع الصدر باستخدام خياطة 5-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ولا يسمح للماوس على التعافي من التخدير. ويدير البوبرينورفين (0،05-0،15 ملغ / كلغ) على الفور بعد عملية جراحية، ومقابل كل 8 ساعات لمدة 2-3 أيام بعد الجراحة. </li></ol> 3. ممثل النتائج وقد علمتنا تجربتنا أنه يتطلب عدة أشهر من الممارسة المتكررة ليبرعوا في عملية زرع رئة الفأر نموذج. بعد أن يتم تحقيق الكفاءة، لديناchieved أن 96٪ (96/100 عملية جراحية على التوالي) معدل البقاء على قيد الحياة المحيطة بالجراحة مع الوفيات التي حدثت في آخر الأيام السبعة الجراحة. وكانت وفاة شخصين بسبب النزيف الذي بدأ intraoperatively، وpneumothraces كان سبب الوفاة في الفئران اثنين آخرين. لجميع الإجراءات، وهذه هي المرة الإسكيمية دافئ 14.32 ± 3.14 دقيقة، والباردة مرة الإسكيمية كان 58.51 ± 18.06 دقيقة. وتمت دراسة ثلاثة زرع رئة orthotopic مجموعات: isograft: C57BL / 6 → C57BL / 6، طعم خيفي: C57BL/10 → C57BL / 6 و C57BL / 6 → C57BL/10. كنا الفئران الذكور فقط ولكن يمكن لنا تقنية ينطبق أيضا على إناث الفئران، لأنه لا يوجد فرق كبير تشريحية بين الجنسين. وقد أجريت الدرجات من الأمراض الرفض بأسلوب أعمى استخدام المعايير القياسية لزرع رئة سريرية 7 (الجدول 1). في حين لاحظنا رفض معتدل أو لا في isograft (C57BL / 6 → C57BL / 6)، وكلاهما معا طعم خيفي المتقدمة يحتمrable الرفض الحاد أو المزمن (الشكل 1). في المقابل، كان OB بشكل ملحوظ أكثر تواترا في C57BL/10 → C57BL / 6 من C57BL / 6 → C57BL/10 مجموعة من day28 (الجدول 1). <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td> C57BL / 6 → C57BL / 6 </td><td> C57BL/10 → C57BL / 6 </td><td> C57BL / 6 → C57BL/10 </td><td> ف قيمة </td></tr><tr><td> رفض علم الأمراض &quot;A&quot; العشرات في اليوم 28 </td><td> 0.67 ± 0.89 </td><td> * 3.33 ± 0.82 </td><td> * 3.29 ± 0.76 </td><td> * P&gt; 0.05 </td></tr><tr><td> OB / الفئران المجموع في يوم 21 و 28 </td><td> 0/24 (0٪) </td><td> ** 14/34 (42.1٪) </td><td> ** 2/16 (12.5٪) </td><td> ** P &lt;0.05 </td></tr></tbody></table> الجدول رقم 1. عشرات نسيجية من الرفض الحاد وانتشار التهاب القصيبات زرع مسد آخر. التهديف من الرفض الحاد (&quot;A&quot; العشرات) من قبل المركز الجهوي للاستثمار قياسيteria كما هو موضح في نتائج ممثل. البيانات تمثل متوسط ​​± التنمية المستدامة من عشرات &quot;A&quot; في زرع أيام آخر 28. البيانات تمثل الكمية والنسبة المئوية من الفئران في كل مجموعة التي وضعت OB في أيام 21 و 28 زرع آخر. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/3947/3947fig1.jpg" /> الشكل 1. نتائج عياني والتشريح المرضي في 28 يوما آخر زرع رئة. لوحة تمثل 1A نتائج العيانية و H &amp; E الرئة Isograft الملون والرئة السذاجة حق. 1B 1C الفريق ويمثل H &amp; E وماسون وثلاثي الألوان الملون طعم خيفي الرئة BL/10 زرعها في المتلقي الماوس BL / 6، التي وضعت OB OB وغير، على التوالي. السهم الأبيض في 1B يحدد آفات OB. 1D لوحة يظهر BL / 6 طعم خيفي الرئة زرعها في المتلقي الماوس BL/10. وكانت أهم مشكلة اطلاق النار أثناء إجراء على النحو التالي. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اضطراب تدفق الدم: فلوش الرئة المانحة حتىاللون يصبح لونه ابيض. ويمكن استخدام الضغط المفرط لحث ذمة رئوية. ولكن لا يدفع الكثير للحيلولة دون وذمة بعد الزرع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صعوبة إدخال الكفة إلى الجهة المانحة: التأكد من أن الأوعية الدموية هو من طول كافية وخالية من الدهون والأنسجة المرفقة الضام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نزيف في موقع تفاغري: استخدام نصائح س لممارسة الضغط على موقع المتضررة لحوالي 5 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المتلقي عرقلة تدفق الدم للسلطة الفلسطينية: وهو ينجم أساسا عن التواء من خلال الإدراج الكفة. إذا لاحظ الهواء داخل السلطة الفلسطينية ثم إعادة فعل من التفمم ضروري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من الصعب PV مفاغرة: غشاء الكهروضوئية رقيقة جدا والدموع بسهولة. تحديد الحجم المناسب وإدراج صفعة مباشرة الى PV المستلم بلطف جدا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المستفيد من تدفق الدم PV إعاقة: تأكد من موقف واتجاه الكفة. الافراج عن ضغط من صفعة الشعب الهوائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استرواح الصدر: قد يكون سبب هذا إما عن طريق ثقب الشعب الهوائية بسبب تلاعبن من مجرى التنفس، أو ثقب من سطح الرئة بسبب الصدمة المرتبطة إجراء عملية زرع. يتم التعامل مع السابق مع إغلاق جراحي لثقب في جدار الشعب الهوائية، ويتم التعامل مع هذا الأخير من قبل oversewing تسرب على سطح الرئة باستخدام 10-0 خاط النايلون. </li></ol>

<ol>
	<li>Asimacopoulos, P. J., Molokhia, F. A., Pegg, C. A., Norman, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+in+the+rat.">Lung transplantation in the rat.</a> Transplant Proc. 3, 583-585 (1971).</li><li>Yoshida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+of+experimental+lung+transplantation+in+rabbits.">Surgical technique of experimental lung transplantation in rabbits.</a> Ann. Thorac. Cardiovasc. Surg. 11, 7-11 (2005).</li><li>McDyer, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+and+murine+obliterative+bronchiolitis+in+transplant.">Human and murine obliterative bronchiolitis in transplant.</a> Proc. Am. Thorac. Soc. 4, 37-43 (2007).</li><li>Sato, M., Keshavjee, S., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research:+animal+models+of+obliterative+bronchiolitis+after+lung+transplantation.">Translational research: animal models of obliterative bronchiolitis after lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 9, 1981-1987 (2009).</li><li>Okazaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic+vascularized+aerated+lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic vascularized aerated lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 7, 1672-1679 (2007).</li><li>Fan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralizing+IL-17+Prevents+Obliterative+Bronchiolitis+in+Murine+Orthotopic+Lung+Transplantation.">Neutralizing IL-17 Prevents Obliterative Bronchiolitis in Murine Orthotopic Lung Transplantation.</a> Am. J. Transplant. 11, 911-922 (2011).</li><li>Stewart, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revision+of+the+1996+working+formulation+for+the+standardization+of+nomenclature+in+the+diagnosis+of+lung+rejection.">Revision of the 1996 working formulation for the standardization of nomenclature in the diagnosis of lung rejection.</a> J. Heart Lung Transplant. 26, 1229-1242 (2007).</li><li>Mizuta, T., Kawaguchi, A., Nakahara, K., Kawashima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified rat lung transplantation using a cuff technique.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 97, 578-581 (1989).</li><li>Jungraithmayr, W. M., Korom, S., Hillinger, S., Weder, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic,+single-lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic, single-lung transplantation.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 137, 486-491 (2009).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+vascularized+right+lung+transplantation+in+the+mouse.">Orthotopic vascularized right lung transplantation in the mouse.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. , (2010).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

زرع مثلي الرئة في الفئران ويتحدى بسبب مطالب المجهرية والهشاشة البالغة للأنسجة. وقد سمح إدخال تقنية صفعة للاستخدام على نطاق واسع من زرع الرئة في الفئران orthotopic 8. وأصبح هذا الأساس لتطوير نموذج زرع رئة orthotopic في الفئران في المختبر. في الفئران والجرذان، وخلافا للبشر، الرئة اليسرى يحتوي على واحد فقط، والفص لا تشكل سوى 25٪ من مجموع كتلة الرئة. وهذا يجعل من اليسار واحد زرع رئة الممكنة في نموذج الفئران من دون الحاجة إلى وجود نظام دعم الدورة الدموية. وكشفت عملية جراحية لدينا الأولية التي والتهوية، ونضح من الرئة المزروعة كانت تعتمد بشكل كبير على حجم مفاغرة الكهروضوئية. واستخدمت محددة الكفة تفاغري الكهروضوئية لتتناسب مع حجم المانحين والمتلقين كما ذكرت 9. غير ملائم التحجيم الكفة أسفرت إما انخماص الرئة المزروعة أو تفزر من anast الكهروضوئيةomosis. وذكرت أوكازاكي وآخرون استخدام ربط السفينة مجتمعة، وتقليم 5 القصبات الهوائية. وفي الدراسة الحالية التي نستخدمها مقطع أم الدم لجميع هياكل نقيري، التي نقترح قد يختصر الوقت الدماغية دافئ. واحد الحد من زراعة الرئة اليسرى orthotopic في نموذج الفئران أن الحيوانات المتلقي يمكن البقاء على قيد الحياة بعد منيع للمستضد الخيفي بوساطة تنخر allografts بهم 5. ولذلك، دراسات البقاء على قيد الحياة غير ممكن، وتقييم الكسب غير المشروع يعتمد على الفحص النسيجي في الرئة المزروعة 10. باستخدام هذه التقنية، قمنا بتطوير نموذج ما قبل السريرية التهاب القصيبات مسد في الفئران. على وجه التحديد، الماوس المانحة C57BL/10 وكان المستفيد C57BL / 6. هذا يشير إلى دور قاصر، وليس رئيسيا مستضدات التوافق النسيجي، في التسبب التهاب القصيبات مسد 6. وعلاوة على ذلك، أفادت نحن تحييد IL-17 يمنع التهاب القصيبات مسد في نموذج الفئران. هذا الوضعل يمثل أداة بحث جديدة لفحص زرع الرئة والنهوض زرع رئة السريرية.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم المعدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج عدد </td></tr><tr><td> زييس Opmi 6SFC-1880 </td><td> بريسكوت المؤتمر الوطني العراقي </td><td> PMZ014 </td></tr><tr><td> هارفارد القوارض جهاز التهوية </td><td> هارفارد جهاز </td><td> 55-7058 </td></tr><tr><td> 20-مقياس رابعا قسطرة </td><td> شركة Terumo المؤسسة الطبية </td><td> 100510D </td></tr><tr><td> 22-مقياس رابعا قسطرة </td><td> شركة Terumo المؤسسة الطبية </td><td> 081015S </td></tr><tr><td> 24 مقياس رابعا قسطرة </td><td> شركة Terumo المؤسسة الطبية </td><td> 100522A </td></tr><tr><td> 9/0 المنهجيات فيرجين بلو الحرير </td><td> Ashaway الخط &amp; CO البرمة فيبكو </td><td> MBVS-90 </td></tr><tr><td> 10-0 ألكون الخياطة الجراحية </td><td> ألكون المختبرات، وشركة </td><td> 8065-192101 </td></tr><tr><td> BLACK 5-0/18inches الحرير مزين </td><td> هنري شين </td><td> M652630 </td></tr><tr><td> الهيبارين صوديوم 1000 وحدة / مل </td><td> APP الصيدلة </td><td> 407156 </td></tr><tr><td> Betadine الحل </td><td> بوردو المنتج </td><td> 67618-150 </td></tr><tr><td> Lactated رينغر حقن </td><td> هوسبيرا </td><td> NDC 0409-7953-03 </td></tr></tbody></table><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> سلالة من الفئران </td><td> بائع </td><td> العمر، والوزن </td><td> بين الجنسين، وتعليقات </td></tr><tr><td> C57BL/10 </td><td> هارلان سبراغ-داولي </td><td> 8-12 أسابيع، 25-30G </td><td> الذكور، والجهات المانحة </td></tr><tr><td> C57BL / 6 </td><td> هارلان سبراغ-داولي </td><td> 8-12 أسابيع، 25-30G </td><td> الذكور، والجهات المانحة أو المستفيدة </td></tr></tbody></table> الجدول 2. طاولة من الفئران، specifIC الكواشف والمعدات.

development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation

لاول مرة زرع مثلي الرئة في الفئران عن طريق Asimacopoulos وزملاؤه في عام 1971 1. حاليا، وهذه الطريقة مقبولة بشكل جيد وموحدة، ليس فقط لدراسة غرابة الرفض ولكن أيضا بين السلالات مسانج لدراسة آليات من نقص التروية، ضخه الاصابة بعد زرع الرئة. على الرغم من أن تطبيق هذه الفئران وغيرها من نموذج حيواني كبيرة 2 ساهمت بشكل كبير في توضيح هذه الدراسات، ويقتصر نطاق تلك التحقيقات التي تقوم بها قلة من خروج المغلوب والفئران المعدلة وراثيا. بسبب عدم علاجات فعالة لالتهاب القصيبات مسد، والسبب الرئيسي للوفاة في مرضى زرع الرئة، وكان هناك بحث مكثفة لمرحلة ما قبل السريرية النماذج التي تحاكي التهاب القصيبات مسد. نموذج طعم خيفي القصبة الهوائية هو الأكثر استخداما على نطاق واسع، وربما إعادة إنتاج بعض ملامح histopathologic من التهاب القصيبات مسد 3. ومع ذلك، فإن عدم وجود vasculat سليمةلدى عودتهم لا علاقة لشركة الخطوط الجوية المستلم إجراء، وميزات مرضية غير مكتملة من التهاب القصيبات مسد تحد من فائدة من هذا النموذج 4. خلافا لزرع الأعضاء الصلبة الأخرى، ومؤخرا فقط تم زرع أوعية دموية رئة الفأر التي أبلغ عنها أوكازاكي وزملاؤه للمرة الأولى في 2007 5. تطبيق المبادئ الأساسية لزرع رئة الفئران، بدأ مختبر لدينا نموذج التهاب القصيبات مسد استخدام قاصر مستضد الفئران متنافر نسيجيا orthotopic زرع رئة واحدة لليسار الذي يسمح للمزيد من الدراسة من إمراض مناعي التهاب القصيبات مسد 6.

Watch this Scientific Journal Video about Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation at JoVE.com

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

التهاب القصيبات المسد هو المعوق الرئيسي لبقاء طويل الأمد للمتلقي زرع الرئة وعدم وجود نموذج ما قبل السريرية قوي يحول دون دراسة مسد إمراض مناعي التهاب القصيبات. خلافا لغيرها من عمليات زرع الأعضاء الصلبة، وأوعية دموية فأر زرع رئة إلا في الآونة الأخيرة وضعت. هنا نعرض لدينا نموذج تطويرها بشكل مستقل التهاب القصيبات مسد الفئران بعد زرع رئة واحدة orthotopic.

تطوير النزلات الشعبية مسد في نموذج الفئران من زرع الرئة Orthotopic

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

development-obliterative-bronchiolitis-murine-model-orthotopic-lung

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

20.2K Views.  Indiana University School of Medicine. التهاب القصيبات المسد هو المعوق الرئيسي لبقاء طويل الأمد للمتلقي زرع الرئة وعدم وجود نموذج ما قبل السريرية قوي يحول دون دراسة مسد إمراض مناعي التهاب القصيبات. خلافا لغيرها من عمليات زرع الأعضاء الصلبة، وأوعية دموية فأر زرع رئة إلا في الآونة الأخيرة وضعت. هنا نع?...

Video: Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

زرع مثلي الأورطي : نموذج الفأر لدراسة تطوير المزمنة اعتلال وعائي

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and subsequent cell adhesion. After their bladders are transurethrally catheterized and drained, animals are again catheterized to permit insertion of a platinum wire into bladders without damaging the urethra or bladder. The catheters are made of Teflon to serve as an insulator for the wire, which will conduct electrical current into the bladder to create a burn injury. An electrocautery unit is used to deliver 2.5W to the exposed end of the wire, burning away extracellular layers and providing attachment sites for carcinoma cells that are delivered in suspension to the bladder through a subsequent catheterization. Cells remain in the bladder for 90 minutes, after which the catheters are removed and the bladders allowed to drain naturally. The development of tumor is monitored via ultrasound. Specific attention is paid to the catheterization technique in the accompanying video.

Bladder tumors are established in female mice in a minimally invasive fashion through catheterization, local cauterization, and subsequent adhesion of carcinoma cells to the burn sites.

نموذج مثلي من سرطان المثانة الفئران

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Small bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with short gut syndrome and failure of parenteral nutrition (irreversible intestinal failure). In specialized centers improved operative and managing strategies have led to excellent short- and intermediate term patient and graft survival while providing high quality of life 1,3. Unlike in the more common transplantation of other solid organs (i.e. heart, liver) many underlying mechanisms of graft function and immunologic alterations induced by intestinal transplantation are not entirely known6,7. Episodes of acute rejection, sepsis and chronic graft failure are the main obstacles still contributing to less favorable long term outcome and hindering a more widespread employment of the procedure despite a growing number of patients on home parenteral nutrition who would potentially benefit from such a transplant. The small intestine contains a large number of passenger leucocytes commonly referred to as part of the gut associated lymphoid system (GALT) this being part of the reason for the high immunogenity of the intestinal graft. The presence and close proximity of many commensals and pathogens in the gut explains the severity of sepsis episodes once graft mucosal integrity is compromised (for example by rejection). To advance the field of intestinal- and multiorgan transplantation more data generated from reliable and feasible animal models is needed. The model provided herein combines both reliability and feasibility once established in a standardized manner and can provide valuable insight in the underlying complex molecular, cellular and functional mechanisms that are triggered by intestinal transplantation. We have successfully used and refined the described procedure over more than 5 years in our laboratory 8-11. The JoVE video-based format is especially useful to demonstrate the complex procedure and avoid initial pitfalls for groups planning to establish an orthotopic rodent model investigating intestinal transplantation.

Small bowel transplantation has become an accepted treatment option for patients with irreversible intestinal failure. Our experimental model of orthotopic small bowel transplantation in rats serves as a reliable tool to address underlying immunologic and inflammatory processes that complicate intestinal transplantation.

زرع مثلي الأمعاء الصغيرة في الفئران

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

زراعة كبد في الفئران

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

العمليات الجراحية لنموذج الفئران من الجزئي زرع الكبد orthotopic مع إعادة الإعمار الكبدي الشرياني

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each year. While several animal models exist for this procedure and mice are the species that is most commonly used. The reasons for using mice are the relative cost of using this species, the existence of many genetically defined strains that allow for the study of immune responses, and the existence of an extensive array of reagents that can be used to further define responses in this species. This model has been used to define factors in the cornea that are responsible for the relative immune privilege status of this tissue that enables corneal allografts to survive acute rejection in the absence of immunosuppressive therapy. It has also been used to define those factors that are most important in rejection of such allografts. Consequently, much of what we know concerning mechanisms of both corneal allograft acceptance and rejection are due to studies using a murine model of corneal transplantation. In addition to describing a model for acute corneal allograft rejection, we also present for the first time a model of late-term corneal allograft rejection.

Mice have been used as a model for studying many forms of transplantation, including corneal transplantation. We describe in this report a murine model for both acute and late-term corneal transplantation.

الفئران زرع القرنية: نموذج لدراسة الشكل الأكثر شيوعا من الصلبة زراعة الأعضاء

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

طريقة معزولة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الإرواء الرئة في الفئران نموذج: الدروس المستفادة من تطوير برنامج EVLP الجرذ

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information about this disease. The human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model provides a useful alternative approach for understanding the specific interactions between genetically and molecularly altered tumor cells, their organ microenvironment, and for evaluation of efficacy of therapeutic regimens. This is a well characterized model designed to study the molecular events of primary tumor development and it recapitulates the early events in the metastatic cascade prior to embolism and entry of tumor cells into the circulation. Thus it allows elucidation of molecular mechanisms underlying the initial phase of metastatic disease. In addition, this model can annotate drug targets of clinical relevance and is a valuable tool to study prostate cancer progression. In this manuscript we describe a detailed procedure to establish a human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model.

Prostate cancer is the second most common cause of cancer-related deaths in the United States. An orthotopic cancer model provides a useful approach to understand the biology of prostate cancer and to evaluate the efficacy of therapeutic regimens. This protocol describes detailed steps necessary to establish an orthotopic prostate cancer mouse model.

ما قبل السريرية مثلي فأري موديل سرطان البروستاتا البشرية

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute respiratory distress syndrome (ARDS), characterized by neutrophilic alveolitis, and injury to both alveolar epithelium and vascular endothelium. Clinically, ARDS is defined by acute onset of hypoxemia, bilateral patchy pulmonary infiltrates and non-cardiogenic pulmonary edema. Human studies have provided us with valuable information about the physiological and inflammatory changes in the lung caused by ARDS, which has led to various hypotheses about the underling mechanisms. Unfortunately, difficulties determining the etiology of ARDS, as well as a wide range of pathophysiology have resulted in a lack of critical information that could be useful in developing therapeutic strategies.
Translational animal models are valuable when their pathogenesis and pathophysiology accurately reproduce a concept proven in both in vitro and clinical settings. Although large animal models (e.g., sheep) share characteristics of the anatomy of human trachea-bronchial tree, murine models provide a host of other advantages including: low cost; short reproductive cycle lending itself to greater data acquisition; a well understood immunologic system; and a well characterized genome leading to the availability of a variety of gene deletion and transgenic strains. A robust model of low pH induced ARDS requires a murine ALI that targets mainly the alveolar epithelium, secondarily the vascular endothelium, as well as the small airways leading to the alveoli. Furthermore, a reproducible injury with wide differences between different injurious and non-injurious insults is important.
The murine gastric acid aspiration model presented here using hydrochloric acid employs an open tracheostomy and recreates a pathogenic scenario that reproduces the low pH pneumonitis injury in humans. Additionally, this model can be used to examine interaction of a low pH insult with other pulmonary injurious entities (e.g., food particles, pathogenic bacteria).

This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.

فتح القصبة الهوائية المعدة حمض الطموح فأري موديل الحاد الرئة إصابة النتائج في القصوى الحاد غير قاتل الرئة الإصابات

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

نموذج بورسين ما قبل السريرية لزراعة القلب التقويمي

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...