Method Article
ويدخل هذا البروتوكول طريقة تغيير القفص للفئران عن طريق الفرس التدريب. الفئران تعلم السلوك المطلوب ليس فقط بالتدريب المباشر ولكن أيضا عن طريق التعلم القائمة على الملاحظة. قد تساعد تنفيذ هذا البروتوكول بسرعة وسهولة لتحسين رفاه والنظافة في مرافق القوارض.
قفص التنظيف هو إجراء تربية المنجز بشكل روتيني وهو معروف للحث على الإجهاد في الفئران المختبرية. الإجهاد يمكن أن يكون لها أثر سلبي على الرفاه، ويمكن أن تؤثر على القابلية للمقارنة وإمكانية تكرار نتائج نتائج البحوث، ينبغي التقليل من مقدار الضغوط التي تتعرض لها الحيوانات المختبرية وتجنبها عندما يكون ذلك ممكناً. علاوة على ذلك، الاتصال المباشر بين الفئران والحيوانات المؤقتة أثناء تغيير القفص يتحمل مخاطر الصحة العامة وذلك ربما يؤثر سلبا على رفاه الفئران ونوعية البحوث.
لدينا بروتوكول يهدف إلى تحسين القفص بشكل روتيني أجرى تغيير الإجراء. ولهذا السبب، فإننا نقدم بروتوكول ممكنة التي تمكن من الفئران للتعلم عن طريق الفرس التدريب والمراقبة لتغيير طوعا إلى قفص نظيف. هذا التدريب يساعد على تقليل الإجهاد الناجم عن الاضطرابات البدنية والتغييرات المناولة المقترنة بالقفص ويتيح في الوقت نفسه تخفيض الاتصال المباشر بين الحيوانية والحيوانية المؤقتة بعد الانتهاء من مرحلة التدريب.
تنفيذ الفرس تدريب الفئران سريعة وسهلة. عموما اهتماما في التدريب الفئران وكفاءة تعلم السلوك المطلوب، مما يستتبع أقفاص المتغيرة عن طريق أنبوب. حتى بدون تدريب، تعلم الفئران لأداء السلوك المطلوب من المراقبة، كما أن 80% مجموعة التعلم القائمة على الملاحظة بنجاح تغيير الأقفاص عند اختباره. يساعد التدريب كذلك إقامة علاقة ثقة بين المدرب والحيوان. كما النظافة ورفاه كلاهما مهم جداً في التجارب على الحيوانات، هذا البروتوكول قد تساعد أيضا في تحسين بحوث عالية الجودة.
إجراءات روتينية يمكن أن يسبب الإجهاد في مختبر الحيوانات1،2،،من34. فقد ثبت أن تغيير القفص زيادة معلمات القلب والأوعية الدموية والنشاط العام في الفئران4،،من56. هذه الاستجابات الإجهاد يمكن على الأقل جزئيا بسبب الاضطرابات البدنية والمناولة المرتبطة بقفص تغيير الإجراءات بدلاً من بيئة غير مألوفة الجديد2،4. أهمية خاصة هو التأثير السلبي للإجهاد على رفاه الحيوان يعتبر7. علاوة على ذلك، يدفع الإجهاد التغييرات في السلوك وفي معلمات الهيئة الأخرى، بما في ذلك النظام العصبي اللاإرادي والجهاز الهرموني العصبي والمناعي. ولذلك، كثيرا ما يشار إلى كمصدر محتمل لانحرافات غير متوقعة عبر التجارب على الحيوانات الإجهاد ويجب تجنبها قدر الإمكان في أبحاث الحيوانات عالية الجودة7،8. أحد السبل للحد من التوتر في الحيوانات المختبرية بالتدريب. تدريب الحيوانات عموما يمكن أن تكون أداة مفيدة للغاية لإدارة الحيوانات المختبرية، وهو، في الواقع، وطالب بتوجيه الاتحاد الأوروبي 2010/63/الاتحاد الأوروبي9. التدريب يمكن أن تستخدم كنموذج لتخصيب اليورانيوم، ويساعد على إعداد الحيوانات للتجارب؛ وهكذا، التدريب يسهم في إدامة وتعزيز الرفاه في مختبر إعدادات10،،من1112. هو أسلوب تدريب ممكن التدريب التعزيز الإيجابي (إعادة الإعمار). فريق إعادة الإعمار الإقليمي شكل من تكييف هواء فعال حيث مكافأة (مثلاً، مكافأة غذاء)، يرتبط ب سلوك المطلوب13. هذا النوع من التدريب هو شائعة الاستعمال بالفعل في إعدادات المختبر للرئيسات نونومان من أجل الحد من التوتر وتعزيز رفاه واكتسب شعبية في مختلف سائر الأنواع الحيوانية10،13، 14،،من1516. التدريب للحركة التطوعية أيضا كثيرا ما يستخدم لتحسين الثروة الحيوانية إدارة17،،من1819. فريق إعادة الإعمار الإقليمي ليس فقط أداة مفيدة للتعاون عند العمل مع الحيوانات؛ كما أنها مفيدة عموما الرفاه الحيوانات، بغض النظر عما إذا كان السلوك المدربين هو استخدامها مباشرة20. وصف بروتوكول التدريب التعزيز الإيجابي هنا يهدف إلى تجنب أي شكل من أشكال الإجهاد خلال التغييرات القفص يقوم بشكل روتيني بإعطاء الفئران فرصة المشاركة طوعا في الإجراء.
بالإضافة إلى الضغوط الممكنة للحيوانات، العامل في مرافق الحيوانات دائماً توفر عمليات مطبات للحفاظ على الحالة الصحية، خاصة وأن الاتصال المباشر بين الحيوانات المختبرية وأولياء الأمر الحيوان يتحمل مخاطر الصحة العامة التلوث. في الحيوان مرافق متخصصة في القوارض، يوفر نقل الحيوانات من القذرة في أقفاص نظيفة من عبء عمل العادية وعالية. هذا الإجراء عادة ما يتضمن الاتصال المباشر بين الحيوانات والبشر، ومما يمثل عامل مخاطرة صحية نظراً لإمكانية نقل مسببات الأمراض استقر على جلد الإنسان21. وبصرف النظر عن نقل من ناقلات الأمراض الحيوانية الأخرى، تتدخل الكائنات المسببة للأمراض و nonpathogenic مرافق الحيوان الأكثر شيوعاً عن طريق البشر22،23. كما يرتبط انخفاض الصحة مع تجنب انخفاض رفاهية، حتى تحت اﻻكلينيكي العدوى يمكن أن يكون سببا للنتائج التجريبية نونريبرودوسيبلي، وهذا ينبغي أن يكون من الواضح24،25. في هذا الحساب، تدريب الحيوانات في أقفاص التغيير الطوعي كذلك يتيح التوصيل بتغيير القفص بعد انتهاء التدريب مع أي اتصال مباشر بين المؤقتة الحيوان والحيوان، مما يقلل من مخاطر صحية محتملة أثناء أداء الإجراءات التجريبية.
لدينا بروتوكول لتدريب الفئران لتغيير أقفاص طوعا يمكن أن تكون أداة مفيدة للإدارة الفئران المختبرية، كما أنه يربط التدريب باعتباره شكلاً من أشكال الإثراء المعرفي مع أداء العمل الروتيني. بناء على ذلك، لدينا البروتوكول هو إجراء صديقة للحيوان الذي يساعد على زيادة رفاهية الفئران في مرافق المختبرات الحيوانية. كتغيير القفص بعد مرحلة التدريب يمكن أن يجري بدون أي اتصال مباشر بين المؤقتة الحيوانية والحيوانية، قد بالإضافة إلى ذلك يساعد على الحفاظ على النظافة العامة على مستوى عال وذلك زيادة تحسين الأبحاث الحيوانية.
التعامل مع الفئران والإجراءات التجريبية التي أجريت وفقا للمبادئ التوجيهية الأوروبية والوطنية والمؤسسية لرعاية الحيوان.
1-التأقلم والتعود
ملاحظة: إذا لم يكن تم نقلها الفئران، يمكن تخفيض الوقت التأقلم والتعود. لتحديد موسع، لون الذيل مع علامة الصديقة للجلد.
2-الفرس التدريب
ملاحظة: دورة تدريبية تستغرق أربع دقائق ويتكون من فترات من 30 ثانية للتدريب يتبعها 15 ثانية لكسر. قم بإزالة أي من المواد المضافة أثناء الإيقاف المؤقت. الفأر المراقب حر في أن يفعل ما يريد، وأنه مسموح للمشاركة وتستهلك المكافأة، ولكن يتم التركيز فقط على الفئران الأخرى. كانت مدغدغ جميع الفئران في يوم واحد ويوم الخمس. لنجاح التدريب، من الأهمية بمكان أن المجرب تولي اهتماما لسلوك الحيوانات، ويتصرف بطريقة هادئة. التدريب تعتمد اعتماداً كبيرا على قدرات المجرب توقيت وقوة للمراقبة. يحدث لا ردود الفعل اللفظية في التدريب، والتواصل اللفظي مع الحيوانات قد تحدث فقط خارج الدورات. مؤشرا لتعلم السلوك المطلوب هو تكرار السلوك.
وجرى التدريب على مجموعة من عشرة إناث الفئران مقنعين ليستر (دينار). عشرة غير مدربين ولكن التعامل معها بلطف الإناث LD الفئران كمجموعة مراقبة. يعني معالجة لطيف أن الفئران رفع فقط من الجسم ولا ترفع عند قاعدة الذيل. وأضاف نحن لتقييم التعلم بالملاحظة، مجموعة أخرى من الإناث 10 دينار الفئران التي كانوا غير مدربين ولكن زملائه في قفص الجرذان المدربة وكانت قادرة على مراقبة التدريب. إكمال جميع الفئران بالتأقلم والتعود على التعامل. ويتألف التدريب الانتقال إلى قفص جديد من خلال أنبوب معدني (الشكل 4). كوفئ مظاهر السلوك المطلوب (الشكل 4). تم تقييم كل دورة تدريبية، وقد تم تحليل نجاح التدريب في ثلاث فئات هي: المشاركة وليس المشاركة والسلوك الاستكشافية. على الفئران المدربة عموما المهتمين بالتدريب وإنما يظهر أيضا حافز عالية لاستكشاف البيئة الجديدة. خاصة خلال الأيام الأولى من التدريب، كان سلوك الاستكشافية بارزة جداً (الشكل 5). بعد ثلاثة أيام فقط من التدريب، أغلبية من الفئران عرض السلوك المطلوب وتغيير القفص عبر الأنابيب المعدنية (الشكل 5). بعد الانتهاء من التدريب لمدة خمسة أيام، أظهرت جميع الفئران المدربة السلوك (الشكل 5). وقد استمر التدريب لمدة أربعة أسابيع، مع خمسة أيام لتدريب كل. وبعد أربعة أسابيع من يراقب "مركز التدريب" من مجموعة التدريب الرصدية، قيمت هذه الفئران. لهذا التقييم، احصينا عدد المرات التي ركض الفئران من خلال النفق إلى القفص نظيفة خلال دورة تدريبية واحدة. إجمالاً، 80% الفئران علم السلوك المطلوب بمشاهدة (الشكل 6).
كذلك قمنا بفحص ما إذا كان التدريب كان له أثر إيجابي على الفئران المدربة. ولذلك، يمكننا تقييم السلوكيات المتصلة بالخوف من الفئران أثناء ضبط النفس بعد أربعة أسابيع تدريب. سجلت التبول والتغوط وحناجرهم، وحسبت على درجة من البرود (لا السلوك المتصلة بالخوف = 0، واحد من السلوك المتصلة بالخوف = 1، هما السلوكيات المتصلة بالخوف = 2، ثلاثة السلوكيات المتصلة بالخوف = 3). مجموعة غير مدربين وأظهرت زيادة ملحوظة في درجات السلوك المتصلة بالخوف (الشكل 7).
الشكل 1 : لطيف رفع الفئران. يدا واحدة ويوضع تحت البطن أو حول الصدر، وناحية أخرى تدعم الخلفيتين من الفئران. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2 : الشم وتربية- الفئران يظهر اهتماما في مكافأة الغذاء باستنشاق أو تبحث رفع بأطرافهم هند. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3 : النفق القصير. مكافأة الفئران بعد مرورها عبر نفق قصيرة. الفأر المراقب يظهر اهتماما في الإجراء. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4 : مكافأة بعد تغيير القفص. فأر يكافأ بعد الانتقال إلى قفص نظيفة من خلال أنبوب معدني. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 5 : الأيام حتى التعلم. باستخدام مقرقعة التدريب تدريب مجموعة من عشرة إناث الفئران يستر مقنعين لتغيير القفص عبر أنبوب معدني. وتم تقييم التدريب في ثلاث فئات: المشاركة وليس المشاركة والسلوك الاستكشافية (nd: لم يتم الكشف عن: لم يظهر أي من الفئران في سلوك كل منهما). جميع الفئران اكتسبت السلوك المدربين بعد خمسة أيام تدريب. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الرقم 6 : تعلم الرصدية. مجموعة من عشرة ليستر الإناث مقنعين الفئران التي كانت الأصحاب قفص الفئران مدربين لم تطرأ تدريب أنفسهم ولكن سمح بمراقبة التدريب. بعد أربعة أسابيع مراقبة، قيمت الفئران للتبرعات قفص تغيير السلوك. عموما، تغيير 80% مجموعة التعلم القائمة على الملاحظة أقفاص عبر الأنابيب المعدنية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 7: المتصلة بالخوف درجة السلوك. بعد أربعة أسابيع تدريب، جميع الفئران عبر المجموعات 3 (التعلم المدربين، والرصد، ومجموعة المراقبة غير مدربين) ضبط النفس، وسجلت الألفاظ والتغوط والتبول وبعد ذلك تستخدم لحساب درجة سلوك المتصلة بالخوف لكل الفئران (لا السلوك المتصلة بالخوف = 0، واحد من السلوك المتصلة بالخوف = 1، هما السلوكيات المتصلة بالخوف = 2، ثلاثة السلوكيات المتصلة بالخوف = 3). يصور السلوكيات المتصلة بالخوف ك ± يعني sem. للتحليل الإحصائي، أنجز ANOVA أحادي اتجاه مع اختبار المقارنات المتعددة اللاحقة توكي. وأظهر الفريق غير مدربين مقارنة درجة زيادة السلوك المتصلة بالخوف لأن المدربين والمراقبة تعلم المجموعات. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
البروتوكول المذكورة أعلاه مفيد تمديد تطبيق لدينا بروتوكول التدريب الفرس هو موضح سابقا ل الفئران المختبرية10. ويتطلب التنفيذ دقائق فقط في اليوم الواحد على ما مجموعة سبعة أسابيع، بما في ذلك التأقلم والتعود والتدريب الفرس. لجدوى، اقتصر هذا البروتوكول على أيام الأسبوع مع دورات لمدة عشر دقائق تقريبا كل زوج من الفئران. البروتوكول يمكن أن تبدو وكأنها تستغرق وقتاً طويلاً لإنشاء مستعمرات الفئران الكبيرة، ولكن إذا عينت الحيوانات للتجارب الطويلة الأجل أو كمربي، يمكن أن يساعد على تحسين عملية قفص المتغيرة في الأجل الطويل. وباﻹضافة إلى ذلك، اضطراب انخفاض أثناء إجراء التجارب يمكن تحسين نوعية النتائج. كذلك، كل الوقت يمتد ولاحظت في هذا البروتوكول هي توصيات ويمكن تعديلها لتناسب الاحتياجات المحددة أي مختبر. ويمكن تقصير فترات زمنية إذا الحيوانات تعلم المهام بسرعة أو إذا كان الفعل قد اعتادوا على الفئران. عموما، الفئران مهتما التدريب ويتطلب فقط بعض التكرار للحصول على السلوك المطلوب "تغيير القفص عن طريق أنبوب". حتى بدون تدريب، التطوع الفئران المستفادة لأداء السلوك المطلوب من المراقبة، كما أن 80% مجموعة المراقبة التعلم تشارك بنجاح في قفص المتغيرة عند اختباره. نقدم هنا، طريقة للمدربين قفص المتغيرة لأنها إجراء روتيني كثيرا ما يقومون به في تربية الحيوان ومن المعروف أن يسبب الإجهاد في الحيوانات. ويرجع جزئيا على الأقل على الاضطرابات البدنية أثناء تغيير القفص2،4هذا الإجهاد. ويعطي التدريب على الفئران خيار التعاون طواعية في تنفيذ هذا الإجراء تربية. بعد اختيار المشاركة في مهمة يقترح أن تكون لها آثار مفيدة على الحيوانات وذلك قد يساعد على تقليل الإجهاد28. التدريب مفيد أيضا في حالات أخرى الطرق، كما أنه بمثابة شكل من أشكال الإثراء المعرفي. تأثير إيجابي على الفئران أصبحت واضحة للعيان بتخفيض في السلوك المتصلة بالخوف عليها ويجري ضبط النفس. التدريب المباشر تظهر أن تكون مفيدة للمعالجة في وقت لاحق من هذه الفئران، بل التعلم القائمة على الملاحظة خفض درجة السلوك ذات الصلة الخوف كذلك. وأبقى لنا الفئران في بيئات قياسي، المخصب مع PVC-النفق والمناديل الورقية. بالإضافة إلى التدريب، تعرضوا جميع الفئران عبر المجموعات الثلاث مقايسة دغدغة. وبناء على ذلك، نحن لم يكشف عن أي عجز في الرفاه في أي من الفئات، كما لم تكن هناك فروق في تفضيل السكروز أو تختبئ السلوك بين المجموعات الثلاث (البيانات لا تظهر). ومع ذلك، يبدو التدريب تكون مفيدة بالنسبة الفئران، كما أنها أظهرت انخفاض السلوك المتصلة بالخوف بينما يجري ضبط النفس.
من ناحية، التدريب على الفئران قد يؤدي إلى تفاعل نونستريسفول بين البشر والحيوانات، والتي تستفيد منها الحيوانات وضوح. من ناحية أخرى، ومع ذلك، الاتصال بين البشر والحيوانات تحمل دائماً خطر التلوث بالنظافة. على وجه الخصوص، الاتصال بين الحيوانات والجلد كشفت نتائج المواضيع المؤقتة المجرب أو الحيوان في ارتفاع معدل عدوى في الفئران24. ولذلك، تبعاً لمستوى النظافة، وينبغي تدريب الحيوانات بعناية، ويجب أن تلبس ملابس واقية من المدربين مع التعديلات اللازمة للبروتوكول تبعاً لمتطلبات المرفق. على سبيل المثال، يمكن إهماله الأنابيب المعدنية إذا تنظيف الأنابيب بما فيه الكفاية ليس أمرا ممكناً أو تستغرق وقتاً طويلاً جداً للعمل اليومي. قمنا باستخدام الأنابيب لأنه يسمح سهولة قياس نجاح التدريب وأيضا يحول تلقائياً بالتناوب بين أقفاص الجرذان. ومع ذلك، من الممكن أيضا لتدريب الفئران لتغيير الأقفاص بتحريك جدران القفص القديم إلى القفص الجديد. هذه العملية قد حتى تسريع الإجراء إذا كان القفص تغيير يحدث بشكل متكرر لأن الفئران غريبة جداً والاستكشافية. في اختيار الأنابيب ومكافأة فيما يتعلق بالنظافة، ضمان أن كلاهما سهلة لتنظيف وتطهير، أو اﻷوتوكﻻف. ويمكن تعديل البروتوكول لمجموعة من إعدادات البحث. على سبيل المثال، يمكن استخدام الجسور، التي تسمح للفئران لتغيير أقفاص دون المخاطر الجسدية أو اضطراب متأثراً بجراحه بعد التدخلات الجراحية. على المدى الطويل، هذا البروتوكول يسمح بالاتصال المباشر أقل بين الحيوانات المدربة وحارس الحيوان. وهكذا، تتعرض الحيوانات لحمولة جرثومية أقل. علاوة على ذلك، سيتطلب الفئران ليست كلها بسبب تعلم الرصد ناجحة على الفئران، التدريب. قد يكون هذا التعلم القائمة على الملاحظة مفيدة بشكل خاص في تربية أقفاص، الذرية قد تكون قادرة على تعلم السلوك مباشرة من الأم. يمكن أن يساعد إنقاص الاتصال المباشر ولكن عموما لا بين الجرذان والحيوانات أولياء الأمر للحد من خطر التلوث بينما في نفس الوقت إقامة علاقة ثقة من خلال التدريب. مستوى النظافة لها أهمية كبيرة نظراً لأن إينتيركورينت الإصابات التي تحدث أثناء مراحل تربية والتجريبية يمكن أن تحد بشكل كبير الأهمية العلمية للتجارب على الحيوانات؛ وهكذا، قد يساعد هذا البروتوكول على مواصلة تحسين الرفاه والعلم29.
للحصول على التطبيق الناجح لهذا البروتوكول، ينبغي مراعاة عدة نقاط. يجب أن تكون فترة تأقلم للفئران المحافظة إذا تم نقل أنهم قبل التدريب. طول فترة تأقلم ينبغي تكييف لقضية البحث العلمي. وقد أثبتت الدراسات السابقة أن وقت مدى ثلاثة أيام قد تكون كافية لبعض تجارب30،31، حين دراسة أخرى أظهرت أن البلازما يظل الكورتيزون زيادة الأسبوعين الماضيين ما يزيد على32. في هذه الدراسة، نختار فترة تأقلم لمدة 14 يوما بعد النقل من مربي التجارية إلى مرفق الحيوان. ويجب رصد كل الفئران لأي دلائل على عدم الراحة قبل التدريب. إذا لم تكن المجرب دراية بالفئران، يمكن استخدام أدوات مثل مقياس كشر الفئران لمرجع33. دون هذه الاعتبارات، فقد خفض معدل النجاح في التدريب. الفئران يمكن أن تكون طبيعتها حريصة جداً، وقد تتطلب مراحل التعود إضافية. محاولة لتدريب الحيوانات خوفاً من سيحقق نجاحا محدودا. أكد الأقل وخوفا من الحيوانات في بداية التجربة، أسرع التدريب سيتم الانتهاء.
نهاية مرحلة التعود هو نقطة الوقت الأمثل لبيانات خط الأساس سجل لتجارب أخرى. إذا كانت أساليب الغازية ضرورية للتجربة، البروتوكول ينبغي أن يكون مؤقتاً. يشير إلى أي أسلوب التي تساوي أسلوب الغازية أو أعلاه شدة خفيفة المبينة في المرفق الثامن "تصنيف الخطورة من إجراءات" التوجيه 2010/63/الاتحاد الأوروبي9.
للدورة التدريبية، خطة لتدريب يمكن أن تكون أداة مفيدة للتأكد من أن البروتوكول سوف تجري دائماً على النحو المرغوب فيه. هذا التخطيط هو المجربون أهمية خاصة عند مختلف أو معالجات المعنية.
مجتمعة، هذا من السهل جداً، والموجهة نحو تطبيق البروتوكول قد ليس فقط الحد من التوتر خلال إجراءات تربية وإعدادات البحث ولكن أيضا ربما تكون لها آثار مفيدة على الصحة الحيوانية. ولذلك، يمكن تسهيل التغيير قفص التدريب في الفئران البحوث العالية الجودة ورفاه الحيوانات للبحث.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
الكتاب ممتنون يكر توماس لدعمه التقني. كذلك نشكر الدكتور إيكر روث لها الدعم الرقيقة.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Target Stick with Clicker | Trixie | 2282 | |
Metal Pipe (Alu Flexrohr nw 100) | Rotheigner | available in construction marktes | |
White Chocolate/ white chocolate cream | Company doesn't matter, preferable organic quality | ||
Prism Version 6.0 for Mac | GraphPad Software |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved