وأيد هذه الدراسة في جزء من المعاهد الوطنية للصحة منح 1RO1DK74566 و1RO1AM52984. فإن الكتاب أود أن أشكر السيدة جاكلين مكارتي في المؤتمر الإقليمي لمساعدتها خلال عملية جراحية، الدكاترة. Jianpu وانغ وساروجيني Harshini لمساعدتهم في رعاية عملية جراحية وبعد العملية الجراحية لبعض الأرانب، والدكتور رونغ وان لعمل الأنسجة لها، والسيدة لى مينغ لقياسات HPLC لها ذات الطاقة العالية الفوسفات.

<ol>
	<li>Ninomiya, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vascular+bed+in+the+rabbit+ear:+microangiography+and+scanning+electron+microscopy+of+vascular+corrosion+casts.">The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts.</a> Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).</li><li>Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skin+wounds:+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy.">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair. 17, 763-771 (2009).</li><li>Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+global+burden+of+diabetic+foot+disease.">The global burden of diabetic foot disease.</a> Lancet. 366, 1719-1724 (2005).</li><li>Edwards, J., Stapley, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Debridement+of+diabetic+foot+ulcers.">Debridement of diabetic foot ulcers.</a> Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).</li><li>Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence-based+Management+Strategies+for+Treatment+of+Chronic+Wounds.">Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds.</a> Eplasty. 9, 169-179 (2009).</li><li>Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+enhance+wound+healing+through+differentiation+and+angiogenesis.">Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis.</a> Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).</li><li>Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+chronic+ulceration+of+the+legs+with+human+amnion.">Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion.</a> Lancet. 1, 1153-1156 (1980).</li><li>Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+use+in+wound+healing+research:+a+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue.">Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue.</a> Wound Repair. 8, 83-96 (2000).</li><li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+wound+healing+research:+do+we+need+more.">Animal models in wound healing research: do we need more.</a> Wound Repair. 8, 81-82 (2000).</li><li>LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+disease+of+the+lower+extremities+in+diabetes+mellitus.">Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus.</a> Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).</li><li>Gottrup, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen,+wound+healing+and+the+development+of+infection.+Present+status.">Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status.</a> Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).</li><li>Niinikoski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+blood+and+oxygen+supply+on+the+biochemistry+of+repair.">The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair.</a> , 56-71 (2002).</li><li>Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+to+study+ischemia+in+chronic+wounds.">Models to study ischemia in chronic wounds.</a> Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).</li><li>Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+oxygen+in+wound+repair.">The role of oxygen in wound repair.</a> , 165-174 (1991).</li><li>Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Science,+medicine+and+the+future:+healing+chronic+wounds.">Science, medicine and the future: healing chronic wounds.</a> BMJ. 324, 160-163 (2002).</li><li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Editorial:+How+should+one+study+wound+healing.">Editorial: How should one study wound healing.</a> Wound Repair. 14, 515-515 (2007).</li><li>Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+rabbit+ear+model+created+by+minimally+invasive+surgery.">Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery.</a> Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).</li><li>Joseph, J., Townsend, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+healing+of+defects+in+immobile+skin+in+rabbits.">The healing of defects in immobile skin in rabbits.</a> Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).</li><li>James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilms+in+chronic+wounds.">Biofilms in chronic wounds.</a> Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).</li><li>Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+study+of+decubitus+ulcer+formation+in+the+rabbit+ear+lobe.">Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe.</a> J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).</li><li>Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+pressure+ulcer+research.">Animal models in pressure ulcer research.</a> J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).</li></ol>

لا يوجد تعارض في المصالح المالية المشتركة في هذه الدراسة.

ويصيب داء السكري 23600000 شخص في الولايات المتحدة، 2،3 و 15-20٪ من هؤلاء المرضى تطوير تقرحات القدم في حياتهم، 4،5 بتكلفة علاج سنوية قدرها أكثر من 25 مليار دولار. 3،6 ولكن، حتى في أفضل ما هو متاح العلاجات السبيل الوحيد لتحقيق معدل شفاء 50٪ وهذا غالبا ما يكون مؤقتا، 7 مع معدلات تكرار يصل إلى 66٪ في مرضى السكري. 3،6 وعندما يحدث تقرحات في مرضى السكري، مضاعفات كبرى مثل العدوى وزيادة بتر بشكل كبير. على الرغم من قرن تقريبا من الأبحاث المكثفة ووضع الآلاف من المنتجات خلع الملابس، وقد ثبت حتى الآن لا شيء فعال. في بيان ان &quot;قرحة قديم في عام 1830 ستكون الأكبر قرحة في عام 1860،&quot; صنع في إحدى الصحف تصف 1 المزمنة علاج الجرح، لا يزال ساريا اليوم. 8 العثور على نموذج حيواني المناسبة للدراسة الجرح وكان تحديا كبيرا للعلماء كما كذلك بالنسبة للأطباء. وقد تم إنشاء العديد من النماذج الحيوانيةأو مقترح لدراسة العناية بالجروح، ولكن نموذج مشابه إلى جرح بجرح مزمن غير تضميد الجراح، والإنسان هو غير موجود. 9،10 وذلك لأن كل الجروح السكري البشرية لديها مزيج من نقص تروية الأنسجة، وارتفاع السكر في الدم المزمن، والاكسدة، والاعتلال العصبي، و البكتيرية الاستعمار. قد لا يكون نقص التروية أقرب سبب تقرحات القدم السكري، ولكن هذا هو السبب الرئيسي لاستمرار وجود هذه الجروح، 11. وذلك لأن الجروح لا تلتئم في الأنسجة التي لا ينزف، في حين أنهم دائما تقريبا في شفاء الأنسجة التي ينزف على نطاق واسع. 12-15 لسوء الحظ، لم يتم حتى الآن أيا من النماذج الحيوانية جرح الدماغية المستخدمة حاليا تستخدم بنجاح في الحيوانات بداء السكري، وهذا وقد خلق عقبة رئيسية لاختبار العقاقير الجرح. وقد أظهرت التجارب السريرية على نطاق صغير من عوامل النمو، مثل bFGF، لها أن تكون فعالة للغاية، لكنها ليست فعالة في نقص الأوكسجين نماذج قرحة الجلد. 16،17 نشرنا فناICLE في عام 2007 يصف أذن الأرنب التروية نموذج الجرح الذي تم استخدامه بنجاح في الحيوانات بداء السكري. 18. هذا الاسلوب من الصعب بعض الشيء لأداء لأن هناك حاجة إلى تشريح دقيق للحزمة وعائية عصبية في الجمجمة. لأن هذه السفن الصغيرة، ومساهمتها في الانتعاش بعد العملية الجراحية لا يكاد يذكر. منذ ذلك الحين، ونحن تبسيط الإجراء الذي قطع كامل الحزمة الوعائية العصبية في الجمجمة. للمقارنة مع الإجراء الذى كان فى الحفاظ على حزمة الجمجمة، لم يكن هناك اختلاف في التئام الجروح أو مضاعفات الأذن. هذا الإجراء تعديل مينيملي والمزايا التالية: 1). انها بسيطة وآمنة، ولها نسبة نجاح عالية، مما يقلل من الألم والمعاناة للحيوانات. لم يحدث مضاعفات العمليات الجراحية في هذه الحيوانات، بما في ذلك بعض الأرانب مع 24 شهرا من وقت السكري، 2). لديه وقتا طويلا الدماغية. وأشارت قياسات لدينا فرق درجة حرارة الجلد في نهاية شهر واحد. فمن الممكن أن عشره النسيج تحت الجلد واسعة تشريح دون الحاجة إلى خياطة النتائج مرة أخرى في تشكيل النسيج الجانبية المتأخرة، 3). انها مرنة جدا. لأن حزم 3 الأوعية الدموية كلها تحت السيطرة الجراحية، ويمكن بسهولة أن يتم هذا النموذج لمحاكاة مختلف الجروح المزمنة (انظر أدناه)، 4). وخلافا للجلد في مواقع أخرى، هذه الجروح لا بصيلات الشعر في السرير الجرح. شفاء تماما من على حافة الجرح، 5). هذا الإجراء بإنشاء 4 الجروح الدماغية و 4 الجروح غير الدماغية في الأرنب نفسه للمقارنة الاقتران، وبالتالي تقليل الاختلافات الفردية؛ 6). انكماش الجلد هو الحد الأدنى. في حين أن جلد ظهري للأذن الأرنب لديه بعض الحراك، ومجبر على الجلد البطني بواسطة غضروف، مما يسمح للدراسة أكثر دقة لإعادة الاندمال بتشكل النسيج الظهاري، 19 7). الأرانب عموما خجول وعدائية. وهناك حاجة للتخدير فقط خلال عملية جراحية اصابة. وهذا يمكن الحد من أي التباس العوامل المحتملة التي قد تؤثر على عمليات التئام الجروح، 8). بل هو أيضا النسخةذ اقتصادية يمكن أن يصل إلى 8 بسبب الجروح تتم في واحدة أرنب. 9). وعلى النقيض من بعض التقارير السابقة، لم نر أي تشكيل ندبة ضخامية إما في الأرانب غير المصابين بالبول السكري أو مرض السكري لوحظ منذ أكثر من 24 شهرا بعد الجراحة. الآلية لا يزال غير واضح. ويمكن اتخاذ العديد من الطرق لتعديل عملية لتلبية متطلبات الاختبار المختلفة. 1). مزيد من تمديد الوقت الدماغية. نتائجنا الحالية تظهر أن يتم الحفاظ على اختلاف درجة حرارة الجلد ما لا يقل عن شهر واحد. إذا تم استخدام بعض المواد الخاملة (مثل السيليكون) لملء النفق، إلى تأخير تشكيل الجانبية، يمكن تمديد الوقت الدماغية. حاولنا هذه التقنية في بعض الأرانب وجدت القليل جدا من رد فعل الأنسجة، 2). مجموع الأذن إزالة التعصيب. أسلوبنا يقطع الأعصاب في العنيقات 2 الأوعية الدموية (المركزية والجمجمة)، وترك فرع الذيلية سليمة. اذا كانت هناك حاجة مجموع إزالة التعصيب الجرح، ويمكن أيضا فرع العصبية في عنيق الذيلية وقطع ونحنليرة لبنانية، 3). اذا كانت هناك حاجة تلقيح جرح البكتيرية، ويمكن تطبيقه على الجرح. لأن قاعدة الجرح الأذن الغضروف، فمن لديه القدرة على الحصول على العدوى وثقب. لمنع المضاعفات الغضروف، ينبغي تطبيق التلقيح البكتيرى بعد يتم تغطية بواسطة غضروف النسيج الحبيبي. تجدر الإشارة إلى أن يتم بسهولة التلوث الجرثومي وأنها يمكن أن تمتد بشكل كبير من وقت الشفاء. ومع ذلك، وإنشاء بيوفيلم في الجروح الحادة هو أكثر صعوبة. استخدام المواد الطبية والتكنولوجيا للدولة من بين الفن، وقد تبين بيوفيلم التي ستنشأ في 6٪ فقط من جروح حادة، بينما في حالات الجروح المزمنة هي اعلى بعشر مرات (60٪)، و 20 لدينا التجربة أثبتت أنه عندما مرات السكري تصل إلى سنتين، يمكن أن معظم الجروح في الأذن الدماغية يصاب حتى مع تقنية العقيم صارمة. 4). قرحة الضغط وغالبا ما تحدث في المرضى الذين يعانون من تلف الأعصاب الطرفية المركزية أو بسبب فقدان الإحساس. باستخدام هذا النموذج، وهو pressuويمكن أيضا أن تنشأ قرحة اعادة بواسطة أساليب الضغط المختلفة. 21،22

للرصد خلال عملية جراحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وسادة التدفئة للحفاظ على درجة الحرارة العادية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ورصد الأوكسجين عبر الجلد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وعند درجة حرارة الشاشة. </li></ol> لإجراء عملية جراحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سكين # 3 مع شفرة 15 #. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اثنين من أزواج من ملقط (واحد للحصول على بشرة وآخر للالأنسجة الرخوة الأخرى). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2-3 أزواج من المشابك الصغيرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> واحد أو اثنين من أزواج من مقص الصغرى (لقطع الأنسجة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> زوج واحد من مقص صغير (لقطع الخيوط). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إبرة حامل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وهناك عدد قليل اللكمات الفولاذ المقاوم للصدأ (لصنع الجروح). </li></ol>

a simplified technique for producing an ischemic wound model

واحد عقبة رئيسية في الأبحاث الحالية جرح السكري هو عدم وجود نموذج جرح الدماغية التي يمكن استخدامها بأمان في الحيوانات بداء السكري. قد الأدوية التي تعمل بشكل جيد في عدم نقص تروية الجروح لا تعمل في الجروح السكري الانسان بسبب اعتلال وعائي هو أحد العوامل الرئيسية التي تحول دون التئام هذه الجروح. نشرنا مقالا في عام 2007 واصفا أرنب نموذج الأذن الجروح الدماغية الناجمة عن تقنية جراحية مينيملي. منذ ذلك الحين، ونحن كذلك تبسيط الإجراءات لتسهيل عملية. في أذن واحدة، وقدمت ثلاثة شقوق صغيرة في الجلد في السويقات الأوعية الدموية، 1-2 سم من قاعدة الأذن. وكان ligated الشريان المركزي وخفض جنبا إلى جنب مع العصب. تم قطع حزمة كاملة في الجمجمة وligated، ولم يتبق سوى فرع الذيلية سليمة. وقدم نفق تحت الجلد كفافي من خلال الشقوق، لقطع الأنسجة تحت الجلد والعضلات والأعصاب، والسفن الصغيرة. تم استخدام الأذن الأخرى كعنصر تحكم غير الدماغية. وأدلى أربعة بجروح في الجانب يا بطنيو كل أذن. هذه التقنية تنتج 4 الجروح الدماغية و 4 غير الدماغية الجروح في حيوان واحد لإجراء المقارنات المقترنة. بعد الجراحة، وكان الأذن الدماغية بارد ومزرقة، وأظهرت حركة انخفاض وعدم وجود نبض في الشريان الأذن. وكانت درجة حرارة الجلد في الأذن الدماغية 1-10 درجة مئوية أقل من ذلك على الأذن طبيعي والحفاظ على هذا الفارق لأكثر من شهر واحد. وكانت الأذن محتويات الأنسجة الفوسفات عالية الطاقة أقل في الأذن من نقص تروية الأذن السيطرة. وكانت الأوقات التئام الجروح تعد في الأذن من نقص تروية في الأذن غير الدماغية عندما استخدمت نفس المعاملة. وقد تم الآن والتقنية المستخدمة في أكثر من 80 في الأرانب التي كانت 23 السكري (داء السكري بدءا من الساعة 2 أسابيع إلى 2 سنة). وقد وضعت لا أرنب واحد أي مضاعفات جراحية مثل النزيف، العدوى، أو تمزق في شقوق الجلد. هذا النموذج العديد من المزايا، مثل اضطراب الجلد قليلا، وقتا أطول الدماغية، وارتفاع معدل النجاح، وبالمقارنة مع العديد من النماذج الأخرى. كاليفورنيا أنهن استخدامها بأمان في الحيوانات مع انخفاض المقاومة، ويمكن أيضا أن يتم تعديل لتلبية متطلبات الاختبار المختلفة.

Watch this Scientific Journal Video about A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model at JoVE.com

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

قمنا بتطوير تقنية مينيملي لخلق أرنب جرح الأذن الدماغية نموذج بقسمة الشريان المركزي والأعصاب والحزمة الوعائية العصبية في الجمجمة. نفق تحت الجلد ثم يقطع كل الأنسجة تحت الجلد. هذا الإجراء يتسبب في تعطيل الحد الأدنى من الجلد ويمكن استخدامها بأمان في الحيوانات بداء السكري.

أسلوب مبسط لإنتاج نموذج الجرح الدماغية

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

a-simplified-technique-for-producing-an-ischemic-wound-model

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

17.2K Views.  University of Louisville. قمنا بتطوير تقنية مينيملي لخلق أرنب جرح الأذن الدماغية نموذج بقسمة الشريان المركزي والأعصاب والحزمة الوعائية العصبية في الجمجمة. نفق تحت الجلد ثم يقطع كل الأنسجة تحت الجلد. هذا الإجراء يتسبب في تعطيل الحد الأدنى من الجلد ويمكن استخدامها بأمان في الحيوانات بداء...

Video: A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine their efficacy and safety.
Gene therapy using viral vectors is one of the most promising approaches for treating cardiac diseases. Viral delivery of various different genes by changing the carrier gene has immeasurable therapeutic potential.
In this video, the full process of an animal model of heart failure creation followed by gene transfer is presented using a swine model. First, myocardial infarction is created by occluding the proximal left anterior descending coronary artery. Heart remodeling results in chronic heart failure. Unique to our model is a fairly large scar which truly reflects patients with severe heart failure who require aggressive therapy for positive outcomes. After myocardial infarct creation and development of scar tissue, an intracoronary injection of virus is demonstrated with simultaneous nitroglycerine infusion. Our injection method provides simple and efficient gene transfer with enhanced gene expression. This combination of a myocardial infarct swine model with intracoronary virus delivery has proven to be a consistent and reproducible methodology, which helps not only to test the effect of individual gene, but also compare the efficacy of many genes as therapeutic candidates.

A method of gene transfer for the treatment of ischemic heart failure is described using a swine model of myocardial infarction. Our simple and reproducible method enables us to readily evaluate the efficacy of various gene transfers with a very simple and reproducible way.

نقل الجينات لقصور القلب الدماغية في نموذج ما قبل السريرية

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. Impaired wound healing, which occurs in diabetic patients for example, can lead to severe unfavorable outcomes such as amputation. There is, therefore, an increasing impetus to develop novel agents that promote wound repair. The testing of these has been limited to large animal models such as swine, which are often impractical. Mice represent the ideal preclinical model, as they are economical and amenable to genetic manipulation, which allows for mechanistic investigation. However, wound healing in a mouse is fundamentally different to that of humans as it primarily occurs via contraction. Our murine model overcomes this by incorporating a splint around the wound. By splinting the wound, the repair process is then dependent on epithelialization, cellular proliferation and angiogenesis, which closely mirror the biological processes of human wound healing. Whilst requiring consistency and care, this murine model does not involve complicated surgical techniques and allows for the robust testing of promising agents that may, for example, promote angiogenesis or inhibit inflammation. Furthermore, each mouse acts as its own control as two wounds are prepared, enabling the application of both the test compound and the vehicle control on the same animal. In conclusion, we demonstrate a practical, easy-to-learn, and robust model of wound healing, which is comparable to that of humans.

A murine model of cutaneous wound healing that can be used to assess therapeutic compounds in physiological and pathophysiological settings.

نموذج الفئران من التئام الجروح

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. Sublethal ischemia has also been shown to upregulate protective mechanisms in remote tissues. A brief period of ischemia (5-10 min) in the hind limb of mammals induces self-protective responses in the brain, lung, heart and retina. The effect is known as remote ischemic preconditioning (RIP). It is a therapeutically promising way of protecting vital organs, and is already under clinical trials for heart and brain injuries. This publication demonstrates a controlled, minimally invasive method of making a limb &#8211; specifically the hind limb of a rat &#8211; ischemic. A blood pressure cuff developed for use in human neonates is connected to a manual sphygmomanometer and used to apply 160 mmHg pressure around the upper part of the hind limb. A probe designed to detect skin temperature is used to verify the ischemia, by recording the drop in skin temperature caused by pressure-induced occlusion of the leg arteries, and the rise in temperature which follows release of the cuff. This method of RIP affords protection to the rat retina against bright light-induced damage and degeneration.

Remote ischemic preconditioning (RIP) is a method of conditioning tissues against damaging stress. We have established a method of remote ischemia at the hind limb, by inflating a sphygmomanometer cuff for 5-10 min. The neuroprotective capabilities of RIP have been demonstrated in a model of retinal degeneration in rodents.

أطرافهم بعد الدماغية شروط مسبقة: تقنية اعصاب في القوارض

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs across species but is age dependent. The transition from a scarless to scarring phenotype occurs in the third trimester of pregnancy in humans and around embryonic day 18 (E18) in mice. However, this varies with the size of the wound with larger defects generating a scar at an earlier gestational age. The emergence of lineage tracing and other genetic tools in the mouse has opened promising new avenues for investigation of fetal scarless wound healing. However, given the inherently high rates of morbidity and premature uterine contraction associated with fetal surgery, investigations of fetal scarless wound healing in vivo require a precise and reproducible surgical model. Here we detail a reliable model of fetal scarless wound healing in the dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

During mammalian development, early gestational skin wounds heal without a scar. Here we detail a reliable and reproducible model of fetal scarless wound healing in the cutaneous dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

نموذج الجلد ماوس الجنين من إصلاح الجرح Scarless

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the world&#8217;s 2.9 million neonatal deaths. Animal models of HIE have contributed to the understanding of the pathophysiology in HIE, and have highlighted the dynamic process that occur in brain injury due to perinatal asphyxia. Thus, animal studies have suggested a time-window for post-insult treatment strategies. Hypothermia has been tested as a treatment for HIE in pdiglet models and subsequently proven effective in clinical trials. Variations of the model have been applied in the study of adjunctive neuroprotective methods and piglet studies of xenon and melatonin have led to clinical phase I and II trials1,2. The piglet HIE model is further used for neonatal resuscitation- and hemodynamic studies as well as in investigations of cerebral hypoxia on a cellular level. However, it is a technically challenging model and variations in the protocol may result in either too mild or too severe brain injury. In this article, we demonstrate the technical procedures necessary for establishing a stable piglet model of neonatal HIE. First, the newborn piglet (&#60; 24 hr old, median weight 1500 g) is anesthetized, intubated, and monitored in a setup comparable to that found in a neonatal intensive care unit. Global hypoxia-ischemia is induced by lowering the inspiratory oxygen fraction to achieve global hypoxia, ischemia through hypotension and a flat trace amplitude integrated EEG (aEEG) indicative of cerebral hypoxia. Survival is promoted by adjusting oxygenation according to the aEEG response and blood pressure. Brain injury is quantified by histopathology and magnetic resonance imaging after 72 hr.

Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

A الخنزير الصغير نموذج من الأطفال حديثي الولادة نقص الأوكسجين، اعتلال الدماغ الإقفاري

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and unrelieved pressure due to immobility. Animal models have been developed that attempt to mimic these conditions for the purpose of furthering our understanding of the complexity of chronic wounds. The model described herein is a rat ischemic skin flap model that permits a prolonged reduction of blood flow resulting in wounds that become ischemic and resemble a chronic wound phenotype (reduced vascularization, increased inflammation and delayed wound closure). It consists of a bipedicled dorsal flap with 2 ischemic wounds placed centrally and 2 non-ischemic wounds lateral to the flap as controls. A novel addition to this ischemic skin flap model is the placement of a silicone sheet beneath the flap that functions as a barrier and a splint to prevent revascularization and reduce contraction as the wounds heal. Despite the debate of using rats for wound healing studies due to their quite distinct anatomic and physiologic differences compared to humans (i.e., the presence of a panniculus carnosus muscle, short life-span, increased number of hair follicles, and their ability to heal infected wounds) the modifications employed in this model make it a valuable alternative to previously developed ischemic skin flap models.

The rat, due to its size, availability, and rather docile behavior, has been utilized as a research model for many years. The goal of this protocol is to utilize the rat as an ischemic skin wound healing model to provide valuable insight into the pathophysiology of chronic wounds.

مظاهرة في الجرذان الدماغية الجلد الجرح نموذج

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by reduced blood supply to the heart, resulting in the loss of oxygen to and the ensuing necrosis of the heart muscle. The MI model has gained popularity for its use as a short-term ischemia-reperfusion model and a long-term permanent ligation model. Below, we describe a reliable method for the permanent ligation of the LAD. With mouse genetic engineering technology becoming more advanced, and with an increasing availability of quality murine surgical instruments, the mouse has become a popular model for MI surgeries. Our surgical model incorporates the use of an easily reversible anesthetic for the rapid recovery of the mouse; a minimally invasive endotracheal intubation without involving a tracheotomy; and a thoracentesis through the original thoracotomy site without creating an additional incision in the chest, as is done in some other methods, to effectively remove excess blood and air from the chest cavity. This method is comparatively less invasive than other methods, which dramatically reduces surgical and post-surgical complications and mortality and improves reproducibility.

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

We provide a reliable method for left anterior descending artery (LAD) ligation in a mouse model. This method is comparatively less invasive than other methods, involving endotracheal intubation, a left-sided thoracotomy approach, and thoracentesis. This method can be used as a model for both acute and chronic myocardial infarction (MI).

الفئران اليسار الأمامي تنازلي (LAD) التاجي ربط الشريان: نموذج تحسين والمبسطة لاحتشاء عضلة القلب

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

سحجه الظهارة القرنية مع لدغ العين كنموذج للقرنية التئام الجروح

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to induce myocardial injury). The majority of pre-clinical myocardial infarction models require the disruption of pericardial integrity with loss of the homeostatic cellular milieu. However, recently a methodology has been developed by us to induce myocardial infarction, which minimizes pericardial damage and retains the heart&#39;s resident immune cell population. An improved cardiac functional recovery in mice with an intact pericardial space following coronary ligation has been observed. This method provides an opportunity to study inflammatory responses in the pericardial space following myocardial infarction. Further development of the labeling techniques can be combined with this model to understand the fate and function of pericardial immune cells in regulating the inflammatory mechanisms that drive remodeling in the heart, including fibrosis.

This protocol outlines the steps for inducing myocardial infarction in mice while preserving the pericardium and its contents.

نموذج القوارض الإقفارية التامور سليمة

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of transplant with the potential to deliver durable heart valves capable of somatic growth with no requirement for anticoagulation. However, the immunobiology of heart valve transplants remains unexplored, highlighting the need for animal models to study this new type of transplant. Previous rat models for heterotopic aortic valve transplantation into the abdominal aorta have been described, though they are technically challenging and costly. For addressing this challenge, a renal subcapsular transplant model was developed in rodents as a practical and more straightforward method for studying heart valve transplant immunobiology. In this model, a single aortic valve leaflet is harvested and inserted into the renal subcapsular space. The kidney is easily accessible, and the transplanted tissue is securely contained in a subcapsular space that is well vascularized and can accommodate a variety of tissue sizes. Furthermore, because a single rat can provide three donor aortic leaflets and a single kidney can provide multiple sites for transplanted tissue, fewer rats are required for a given study. Here, the transplantation technique is described, providing a significant step forward in studying the transplant immunology of heart valve transplantation.

This protocol describes a simple and efficient method for the transplantation of aortic valve leaflets under the renal capsule to allow for the study of alloreactivity of heart valves.